প্রাথমিক হেপাটোসাইটস: ভিট্রো ড্রাগ গবেষণায় ক্লিনিকাল ননকে অগ্রসর করার জন্য একটি গুরুত্বপূর্ণ সরঞ্জাম

প্রাথমিক হেপাটোসাইটস: ভিট্রো ড্রাগ গবেষণায় ক্লিনিকাল ননকে অগ্রসর করার জন্য একটি গুরুত্বপূর্ণ সরঞ্জাম

লিভার, ড্রাগের এক্সপোজারের প্রাথমিক অঙ্গ হিসাবে, ড্রাগ বিপাক এবং বিষাক্ততা প্রক্রিয়াগুলিতে গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে। প্রাথমিক হেপাটোসাইটগুলি সেলুলার বৈশিষ্ট্যগুলির সম্পূর্ণ বর্ণালী এবং এনজাইম এবং কোফ্যাক্টরগুলির শারীরবৃত্তীয় স্তরের রয়েছে, যার মধ্যে ঝিল্লি - সাইটোক্রোম পি 450 (একটি মিশ্র - ফাংশন অক্সিডেসে মসৃণ এন্ডোপ্লাজমিক রেটিকুলাম) এবং সাইটোসোলিক এস্টেরেসস, সমস্ত মেটাবোলিককে অন্তর্ভুক্ত করে। এই কারণে, প্রাথমিক হেপাটোসাইটগুলি ভিট্রো লিভারের মডেলগুলি তৈরির জন্য সোনার মান হিসাবে ব্যাপকভাবে বিবেচিত হয় এবং ড্রাগের মিথস্ক্রিয়া, ড্রাগ বিপাক এবং বিষাক্ততা গবেষণায় গবেষকদের দ্বারা অনুকূল হয়। এই নিবন্ধটি প্রাথমিক হেপাটোসাইট এবং ওষুধ বিকাশে তাদের অ্যাপ্লিকেশনগুলির উপর ভিত্তি করে 2 ডি এবং 3 ডি সংস্কৃতি মডেলগুলির একটি ওভারভিউ সরবরাহ করে।

কীওয়ার্ডস: প্রাথমিক হেপাটোসাইটস, 2 ডি চাষ, 3 ডি চাষ, অর্গানয়েডস, কো - সংস্কৃতি।

1. 1। প্রাথমিক হেপাটোসাইটের বিচ্ছিন্নতা

প্রাথমিক হেপাটোসাইটগুলির বিচ্ছিন্নতা ভিট্রো লিভারের মডেলগুলি প্রতিষ্ঠার একটি গুরুত্বপূর্ণ পদক্ষেপ, দুটি - পদক্ষেপ কোলাজেনেস পারফিউশন পদ্ধতিটি সর্বাধিক ব্যবহৃত হয়। ছোট প্রাণীদের মধ্যে, লিভার পারফিউশন পোর্টাল শিরা বা নিকৃষ্ট ভেনা কাভা মাধ্যমে সঞ্চালিত হতে পারে, যখন বৃহত্তর প্রাণীদের সাধারণত লিভারের লব বা বিভাগগুলির মাধ্যমে পারফিউশন প্রয়োজন হয়। বেশ কয়েকটি মূল কারণ হেপাটোসাইটগুলির সফল বিচ্ছিন্নতা প্রভাবিত করে: প্রথমত, কোলাজেনেস অ -সাইটোঅক্সিক হওয়া উচিত। দ্বিতীয়ত, হজমের সময়টি অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণউভয় অধীনে - হজম এবং ওভার - হজম হেপাটোসাইটের ফলন এবং কার্যক্ষমতার সাথে আপস করতে পারে। তৃতীয়ত, লিভারের অবস্থা অবশ্যই সর্বোত্তম হতে হবে, কারণ হেপাটোসাইটগুলি ইস্কেমিক ক্ষতির জন্য অত্যন্ত সংবেদনশীল। হেপাটোসাইট প্রস্তুতির জন্য ব্যবহৃত লিভারটি বিপাকের হার হ্রাস করতে এবং বিপাকীয় হাইপোক্সিয়া এবং পরবর্তীকালে ইস্কেমিয়া প্রতিরোধের জন্য দ্রুত ঠান্ডা করা উচিত।

ওষুধ গবেষণায় ব্যবহৃত প্রাথমিক হেপাটোসাইটগুলির মানগুলি নিম্নরূপ:

