প্ররোচিত ইঁদুর লিভার এস 9 ভগ্নাংশ: ভিট্রো জিনোটোক্সিসিটি এবং মিউটেশন পরীক্ষার জন্য একটি বিপাকীয় অ্যাক্টিভেশন সিস্টেম

কীওয়ার্ড: ওইসিডি 471, ওইসিডি 473, ওইসিডি 476, ওইসিডি 487, মিউটেশন টেস্ট, জিনোটোক্সিসিটি, জিনগত বিষাক্ততা, প্ররোচিত ইঁদুর লিভার এস 9, এএমইএস পরীক্ষা, মিনি আমেস টেস্ট, ক্রোমোসোমাল অ্যাব্রেশন, মাইক্রোনোক্লিয়াস, এইচপিআরটি/এইচজিপিআরটি অ্যাস, টি কে

আইফেজ পণ্য

ভূমিকা

প্ররোচিত ইঁদুর লিভার এস 9মূল্যায়ন করার ক্ষেত্রে একটি মূল উপাদানজেনেটিক বিষাক্ততারাসায়নিকের সম্ভাবনা, বিশেষত নিয়ন্ত্রক টক্সিকোলজিতে। এটি সাধারণত ভিট্রো অ্যাসেসের সাথে সংমিশ্রণে ব্যবহৃত হয় যেমনআমেস পরীক্ষা এবংমিউটেশন পরীক্ষা, যৌগিকগুলির মিউটেজেনিক বৈশিষ্ট্যগুলি মূল্যায়ন করতে। সাইটোক্রোম পি 450 (সিওয়াইপি 450) সমৃদ্ধ এনজাইমেটিক সিস্টেম সরবরাহ করে, প্ররোচিত ইঁদুর লিভার এস 9 ভগ্নাংশ লিভারে ঘটে যাওয়া বিপাকীয় প্রক্রিয়াগুলি অনুকরণে গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে, রাসায়নিকগুলি সম্ভাব্যভাবে জিনগত রূপান্তর বা ক্যান্সারের কারণ হতে পারে কিনা তা নির্ধারণ করতে সহায়তা করে।

প্ররোচিত ইঁদুর লিভার এস 9

লিভার এস 9 ভগ্নাংশটি একটি পোস্টকে বোঝায় - মাইটোকন্ড্রিয়াল সুপারেনট্যান্ট ইঁদুরের লিভার হোমোজেনেটস থেকে প্রাপ্ত ধারাবাহিক কেন্দ্রের একটি ধারাবাহিক পদক্ষেপের পরে। "প্ররোচিত" শব্দটি নির্দিষ্ট যৌগগুলির সাথে ইঁদুরগুলির চিকিত্সা বোঝায় যা লিভার এনজাইমগুলির ক্রিয়াকলাপকে বাড়িয়ে তোলে, বিশেষত সাইটোক্রোম পি 450 এনজাইমগুলি (সিওয়াইপি 450), যা জেনোবায়োটিক বিস্তৃত বিপাকের জন্য দায়ী।

প্ররোচিত ইঁদুর লিভার এস 9 ভগ্নাংশে বিভিন্ন ধরণের এনজাইম রয়েছে যা প্রথম ধাপ এবং দ্বিতীয় ধাপের রাসায়নিকের বিপাকের সাথে জড়িত। এর মধ্যে সাইটোক্রোম পি 450 মনোক্সিজেনেসেসের মতো এনজাইমগুলি অন্তর্ভুক্ত রয়েছে যা স্তরগুলির অক্সিডেটিভ বায়োট্রান্সফর্মেশনকে সহজতর করে, যার ফলে মানব লিভার বিপাককে নকল করে।

