Inovativní terapie CGT - Lentivirus - Balení auto imunitních buněk

Inovativní terapie CGT - Lentivirus - Balení auto imunitních buněk

Imunitní buněčná terapie je inovativní léčba rakoviny, která zvyšuje imunitní systém těla k cílení a eliminaci rakovinných buněk. Mezi klíčové formy patří cytokin - indukovaná terapie vrahy, buněčná terapie a terapie CAR - T buněk. Terapie CAR - T zahrnuje přeprogramování T buněk na exprimující chimérické antigenové receptory (CAR), které se konkrétně zaměřují na nádorové buňky a vykazují významný úspěch u hematologických rakovin, jako je leukémie a lymfom.

Klíčová slova: auto - t, lentivirová, lentivirový vektor, stopovací lentivirus

Příprava vozidla - terapie T buněk

Obecně jsou klíčové kroky k přípravě CAR - T buňky následující:

Obrázek Zdroj: Dana - Farber Cancer Institute - Car t - Cell Clinical Stiswers pomáhají pacientům s více myelomu vracet se ke zdraví

1. 1.Sorting (t - Izolace buněk)

Prvním krokem při přípravě CAR - T buňky je izolovat T - buňky z bílých krvinek v periferní krvi pacienta. Techniky, jako je imunomagnetická separace kuliček nebo průtoková cytometrie, se obvykle používají k extrahování CD3+- bohatých T - buněk z krve. Pro zajištění čistoty buněk musí být proces třídění velmi přesný, což zajišťuje, že se získá dostatečný počet vysokých kvalitních buněk T -.

2. 2.Stimulace (T - Aktivace buněk)

Extrahované buňky T - jsou aktivovány in vitro, obvykle pomocí aKit CD3 /CD28 T - Buňky Aktivace /rozšiřování. Aktivované T buňky vstupují do aktivního stavu a připravují je na transfekci genu. Prostřednictvím tohoto procesu je funkce T buněk zvýšena, což přispívá k následné genetické modifikaci a amplifikaci.

3. 3. Transfekce (editace genů)

Aktivované T buňky podléhají genové transfekci k exprimu chimérického antigenového receptoru (CAR). Tento proces obvykle používálentivirový vektorzavést geny automobilů do T buněk. Lentivirus je efektivní nástroj pro transdukci genu, s výhodou stabilně integrace cílového genu (jako je gen Car) do buněčného genomu. Infikováním T buněk a transfekcí genu CAR do DNA T buněk umožňuje lentivirus T buňky k exprimujícím automobilům dlouhým termínem. Gen Car zahrnuje jednorázový fragment variabilního fragmentu (SCFV) protilátky, která umožňuje T buňkám rozpoznávat specifické antigeny na povrchu nádorových buněk a zahájit imunitní odpověď aktivací signálních oblastí T buněk. Jak je znázorněno na obrázku 2. Lentivirová transfekce má vlastnosti vysoké účinnosti a stability, takže gen CAR může být exprimován v T buňkách po dlouhou dobu.

Zdroj obrázku: Singapurské auto - terapie buněk

4. 4. Amplifikace (proliferace buněk)

Po transfekci vstupují do fáze amplifikace CAR -Il - 2jsou přidány k podpoře proliferace buněk. Účelem tohoto procesu je zajistit, aby byl pro pacienta k dispozici dostatečný počet CAR - T buněk. Proces amplifikace musí být prováděn za sterilních podmínek, aby se zaručila kvalita a množství buněk.

5. 5. Quality Control (QC)
6. Před obnovením pacienta je kontrola kvality během procesu přípravy zásadní. Připravené auto - T buňky podléhají přísnému testovánízajistit jejich čistotu, aktivitu, účinnost transfekce a dodržování standardů léčby. Pro zajištění bezpečnosti a terapeutické účinnosti buněk po reinfúzi do pacienta je navíc nezbytné testování kontaminace buněk nebo nežádoucí účinky.