1. 2। প্রাথমিক হেপাটোসাইট 2 ডি সংস্কৃতি

সাসপেনশন হেপাটোসাইট মডেল

এটিতে সম্পূর্ণ ড্রাগ রয়েছে - এনজাইম এবং কোফ্যাক্টরগুলি বিপাকীয় করে তোলে, এটি বিভিন্ন বিপাকীয় ছাড়পত্রের পথ অধ্যয়নের জন্য উপযুক্ত করে তোলে। যাইহোক, সাসপেনশন হেপাটোসাইটগুলির কার্যকারিতা এবং ড্রাগের ক্রিয়াকলাপ - ভিট্রো ইনকিউবেশন সময় বাড়ার সাথে সাথে ধীরে ধীরে এনজাইমগুলি বিপাকীয়ভাবে হ্রাস পায়, ইনকিউবেশন সময়কে সর্বোচ্চ 4 ঘন্টা সীমাবদ্ধ করে। এই মডেলটি সাধারণত মাঝারি থেকে উচ্চ ছাড়পত্রের হারের সাথে ওষুধের ছাড়পত্র অনুমান করতে ব্যবহৃত হয়। যখন ছাড়পত্রের হার 20%এরও কম হয়, সঠিক ছাড়পত্রের মান নির্ধারণ করা যায় না। Dition তিহ্যবাহী সাসপেনশন হেপাটোসাইট - ভিট্রো বিপাকের মডেলগুলির উপর ভিত্তি করে ধীর - বিপাকীয় যৌগগুলির জন্য সনাক্তকরণযোগ্য বিপাকীয় প্রতিক্রিয়া উত্পন্ন করার জন্য অপর্যাপ্ত, এইভাবে এই যৌগগুলির ছাড়পত্রের হার এবং বিপাকীয় পণ্যগুলির পূর্বাভাস দেওয়ার তাদের ক্ষমতা সীমাবদ্ধ করে। একটি সাসপেনশন হেপাটোসাইট রিলে পদ্ধতি (চিত্র 1) ইনকিউবেশন সময়টি 20 ঘন্টা বা তারও বেশি সময় পর্যন্ত প্রসারিত করতে ব্যবহার করা যেতে পারে।

আবেদন:ছোট অণু ওষুধের জন্য এনজাইম ক্রিয়াকলাপ এবং বিপাকীয় স্থায়িত্ব অধ্যয়ন।

চিত্র 1। সাসপেনশন হেপাটোসাইট রিলে পদ্ধতি স্থানান্তর প্রক্রিয়া

উত্স: ড্রাগ মেটাব ডিসপোস, 2012,40 (9): 1860–1865

প্লেটেবল হেপাটোসাইটস মডেল

প্রাথমিক হেপাটোসাইটগুলি কোলাজেন - প্রলিপ্ত সংস্কৃতি প্লেটগুলিতে একটি 2 ডি সিস্টেমে সংস্কৃত হয়। হেপাটোসাইটগুলি একটি এপিথিলিয়াল মরফোলজি প্রদর্শন করে, প্রস্রাবকারী নিউক্লিয়াস সহ প্রায়শই একটি বিনুক্লিটেড আকারে উপস্থাপন করে। একক হেপাটোসাইট মনোলোয়ার সংস্কৃতির ত্রুটিগুলির মধ্যে রয়েছে: 1। সেল পোলারিটি এবং ফাংশন 2 এর পরিবর্তন। অন্যান্য প্রাসঙ্গিক কোষের ধরণের অভাব (যেমন, নন - প্যারেনচাইমাল সেল) যা সাধারণ ফাংশনের জন্য প্রয়োজনীয়। হেপাটোসাইটগুলি তাদের ফাংশনগুলি সম্পাদন করার ক্ষেত্রে (যেমন পিত্ত অ্যাসিড এবং সিরাম প্রোটিন বায়োসিন্থেসিস) সমর্থন করার জন্য পর্যাপ্ত পুষ্টি এবং প্যারাক্রিন উপাদান সরবরাহ করতে অক্ষমতা।

অ্যাপ্লিকেশন:

1)। ড্রাগের মূল্যায়ন - ড্রাগ ইন্টারঅ্যাকশন:এর মধ্যে এনজাইম ইন্ডাকশন, এনজাইম ইনহিবিশন এবং ট্রান্সপোর্টার স্টাডিজ অন্তর্ভুক্ত রয়েছে। প্রথমত, যখন কোনও ড্রাগ সূচক হিসাবে কাজ করে, তখন এটি ড্রাগের বর্ধিত অভিব্যক্তির দিকে পরিচালিত করতে পারে - এনজাইম এবং ট্রান্সপোর্টারদের বিপাকীয় করে তোলে। শক্তিশালী সূচকগুলি একসাথে একাধিক জিনকে আপগ্রেট করতে পারে, যেমন সিওয়াইপি 2 বি 6, সিওয়াইপি 3 এ 4, সিওয়াইপি 2 সি 9, ইউজিটি এবং এমআরপি 2 এর মতো বেশ কয়েকটি পরিবহন প্রোটিনের ফেনোবারবিটাল ইন্ডাকশন। দ্বিতীয়ত, এখানে প্রজাতি রয়েছে - হেপাটোসাইটগুলি কীভাবে সূচকগুলিকে প্রতিক্রিয়া জানায় তার নির্দিষ্ট পার্থক্য। উদাহরণস্বরূপ, রিফাম্পিসিন হ'ল মানব এবং খরগোশের হেপাটোসাইটগুলির জন্য একটি কার্যকর সূচক, তবে ইঁদুর হেপাটোসাইটগুলিতে কোনও আনয়ন প্রভাব নেই। অবশেষে, প্লেটেবল হেপাটোসাইটগুলির সাবপটিমাল প্লেটিং ঘনত্ব P450 এর বেসাল অভিব্যক্তি হ্রাস করতে পারে এবং কৃত্রিমভাবে বর্ধিত অন্তর্ভুক্তির প্রতিক্রিয়াগুলি বাড়িয়ে তুলতে পারে। চিত্র 3 -তে দেখানো হয়েছে, নিম্ন ধাতুপট্টাবৃত ঘনত্বের হেপাটোসাইটগুলি সিওয়াইপি 1 এ 2, সিওয়াইপি 2 বি 6, এবং সিওয়াইপি 3 এ 4 এর কম বেসাল ক্রিয়াকলাপ দেখায়, তবে শক্তিশালী আনয়ন প্রতিক্রিয়াগুলি দেখায়। অতএব, শারীরবৃত্তীয়ভাবে প্রাসঙ্গিক ডেটা পাওয়ার জন্য একটি উপযুক্ত ধাতুপট্টাবৃত ঘনত্বের স্বাস্থ্যকর হেপাটোসাইটগুলি প্রয়োজনীয়।

অঙ্ক

সূত্র: বর্তমান ড্রাগ ডিসকভারি টেকনোলজিস, 2010, 7: 188 - 198

2)। হেপাটোটক্সিসিটি মূল্যায়ন: একটি হালকা মাইক্রোস্কোপের অধীনে মরফোলজিকাল পরিবর্তনগুলি পর্যবেক্ষণ করা, যেমন সেল মরফোলজি, ভ্যাকুওল এবং লিপিড ফোঁটা সমষ্টি এবং কোষ সংযুক্তি/বিচ্ছিন্নতা। হেপাটোসাইট নেক্রোসিস সনাক্তকরণ (যেমন অ্যাস্পার্টেট অ্যামিনোট্রান্সফেরেজ, ল্যাকটেট ডিহাইড্রোজেনেস এবং অ্যালানাইন অ্যামিনোট্রান্সফেরেজ দ্বারা নির্দেশিত) এবং অ্যাপোপটোসিস (ডিএনএ খণ্ডন) দ্বারা নির্দেশিত। সাইটোকাইন - মধ্যস্থতা সাইটোঅক্সিসিটির জন্য, হেপাটোসাইটের একক মনোলোয়ার সংস্কৃতিগুলি প্রতিবেশী নন - পেরেনচাইমাল কোষগুলি যেমন কুপফার কোষ, স্টেললেট কোষ এবং সাইনোসয়েডাল এন্ডোথেলিয়াল কোষ থেকে প্রকাশিত পদার্থ দ্বারা নিয়ন্ত্রণের কারণে বিষাক্ত প্রতিক্রিয়াগুলির পূর্বাভাস দিতে পারে না।

