Сравнителен анализ на мононуклеарните клетки на периферната кръв (PBMC): между приложенията на видовете в имунологията и терапевтичните изследвания

IФазови продукти

Мононуклеарни клетки на периферна кръв (PBMC)

Мононуклеарни клетки на периферна кръв (PBMC)са хетерогенна популация от имунни клетки, открити в периферна кръв, характеризираща се с едно кръгло ядро. Те включват лимфоцити - като Т клетки, В клетки и естествени убийствени (NK) клетки - и моноцити, като същевременно изключват гранулоцитите (например неутрофили) и еритроцитите. PBMC обикновено се изолират чрез центрофугиране на градиент на плътност, използвайки среда като Ficoll, която разделя клетките въз основа на плаваемостта. Този не - инвазивен метод позволява лесен достъп до критични имунни компоненти, което прави PBMC безценен при имунологичните изследвания и терапевтичното развитие.

PBMC isoЛейт

Размерът, морфологията и специфичната тежест на единичните нуклеирани клетки се различават от другите клетки в периферната кръв. Специфичната тежест на червените кръвни клетки и полиморфонуклеарните левкоцити надвишава 1,080, тази на отделните нуклеирани клетки е около 1,070, а тази на тромбоцитите е около 1,030. Следователно, разликата между специфичната тежест на различни кръвни клетки и отделни нуклеирани клетки може да се използва за отделяне на различни кръвни клетки от отделните нуклеирани клетки. Центрофугирането на градиента на плътността на ficoll е най -често използваният метод заPBMC изолацияи пречистване. Ficoll е мултимер на захароза, неутрален, със средно молекулно тегло 400 000 и когато плътността е 1,2 g/ml, тя не надвишава нормалното физиологично осмотично налягане и не преминава през биологични мембрани, така че обикновено се използва за PBMC. Следователно, той често се използва като раздел за разделяне за PBMC разделяне. Еритроцитите и гранулоцитите имат голяма специфична гравитация и потъват до дъното на тръбата след центрофугиране; Лимфоцитите и моноцитите имат специфична гравитация, по -малка или равна на специфичната гравитация на разтвора за разделяне, и плават върху повърхността на разтвора за разделяне след центрофугиране, а малка част от клетките също може да бъде суспендирана в разтвора за разделяне. Чрез аспириране на клетките на белия мембранен слой върху течната повърхност на разтвора за разделяне и измиването им по подходящ начин, единични нуклеирани клетки с по -висока чистота, т.е. PBMC, могат да бъдат изолирани от периферна кръв.

PBMC при различни видове

При не - човешки примати, по -специално Cynomolgus маймуни и резус маймуна, изследванията на PBMC са високо ценени поради физиологичните прилики, които споделят с хората. Изследване с помощта наCynomolgus Monkey PbmcиRhesus Monkey PBMCса позволили подробни проучвания на имунните механизми и многобройни проучвания, използващи Monkey PBMC, подчертават своя транслационен потенциал за човешка имунотерапия. Използването на маймунски PBMC при тестване на ваксини, скрининг на лекарства и имунна модулация се превърна в крайъгълен камък както в предклиничните, така и в клиничните изследвания.

По същия начин, разследвания, включващикуче PBMCса допринесли значително за ветеринарна имунология. Проучванията, използващи куче PBMC, осветяват пътищата на имунния отговор в кучетата, докато изследванията, включващикучешки PBMCсъщо така подчерта паралелите с имунната функция на човека. В областта на зоонотичните заболявания както Dog PBMC, така и кучешките PBMC изследвания предоставят критични данни за патоген - взаимодействия на гостоприемника, като подчертават ролята на тези клетки в наблюдението на болестта и развитието на лечението. Повтарящата се употреба на куче PBMC и кучешки PBMC в сравнителни проучвания подчертава тяхното значение като моделна система.

Моделите на гризачите, които включватПлъх PBMCимишка pbmc, традиционно са били начело на имунологичните изследвания. Изследванията, използващи PBMC на плъхове, предлагат подробна перспектива за имунната регулация при хронични възпалителни състояния, а широкото използване на миши PBMC е от решаващо значение за генетичните и механистичните изследвания на автоимунитета и инфекцията. Изследователите продължават да разчитат както на PBMC на плъхове, така и на миши PBMC, за да изследват сложни имунологични процеси, което прави тези модели задължителни. Освен това интегрирането наHamster PBMCПри експериментални настройки добави друго измерение към имунологичните изследвания, тъй като Hamster PBMC изследва често дават нова представа за вирусната патогенеза и стратегиите за имунно укриване. С Hamster PBMC, допълващ изследването на PBMC на плъхове и мишката PBMC, моделите на гризачи колективно образуват цялостен инструментариум за имунни изследвания.

