Nahiuyon nga Rat Liver S9 Fraction: usa ka sistema sa pagpaayo sa metaboliko alang sa vitro genotoxicity ug mga pagsulay sa mutuki

Keywords: OECD 471, OECD 473, OECD 476, OECD 487, Mutation Test, Genotoxicity, Genetic Toxicity, Induced Rat Liver S9, Ames Test, Mini Ames Test, Chromosomal Aberration, Micronucleus, HPRT/HGPRT Assay, TK Assay

IPHase Product

Pasiuna

Nahiuyon nga Rat Liver S9usa ka hinungdanon nga sangkap sa pagtimbang-timbang saAng Hoxicity sa GeneticPotensyal sa mga kemikal, labi na sa regulasyon toxicology. Kasagaran kini gigamit sa kombinasyon sa mga vitro assays, sama saMga pagsulay sa AMES ugMga Pagsulay sa Mutasyon, aron pagtimbang-timbang sa mga mutagenic nga kabtangan sa mga compound. Pinaagi sa paghatag sa sistema sa enzymatic nga dato sa Cytochrome P450 (CYP450), ang naaghat nga mga proseso sa Rat Lift nga nag-simect sa mga metograpikong mga meticic nga mga mutasyon o kanser.

Nahiuyon nga Rat Liver S9

Ang Fraction sa atay S9 nagtumong sa usa ka post - Mitochondrial supernatant nga nakuha gikan sa mga homogenates sa Rat Live pagkahuman sa usa ka serye sa mga lakang sa sentripolasyon. Ang termino nga "naaghat" nagtumong sa pagtambal sa mga ilaga nga adunay piho nga mga compound nga nagpalambo sa kalihokan sa mga enzyme sa atay, nga adunay tulubagon sa metabolismo sa usa ka halapad nga xenobiotic.

Ang nahilambigit nga bahin sa Rat Liver S9 nga bahin adunay lainlaing mga enzyme nga nahilambigit sa yugto I ug Phase II metabolismo sa mga kemikal. Naglakip kini sa mga enzyme sama sa Cytochrome P455 Monooxygenases, nga nagpadali sa Oxidative BIRIRNATIFICATIONS sa mga substrate, sa ingon nagsundog sa metabolismo sa Human Lifer.

Kalihokan sa CYP450 ug Metabolic Aktibo

Ang Cytochrome P450 nga pamilya nga P450 nga enzyme (CYP450) nagdula usa ka hinungdanon nga papel sa metabolismo sa usa ka lainlaing mga parmasya, mga kemikal sa kalikopan, ug mga carcinogens. Ang naaghat nga bahin sa Rat Lift S9 nga bahin sa kini nga mga enzyme ug hinungdanon alang sa pagtimbang-timbang sa mga kemikal nga mahimo ra nga pag-aktibo sa metaboliko.

Daghang mga compound ang una nga dili - makahilo apan mahimong makahilo pagkahuman sa metabolismo sa atay. Kini nga PRO - MUTAGENSE (nga nanginahanglan og aktibo nga metaboliko nga mahimong mutagenic) ug Pro - Ang mga carcinogens (nga kinahanglan ang pagpaaktibo sa mga asno nga adunay usa ka S9 metabolic activation system. Kung wala ang induksiyon sa metabolic enzymes sama sa CYP450, kini nga mga substansiya mahimo'g dili makadaot sa standard nga mga pagsulay sa genotoxicity.

Pinaagi sa pagdugang nga naaghat nga Rat Liver S9 hangtod sa Vitro Asays, ang mga tigdukiduki mahimong masusi kung giunsa ang usa ka substansiya nga nakig-uban sa mga cyp450 nga enzyme. Ilabi na kini hinungdanon alang sa mga parmasyutiko, ingon nga metabolismo pinaagi sa CYP450 nga mga enzyme usa ka kritikal nga lakang sa daghang mga droga.

Mga Aplikasyon sa Inturce Rat Liver S9

1. 1. Mga AMES Sulayi (OECD 471)

Ang pagsulay sa AMES, gilatid sa giyaOECD 471, usa sa labing maayo nga - nailhan ug kaylap nga gigamit nga mga pamaagi alang sa pagtimbang-timbang sa mutagenicity. Naglangkit kini sa pag-expose sa mga bakterya sa salmonella sa usa ka kemikal nga pagsulay aron mahibal-an kung nag-aghat ba kini sa mga mutasyon nga hinungdan sa mga bakterya nga magbalik sa usa ka kasaysayan nga independente.