সিওয়াইপি 450 ক্রিয়াকলাপ এবং বিপাকীয় অ্যাক্টিভেশন

সাইটোক্রোম পি 450 এনজাইম পরিবার (সিওয়াইপি 450) বিভিন্ন ফার্মাসিউটিক্যালস, পরিবেশগত রাসায়নিক এবং কার্সিনোজেন সহ বিভিন্ন ধরণের পদার্থের বিপাকের ক্ষেত্রে গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে। প্ররোচিত ইঁদুর লিভার এস 9 ভগ্নাংশে এই এনজাইমগুলি রয়েছে এবং রাসায়নিকগুলি মূল্যায়নের জন্য প্রয়োজনীয় যা বিপাকীয় সক্রিয়করণের পরে কেবল জিনোটক্সিক হয়ে উঠতে পারে।

অনেক যৌগ প্রাথমিকভাবে অ - বিষাক্ত তবে লিভারে বিপাকের পরে বিষাক্ত হয়ে উঠতে পারে। এই প্রো - মিউটেজেনগুলি (যার জন্য মিউটেজেনিক হওয়ার জন্য বিপাকীয় অ্যাক্টিভেশন প্রয়োজন) এবং প্রো - কার্সিনোজেনস (যা ক্যান্সারের কারণ হিসাবে অ্যাক্টিভেশন প্রয়োজন) কেবলমাত্র এসএএসের মাধ্যমে সনাক্ত করা যায় যা একটি এস 9 বিপাকীয় অ্যাক্টিভেশন সিস্টেম অন্তর্ভুক্ত করে। সিওয়াইপি 450 এর মতো বিপাকীয় এনজাইমগুলি অন্তর্ভুক্ত না করে, এই পদার্থগুলি স্ট্যান্ডার্ড জিনোটোক্সিসিটি পরীক্ষায় নিরীহ বলে মনে হতে পারে।

ভিট্রো অ্যাসেসে প্ররোচিত ইঁদুর লিভার এস 9 যুক্ত করে গবেষকরা মূল্যায়ন করতে পারেন যে কীভাবে কোনও পদার্থ সিওয়াইপি 450 এনজাইমগুলির সাথে ইন্টারঅ্যাক্ট করে। এটি ফার্মাসিউটিক্যালসের জন্য বিশেষভাবে গুরুত্বপূর্ণ, কারণ সিওয়াইপি 450 এনজাইমগুলির বিপাকটি অনেক ওষুধের ফার্মাকোকিনেটিক্সের একটি গুরুত্বপূর্ণ পদক্ষেপ।

প্ররোচিত ইঁদুর লিভার এস 9 এর অ্যাপ্লিকেশন

1. 1। আমেস পরীক্ষা (ওইসিডি 471)

গাইডলাইনে বর্ণিত আমেস টেস্টওইসিডি 471, মিউটেজেনসিটি মূল্যায়নের জন্য সর্বাধিক ভাল পরিচিত এবং বহুল ব্যবহৃত পদ্ধতি। এটিতে সালমোনেলা ব্যাকটিরিয়ার স্ট্রেনগুলি একটি পরীক্ষার রাসায়নিকের সাথে প্রকাশ করা জড়িত তা দেখার জন্য এটি এমন রূপান্তরকে প্ররোচিত করে যা ব্যাকটিরিয়াগুলিকে হিস্টিডাইন - স্বাধীন অবস্থায় ফিরে আসে।

মানব বিপাক প্রক্রিয়া অনুকরণ করতে, প্রেরিত ইঁদুর লিভার এস 9 প্রায়শই পরীক্ষার সিস্টেমে যুক্ত হয়। এস 9 ভগ্নাংশটি সিওয়াইপি 450 সহ প্রয়োজনীয় এনজাইমগুলি সরবরাহ করে, যা যৌগটিকে আরও প্রতিক্রিয়াশীল আকারে বিপাক করার প্রয়োজন হতে পারে যা ব্যাকটিরিয়া ডিএনএতে মিউটেশনগুলির কারণ হতে পারে। এএমইএস পরীক্ষার সাথে এস 9 এর এই সংমিশ্রণটি প্রত্যক্ষ এবং বিপাকীয়ভাবে সক্রিয় মিউটেজেনিক প্রক্রিয়া উভয়কেই নকল করে মিউটেজেনিক সম্ভাবনার আরও বিস্তৃত মূল্যায়নের অনুমতি দেয়।

