GirişKometa testi
Kometa Assay kimi də tanınan komet testi, fərdi hüceyrələrdə DNT zərərini ölçmək üçün istifadə olunan həssas və çox yönlü bir texnikadır. Əvvəlcə DNT-nin zədələnməsində dəyişkənliyi öyrənmək və Mammalian hüceyrələrinin populyasiyaları çərçivəsində təmir etmək üçün, Comet ASSay, toksikologiya, ekoloji monitorinq və xərçəng araşdırması da daxil olmaqla müxtəlif sahələr boyunca geniş istifadə olunan bir vasitə halına gəldi. Tək bir dna lezyonlarını aşkar etmək qabiliyyəti, tək - strand, ikiqat - strand parçaları və çarpaz kimi daha mürəkkəb formalara bölünür, daralır və DNT zədəsinə mobil reaksiya. Comet ASSAY topdan komet test təminatçıları arasında populyardır və burada tədqiqatçılar və laboratoriyalar üçün əlçatan bir neçə komet test fabriki tərəfindən istehsal olunur.
Comet Assay mexanizmi
● Gel elektroforez prosesi
Comet ASSay, mikroskop slaydında Agarose Gel-də hüceyrələri mikroskop sürüşdürərək, membranları və zülalları silmək və qalan nukleoidini elektropa qurtarmaq üçün hüceyrələri liza edir. DNT elektrik sahəsinin altındakı jelin üzərindən miqrasiya edildiyi kimi, DNT-nin bütövlükdə olan DNT-yə nisbətən DNT-dən daha da, ləkələnmiş və flüoresan mikroskopu altında bir kometa bənzəyən bir nümunə meydana gətirərək, bir nümunə meydana gətirir. "Komet" nin quyruq uzunluğu və intensivliyi DNT zərərinin dərəcəsidir və kəmiyyətcə təhlil edilə bilər.
● Hüceyrələrdə DNT zərərin ölçülməsi
ASSAY, müxtəlif ekoloji və kimyəvi maddələrin səbəb olduğu DNT-nin ən çox görülən dna zərərinin ən çox yayılmış forması olan DNT-nin ölçülməsi zamanı xüsusilə təsirlidir. Bununla birlikdə, əsas protokola dəyişikliklər ikiqat aşkarlanmasına imkan verir. Bu uyğunlaşma, müxtəlif tədqiqat ehtiyaclarını ödəyən məhsullar hazırlamaq üçün komet test istehsalçıları və tədarükçülər üçün dəyərli bir vasitə halına gətirir.
DNT ziyanının növləri aşkarlandı
● tək - iplik vs ikiqat - strand qırılır
Kometa Assay, əvvəlcə ionlaşdırıcı radiasiya və müəyyən kimyəvi maddələrə məruz qalma səbəbindən baş verən bir subay - strand fasilələrini müəyyən etmək üçün istifadə olunur. Bununla birlikdə, DNT-nin daha şiddətli və potensial ölümcül formaları olan iplik fasilələrini də aşkar edə bilər. Digər DNT-nin digər növlərini strand fasilələrə çevirən xüsusi fermentləri daxil etməklə, tədqiqatçılar Genotoksik effektlərin geniş çeşidini öyrənmək üçün Comet ASSay-dan istifadə edə bilərlər.
● DNT Xaç - Links və Baza Zərərinin aşkarlanması
Strand fasilələrindən başqa, Comet ASSAY, həmçinin DNT Xaç - bağlantıları və əsas zərərləri xüsusi eksperimental quraşdırma vasitəsi ilə aşkar edə bilər. Xaç - DNT-dən ayrılmasının qarşısını alan bağlantılar, elektroforez zamanı DNT miqrasiyasının azaldılmasını qiymətləndirməklə müəyyən edilə bilər. Eynilə, oksidləşdirici baza ziyanı Formamidopyrimidine DNT Glikosyase (FPG) və ya Endonuclease III istifadə edərək, Comet ASSAY Protokolunun bir hissəsi olaraq, oksidləşdirici stress və onun mobil DNT-yə təsiri olan təsəvvürləri təqdim edir.
Həssaslıq və məhdudiyyətlər
● Strand qırılmasına həssaslıq
Comet ASSay'ın həssaslığı ən böyük güclü tərəflərindən biridir. DNT zərərin ölçülməsi üçün ən həssas texnikalardan biri olan Mammaliya diploid hüceyrələrində bir hüceyrəyə 50-lik olaraq 50 strand parçası aşkar edə bilər. Bu yüksək həssaslıq, bir komet test fabriki tərəfindən ölçüldükləri və ya komet test tədarükçüsü ilə daha kiçik miqyasda təhlil edilməsindən asılı olmayaraq, genotoksik effektləri öyrənmək üçün çox vacibdir.