3)। ধীর বিপাকীয় যৌগিক ছাড়পত্র এবং এর বিপাকগুলির অধ্যয়নের জন্য "রিলে পদ্ধতি": ড্রাগের ক্রিয়াকলাপ - প্লেটেবল হেপাটোসাইটগুলিতে এনজাইমগুলি বিপাকীয় 24 ঘন্টা প্লেটিংয়ের পরে হ্রাস পেতে শুরু করে। সিরাম সহ প্লেটেবল হেপাটোসাইটগুলি ইনকিউবেট করার পরে - 24 ঘন্টা আগ্রহের যৌগযুক্ত ফ্রি মিডিয়াম, মাধ্যমটি সংগ্রহ করা এবং মিশ্রিত করা হয়, তারপরে আরও অধ্যয়নের জন্য নতুন প্লেটেবল হেপাটোসাইটে স্থানান্তরিত হয় (চিত্র 3)।

চিত্র 3। প্লেটেবল হেপাটোসাইট রিলে পদ্ধতি স্থানান্তর প্রক্রিয়া

সূত্র: ড্রাগ বিপাক পত্র, 2016, 10: 3 - 15

3)। হেপাটোসাইটের লক্ষ্য জিনের উপর সেলুলার গ্রহণ, এন্ডোসাইটোসিস, এন্ডোসোমাল এস্কেপ এবং সাইলেন্সিং এফেক্টগুলি মূল্যায়ন করুন - লক্ষ্যযুক্ত ছোট নিউক্লিক অ্যাসিড ড্রাগগুলি।

স্যান্ডউইচ চাষের মডেল

ভিট্রোতে, হেপাটোসাইটগুলি ভিভো স্ট্রাকচারগুলিতে পুনর্গঠন করতে কোলাজেন বা ম্যাট্রিজেলের দুটি স্তরগুলির মধ্যে সংস্কৃত হতে পারে, যা স্যান্ডউইচ চাষ হিসাবে পরিচিত। জেল - কোলাজেন (স্যান্ডউইচ স্ট্রাকচার) এর দুটি স্তরের মধ্যে সংস্কৃত হেপাটোসাইটগুলি কোষগুলির রূপচর্চা এবং কার্যকারিতা উন্নত করতে পারে এবং দীর্ঘ সময়ের জন্য তাদের কার্যকারিতা বজায় রাখতে পারে। তদ্ব্যতীত, স্যান্ডউইচ সংস্কৃতিতে হেপাটোসাইটগুলি পোলারিটি পুনরুদ্ধার করতে পারে, বেসোলটারাল এবং ক্যানালিকুলার ট্রান্সপোর্টারগুলির যথাযথ স্থানীয়করণের পাশাপাশি কার্যকরী পিত্ত নালী নেটওয়ার্ক গঠনের অনুমতি দেয় (চিত্র 4)।

চিত্র 4। মানব হেপাটোসাইট স্যান্ডউইচ মডেলটিতে ট্রান্সপোর্টারদের মেরুকৃত অভিব্যক্তি

সূত্র: বর্তমান ড্রাগ ডিসকভারি টেকনোলজিস, 2010, 7, 188 - 198

অ্যাপ্লিকেশন:

1. 1)। যৌগগুলির বিলিয়ারি নির্গমন অনুমান করা।
2. 2)। অন্তঃসত্ত্বা এবং বহিরাগত যৌগ এবং বিপাকগুলির হেপাটিক এবং বিলিয়ারি বিতরণ মূল্যায়ন।
3. 3)। বিপাক এবং ট্রান্সপোর্টারদের দ্বারা মধ্যস্থতা ছাড়পত্র অনুমান করা এবং ফিজিওলজি নির্মাণ - ভিত্তিক ফার্মাকোকিনেটিক মডেলগুলি।
4. 4)। হেপাটোটক্সিসিটি অধ্যয়ন করা এবং ক্লিনিকাল ড্রাগের জন্য ব্যবস্থা সরবরাহ করা - লিভারের আঘাতের প্ররোচিত। সম্ভাব্য ওষুধের পূর্বাভাস দেওয়ার জন্য ডেটা সিস্টেম ফার্মাকোলজি মডেলগুলিতে সংহত করা হয় - মানুষের মধ্যে লিভারের আঘাতের প্ররোচিত।
5.  
   1. 3। প্রাথমিক হেপাটোসাইট 3 ডি সংস্কৃতি