Големите животински модели също са обогатили полето, сMinipig PBMCИгра на основна роля в преодоляването на предклиничните изследвания и клиничните приложения. Използването на Minipig PBMC се оказа полезно в изследванията за регенеративна медицина и трансплантация на органи, където Minipig PBMC предоставя физиологично значима платформа за тестване на нови терапии. Освен това, използвайки разследванияЗаек PBMCса от съществено значение за производството на антитела и изследването на автоимунните разстройства, като Rabbit PBMC изследва постоянно да дава ценни имунологични прозрения. Използвайки Minipig PBMC и Rabbit PBMC в тандем, изследователите могат да оценят ефикасността и безопасността на новите имунотерапии в системи, които тясно имитират човешката физиология.

Котешка иCAT PBMCИзследванията са извадили своята ниша при изследване на ретровирусни инфекции и имунна дисфункция. Използване на разследваниякотешка PBMCРазшириха нашето разбиране за котешката имунна система, докато проучванията с CAT PBMC са предложили прозорец в имунните отговори, свързани с вирусни инфекции. Както PBMC, така и CAT PBMC са многократно подчертани в изследвания, изследващи паралелите между котешки и човешки имунодефицитни вируси, което доказва, че многократното използване на котешки PBMC и CAT PBMC е от решаващо значение за разработването на ефективни диагностични и терапевтични стратегии.

Имунологията на птиците не е изоставена, сПиле PBMCиDuck PbmcПроучвания, предоставящи критична представа за имунните механизми на птиците. Изследванията, използващи пилешко PBMC, разкриха уникални аспекти на имунните отговори на птиците, докато изследванията, включващи PBMC Duck, допълнително обогатиха нашето разбиране за патогенната резистентност при видовете птици. Многократната употреба на пилешко PBMC и патица PBMC в проучвания, изследващи вирусни инфекции и ефикасност на ваксината, илюстрира тяхното значение при контролирането на заболявания, които засягат както животинските, така и от човешките популации.
Освен това, проучвания, използващиГвинея свин PBMCса били централни за туберкулозата и изследванията на ваксините, където PBMC на морски свинчета последователно служат като надеждни показатели за имунен отговор. Паралелно, разследвания, включващиAlpaca PBMCиCamel Pbmcса привлекли вниманието поради уникалните структури на антитела, присъстващи при тези видове. Изследванията, включващи Alpaca PBMC и Camel PBMC, разкриха нови терапевтични приложения, като Alpaca PBMC и Camel PBMC се използват многократно за изследване на иновативните технологии на нанободи и имунизирани - базирани лечения.

Приносите наBovine PBMCиОвце PBMCЗа селскостопанската имунология също са били забележителни. Проучванията с говежди PBMC предоставят дълбока представа за говежди мастит и респираторни заболявания, а обширните изследвания, използващи говежди PBMC, имат пряко информирани стратегии за подобряване на здравето на добитъка. Също така, многократната употреба на овце PBMC при имунологични изследвания обогати нашето разбиране за имунните реакции на преживни животни, а изследванията на PBMC от овце продължават да ръководят развитието на ефективни ваксини и протоколи за управление на болести.

Роля в имунните изследвания

PBMC може да имитира in vivo средата и да осигури ефективен in vitro модел за разработване на лекарства. Чрез наблюдение на ефектите на лекарствата върху пролиферацията на PBMC, апоптозата и цитотоксичността, ефикасността и безопасността на лекарствата могат да бъдат първоначално оценени. Чрез изучаване на ефектите на лекарствата върху целите на действието и сигналните пътища на PBMC, той помага да се открият нови цели на лекарственото действие и тези открития могат да предоставят нови идеи и указания за развитието на лекарствата.

Приложения в антитяло - Зависима клетка - медиирана цитотоксичност (ADCC)

Прилагането на PBMC при откриване на наркотици е представено отАнтитяло - Зависима клетка - Медиирана цитотоксичност (ADCC). Антитяло - Зависима клетка - Медиирана цитотоксичност, както подсказва името, разчита на антитяло - Медиирано убийство на клетки, за да убие целевите клетки. Специфичният процес може да бъде разбран по следния начин: FAB сегментът на антитялото се свързва с антигенен епитоп на целевата клетка. ФК сегментът на антитялото се свързва с FCR на повърхността на NK клетката (тъй като NK клетките са основните клетки, които могат да играят ролята на ADCC, това се използва като пример) и по този начин се активират NK клетката и се отделя перфорин и гранзим. Перфоринът и гранзимът навлизат в клетката през порите, образувани в целевата клетъчна мембрана и причиняват умиране на целевата клетка чрез активиране на апоптоза - свързани ензими.