IMportance transfekce lentiviru v imunitních buňkách

Technologie lentivirové transfekce je zásadní v terapii imunitních buněk, zejména pro editaci genů a buněčné inženýrství. Lentivirové vektory, odvozené z modifikovaných HIV - 1, se široce používají kvůli jejich schopnosti integrovat geny do hostitelského genomu a zajišťují stabilní, dlouhou termínovou expresi. Mohou infikovat dělicí i ne - dělící buňky a jejich bezpečnost byla zlepšena úpravou klíčových genů, aby se zabránilo replikaci. Tyto vektory se nyní běžně používají v genové terapii, editaci genů a výzkumu biologie buněk pro jejich účinnost a trvanlivost při dodávání genů.

Zdroj obrázku: obiosh.com/product/ Schematický diagram lentivirového balení a procesu transfekce lentiviru v 293T buňkách

1. Transdukce genu efektivní

Lentivirový vektor může účinně dodávat cílové geny, jako je gen Car, do imunitních buněk a tyto geny stabilně integrovat do buněčného genomu, což zajišťuje, že gen CAR je nepřetržitě exprimován během dělení a proliferace buněk. Tato schopnost transdukce účinnosti s vysokou účinností je zásadní pro úspěch imunoterapie.

2. Imunogenita navázaná 

Ve srovnání s jinými virovými vektory mají lentiviry nižší imunogenitu. Výsledkem je, že když se lentiviry používají k přechodu imunitních buněk, imunitní systém pacienta generuje relativně slabší imunitní odpověď na virus. To pomáhá minimalizovat nežádoucí účinky, zejména v dlouhodobém přežití buněk po infuzi, čímž se zabrání nadměrnému imunitnímu odmítnutí.

3. Vysoká přizpůsobivost imunitním buňkám

Lentivirový vektor je schopen efektivně převádět různé typy imunitních buněk,zejména T buňky a NK buňky. Prostřednictvím lentivirové transdukce mohou imunitní buňky získat nádor - specifické rozpoznávací schopnosti, čímž se zvyšují jejich schopnost cílit a zabíjet nádorové buňky.

4. Přesnost transdukovaných efektorových buněk v rozpoznávání cílových buněk 

V imunoterapii,transdukované efektorové buňkyViz imunitní buňky, které po transdukci exprimují CAR a vyvíjejí anti - nádorovou aktivitu. Lentivirové vektory mohou přesně dodávat gen Car do těchto efektorových buněk, což jim umožní rozpoznat a cílit na nádorové buňky.Cílové buňkyjsou nádorové buňky, které jsou tyto imunitní buňky identifikovány a zničeny. Prostřednictvím lentivirové transdukce mohou imunitní buňky zvýšit jejich specificitu v rozpoznávání a zabíjení nádorových buněk, čímž se zlepšují terapeutickou účinnost.

V této souvislosti vyvinula iPhase, vůdce in vitro výzkumných činidel, k dispozici lentivirusové balení a činidlo koncentrace lentiviru, aby zjednodušila složitost transdukce pro zákazníky imunoterapie a zlepšila úspěšnost stabilní genové transfekce. Tyto produkty nabízejí řešení pro zákazníky jedno řešení.

Iphase lentivirusProducts

Sada Iphase Lentivirus Packaging Kitobsahuje všechna základní činidla požadovaná proLentivirus balení, výrazně zjednodušení experimentálního procesu a úspory času a úsilí. Tato sada zahrnuje:

• Mix plazmidu lentivirus
• Transfect Reagent
• Plasmid EGFP
• Reaktivní činidlo koncentrace lentiviru na ifázi

Tato sada skutečně zefektivňuje experiment! Bez potřeby komplikované přípravy činidla lze balení lentiviru efektivně dokončit jednoduše podle zahrnutých pokynů.Mezi jedinečné výhody soupravy patří krátký čas balení, vysoký virový titr a snadný provoz, díky čemuž je ideální pro začátečníky v lentiviru. Každá sada činidel podléhá přísné kontrole kvality, aby byla zajištěna přesné, spolehlivé a reprodukovatelné výsledky, což výrazně zlepšilo účinnost transfekce a stabilitu virových vektorů, čímž poskytuje silnou technickou podporu pro přípravu imunitních buněk.

