CGT Інавацыйная тэрапія - Лентивирус - Упаковачны аўтамабіль - T імунныя клеткі

CGT Інавацыйная тэрапія - Лентивирус - Упаковачны аўтамабіль - T імунныя клеткі

Тэрапія імуннай клеткі - гэта інавацыйнае лячэнне рака, якое ўзмацняе імунную сістэму арганізма для мэты і ліквідацыі ракавых клетак. Ключавыя формы ўключаюць цітокін - індукаванае клеткавае тэрапію, т - клеткавую тэрапію і тэрапію аўтамабіля - Т -клеткавая тэрапія. Тэрапія аўтамабіля - T прадугледжвае перапраграмаванне Т -клетак для экспрэсіі хімерных антыгенных рэцэптараў (CAR), якія спецыяльна арыентуюцца на опухолевые клеткі, праяўляючы значны поспех у гематалагічных раках, такіх як лейкемія і лімфа.

Ключавыя словы: аўтамабіль - T, лентивирус, лентивирусны вектар, Tracer Lentivirus

Падрыхтоўка аўтамабіля - Т -клеткавая тэрапія

Увогуле, ключавыя крокі для падрыхтоўкі аўтамабіляў - Т -клеткі наступныя:

Крыніца малюнка: Дана - Інстытут рака Фарбера - CAR T - Клінічныя выпрабаванні клетак дапамагаюць множнай міеломай пацыенты вярнуцца да здароўя

1. 1.зартны (t - ізаляцыя клетак)

Першы крок у падрыхтоўцы аўтамабіляў - Т -клетак - вылучэнне т - клеткі з лейкацытаў у перыферычнай крыві пацыента. Такія метады, як імунамагнітнае аддзяленне шарыка або праточная цытаметрыя, звычайна выкарыстоўваюцца для здабывання CD3+- багатых т - клетак з крыві. Каб забяспечыць чысціню клетак, працэс сартавання павінен быць вельмі дакладным, забяспечваючы атрыманне дастатковай колькасці высокіх - якасных т - клетак.

2. 2.stimulation (t - актывацыя клетак)

Вынятыя т - клеткі актывуюцца in vitro, звычайна выкарыстоўваючы aCD3 /CD28 T - Набор для актывацыі /пашырэння клетак. Актываваныя Т -клеткі ўваходзяць у актыўнае стан, рыхтуючы іх да трансфекцыі генаў. У выніку гэтага працэсу функцыя Т -клетак узмацняецца, што спрыяе наступнай генетычнай мадыфікацыі і ампліфікацыі.

3. 3.Transfection (рэдагаванне генаў)

Актываваныя Т -клеткі падвяргаюцца трансфекцыі генаў для экспрэсіі хімернага антыгенавага рэцэптара (CAR). Гэты працэс звычайна выкарыстоўваелентивирусны вектарКаб увесці аўтамабільныя гены ў Т -клеткі. Lentivirus - гэта эфектыўны інструмент трансдукцыі генаў з перавагай стабільнай інтэграцыі мэтавага гена (напрыклад, гена аўтамабіля) у геном клетак. Зарабляючы Т -клеткі і пераўтвараючы ген аўтамабіля ў Т -клеткавую ДНК, лентивирус дазваляе Т -клеткам экспрэсіраваць аўтамабілі доўгімі - тэрмін. Ген аўтамабіля ўключае ў сябе адзіную - зменную зменную ланцужок (SCFV) антыцелаў, што дазваляе Т -клеткам распазнаваць пэўныя антыгены на паверхні опухолевых клетак і ініцыяваць імунны адказ, актываваўшы вобласці сігналізацыі Т -клетак. Як паказана на малюнку 2. Лентивирусное трансфекцыю мае характарыстыкі высокай эфектыўнасці і ўстойлівасці, так што ген аўтамабіля можа быць экспрэсіраваны ў Т -клетках на працягу доўгага часу.