Aron mahimaya ang proseso sa metaboliko nga metaboliko, ang naaghat nga Rat Liver S9 kanunay nga gidugang sa sistema sa pagsulay. Ang S9 Fraction naghatag sa mga kinahanglanon nga enzyme, lakip ang CYP450, nga mahimong kinahanglan nga ma-metabolize ang compound sa usa ka labi ka reaktibo nga porma nga mahimong hinungdan sa mga mutasyon sa bakterya nga DNA. Kini nga kombinasyon sa S9 nga adunay test test nagtugot alang sa usa ka labi ka komprehensibo nga pagtuki sa mutagenic potensyal pinaagi sa pagsundog sa direkta nga mga mekanismo sa Mutagenic.

2. 2.Mga Pagsulay sa Mutasyon (Chromosomal Aberration Test, Micronulacleus Test, ug uban pa sa Vitro Asays)

Gawas sa pagsulay sa AMES, ang mga pagsulay sa mutation sagad gigamit aron matimbang ang potensyal sa genotoxic. Kini nga mga pagsulay mas komprehensibo sa pagtimbang-timbang sa usa ka lainlaing kadaot sa genetic, lakip ang mga pag-mutasyon sa chromosomal, gene mutations, ug pagporma sa micronulclei. Ang nag-aghat nga Rat Liver S9 gigamit sa mga pagsulay sa mutasyon alang sa mga mosunod nga mga hinungdan:

Pagsulay sa Micronulcleus (OECD 487)

Nahibal-an sa kini nga pagsulay ang pagporma sa micronulclei sa mga selyula, nga gagmay, expranuclear nga mga lawas nga adunay mga tipik sa mga chromosome o tibuuk nga mga chromosome nga wala maapil sa nucyus sa panahon sa cell division. Ang Pagsulay sa MicronulcleusMakita ang Clashogenic (Chromosome - Pagbungkag) ug aneugenic (makaapekto sa mga epekto sa chromosome). Ang nag-aghat nga Rat Liver S9 gigamit dinhi aron ma-aktibo ang Sulayi nga Sulud sa metaboliko, tungod kay ang pipila ka mga kemikal hinungdan sa kadaot sa chromosomal sa higayon nga sila gisunud sa mga enzyme sa atay. Ang S9 Fraction nagpalambo sa pagkasensitibo sa pagsulay pinaagi sa pag-simulate sa metabolic activation nga mahimong mahitabo sa Vivo.

Chromosomal Aberration Test (OECD 473)

Ang kini nga pagsulay nga nag-evaluate kung ang usa ka substansiya mahimong hinungdan sa kadaot sa istruktura sa mga chromosome pinaagi sa pag-undang sa mga break, pagtangtang, mga tipik, o uban pang mga matang sa aberrasyon. Sama sa pagsulay sa micronulacleus, angPagsulay sa Chromosomalmahimong magamit sa o wala'y paglihok sa metaboliko. Ang nag-aghat nga Rat Liver S9 gidugang sa sistema sa pagsulay aron masundog ang mga proseso sa metaboliko sa atay, nga gitugotan ang pagsuta sa mga sangkap nga dili mahimo sa sunod nga porma.

Talaan 1. Pag-amping Mga konsiderasyon sa mga pagsulay sa mutasyon

HPRT / HGPRT Assay (OECD 476)

SaHPRT / HGPRT Assay, Mga Kultura sa Hammaster sa China (Cho o V79) o Human Lymphoblastoid (Tk6) nga mga cemical sa presenturya nga mga pro-mutagens sa mga species sa DNA-React. Pagkahuman sa usa ka mubo nga pagtambal ug usa ka pito ka adlaw nga pagpahayag nga panahon, ang mga selyula gihagit sa 6-thioguanine; Ang mga clones nga nagdala sa pagkawala sa pagkawala sa pagkawala sa mga mutasyon sa hypoxanthina-guanphoribosyloslase nga mabuhi. Pinaagi sa pagtandi sa us aka us aka kolonya nga ihap sa kinatibuk-an, ang mga tigdukiduki nagtino sa usa ka frequency sa mutum nga, kung ang mga confurent nga managsama ug ang mga kontrol sa kasaysayan, nagpaila sa potensyal sa genotoxic.