2. 2.মিউটেশন টেস্ট (ক্রোমোসোমাল অ্যাব্রেশন টেস্ট, মাইক্রোনোক্লিয়াস পরীক্ষা এবং অন্যান্য ইন ভিট্রো অ্যাসেস)

এএমইএস পরীক্ষা ছাড়াও, মিউটেশন পরীক্ষাগুলি সাধারণত রাসায়নিকগুলির জিনোটক্সিক সম্ভাবনার মূল্যায়ন করতে ব্যবহৃত হয়। এই পরীক্ষাগুলি ক্রোমোসোমাল মিউটেশন, জিন মিউটেশন এবং মাইক্রোনোক্লেই গঠন সহ বিভিন্ন জিনগত ক্ষতির পরিসীমা মূল্যায়নে আরও বিস্তৃত। প্ররোচিত ইঁদুর লিভার এস 9 নিম্নলিখিত কারণে মিউটেশন পরীক্ষায় ব্যবহৃত হয়:

মাইক্রোনোক্লিয়াস পরীক্ষা (ওইসিডি 487)

এই পরীক্ষাটি কোষগুলিতে মাইক্রোনোক্লেই গঠন সনাক্ত করে, যা কোষ বিভাগের সময় নিউক্লিয়াসে অন্তর্ভুক্ত করা হয়নি এমন ক্রোমোজোম বা পুরো ক্রোমোজোমগুলির টুকরোযুক্ত ছোট, বহির্মুখী দেহগুলি। দ্য মাইক্রোনোক্লিয়াস পরীক্ষাক্লাস্টোজেনিক (ক্রোমোজোম - ব্রেকিং) এবং অ্যানিউজেনিক (ক্রোমোজোম সংখ্যা প্রভাবিত করে) প্রভাবগুলি সনাক্ত করতে পারে। প্ররোচিত ইঁদুর লিভার এস 9 এখানে পরীক্ষার পদার্থটি বিপাকীয়ভাবে সক্রিয় করতে ব্যবহৃত হয়, কারণ কিছু রাসায়নিকগুলি কেবল লিভার এনজাইম দ্বারা বিপাক হয়ে গেলে ক্রোমোসোমাল ক্ষতির কারণ হয়। এস 9 ভগ্নাংশটি ভিভোতে ঘটতে পারে এমন বিপাকীয় অ্যাক্টিভেশনকে অনুকরণ করে পরীক্ষার সংবেদনশীলতা বাড়ায়।

ক্রোমোসোমাল অ্যাব্রেশন টেস্ট (ওইসিডি 473)

এই পরীক্ষাটি মূল্যায়ন করে যে কোনও পদার্থ বিরতি, মুছে ফেলা, ট্রান্সলোকেশন বা অন্যান্য ধরণের ক্ষয়কে প্ররোচিত করে ক্রোমোজোমগুলির কাঠামোগত ক্ষতি করতে পারে কিনা। মাইক্রোনোক্লিয়াস পরীক্ষার মতোক্রোমোসোমাল ক্ষয় পরীক্ষাবিপাকীয় অ্যাক্টিভেশন সহ বা ছাড়াই প্রয়োগ করা যেতে পারে। লিভারে বিপাকীয় প্রক্রিয়াগুলি নকল করার জন্য প্ররোচিত ইঁদুর লিভার এস 9 পরীক্ষার সিস্টেমে যুক্ত করা হয়, যা তাদের মূল আকারে ক্রোমোসোমাল ক্ষতির কারণ হতে পারে না এমন পদার্থের মূল্যায়নের অনুমতি দেয় তবে লিভার বিপাকের পরে এটি করতে পারে।

সারণী 1। মিউটেশন পরীক্ষার তুলনামূলক বিবেচনা

এইচপিআরটি/এইচজিপিআরটি অ্যাস (ওইসিডি 476)

