BioAnalyTical Metod İnkişafı və BioAnalytical Metod Doğrulama üçün Boş Bioloji Matrixin İnsan və Heyvan Safri

1 iPhase məhsulları

2 boş biomatrix

Müxtəlif növBioloji matrislər, boş bütöv qan, serum, plazma, o cümlədən safra, süd, sidik, nəcis, bağırsaq məzmunu, visseral orqan, vitreus yumor, sulu yumor, sulu yumor, sulu maye və ya sağlam təcrübə heyvanlarından toplanan və ya sağlam təcrübi heyvanlar toplanmış bioloji matris kimi deyilir.

3 Əvvəlki araşdırmalarda boş bioloji matrislərin istifadəsinin zəruriliyi

In Narkotik prinikal tədqiqatları, boş bioloji matris qurmaq və doğrulama üçün təməl daşıdırBioloji analiz metodları. Sağlam fənlər və ya təcrübi heyvanlardan boş matrislərdən istifadə edərək tədqiqatçılar kalibrləmə standartlarını və keyfiyyətə nəzarət nümunələrini dəqiq bir şəkildə hazırlayaraq, analitik metodların spesifikliyini, həssaslığını, dəqiqliyini və matris təsirini dəqiqləşdirir və dərman konsentrasiyası miqdarının etibarlılığını təmin edə bilərlər.

4 Bioloji metod təsdiqlənməsi və boş bioloji matrisin qurulması və tətbiqi

FDA / EMA təlimatlarının tələb olunduğu kimi, bioloji matris analiz metodlarının qurulmasında və təsdiqlənməsində, analiz metodunun düzgünlüyünü və etibarlılığını təmin etmək üçün boş bioloji matrislərdən istifadə edilməlidir. Xüsusilə LC - MS / MS təhlili, müxtəlif mənbələrdən Matrix komponentlərinin fərqləri ionlaşma səmərəliliyinə əhəmiyyətli dərəcədə təsir göstərə bilər. Boş matris əsasən kalibrləmə standartlarını hazırlamaq, spesifikliyin, seçicilik, dəqiqlik, dəqiqlik, matris effektlərini, bərpa dərəcəsi, sabitliyi, seyreltmə xətti, müdaxilələrin, müdaxilə effektləri, müdaxilə effektləri və s. Aşkarlama metodunun seçmə qabiliyyəti və matris effekti boş matris üçün daha yüksək tələblər tələb edir.

Narkotiklərin inkişafında safra boş matrisinin 5 tətbiq ssenariləri

Süni safra matrixi (simulyasiya edilmiş safra matrixi)Təbii safra komponentlərini simulyasiya edən və dərman mübadiləsi, toksikologiya və bioloji analiz araşdırması üçün istifadə olunan sintetik bir həlldir.Bile boş matrisAşağıdakı dərman inkişaf ssenarilərində mühüm tətbiq dəyərinə malikdir

6 Hepatobileary sistem dərmanı

Hepatobilistlik sistemi üçün dərmanların hazırlanmasında, Bil Blanm Matrix, Farmakokinetik (PK), toksikoloji və bioloji analiz araşdırmalarında vitro simulyasiya sistemində standart olaraq əvəzolunmaz rol oynayır.

6.1 Narkotiklərin safra excreetion xüsusiyyətlərini qiymətləndirin

HepatointSeTinal dövriyyəsi ilə bağlı araşdırma: Sədaqət dərmanların və onların metabolitlərinin ifrazatı üçün vacib yollardan biridir. Süni safra matrisindən istifadə etməklə, bataqlıqdakı dərmanların konsentrasiyası dəyişiklikləri, qaraciyər bağırsaq dövriyyəsi ilə reabsorbedin olub olmadığını qiymətləndirmək üçün simulyasiya edilə bilər.

Bile rəsmiləşdirilməsi dərəcəsi Müəyyənləşdirmə: Safr (məsələn, statinlər və müəyyən antibiotiklər kimi), süni safra (simulyasiya edilmiş scoty), onların rəsmiləşdirmə səmərəliliyini ölçmək və dozaj rejimini optimallaşdırmaq üçün kömək edə bilər.

6.2. Dili turşularının dərman udulmasına təsirini öyrənin

Solubilization effekti: Bile turşuları, Dotiumin D. kimi lipofilik dərmanların dağılmasının və bağırsaq udulmasını təbliğ edə bilər.

Dərman əyilmiş turşu qarşılıqlılığı: Bəzi dərmanlar (məsələn, liraglutide kimi), safra turşusu nəqliyyatçıları ilə (məsələn, MRP2) və süni safra kimi, potensial safra risklərinin qarşısını almaq üçün bu cür qarşılıqlı əlaqələri öyrənmək üçün istifadə edilə bilər.

6.3 Hepatotoksiklik və xolestasisin risk qiymətləndirilməsi

Narkotik xolestasis modeli: Süni safra, safra kanalının maneə və hiperbilirubinemiyası kimi patoloji vəziyyətləri təqlid edə bilər və narkotiklərin safra axınının və ya zərərli safra hüceyrələri ilə əlaqəli olub olmadığını aşkar etmək üçün istifadə olunur.