Крыніца малюнка: Сінгапурскі аўтамабіль - Т -клеткавая тэрапія

4. 4. Абмежаванне (праліферацыя клетак)

Пасля трансфекцыі CAR - Т -клеткі ўваходзяць у этап узмацнення, дзе фактары росту, такія якIl - 2дадаюцца для прасоўвання праліферацыі клетак. Мэтай гэтага працэсу з'яўляецца забеспячэнне дастатковай колькасці клетак аўтамабіля - Т для магчымага ўлівання ў пацыента. Працэс узмацнення павінен праводзіцца ў стэрыльных умовах, каб гарантаваць якасць і колькасць клетак.

5. 5. Кантроль якасці (QC)
6. Перш чым пераўтварыць у пацыента, кантроль якасці мае вырашальнае значэнне падчас працэсу падрыхтоўкі. Падрыхтаваны аўтамабіль - Т -клеткі праходзяць строгае выпрабаванне наЗабяспечыць іх чысціню, актыўнасць, эфектыўнасць трансфекцыі і захаванне стандартаў лячэння. Акрамя таго, для забеспячэння бяспекі і тэрапеўтычнай эфектыўнасці клетак пасля паўторнай інфузіі ў пацыента неабходна праверыць тэставанне на забруджванне клетак або пабочныя рэакцыі.

IMportance лентивирусавай трансфекцыі ў імунных клетках

Тэхналогія лентивирусной трансфекцыі мае вырашальнае значэнне для імуннай клеткавай тэрапіі, асабліва для рэдагавання генаў і клеткавай інжынерыі. Лентивирусныя вектары, атрыманыя з мадыфікаванага ВІЧ - 1, шырока выкарыстоўваюцца з -за іх здольнасці інтэграваць гены ў геном гаспадара, забяспечваючы стабільную, доўгую - тэрміновую экспрэсію. Яны могуць заразіць як падзеленыя, так і не - дзяленне клетак, і іх бяспека была палепшана шляхам мадыфікацыі ключавых генаў для прадухілення рэплікацыі. Гэтыя вектары звычайна выкарыстоўваюцца ў геннай тэрапіі, рэдагаванні генаў і даследаваннях клеткавай біялогіі для іх эфектыўнасці і даўгавечнасці ў дастаўцы генаў.

Крыніца малюнка: obiosh.com/product/ схематычная схема лентивирусной упакоўкі і працэсу трансфекцыі лентивируса ў клетках 293T

1. Эфектыўная трансдукцыя генаў

Лентивирусный вектар можа эфектыўна дастаўляць мэтавыя гены, такія як ген аўтамабіля, у імунныя клеткі і стабільна інтэграваць гэтыя гены ў клеткавы геном, гарантуючы, што ген аўтамабіля пастаянна экспрэсіруецца падчас дзялення клетак і праліферацыі. Гэтая высокая - здольнасць трансдукцыі эфектыўнасці мае важнае значэнне для поспеху імунатэрапіі.

2. імунагеннасць, больш нізкая 

У параўнанні з іншымі віруснымі вектарамі, лентивирусы маюць меншую імунагеннасць. У выніку, калі лентивірусы выкарыстоўваюцца для перамяшчэння імунных клетак, імунная сістэма пацыента стварае адносна слабейшы ​​імунны адказ на вірус. Гэта дапамагае мінімізаваць пабочныя рэакцыі, асабліва ў доўгай - тэрміновай выжывальнасці клетак пасля інфузорыя, прадухіляючы тым самым празмернае адхіленне імунітэту.

3. Высокая адаптацыя да імунных клетак

Лентивирусны вектар здольны эфектыўна перадаваць розныя тыпы імунных клетак,асабліва Т -клеткі і NK -клеткі. Дзякуючы лентивирусном трансдукцыі, імунныя клеткі могуць набыць пухліну - канкрэтныя здольнасці распазнавання, тым самым павышаючы іх здольнасць арыентавацца і забіваць опухолевые клеткі.