6. থ্রিডি সংস্কৃতি ব্যবস্থায়, হেপাটোসাইটগুলি একটি তিন - মাত্রিক ম্যাট্রিক্সে সংস্কৃত হয়, যা 2 ডি মনোলোয়ার সংস্কৃতির তুলনায় ভিভো লিভারের আর্কিটেকচারে আরও ভাল নকল করে। এই সিস্টেমগুলি সেল - সেল এবং সেল - ম্যাট্রিক্স ইন্টারঅ্যাকশন প্রচার করে, যা ড্রাগ বিপাক, প্রোটিন সিক্রেশন এবং পিত্ত গঠন সহ লিভারের আরও বেশি শারীরবৃত্তীয় ক্রিয়াকলাপ পুনরুদ্ধার করতে পারে। প্রাথমিক হেপাটোসাইট 3 ডি সংস্কৃতিগুলি লিভার অধ্যয়ন করতে ব্যবহার করা যেতে পারে - ভিভোতে আরও কিছু নির্দিষ্ট ফাংশনগুলি পরিবেশের মতো, ড্রাগ পরীক্ষা, বিষাক্ত মূল্যায়ন এবং রোগের মডেলিংয়ের জন্য সুবিধাগুলি সরবরাহ করে।

   স্পেরয়েড মডেল

আল্ট্রা - নিম্ন সংযুক্তি সংস্কৃতি, ঝুলন্ত ড্রপ সংস্কৃতি এবং চৌম্বকীয় কোষ সংস্কৃতি (চিত্র 5) এর মতো কৌশলগুলির মাধ্যমে প্রাথমিক হেপাটোসাইটগুলি বাহ্যিক ম্যাট্রিক্সের উপর নির্ভর না করে 150 - 175 মিমি পর্যন্ত ব্যাসের সাথে স্পেরয়েডাল সমষ্টিগুলিতে একত্রিত হতে পারে। স্পেরয়েড সংস্কৃতির একটি সুবিধা হ'ল প্রতিটি স্পেরয়েডের জন্য কেবল 1,330 - 2,000 কোষের প্রয়োজন হয়, অন্যান্য 3 ডি সংস্কৃতি কৌশলগুলির তুলনায় কোষের সংখ্যা উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করে। সাম্প্রতিক গবেষণায় দেখা গেছে যে প্রাথমিক হেপাটোসাইট স্পেরয়েড সংস্কৃতিগুলি 5 সপ্তাহ পর্যন্ত বজায় রাখতে পারে, সিওয়াইপি এনজাইম ক্রিয়াকলাপ 8 এবং 35 দিনের মধ্যে প্রায় অপরিবর্তিত রয়েছে। প্রোটোমিক্স বিশ্লেষণে প্রকাশিত হয়েছে যে স্যান্ডউইচ সংস্কৃতির তুলনায়, ড্রাগস শোষণের জন্য দায়ী এনজাইমগুলি 14 দিনের জন্য আরও ভাল সংরক্ষণ করা হয়েছে। তবে লিভারটি কোষের সমষ্টিগুলির চেয়ে অনেক জটিল। হেপাটোসাইটের বেসোলটারাল দিকটি রক্তের সাথে যোগাযোগ করে, যখন পিত্ত অ্যাপিকাল দিক থেকে প্রবাহিত হয়, যা জটিল লিভারের লোবুল কাঠামোর মূল বৈশিষ্ট্য এবং এটি এখনও স্পেরয়েড মডেলটিতে প্রতিলিপি করা যায় না।

অ্যাপ্লিকেশন:

1. 1)। ধীর বিপাক যৌগিক ছাড়পত্র এবং এর বিপাকগুলির অধ্যয়ন।
2. 2)। হেপাটোটক্সিসিটি গবেষণা।
3. 3)। সেলুলার আপটেক, এন্ডোসাইটোসিস, এন্ডোসোমাল এস্কেপ এবং হেপাটোসাইটের লক্ষ্য জিনের উপর নীরব প্রভাবগুলির মূল্যায়ন - লক্ষ্যযুক্ত ছোট নিউক্লিক অ্যাসিড ড্রাগগুলি।

চিত্র 5। স্পেরয়েড সংস্কৃতি পদ্ধতি

লিভার অর্গানয়েডস মডেল

অর্গানয়েডগুলির sens ক্যমত্য সংজ্ঞাটি হ'ল: স্টেম সেল, পূর্বসূরী কোষ বা পৃথক পৃথক কোষ থেকে প্রাপ্ত 3 ডি স্ট্রাকচার, ভিট্রোতে স্থানীয় টিস্যুগুলির নির্দিষ্ট ফাংশন এবং কাঠামোগুলি পুনরুত্পাদন করতে সক্ষম, ভিভো মাইক্রোইনভায়রনমেন্ট এবং সেল - থেকে - সেল ইন্টারঅ্যাকশনগুলিতে কার্যকরভাবে নকল করে। লিভার অর্গানয়েডগুলি মানব লিভার জীববিজ্ঞান গবেষণার জন্য সর্বাধিক উন্নত মডেল হিসাবে চিহ্নিত হয়েছে।