Biomarker analizi: Bilirubin, safetlər və iltihablı amillər kimi xüsusi komponentlər əlavə etməklə, dərmanların safra komponentlərinə təsiri qiymətləndirilə bilər və klinik təhlükəsizlik proqnozlaşdırıla bilər.

6.4 Təbii safra dəyişdirməyin etik və praktik üstünlükləri

Nümunə çatışmazlığı məsələsinə toxunan: Təbii safra, safra kanalının kateterizası kimi invaziv metodlar vasitəsilə əldə edilməlidir, süni safra, etik məhdudiyyətlərin qarşısını almaq üçün sonsuz hazırlanmışdır.

Batch tutarlılığı: Süni matrisin (simulyasiya edilmiş matris) tərkibi, təbii safradə fərdi fərqlərin təsirini eksperimental nəticələrlə azaltmaqla idarə olunur.

6.5 LC-nin inkişafını dəstəkləyin - MS / MS Bioloji analiz metodları

Matrix effekti Düzəltmə: Təbii safra (yüksək safe duzları, fosfolipidlər, piqmentlər) kompleks tərkibi, LC-də ion yatırılmasına və ya genişləndirilməsinə asanlıqla səbəb ola bilər. Süni safra matrixi (simulyasiya edilmiş sidikli matris) sabit bir fon təmin edə bilər, metod həssaslığını və dəqiqliyini optimallaşdıra bilər.

7 Xaç növü tədqiqatı

Bilin tərkibi fərqli heyvanlar (siçovullar, itlər, meymunlar) və süni safra növləri fərqliliyi standartlaşdıra bilər və prinik məlumatların tərcümə olunmasını yaxşılaşdıra bilər.

7.1 Cynomolgus Monkey Bile (NHP safra)

Cynomolgus meymunun safeyi, bu da insanların tərkibi və narkotik nəqliyyatı kimi (məsələn, MRP2), qaraciyər Bilyary excretion və narkotik safryasiyasının qarşılıqlı əlaqələrini qiymətləndirmək üçün "BSEP" kimi "İnsan" Firstament modeli halına gətirərək insanlara bənzəyir.

7.2 Beagle it safra

Beagholipid məzmunu Beagholipid məzmunu nisbətən yüksəkdir, safra ifrazatını və safra duzlarının dipofilik dərmanların udulmasını öyrənmək üçün uyğunlaşdırır. Bununla birlikdə, Beagle və İnsanlar arasındakı safra turşusu tərkibindəki fərqlər süni matrislər vasitəsilə kalibrləmə tələb edir.

7.3 SD siçovul safra

SD siçovulların safe toplanması həcmi, qaraciyər bağırsaq dövriyyəsi və dərman hepatotoksikliyi üçün geniş istifadə olunan nisbətən böyük (~ 1 ml / saat). Ancaq qeyd etmək lazımdır ki, yüksək bilirubin bazası LC - MS / MS analizinə müdaxilə edə bilər.

7.4 BCR / CD - 1 siçan safra

CD - 1 siçan kiçik bir saft həcmi (50 - 200 μ l), gen modifikasiya modellərinin mexanizmlərini (məsələn, FXR / PXR yolları kimi) öyrənmək üçün uyğunlaşdıran, lakin mikro miqdarlaşdırma üsulları uyğunlaşma üçün tələb olunur.

7.5 C57BL / 6 siçan safra

C57BL / 6 siçan ümumiyyətlə metabolik xəstəlik modellərində istifadə olunur və onların safra tərkibindəki dəyişikliklər patoloji şəraiti əks etdirə bilər, patoloji şəraiti əks etdirə bilər, süni safra matrisinin patologiyasını təqlid etmək üçün istifadə tələb edir.

Yuxarıda göstərilən modellər, növləri fərqləri idarə etmək və LC - MS / MS metodlarının müqayisəsi və xaç növlərini optimallaşdırmaq üçün süni safra matrixi ilə birləşdirilməlidir.

Rəy

Süni Bile Matrix, təbii safra funksiyasını simulyasiya etmək üçün əsas vasitə kimi, hepatobileary dərmanların inkişafında əvəzolunmaz rol oynayır. Fərqli növlərin safra quruluşunu (məsələn, cynomolgus meymunları, beagle itləri, SD siçovullar, CD - 1 siçovul, C57bl / 6 siçovul), süni safra matrixi, fərdi fərqlər və dərman tədqiqatlarının etibarlılığını əhəmiyyətli dərəcədə artırır.

Həssas tibbin inkişafı ilə süni safra matrixi, yenilikçi dərman inkişafına daha güclü dəstək verən qaraciyər və öd kisəsi mikroenvironmentini dinamik olaraq təqlid etmək üçün patoloji xüsusi komponentləri və mikroflifik texnologiyasını birləşdirəcəkdir.

Açar sözlər:Boş Bioloji Matrix nümunəsi, Bioloji Matrix nümunəsi, Biomatrix analizi, insan saflığı, heyvan safle, süni safra, süni safra, nhp safe, rhesus it süje, siçan süjet, lc - ms / ms, bioanalyitik metodun inkişafı

İstinad

Li t, Chiang Jy. Metabol xəstəliyində və dərman müalicəsində safra turşusu siqnalizasiya. Pharmacol Rev. 2014 Oktyabr; 66 (4): 948 - 83. DOI: 10.1124 / pr.113.008201. PMID: 25073467; PMCID: PMC4180336.