4. Вызначэнне трансдуцированных эфектных клетак у распазнанні клетак мэты 

Пры імунатэрапіі,Трансдукаваныя эфектныя клеткіЗвярніцеся да імунных клетак, якія пасля трансдукцыі экспрэсуюць аўтамабіль і ажыццяўляюць анты -- пухлінную актыўнасць. Лентивирусныя вектары могуць дакладна даставіць ген аўтамабіля ў гэтыя эфектныя клеткі, што дазваляе ім распазнаваць і арыентавацца на опухолевые клеткі.Мэтавыя клеткіз'яўляюцца опухолевымі клеткамі, якія ідэнтыфікуюцца і разбураюцца гэтымі імуннымі клеткамі. Дзякуючы лентивирусном трансдукцыі, імунныя клеткі могуць павысіць іх спецыфіку ў распазнанні і знішчэнні опухолевых клетак, паляпшаючы тым самым тэрапеўтычную эфектыўнасць.

У гэтым кантэксце IPHASE, лідэр рэагентаў у даследаваннях in vitro, распрацаваў набор для ўпакоўкі лентивируса і канцэнтрацыю лентивируса, каб спрасціць складанасць трансдукцыі для кліентаў імунатэрапіі і палепшыць хуткасць поспеху стабільнай трансфекцыі генаў. Гэтыя прадукты прапануюць адно - спыніць рашэнне для кліентаў.

Iphase lentivirusPрадукты

Камплект для ўпакоўкі лентивируса IPhaseзмяшчае ўсе неабходныя рэагенты, неабходныя дляУпакоўка лентивируса, значна спрашчаючы эксперыментальны працэс і эканомію часу і намаганняў. Гэты камплект уключае:

• Лентивирусная ўпаковачная плазміда сумесь
• Трансфект рэагент
• EGFP плазміда
• Іфаза лентивирус

Гэты камплект па -сапраўднаму спрашчае эксперымент! Не маючы неабходнасці ў складанай падрыхтоўцы рэагента, упакоўка лентивируса можа быць эфектыўна завершана, проста выконваючы ўключэнне інструкцый.Унікальныя перавагі камплекта ўключаюць кароткі час упакоўкі, высокі вірусны тытр і лёгкую працу, што робіць яго ідэальным для пачаткоўцаў у ўпакоўцы лентивируса. Кожны набор рэагентаў падвяргаецца строгаму кантролю якасці, каб забяспечыць дакладныя, надзейныя і ўзнаўляльныя вынікі, што значна павышае эфектыўнасць трансфекцыі і стабільнасць вірусных вектараў, што забяспечвае магутную тэхнічную падтрымку для падрыхтоўкі імунных клетак.

Акрамя таго, каб дапамагчы кліентам зэканоміць выдаткі, IPHASE таксама распрацаваў і стварыў лентивирусную рэагент, прапаноўваючы хуткае і простае рашэнне канцэнтрацыі.Проста змешваючы супернатант лентивируса з канцэнтрацыйным рэагентам, пасля чаго кароткая інкубацыя і цэнтрафугаванне з выкарыстаннем стандартнай цэнтрабежнай, лентивирусных часціц можна хутка сканцэнтравацца. Гэты працэс не патрабуе ультрацэнтрыфугі, што робіць яго зручным і кошту - эфектыўным варыянтам для большасці лабараторных карыстальнікаў.

Карацей кажучы, рэагент канцэнтрацыі лентивируса IPHASE не толькі значна павышае эфектыўнасць трансфекцыі, але і забяспечвае высокую - якасную вірусную вектарную падтрымку для падрыхтоўкі імунных клетак. Гэта неабходны прадукт для звычайных эксперыментаў, даклінічных даследаванняў і іншых абласцей прымянення.