● aşkar edilərkən və analizdə məhdudiyyətlər
Çox yönlü və həssaslığına baxmayaraq, Comet ASSAY'nın məhdudiyyətləri var. Məsələn, operatorun bacarığı və təcrübəsi nəticələrin ardıcıllığına təsir göstərə bilər. Lizis şəraitində və elektroforez parametrlərində dəyişkənlik DNT zərərinin miqdarında fərqlərə səbəb ola bilər. Üstəlik, ASSAY DNT ziyanında məlumat versə də, zərərin bioloji cəhətdən əhəmiyyətli olub olmadığını və ya mutasiyalar və ya hüceyrə ölümü ilə nəticələnməyəcəyini göstərmir.
Dəyişikliklər və dəyişikliklər
● Müxtəlif tədqiqat ehtiyacları üçün uyğunlaşma
İllər ərzində Comet ASSAY-ın dəyişiklikləri və dəyişiklikləri xüsusi tədqiqat ehtiyaclarını ödəmək üçün hazırlanmışdır. Yüksək - DNT-ni eyni vaxtda çox sayda nümunə və komet test istehsalçıları üçün səmərəliliyi artırmaq üçün DNT-nin zərərlərini təhlil etmək üçün ötürmə versiyaları tətbiq edilmişdir. Digər uyğunlaşmalar, müxtəlif növ DNT-nin müxtəlif növlərini ayırd etmək üçün müxtəlif elektroforez buferlərinin və ferment müalicələrinin istifadəsi daxildir.
● Xüsusi genom ardıcıllığının aşkarlanması
Son irəliləyişlər, həmçinin Comet ASSAY-ın xüsusi genomik ardıcıllığı hədəf almağa imkan verdi. Comet ASSAY-ı situ hybridizasiyasında flüoresan kimi üsullarla birləşdirərək, tədqiqatçılar müəyyən genlər və ya xromosomal bölgələrində DNT zərərini təyin edə bilərlər. Bu dəqiqlik ASSAY-ni genin öyrənilməsi üçün zəruri bir vasitədir - Xüsusi DNT ziyanını və xərçəng kimi xəstəliklərdə təsirləri.
Tədqiqat və tibbdə tətbiqlər
● İnsanlarda və heyvanlarda biomonitorinq
Comet Assay'ın DNT zərərlərini yüksək həssaslıq və spesifiklik ilə aşkar etmək qabiliyyəti, insan və sentinel növlərində biomonitorinq üçün əvəzolunmaz hala gətirir. Ətraf mühit təhlükəsinə məruz qalan populyasiyalarda DNT zərər səviyyələrini qiymətləndirərək tədqiqatçılar müxtəlif çirkləndiricilərin və kimyəvi maddələrin genotoksik potensialını qiymətləndirə bilərlər. Bu proqram, ətraf mühit və sağlamlıq monitorinqi üçün dəst istehsal edən komet test tədarükçüləri üçün xüsusilə faydalıdır.
● Ətraf Mühit Genotoksisliyində Tədqiqatlar
Bundan əlavə, kometa təhlili ətraf mühitin genotoksikliyini qiymətləndirmək üçün geniş istifadə olunur. Çirklənmiş torpaqda torpaq qurdları kimi çirklənmiş ərazilərə məruz qalan orqanizmlərdə DNT-nin zərərini təhlil edərək, tədqiqatçılar ətraf mühit çirkləndiricilərinin canlı orqanizmlərə təsirini daha yaxşı başa düşə bilərlər. Bu, kometa ətraf mühit alimləri və hər hansı bir topdansatış komet test təminatçısı üçün əsaslı bir məhsul üçün vacib bir vasitədir.
Xərçəng tədqiqatında Comet Assay
● şiş DNT-nin ölçülməsi
Xərçəng tədqiqatında, Comet ASSay, Şiş hüceyrələrində DNT hüceyrələrində DNT hüceyrələrində zərərin ölçülməsi, radiasiya terapiyası və kemoterapi kimi müalicələrin effektivliyinə fikir vermək üçün istifadə olunur. Xərçəng hüceyrələrində DNT-nin təmirli kinetikalarını təhlil edərək, normal hüceyrələrə qarşı tədqiqatçılar müalicə nəticələrinə təsir edə biləcək potensial fərqləri müəyyən edə bilərlər.
● Radiobiologiyada tətbiqlər
Radiobiologiya, Comet Assayın həyati rol oynadığı başqa bir sahədir. DNT-nin ionlaşdırıcı şüalanmasına məruz qalan hüceyrələrdə DNT-nin zədələnməsini və təmirini öyrənərək, elm adamları, zərərli təsirlərini azaltmaq üçün radiasiyaya və strategiyaların mobil reaksiyasını araşdıra və inkişaf etdirə bilərlər. Bu araşdırma etibarlı komet test istehsalçılarının və onların yüksək səviyyədə olan keyfiyyətli ASSAY komponentlərini təmin etməkdə onların rolunun vacibliyini vurğulayır.
