Napredak u bioanalizi: Uloga LC - MS / MS u oftalmičkim razvojem droga i vodene i staklene humorske studije

Iphase proizvodi

Tečna kromatografija - Tandem masovna spektrometrija (LC - MS / MS)

Tečna kromatografija - Tandem masovna spektrometrija (LC - MS / MS) je moćna analitička tehnika koja kombinira mogućnosti odvajanja tečne kromatografije sa mogućnostima masovne analize u tandem masovnoj spektrometriji. U LC-u - MS / MS, uzorak se prvo odvaja tečnom kromatografijom, gdje komponente različito komuniciraju s stacionarnom fazom i mobilnom fazom, što dovodi do njihovog odvajanja dok prolaze kroz stupac. Odvojene komponente potom su ionizirane i analiziraju tandem masovne spektrometrije, koji u fragmentima ioni u ioni proizvoda za detaljnu strukturnu analizu.

Primjene LC - MS / MS u bioanalizi

Bioanalysuključuje mjerenje koncentracija lijekova, metabolite i drugih bioloških spojeva unutar bioloških uzoraka, poput krvi, plazme, urina i drugihBiofluids. LC - MS / MS posebno je dobro - pogodan za ove aplikacije zbog velike osjetljivosti i sposobnosti otkrivanja niskih koncentracija ciljnih analita u složenim biološkim matricama.

LC - MS / MS tehnologija za analizu bioloških uzoraka otkriva i egzogene i endogene tvari. Istraživači simulirali su stvarne uzorke dodavanjem tvari da se mjeri na aprazna matricaza formulisanje kvantitativnog standardnog uzorka krivulje i uzorak kontrole kvalitete. Koncentracija tvari koja se mjeri u biološkom uzorku kvantificira se standardnom krivuljom.

Endogene supstance su tvari koje se prirodno nastaju u tijelu. Endogena supstanca - Srodni lijekovi postali su važan smjer za novi razvoj lijekova posljednjih godina. Uz rođenje velikog broja lijekova s ​​endogenim tvarima, bioanaliza lijekova s ​​endogenim tvarima postala je sve važnija. Međutim, u sadašnjosti metoda analize biološke uzorke od strane FDA i drugih organizacija za preispitivanje domaćih i stranih lijekova uglavnom se fokusiraju na egzogene tvari, uključujući preciznost, tačnost, matricu, stopu oporavka i stabilnost. Budući da otkrivanje endogenih tvari dovodi do problema u rezultatima otkrivanja zbog vlastitog učinka prilikom dobijanja prazne matrice za simulaciju stvarnog uzorka, pojavu alternativeprazna biološka matrica (Umjetna prazna biološka matrica) Raspravlja ovaj problem.

Tabela 1: Opis selektivnosti u glavnoj osnovnoj bionaalitičkoj metodološkoj glavnoj valjanosti

Analitička metoda Razvoj i analitička metoda Provjera

U bioanalizi, osiguravajući pouzdanost i obnovljivost analitičkih rezultata najvažniji. Ovo zahtijeva rigorozni razvoj iValidacija analitičkeMetode.

Razvoj analitičkog metodauključuje stvaranje optimiziranih procedura za otkrivanje i kvantifikaciju analize interesa. To uključuje odabir odgovarajućih kromatografskih uvjeta (npr., Stacionarnu fazu, mobilnu fazu, protoku, protok) i MS parametri (npr., Jonizacijska tehnika, energija sudara) za postizanje optimalne osjetljivosti, rezolucije i selektivnosti. Uz to, metoda mora biti sposobna precizno kvantificirati anatine u prisustvu složenih i promjenjivih bioloških matrica, koji se često čine proteinima, lipidima i drugim spojevima koji mogu ometati analizu.