Такім чынам, імунатэрапія, у прыватнасці, машыны - Т -клеткавая тэрапія - NK -клеткавыя метады, уяўляе сабой новы кірунак у сучасным лячэнні рака. Дзякуючы дакладным працэсам, такіх як сартаванне клетак, актывацыя, трансдукцыя, пашырэнне і кантроль якасці, навукоўцы могуць падрыхтаваць эфектыўныя і бяспечныя імунныя клеткі для пацыентаў, што дазваляе мэтанакіраванае лячэнне рака.Лентивирусное трансдукцыю, як асноўная тэхналогія, гуляе вырашальную ролю ў падрыхтоўцы CAR - T і CAR - NK -клеткі з -за высокай эфектыўнасці і стабільнасці.Пры бесперапынным тэхналагічным дасягненні імунатэрапія ўтрымлівае патэнцыял для прапановы інавацыйных варыянтаў лячэння для большай колькасці пацыентаў, забяспечваючы вялікую клінічную каштоўнасць. У будучыні, як чакаецца, імунатэрапія прынясе рэвалюцыйную тэрапеўтычную надзею большай колькасці хворых на рак.

Каб задаволіць патрэбы трансдукцыі генаў, экспрэсіі і захворвання, iPhase прапануе наборы для ўпакоўкі лентивируса, рэагенты канцэнтрацыі лентивируса і лентивирусы Tracer. Гэтыя лентивирусы для прасочвання ўпакоўваюцца з зялёным флуарэсцэнтным бялком (GFP), чырвоным флуарэсцэнтным бялком MCherry і люцыферазай, што дазваляе лёгка адсочваць клеткі -мішэні як у прабірцы, так і ў натуральных умовах.

Акрамя таго, iPhase таксама можа прапанаваць два папярэдне Гэтыя трэкеры можна выбіраць альбо спалучаць на аснове эксперыментальных патрэбаў, упарадкавання працоўных працэсаў і павышэння эфектыўнасці для рэальнага - адсочвання часу і маніторынгу клетак -мішэняў.

IPhaseIммунатэрапіяRузнёсPрадукты

У дадатак да лентивируса - звязаныя з гэтым прадукты, якія выкарыстоўваюцца ў CAR - T або CAR - NK тэрапіі, iPhase, як лідэр у даследаваннях in vitro, таксама ўнеслі значны ўклад у падтрымку інавацый у CGT (клеткавай і геннай тэрапіі) і іншых галінах. Iphase распрацавала і вырабляла лейкацыты і PBMC (мононуклеарныя клеткі перыферычнай крыві), вылучаныя праз лейкаферэз, а таксама розныя наборы для ізаляцыі імунных клетак, каб падтрымаць хуткае развіццё імунатэрапіі.

IPhase прадукты прапануюць наступныя перавагі, ісертыфікат аналізу (COA)Праверана IPHase даступны для кожнай партыі.

Бяспека 

Прадукты iPhase атрыманы ад здаровых донараў/жывёл, якія прайшлі дбайнае папярэдняе праверку, з негатыўнымі вынікамі віруснага тэсціравання (ВІЧ - 1/2, HBV, HCV, прайфіліс).

Падатлівасць  

IPHASE забяспечвае інфармаваныя формы згоды, падпісаныя донарамі, з выразнай і прасочванай праверкай крыніцы.

Прафесіяналізм

Прадукты, якія прадастаўляюцца IPHASE, атрыманыя праз лейкаферэз, вырабляюцца падрыхтаванымі спецыялістамі. Кожная партыя суправаджаецца адпаведным COA, а прадукты транспартуюцца пад строгай халоднай ланцужком для забеспячэння бяспекі, хуткай дастаўкі і забеспячэння якасці.

Абслугоўванне кліентаў

IPHASE прапануе высокую - якасць пасля - продажу, забяспечваючы гладкую і бесперапынную вопыт на працягу ўсяго працэсу выпрабаванняў.