Protokol və standartlaşdırma
● Comet ASSAY-ı keçirmək üçün addımlar
Bir kometa təhlili aparmaq bir neçə kritik addımları əhatə edir: Agarose-də hüceyrələri yerləşdirin, hüceyrələri, elektroforez və boyanma. Hər bir addım dəqiq və reproduktiv nəticələrini təmin etmək üçün diqqətli optimallaşdırma tələb edir. Topdan Comet Test Provayderləri tez-tez, prosesi asanlaşdırmaq üçün bütün lazımi reagentlər və ətraflı təlimatları daxil edən hərtərəfli dəstlər verirlər.
● Tədqiqatda standartlaşdırma vacibliyi
Comet ASSAY Protokolunun standartlaşdırılması, müxtəlif laboratoriyalardakı nəticələrin ardıcıllığını və müqayisəsini təmin etmək üçün vacibdir. Standartlaşdırılmış protokolların yaradılması tədqiqatçılara müxtəlif tədqiqatların məlumatlarını müqayisə etməyə və mənalı nəticə çıxarmağa imkan verir. Komet test tədarükçüləri və istehsalçıları bu səyləri dəstəkləmək üçün standartlaşdırılmış dəstlər və reagentlər verməkdə mühüm rol oynayırlar.
Son irəliləyişlər və yeniliklər
● Yüksək - Comet Comet ASSAY texnikaları
Son yeniliklər Comet ASSAY-ın ötürücüsünü və avtomatlaşdırılmasına yönəldilməyə yönəlmişdir. Yüksək - 96-dan istifadə edərək Yüksək - Dəyişdirmə formatları və çox plitələr və avtomatlaşdırılmış görüntü sistemləri, böyük həcmdə nümunələrin daha səmərəli idarə edilməsi üçün hazırlanmışdır. Bu irəliləyişlər ASSAY-in daha geniş istifadəçiləri, o cümlədən yüksək qiymətləndirmə qabiliyyətini tələb edən komet test fabrikləri üçün daha əlçatan edir.
● Avtomatlaşdırılmış və proqram təminatı - əsaslı analiz
Proqramın tətbiqi - Əsaslı analiz vasitələri də Comet ASSAY nəticələrinin dəqiqliyini və etibarlılığını da yaxşılaşdırdı. Avtomatlaşdırılmış görüntü və məlumatların təhlili proqramı, DNT zədəsini tez və dəqiq ölçmək, insan səhvini azaltmaq və nəticələrin reproduklessinin artırılması mümkündür. Bu texnoloji tərəqqi, istehsalçılara və tədarükçülərə Kəsmə təklif etmək üçün xüsusi maraq doğurur.
Gələcək perspektivlər və problemlər
● Comet ASSay-da potensial inkişaflar
Qarşıda baxanda, Comet ASSay həssaslığını, spesifikliyini və istifadəsini rahatlaşdıra biləcək gələcək inkişaflar üçün hazırlanır. ASSAY-ı digər molekulyar texnikalarla inteqrasiya etmək və ya DNT lezyonlarının müəyyən növlərini aşkar etmək üçün roman reaktivləri inkişaf etdirmək kimi yeniliklər, həm də komet test istehsalçıları və tədqiqatçılar üçün maraqlı imkanlardır.
● Cari çətinliklər və məhdudiyyətlərə müraciət etmək
Bir çox üstünlüklərinə baxmayaraq, Comet ASSAY həll etmək lazım olan problemlərlə üzləşir. Protokolların standartlaşdırılmasının təkmilləşdirilməsi, operator dəyişkənliyinin azaldılması və ASSAY-in bioloji cəhətdən uyğun ziyanı aşkar etmək qabiliyyətinin artırılması əsas diqqət sahələridir. Bu problemləri aradan qaldırmaq kometa təhlilinin genetik və ekoloji tədqiqatların arsenalında dəyərli bir vasitə qalmasını təmin edəcəkdir.
HaqqındaİbarBioskans
Baş ofisi Şimali Uelsdə, Pensilvaniya, iPhase bioskansında "ixtisaslaşdırılmış, roman və yenilikçi" yüksəkdir - tədqiqat, inkişaf, istehsal və bioloji reagentlərin satışına həsr olunmuş texnologiya müəssisəsidir. Geniş bilik və elmi sorğu üçün bir ehtiras olan iPase, dünyada elm adamlarına yüksək keyfiyyətli reaktivlərə sahibdir. İPase, Çin, ABŞ, Avropa və Şərqi Asiya, 12000 kvadrat fut olan Şərqi Asiyada Ar-Ge qurğularını və paylama mərkəzlərini qurdu. 2000-dən çox özünü - İnnovasiya və İnnovasiya ilə bağlı bir öhdəlik ilə iPhase, dünyada tədqiqatçılar üçün kənar həllər üçün bir liderdir.
Time vaxt: 2024 - 12 - 19 16:34:02