লিভার অর্গানয়েড নির্মাণের জন্য কোষের উত্স:

① প্লুরিপোটেন্ট স্টেম সেল (পিএসসি):

ভ্রূণের স্টেম সেল (ইএসসি) এবং প্ররোচিত প্লুরিপোটেন্ট স্টেম সেল (আইপিএসসি) উচ্চ প্লুরিপোটেন্সি, প্লাস্টিকতা এবং সীমাহীন প্রসারণযোগ্য ক্ষমতা রাখে। নির্দিষ্ট সংকেত কারণগুলির প্রভাবের অধীনে, তারা হেপাটোসাইটে পার্থক্য করে - ক্রিয়াকলাপ এবং ফাংশন সহ কোষগুলির মতো। যাইহোক, পিএসসি থেকে প্রাপ্ত লিভার অর্গানয়েডগুলি এপিগনেটিক এবং জেনেটিক পরিবর্তনগুলি করতে পারে, যা পরিবর্ধনের সময় ক্রোমোসোমাল অ্যানিউপ্লয়েডি পরিবর্তনগুলি প্রদর্শন করে।

অ্যাপ্লিকেশন:

1. 1)। জেনেটিক লিভার ডিজিজ মডেল
2. 2)। সংক্রামক লিভার ডিজিজ মডেল
3. 3)। ড্রাগ সাইটোঅক্সিসিটি পরীক্ষা

② লিভার টিস্যু - উত্পন্ন কোষ: এর মধ্যে চোলঙ্গিওসাইটস এবং হেপাটোসাইট অন্তর্ভুক্ত রয়েছে। পরিপক্ক হেপাটোসাইটগুলি নির্দিষ্ট পরিবেশে স্টেম সেল সম্ভাবনা এবং প্রসারিত ক্ষমতা ধরে রাখে। পিএসসি - উত্পন্ন অর্গানয়েডগুলির সাথে তুলনা করে, প্রাথমিক টিস্যু থেকে প্রাপ্ত অর্গানয়েডগুলি আরও স্থিতিশীল জিনোম সহ আরও পরিপক্ক হয় এবং দীর্ঘ সময় ফেনোটাইপিক এবং জিনগত স্থায়িত্ব বজায় রাখে - ভিট্রো সংস্কৃতিতে শব্দ। তবে, ভ্রূণের মানব হেপাটোসাইটস বা প্রাপ্তবয়স্ক মাউস প্রাথমিক হেপাটোসাইটের তুলনায় পরিপক্ক মানব হেপাটোসাইট অর্গানয়েডগুলির দীর্ঘ মেয়াদী প্রসারণযোগ্য ক্ষমতা সীমাবদ্ধ। প্রাপ্তবয়স্ক হেপাটোসাইট অর্গানয়েড সংস্কৃতি চ্যালেঞ্জিং রয়ে গেছে।

সংস্কৃতি পদ্ধতি (চিত্র 6): লিভারের টিস্যু একক কোষে হজম হয় এবং ম্যাট্রিজেল এবং কোষগুলির মিশ্রণটি 24 - ওয়েল প্লেটে গম্বুজ - আকারের কাঠামো গঠনের জন্য বীজযুক্ত হয়। 15 মিনিটের জন্য একটি সেল সংস্কৃতি ইনকিউবেটারে (37 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেড) ইনকিউবেট করুন। দৃ ification ়তার পরে, নির্দিষ্ট সংস্কৃতি মাধ্যম যুক্ত করুন। প্রায় 14 দিন পরে উত্তরণ। 7 - 10 দিনের পরে পার্থক্য মাধ্যমের সাথে মূল মাধ্যমটি প্রতিস্থাপন করুন।

অ্যাপ্লিকেশন:

1. 1)। হেপাটোটক্সিসিটি মডেল
2. 2)। ভিট্রো বিপাক ব্যাধি অধ্যয়ন
3. 3)। অ - অ্যালকোহলযুক্ত ফ্যাটি লিভার ডিজিজ
4. 4)। সৌম্য এবং ম্যালিগন্যান্ট লিভারের রোগের জন্য ড্রাগ বিকাশ