মধ্যেএইচপিআরটি/এইচজিপিআরটি অ্যাস, চাইনিজ হ্যামস্টার (সিএইচও বা ভি 79) বা হিউম্যান লিম্ফোব্লাস্টয়েড (টি কে 6) কোষগুলির সংস্কৃতিগুলি একটি প্ররোচিত ইঁদুর লিভার এস 9 বিপাকীয় মিশ্রণের উপস্থিতিতে পরীক্ষার রাসায়নিকের সংস্পর্শে আসে, যা প্রো -মুটাগেনগুলিকে ডিএনএ - তথাকথিত প্রজাতিতে রূপান্তর করতে প্রয়োজনীয় সিওয়াইপি 450 এনজাইম সরবরাহ করে। একটি সংক্ষিপ্ত চিকিত্সা এবং একটি সাত -দিনের এক্সপ্রেশন সময়কালের পরে, কোষগুলি 6 - থিওগুয়ানাইন দিয়ে চ্যালেঞ্জ করা হয়; হাইপোক্সানথাইন - গুয়ানাইন ফসফরিবোসাইলট্রান্সফ্রেজ জিনে ফাংশন মিউটেশনগুলি কেবলমাত্র ক্লোনস বহন করে। মিউট্যান্ট কলোনির সামগ্রিক কার্যকারিতার সাথে তুলনা করে, গবেষকরা একটি মিউটেশন ফ্রিকোয়েন্সি নির্ধারণ করেন যা যদি একই সাথে এবং historical তিহাসিক উভয় নিয়ন্ত্রণগুলির চেয়ে পুনরুত্পাদনযোগ্যভাবে উন্নীত হয় তবে জিনোটক্সিক সম্ভাবনা নির্দেশ করে।

টি কে অ্যাসেস (ওইসিডি 490 & ওইসিডি 476)

দ্যTk assay L5178Y মাউস লিম্ফোমা কোষ (ওইসিডি 490) বা সিএইচও কোষগুলি নিয়োগ করে (ওইসিডি 476) থাইমিডাইন কিনেস লোকাসে ইঞ্জিনিয়ারড হিটারোজাইগাস। রাসায়নিক এক্সপোজার ± এস 9 মিশ্রণ অনুসরণ করে, কোষগুলি পুনরুদ্ধার করে এবং ট্রাইফ্লুওরোথিমিডিনযুক্ত মাঝারিটিতে ধাতুপট্টাবৃত হয়, যা টি কে - দক্ষ কোষকে হত্যা করে। বেঁচে থাকা টি কে মিউট্যান্টগুলি 10-14 দিনের বেশি কলোনী গঠন করে, ছোট -কোলোনি মিউট্যান্টগুলি প্রায়শই ক্রোমোসোমাল ইভেন্টগুলি এবং বৃহত -কোলোনি মিউট্যান্টগুলি প্রতিফলিত করে পয়েন্ট মিউটেশনগুলিকে প্রতিফলিত করে। এইচপিআরটি/এইচজিপিআরটি অ্যাসের মতো, কঠোর সাইটোঅক্সিসিটি নিয়ন্ত্রণ এবং ধনাত্মক মিউটেজেন বেঞ্চমার্কগুলি নিশ্চিত করে যে রূপান্তর ফ্রিকোয়েন্সিতে পর্যবেক্ষণ বৃদ্ধিগুলি নির্ভরযোগ্যভাবে একটি যৌগের জিনোটক্সিক ঝুঁকি প্রতিফলিত করে।

4. 4 .. ক্যান্সার ঝুঁকি মূল্যায়ন

প্ররোচিত ইঁদুর লিভার এস 9 ক্যান্সারের মূল্যায়ন করার লক্ষ্যে গবেষণায়ও ব্যবহৃত হয় - পদার্থের সম্ভাবনা সৃষ্টি করে। মানব লিভারে ঘটে যাওয়া বিপাকীয় প্রক্রিয়াগুলি অনুকরণ করে, এস 9 ভগ্নাংশটি এমন যৌগগুলি সনাক্ত করতে সহায়তা করতে পারে যা ডিএনএর সাথে আবদ্ধ করতে সক্ষম প্রতিক্রিয়াশীল বিপাক গঠনের দিকে পরিচালিত করতে পারে এবং এমন মিউটেশন তৈরি করতে পারে যা ক্যান্সার হতে পারে।