Приложения вother имунотерапевтично развитие на лекарствата

• - Смесена лимфоцитна реакция (MLR)

Първичните DC клетки и Т клетките са CO - култивирани в система, която може да се използва за оценка на DC - медиирано активиране на Т клетки. DC клетките експресират Pd - L1 в големи количества на тяхната повърхност, което се свързва с Pd - 1 на повърхността на Т клетките, за да го инхибира. Ако лекарството може ефективно да блокира пътя на реакцията между двете, то може да стимулира пролиферацията на Т клетки в големи количества, като по този начин се провери функционалната активност на лекарството.

- T Тестове за клеткактивация

Тестът за активиране на T - клетъчен е един от често използваните анализи за оценка на ефектите на имунотерапевтичните лекарства. В тестове за активиране на Т клетки in vitro култивирани Т клетки обикновено се използват и дават подходящи стимули, като антигени или антитела, за да се индуцира активиране на Т клетки

- Т -клетъчна пролиферация анализ

Тестовете за клетъчна пролиферация могат да се използват за екраниране на кандидатите за имунотерапия с лекарства и за оценка на ефективността на лекарствата чрез сравняване на степента на t - клетъчна пролиферация в различни лекарства - лекувани групи спрямо контролна група

- Стафилококов ентеротоксин В стимулация на PBMCS

Staphylococcal Enterotoxin B е суперсиген, който се свързва директно с MHC молекули върху антиген - Представящи клетки и е представен на T - клетъчни рецептори. Staphylococcal Enterotoxin B има способността да не активира конкретно t - клетки и да индуцира освобождаването на Pro - възпалителни цитокини, като IL - 2, IL - 6 и т.н.

PBMC роля при синдрома за освобождаване на цитокини

PBMC играе основна роля в развитието наСиндром на освобождаване на цитокини(CRS), остър и потенциално пристрастен към живота системен възпалителен отговор. Когато са стимулирани - независимо от имунотерапиите като CAR -T клетки, моноклонални антитела или от инфекции - тези клетки стават силно активирани и бързо секретират диапазон от цитокини като IL -6, IL -1, IFN -γ и TNF -α. Това прекомерно производство на цитокини може да предизвика каскада от събития, включително треска, съдово изтичане, хипотония и мултиорганна дисфункция. Разбирането на приноса на PBMC в CRS доведе до разработването на целеви интервенции, като IL -6 рецепторни инхибитори, за да помогне за смекчаване на синдрома чрез закаляване на цитокиновата буря, като същевременно запазва желаните имунотерапевтични ефекти.

ConСклонение

В обобщение, тази статия подчертава ключовата роля, която PBMC играят за развитието на нашето разбиране за имунните механизми в широк спектър от видове. Чрез изследване на уникалните приноси - от примати модели, които отразяват човешката физиология на гризачи, големи животински и птици системи, които всяка от тях предлагат отличителни изследователски предимства - този преглед подчертава как сравнителните изследвания не само усъвършенстват предклиничните оценки, но и проправят пътя към иновативните имунотерапетични стратегии. Интеграцията на изследванията на PBMC в различни домейни като развитие на ваксини, тестване на ефикасността на лекарствата и изследването на нови имунни пътища е пример за неговата необходима роля както в основните науки, така и в клиничните приложения. В крайна сметка анализът на кръста - видове на PBMC потвърждава стойността на тези клетъчни модели като основни инструменти за превеждане на открития на скамета в ефективни лечения за широк спектър от имунологични предизвикателства.

KEywords: Мононуклеарната клетка на периферната кръв, Cynomolgus Monkey Pbmc, Rhesus Monkey PBMC, Куче PBMC, Кучешки PBMC, Плъх PBMC, мишка PBMC, Мишки PBMC, хамстер PBMC, Minipig PBMC, Заек PBMC, котешки PBMC, CAT PBMC, Пиле PBMC, патица PBMC, Гвинея свин PBMC, Alpaca PBMC, Camel PBMC, говежди PBMC, Овце PBMC, Антитяло - Зависима клетка - Медиирана цитотоксичност (ADCC), Синдром на освобождаване на цитокини, замразен PBMC, криоконсервиран PBMC,PBMC изолация, Размразяване на PBMC, Култивиране PBMC, Leukopak, Левкафереза ​​PBMC, HLA въвежда PBMC.