Jednom kada se metoda razvije, mora se proćiProvjera analitičke metodekako bi se osiguralo da ispunjava unaprijed definirane kriterije uspješnosti. Ovaj postupak validacije potreban je za potvrdu da je metoda pogodna za svoju namjenu i udovoljava regulatornim zahtjevima. Za bioanalitičke metode, validacija obično uključuje nekoliko ključnih parametara:

• - Točnost i preciznost:Osiguravanje metode pruža ispravne i dosljedne rezultate.
• - Osetljivost:Sposobnost otkrivanja niskih koncentracija analita.
• - Selektivnost:Sposobnost metode da razlikuju analit iz drugih spojeva u matrici.
• - Oporavak:Učinkovitost s kojom se analita izvlači iz biološkog uzorka.
• - Stabilnost:Stabilnost analita pod različitim uvjetima skladištenja i rukovanja.
• - Linearnost:Sposobnost metode da proizvede rezultate koji su izravno proporcionalni koncentraciji analita u određenom rasponu.

Prazna biološka matrica i prazna matrica igraju kritične uloge u ovom procesu validacije. Ovi kontrolni uzorci, koji ne sadrže analit od interesa su od suštinskog značaja za identifikaciju potencijalnih efekata ili smetnji matrica tokom analize. Oni pomažu u uspostavljanju nivoa osnovnih linija za anatine i osigurati da sam matrica ne doprinese kontaminaciji ili suzbijanju signala. Slično tome, upotrebaLijek - Besplatne matriceje presudno za potvrdu da u uzorku nisu prisutni preostali lijekovi ili metaboliti koji bi mogli iskriviti rezultate.

Bioanaliza oftalmičkih lijekova

Zid očne jabučice podijeljen je u tri sloja, vanjski sloj je vlaknasna membrana; Srednja membrana je pigmentna membrana, vaskularna membrana ili uvea; A unutrašnja membrana je mreža mrežnice. Očna jabučica podijeljena je u dva dijela, prednje i stražnje regije oka, ograničene stražnjim dijelom sočiva.

Slika 1. Anatomija ljudskog oka.

Glavne strukture uključene u metabolizam droga uključuju:

• Rožnica- Primarno mjesto za aktuelnu apsorpciju lijekova, koja sadrži esteraze i citohrom P450 (CYP) enzimi koji metabolizira prodrozi.
• Konjunktiva- Bogat u drogu - metaboliziranje enzima (npr. Esterases i CYPS), doprinoseći prvom - prolazu metabolizma prije sistemske apsorpcije.
• Vodeni humor- Ograničena metabolička aktivnost, ali igra ulogu u distribuciji i odobrenju droga.
• Staklast- Intravitrelno ubrizgavanje može se djelovati direktno na mrežnicu i smanjiti toksičnost u somatskoj cirkulaciji. Lijekovi male molekule difuzira brzo, a veliki molekuli lijekovi imaju duži dio života. Staklasti promjene s godinama utječu na farmakokinetiku.
• Sklera- Sklera je propušinija za velike droge molekule i prolazu lijeka kroz sklere uglavnom utječe molekularne veličine. Ubrizgavanje subkonjanktiva omogućavaju lijekovima da uđu u choroid, ali proces je komplikovan. Skleralni melanin povezuje lijek i utječe na njegovo izdanje i trajanje akcije.
• Posteriorni region za oči- Retrookularna tkiva bogata su u protoku krvi i lijekovi se mogu eliminirati putem cirkulacije tijela ili limfe. Choroidna vaskularna hiperpermalnost omogućava lijekovima da lako uđu u vanjski prostor, ali teško je preći epitelijum pigmenta mrežnice, koji utječe na efikasnost i dovodi do gubitka. Melanin - Vezni lijekovi mogu produžiti trajanje akcije.

Vodeni humor i staklasti humor

TheVodeni humoristaklastim humoromsu bitne očne tečnosti koje igraju kritične uloge u održavanju intraokularnog pritiska, pružajući hranjive sastojke i olakšavanje optičke jasnoće. Vodeni humor je tanka, jasna, vodenasta tekućina koja ispunjava i prednju istereće komore oka, sadrže jone, proteine, ugljikohidrate i kiseonik. Većina vodenog humora proizvedenog od cilijarnog tijela, izlazi u oko u ugao koji je formiran spojnom irisom i rožkom. Ove tekućine variraju po vrstama, uključujući ljude, majmune, zečeve i druge ne - ljudske primatima. Obično su sakupljali veliku veličinu loto od pojedinih životinja ili bazena.