Tk assays (OECD 490 & OECD 476)

AngTk assay gigamit ang mga l5178y mouse lymphoma cells (OECD 490) o cho cells (OECD 476) Engineered Hetrozygous sa thetMidine kinase lolus. Pagkahuman sa pagkaladlad sa kemikal Ang nakalahutay sa mga MUTANTS nagporma mga kolonya sa 10-14 nga adlaw, nga adunay gagmay nga mga colony mutants kanunay nga nagpakita sa mga panghitabo sa chromosomal nga nagpabanaag sa mga mutasyon sa POIN. Sama sa HPRT / HGPRT Assay, ang mga higpit nga cytotoxicity Controls ug Positibo nga Mutagen Benchmarks nga nagsiguro nga ang naobserbahan nga pagtaas sa peligro sa pagtaas sa mutation.

4. 4. Ang pagsusi sa peligro sa kanser

Ang nag-aghat nga Rat Liver S9 gigamit usab sa mga pagtuon nga gitumong sa pagtimbang-timbang sa kanser - hinungdan sa potensyal nga mga sangkap. Pinaagi sa pag-simulate sa mga proseso sa metaboliko nga nahitabo sa atay sa tawo, ang S9 nga bahin makatabang sa pag-ila sa mga compound nga mahimong mosangput sa mga reaksiyon sa DNA ug hinungdan sa mga mutasyon nga mahimong mosangput sa kanser.

Gipauswag ang pagsulay sa AMEES nga adunay nag-aghat nga Hamster Waser S9

Sumala sa labing bag-o nga mga panudlo nga gi-isyu sa Ahensya sa European Medicine (Ema), ang tradisyonal nga pagsulay sa AMES mahimong dili maayo nga makit-an ang mutagenic nga potensyal sa NUDAGENIC SHOUNDS sa Mutagenic Potensyal sa Potensyal sa NUDAGENIC SA NUDAGENIC POLIKO (NDMACIMETHYLAMINS (NDMA), ug uban pa. Busa, ang mga gipaayo nga AMES test, nga naugmad sa National Center alang sa Toxicological Research (NCtr), usa ka pagbahinbahin sa IR.S. COUND AND COUND Administration (FDE), girekomenda nga usa ka masaligan nga kapilian. Ang gipalambo nga pagsulay sa AMES nga gipaila nga nagdugang sa nag-aghat nga Hamster Laster S9, nga adunay 30% Rat Lift S9 ug 30% Hamster S9. Ang mga Rat ug Hamster Desmosomal Supernatants (S9S) kinahanglan nga andam gikan sa mga rodent livers nga gitambalan sa Cytochrome P450 nga enzyme - pag-undang sa mga sangkap. Pinaagi sa paggamit sa nag-aghat nga Hamster atay S9, kini nga gipalambo nga pagsulay nga mas maayo nga nagsunud sa metabolismo sa tawo ug nagdugang ang kasaligan sa mga resulta.

Kataposan

Ang nag-aghat nga Rat Liver S9 nagsilbing usa ka kritikal nga himan sa pagsulay sa Genotoxicity, gitabangan ang mga tigdukiduki ug mga ahensya sa regulasyon nga gitan-aw ang mutagenic ug carcinogenic potensyal sa mga kemikal. Pinaagi sa paghatag usa ka sistema sa pagpaaktibo sa metaboliko, gipalambo ang abilidad sa mga assays sama sa mga pagsulay sa AMEES, ug mga study sa kalihokan sa MUTUMED nga kinahanglan ang mga sangkap nga metaboliko nga mahimong genotoxic. Ang mga aplikasyon niini hinungdanon alang sa pagsiguro sa kaluwasan sa mga bag-ong droga, kemikal, ug mga produkto sa konsyumer. Uban sa papel niini nga nag-simulate sa metabolismo sa atay sa Tawo, ang naaghat nga Rat Liver Lift S9 Fraction nagpadayon nga usa ka hinungdanon nga bahin sa modernong mga pagtasa sa toxicology ug regulatory safety.