চিত্র 6। টিস্যু সংস্কৃতি এবং উত্তরণ প্রক্রিয়া - উত্পন্ন লিভার অর্গানয়েডস

উত্স: সেল এবং বায়োসায়েন্স (2023) 13: 197

স্পেরয়েড সংস্কৃতি এবং অর্গানয়েড সংস্কৃতির তুলনা

4। প্রাথমিক হেপাটোসাইট কো - সংস্কৃতি মডেল

1. 1. 2 ডি প্রাথমিক হেপাটোসাইট কো - সংস্কৃতি মডেল
      

      2 ডি প্রাথমিক হেপাটোসাইট কো - সংস্কৃতি মডেলটিতে, দুটি বা আরও বেশি কোষের ধরণগুলি দুটি - মাত্রিক পরিবেশে মিশ্রিত এবং সংস্কৃত হয়। এই মডেলের মূল বৈশিষ্ট্যটি হ'ল বিভিন্ন কোষের ধরণের মধ্যে সরাসরি মিথস্ক্রিয়া, কোষ এবং বহির্মুখী ম্যাট্রিক্সের মধ্যে মিথস্ক্রিয়া বা সাইটোকাইনস এবং রাসায়নিক যোগাযোগের মাধ্যমে অপ্রত্যক্ষ সংকেত সংক্রমণ। প্রাথমিক হেপাটোসাইট ফাংশন যেমন অ্যালবামিন উত্পাদন এবং ড্রাগ বিপাক ক্ষমতা, তিন সপ্তাহ পর্যন্ত বজায় রাখা যায়।

      অ্যাপ্লিকেশন:

      1. 1)। প্রাথমিক হেপাটোসাইটস সিও - ফাইব্রোব্লাস্টগুলির সাথে সংস্কৃত: এই মডেলটি ধীর - বিপাকীয় যৌগগুলি এবং তাদের বিপাকগুলির ছাড়পত্রের ছাড়ের অধ্যয়নের জন্য ব্যবহৃত হয়।
      2. 2)। প্রাথমিক হেপাটোসাইটস কো - অ পেরেনচাইমাল লিভার সেল (উদাঃ, স্টেললেট সেল, সাইনোসয়েডাল এন্ডোথেলিয়াল সেল) দিয়ে সংস্কৃত: এই মডেলটি ওষুধের গবেষণার জন্য দরকারী
      3. 3)। প্রাথমিক হেপাটোসাইটস কো - টি কোষের সাথে সংস্কৃত: এই মডেলটি লিভারের ড্রাগ বিপাক সনাক্ত করতে ব্যবহৃত হয় - নির্দিষ্ট টি কোষের প্রতিক্রিয়া।
      4. 4)। আইফেজের হেপাটোম্যাক্স ™সিও - সংস্কৃতি ব্যবস্থা: আইফেস বিভিন্ন প্রজাতির প্রাথমিক হেপাটোসাইট সহ একটি কো - সংস্কৃতি ব্যবস্থা তৈরি করেছে, যা হেপাটোম্যাক্স নামে পরিচিত™। সিও - স্ট্রোমাল কোষগুলির সাথে মানব প্রাথমিক হেপাটোসাইটগুলি সংস্কৃত করে, ভাল ড্রাগ বজায় রাখা সম্ভব - 3 সপ্তাহ পর্যন্ত মানব হেপাটোসাইটে এনজাইম ক্রিয়াকলাপ বিপাক। এই সিস্টেমটি ধীরে ধীরে অধ্যয়ন করার জন্য উপযুক্ত - যৌগিক ছাড়পত্রের হার এবং তাদের বিপাক বিপাক।

      এই কো - সংস্কৃতি মডেল ড্রাগ বিপাক, বিষাক্ততা এবং লিভার - সম্পর্কিত রোগ প্রক্রিয়াগুলি মূল্যায়নের জন্য আরও শারীরবৃত্তীয়ভাবে প্রাসঙ্গিক প্ল্যাটফর্ম সরবরাহ করে, বিভিন্ন কোষের ধরণের লিভারের কার্যকারিতা এবং রোগে কীভাবে অবদান রাখে সে সম্পর্কে অন্তর্দৃষ্টি দেয়।
      
      