প্ররোচিত হ্যামস্টার লিভার এস 9 সহ বর্ধিত এএমইএস পরীক্ষা

ইউরোপীয় মেডিসিন এজেন্সি (ইএমএ) দ্বারা জারি করা সর্বশেষ নির্দেশিকা অনুসারে, traditional তিহ্যবাহী এএমইএস পরীক্ষাটি নির্দিষ্ট এন - নাইট্রোসামাইন অমেধ্য, বিশেষত এন - নাইট্রোসোডিমেথাইলামাইন (এনডিএমএ) এর মধ্যে অন্যদের মধ্যে মিউটেজেনিক সম্ভাবনা সনাক্ত করতে যথেষ্ট সংবেদনশীল হতে পারে না। অতএব, মার্কিন যুক্তরাষ্ট্রের খাদ্য ও ওষুধ প্রশাসন (এফডিএ) এর বিভাগ, জাতীয় কেন্দ্রের জন্য টক্সিকোলজিকাল রিসার্চ (এনসিটিআর) দ্বারা বিকাশিত বর্ধিত এএমইএস টেস্টকে আরও নির্ভরযোগ্য বিকল্প হিসাবে সুপারিশ করা হয়েছে। বর্ধিত এএমইএস পরীক্ষায় প্ররোচিত হ্যামস্টার লিভার এস 9 যোগ করার প্রবর্তন করা হয়েছিল, যা 30% ইঁদুর লিভার এস 9 এবং 30% হামস্টার লিভার এস 9 ধারণ করে। ইঁদুর এবং হ্যামস্টার ডেসমোসোমাল সুপারেনট্যান্টস (এস 9 এস) সাইটোক্রোম পি 450 এনজাইম - প্ররোচিত পদার্থের সাথে চিকিত্সা করা রডেন্ট লাইভার্স থেকে প্রস্তুত করা উচিত। প্ররোচিত হ্যামস্টার লিভার এস 9 ব্যবহার করে, এই বর্ধিত পরীক্ষাটি মানব বিপাককে আরও ভালভাবে অনুকরণ করে এবং ফলাফলগুলির নির্ভরযোগ্যতা বাড়ায়।

উপসংহার

প্ররোচিত ইঁদুর লিভার এস 9 জিনোটোক্সিসিটি পরীক্ষায় একটি গুরুত্বপূর্ণ সরঞ্জাম হিসাবে কাজ করে, গবেষক এবং নিয়ন্ত্রক সংস্থাগুলিকে রাসায়নিকের মিউটেজেনিক এবং কার্সিনোজেনিক সম্ভাবনার মূল্যায়ন করতে সহায়তা করে। বিপাকীয় অ্যাক্টিভেশন সিস্টেম সরবরাহ করে, এটি জিনোটক্সিক হওয়ার জন্য বিপাকীয় অ্যাক্টিভেশন প্রয়োজন এমন পদার্থ সনাক্ত করতে এএমইএস পরীক্ষা, মিউটেশন টেস্ট এবং সিওয়াইপি 450 ক্রিয়াকলাপ অধ্যয়নগুলির মতো অ্যাসেসের ক্ষমতা বাড়ায়। নতুন ওষুধ, রাসায়নিক এবং ভোক্তা পণ্যগুলির সুরক্ষা নিশ্চিত করার জন্য এর অ্যাপ্লিকেশনগুলি প্রয়োজনীয়। মানব লিভার বিপাক অনুকরণে এর ভূমিকা নিয়ে, প্ররোচিত ইঁদুর লিভার এস 9 ভগ্নাংশটি আধুনিক টক্সিকোলজি এবং নিয়ন্ত্রক সুরক্ষা মূল্যায়নের একটি অপরিহার্য অঙ্গ হিসাবে অব্যাহত রয়েছে।