Navíc, aby iPhase pomohl zákazníkům ušetřit náklady, také vyvinul a vytvořil činidlo koncentrace lentiviru a nabízí rychlé a jednoduché koncentrační řešení.Jednoduše smícháním supernatantu lentiviru s koncentračním činidlem, následným krátkou inkubací a centrifugací pomocí standardní odstředivky, lze rychle koncentrovat lentivirové částice. Tento proces nevyžaduje Ultracentrifuge, což z něj činí pohodlnou a nákladovou efektivní možnost pro většinu laboratorních uživatelů.

Stručně řečeno, činidlo koncentrace lentiviru iPhase nejen významně zlepšuje účinnost transfekcí, ale také poskytuje vysokou kvalitu virového vektorového podpory pro přípravu imunitních buněk. Je to nezbytný produkt pro rutinní experimenty, předklinický výzkum a další oblasti aplikací.

Stručně řečeno, imunoterapie, zejména terapie buněk CAR - T buněk a CAR - NK buněk, představuje nový směr v moderní léčbě rakoviny. Prostřednictvím přesných procesů, jako je třídění buněk, aktivace, transdukce, expanze a kontrola kvality, mohou vědci připravit efektivní a bezpečné imunitní produkty pro pacienty, což umožňuje cílenou léčbu rakoviny.Lentivirová transdukce, jako základní technologie, hraje rozhodující roli při přípravě buněk CAR - T a CAR - NK kvůli jeho vysoké účinnosti a stabilitě.Při nepřetržitém technologickém pokroku má imunoterapie potenciál nabídnout inovativní možnosti léčby pro více pacientů, což poskytuje větší klinickou hodnotu. V budoucnu se očekává, že imunoterapie přinese revoluční terapeutické naději více pacientům s rakovinou.

Pro splnění potřeb genové transdukce, exprese a výzkumu nemocí nabízí iPhase sady balení lentiviru, činidla koncentrace koncentrace lentiviru a sledovací lentiviry. Tyto stopové lentiviry jsou zabaleny se zeleným fluorescenčním proteinem (GFP), červeným fluorescenčním proteinem MCHERRY a luciferázou, což umožňuje snadné sledování cílových buněk in vitro i in vivo.

Kromě toho může iPhase také nabídnout dva předem zabalené lentiviry Tracer: GFP & Luciferase a MCherry & Luciferase. Tyto stopy mohou být vybrány nebo kombinovány na základě experimentálních potřeb, zefektivňování pracovních postupů a zvyšování účinnosti pro skutečné sledování času a sledování cílových buněk.

IphaseIMmunoterapieRnadšenýProducts

Kromě Lentivirus - souvisejících produktů používaných v automobilu nebo automobilu - nk terapii, iPhase, jako vůdce in vitro výzkumných činidel, také významně přispěl k podpoře inovací v CGT (buněčná a genová terapie) a další polí. Iphase vyvinula a produkovala leukocyty a PBMC (mononukleární buňky periferní krve) izolované leukaferézou spolu s různými soupravami imunitních buněk imunitní buňky, na podporu rychlého vývoje imunoterapie.

Iphase produkty nabízejí následující výhody aOsvědčení o analýze (COA)Ověřeno iPhase je k dispozici pro každou dávku.

Bezpečnost 

Produkty iPhase jsou pocházející od zdravých dárců/zvířat, kteří podstoupili důkladné předběžné screening, s negativními výsledky pro virové testování (HIV - 1/2, HBV, HCV, Syfilis).

Dodržování  

IPhase poskytuje informované formuláře souhlasu podepsané dárci s jasným a sledovatelným ověřením zdroje.

Profesionalita

Produkty poskytované společností iPhase, získané prostřednictvím leukapheresis, jsou řešeny vyškolenými profesionály. Každá šarže je doprovázena odpovídající COA a produkty jsou přepravovány pod přísným chladným řetězcem, aby se zajistila bezpečnost, rychlé dodávání a zajištění kvality.

Služby zákazníkům

Iphase nabízí vysokou kvalitu po - prodejní službě, což zajišťuje hladký a nepřetržitý zážitek během procesu zkušebního procesu.