      3 ডি প্রাথমিক হেপাটোসাইট কো - সংস্কৃতি মডেল

      সরাসরি 3 ডি কো - সংস্কৃতি: এই মডেলটিতে দুটি বা ততোধিক বিভিন্ন ধরণের লিভার সেল (যেমন, প্রাথমিক হেপাটোসাইটস, সাইনোসয়েডাল এন্ডোথেলিয়াল সেল, হেপাটিক স্টেললেট সেল, কুপফার সেল) মিশ্রিত করা জড়িত, স্ব -সমাবেশ স্পেরয়েডস বা সিও - তাদের যেমন কোলাজেন, ফাইব্রিন, আলজিনেট, অ্যালজিনেট, বা হাইড্রোগেলস, অ্যালজিনেট, বা হাইড্রোগেলস সহ 3 ডি পরিবেশে সংস্কৃত করে তাদের গঠনের জন্য। ডাইরেক্ট থ্রিডি কো - সংস্কৃতি সেল - থেকে - সেল আঠালো, দ্রবণীয় সাইটোকাইনের মাধ্যমে প্যারাক্রাইন সিগন্যালিং এবং এক্সট্রা সেলুলার ম্যাট্রিক্স আঠালো, হেপাটোসাইটের মধ্যে যোগাযোগ সক্ষম করে এমন প্রক্রিয়াগুলির মাধ্যমে বিভিন্ন লিভারের কোষগুলির মধ্যে ঘনিষ্ঠ মিথস্ক্রিয়াকে মঞ্জুরি দেয়।

      অ্যাপ্লিকেশন:

      1. 1)। লিভার ফাইব্রোসিস মডেল: লিভার ফাইব্রোসিসের প্রক্রিয়া এবং অগ্রগতি অধ্যয়ন করতে ব্যবহৃত।
      2. 2)। ড্রাগ - প্ররোচিত লিভারের ইনজুরি (ডিআইএলআই) মডেল: ওষুধের কারণে লিভারের ক্ষতির অনুকরণ এবং মূল্যায়ন করতে সহায়তা করে।
      3. 3)। ড্রাগের মিথস্ক্রিয়া, ড্রাগ বিপাক এবং এনজাইম ইনডাকশন: বিভিন্ন ওষুধ কীভাবে ইন্টারঅ্যাক্ট করে, কীভাবে সেগুলি বিপাক হয় এবং কীভাবে তারা লিভারের এনজাইমগুলিকে প্ররোচিত করে তা মূল্যায়ন করে।

      পরোক্ষ 3 ডি কো - সংস্কৃতি: এই পদ্ধতিটি একটি 3 ডি পরিবেশে দুটি বা ততোধিক কোষের (যেমন এনআইএইচ/3 টি 3 কোষ বা সাইনোসয়েডাল এন্ডোথেলিয়াল কোষ সহ প্রাথমিক হেপাটোসাইটস) সংস্কৃতিতে একটি শারীরিক বিচ্ছেদ সিস্টেম (উদাঃ, ট্রান্সওয়েল বা অন্যান্য উপকরণ) ব্যবহার করে, যেখানে সরাসরি সেল - থেকে - সেল যোগাযোগ প্রতিরোধ করা হয়। কোষগুলির মধ্যে যোগাযোগ দ্রবণীয় সাইটোকাইনগুলির মাধ্যমে ঘটে।

      অ্যাপ্লিকেশন:
      শরীরে লিভার সেলগুলির মধ্যে যোগাযোগ যোগাযোগের জন্য যোগাযোগের জন্য ব্যবহৃত।

      
      সংক্ষেপে, আইফেস, ইন ভিট্রো জৈবিক গবেষণায় নেতা হিসাবে, ক্লিনিকাল ড্রাগ পরীক্ষার জন্য বিস্তৃত সমাধান সরবরাহ করে। বিভিন্ন প্রজাতি থেকে প্রাথমিক হেপাটোসাইটের বিচ্ছিন্নতা এবং সংস্কৃতি থেকে নির্দিষ্ট অ্যাপ্লিকেশন বা মাল্টি - স্পেসিফিকেশন কোলাজেন - প্রলিপ্ত প্লেটগুলির মতো সংস্কৃতি মিডিয়াগুলির মতো সহায়ক পণ্যগুলির বিকাশ পর্যন্ত আইফেস ড্রাগ আবিষ্কার এবং বিকাশের জন্য সেরা ভিট্রো গবেষণা সরঞ্জাম সরবরাহ করার জন্য উত্সর্গীকৃত। আমরা ফার্মাসিউটিক্যাল শিল্পের ক্লায়েন্টদের জন্য বিশ্বস্ত অংশীদার, নন - ক্লিনিকাল গবেষণার জন্য প্রান্ত সমাধানগুলি সরবরাহ করতে প্রতিশ্রুতিবদ্ধ।