Vodeni humor preko vrsta

Ljudski vodeni humor

TheLjudski vodeni humorje jasan, hranjiv - bogati tekućina koja održava intraokularni pritisak i podržava metaboličke funkcije rožnice i sočiva. Proizvodi ga cilijarno tijelo i teče kroz prednju komoru prije odvođenja preko trabekularne mreže.

Monkey vodeni humor

TheMonkey vodeni humorusko podseća na ljude u sastavu i dinamici. S obzirom na anatomske sličnosti između primata i ljudi,ne - ljudski primat vodeni humorsluži kao suštinska referenca za oftalmološke studije.

Zec vodeni humor

Thezec vodeni humorznačajno se razlikuje od one primatima, posebno u koncentraciji proteina i stope prometa. Kunići se obično koriste u okularnim istraživanjima, iako se moraju uzeti u obzir vrste - specifične varijacije.

Staklasti humor preko vrsta

Ljudski staklasti humor

TheLjudski staklasti humorJe li gel - poput supstance sastavljene prvenstveno vode, kolagena i hijaluronske kiseline. Održava očni oblik, apsorbira šokove i služi kao kanal za prevoz hranjivih sastojaka.

Monkey startni humor

TheMonkey startni humorDijeli sličan sastav ljudskom staklastim humoru, izrađujućiNe - ljudski primaljni staklasti humorNeprocjenjivi model za proučavanje starosti - Srodne staklene degeneracije i povezane patologije.

Zec staklastim humorom

Thezec staklastim humoromje strukturno drugačije, što je više tečnost - i ima niže gustoću kolagena. Te razlike utječu na njegov odgovor na hirurške intervencije i farmakološke tretmane.

Razvoj umjetnih i simuliranih okularnih tečnosti

Umjetna vodena i umjetna vodena staklastog stakla

Umjetna vodena humoraiUmjetni staklastim humoromsu dizajnirani supstituti dizajnirani za upotrebu u oftalmičkim operacijama, dostavu lijekova i istraživačkim primjenama. Te sintetičke tečnosti oponašaju biohemijska i fizička svojstva svojih prirodnih kolega.

Simulirani vodeni i simulirani staklastim humorom

Simulirani vodeni humoriSimulirani stakleni humorDa li su laboratorija pripremljena rješenja koja se koriste za in vitro eksperimentiranje i modeliranje okularnog fiziologije. Olakšavaju kontrolirane studije bez etičkih ograničenja povezanih sa životinjskim ili ljudskim uzorcima.

Zaključak

Upotreba tečne kromatografije - Tandem masovna spektrometrija (LC - MS / MS) u bioanalizi predstavlja ključni napredak u analitičkim tehnikama za otkrivanje i kvantifikaciju bioloških spojeva, uključujući drogu i metabolite u biološkim matricama. Visoka osjetljivost, preciznost i selektivnost metode čine ga neprocjenjivim u egzogenoj i endogenoj analizi supstanci, posebno u oftalmičkom razvoju lijeka. Detaljno razumijevanje očne anatomije i uloge tekućine poput vodenog i staklenog humora ističe važnost ovih komponenti tijela u sistemima za dostavu droga. Štaviše, razvoj umjetnih i simuliranih okularnih tečnosti koja predstavljaju mogućnosti istraživanja, a da su ispunjena etička razmatranja. Kako se provjera analitičke metode i dalje razvija, ona osigurava pouzdanost i reproduciju potrebnu za efikasne kliničke primjene, posebno u oftalmologiji.

Ključne riječi: LC - MS / MS, prazna matrica, lijek - BESPLATNA MATRIX, Analitička analitička analitička humora, mađarski humor, ne - ljudski pristanište vodeni glasovni humor, mađarski staklasti humor, zec Staklasti humor, ne - ljudski primaljni staklasti humor,Simulirani vodeni humor, simulirani staklasti humor, umjetni vodeni humor, umjetni staklasti humor.

Referenca

Seyedpour, S. M., Lambers, L., Rezazadeh, G., & Ricken, T. (2023). Matematičko modeliranje dinamičnog odgovora implantalnog pojačanog kapacitivnog senzora pritiska glaukoma.Mjerenje: senzori, 30, 100936. Https://doi.org/10.1016/J.Measen.2023.100936