Lidská a zvířecí žluč prázdné biologické matice pro vývoj bioanalytické metody a ověření bioanalytické metody

1 produkty iphase

2 prázdná biomatrix

Různé typyBiologické matice, včetně prázdné plné krve, séra, plazmy, žluč, mléko, moč, výkaly, obsah střeva, viscerální orgán, skrz humor, vodný humor, mozkomíšní mok atd., Shromážděné od zdravých subjektů nebo zdravých experimentálních zvířat, jsou společně označovány jako prázdné biologické matrice.

3 nutnost použití prázdných biologických matic v předklinických studiích

In léčivý předklinický výzkum, prázdná biologická matice je základním kamenem pro založení a ověřováníMetody biologické analýzy. Pomocí prázdných matic od zdravých subjektů nebo experimentálních zvířat mohou vědci přesně připravit kalibrační standardy a vzorky kontroly kvality, vyhodnotit specificitu, citlivost, přesnost a maticové účinky analytických metod a zajistit spolehlivost výsledků kvantifikace koncentrace léčiva.

4 Ověření biologické metody a založení a použití prázdné biologické matice

Jak vyžaduje pokyny FDA/EMA, při zřízení a validaci metod analýzy biologické matrice je třeba použít k zajištění přesnosti a spolehlivosti metody analýzy prázdné biologické matice. Zejména v LC - MS/MS analýze mohou rozdíly ve složkách matic z různých zdrojů významně ovlivnit účinnost ionizace. Prázdná matice se používá hlavně pro přípravu kalibračních standardů, přípravu vzorků kontroly kvality pro zkoumání specifičnosti, selektivity, přesnosti, přesnosti, maticových efektů, míry zotavení, stability, linearitu ředění, interferenční účinky atd. Analytických metod. Selektivita a maticový účinek metody detekce vyžaduje vyšší požadavky na prázdnou matici.

5 Aplikační scénáře žlučové prázdné matice ve vývoji léčiva

Umělá matice žluči (Simulovaná matice žlučové matice)je syntetický roztok, který simuluje přírodní žlučové složky a používá se pro výzkum metabolismu léčiva, toxikologie a biologické analýzy.BLILE BLANK MATRIXmá důležitou aplikační hodnotu v následujících scénářích vývoje léčiva: farmakokinetické (PK) studie léčiv hepatobiliárního systému, absorpce a studie metabolismu v prvním průchodu, studie interakce s kyselinou kyselinou léčivo, hodnocení hepatotoxicity a studií žlučových stasis a studií biologické analýzy (LC - MS/MS).

6 léčiv hepatobiliárního systému

Ve vývoji léčiv pro hepatobiliární systém hraje žlučová prázdná matrice nenahraditelnou roli jako standardizovaný in vitro simulační systém ve farmakokinetickém (PK), toxikologickém a biologické analýze.

6.1 Vyhodnoťte charakteristiky vylučování žluči u drog

Výzkum hepatointestinální cirkulace: Žluvka je jednou z důležitých cest pro vylučování léčiv a jejich metabolitů. Pomocí umělé žlučové matrice lze simulovat změny koncentrace léčiv ve žluči, aby se vyhodnotilo, zda jsou reabsorbovány prostřednictvím jaterního střevního oběhu.

Stanovení míry clearance žluči: U léků, které jsou aktivně vylučovány žluči (jako jsou statiny a určitá antibiotika), může umělá žluč (simulovaná žluč) pomoci kvantifikovat jejich účinnost clearance a optimalizovat režim dávkování.

6.2 Studujte účinek žlučových kyselin na absorpci léčiva

Účinek solubilizace: žlučové kyseliny mohou podpořit rozpuštění a absorpci střevních lipofilních léčiv, jako je vitamin D. Umělý žluč může simulovat různé složení kyselin žlučových kyselin a vyhodnotit jejich dopad na biologickou dostupnost léčiva.

Interakce kyseliny kyseliny na léčivo: Některá léčiva (jako je liraglutid) mohou konkurovat transportérům žlučových kyselin (jako je BSEP, MRP2) a umělé žluč, lze použít ke studiu takových interakcí, aby se zabránilo potenciálním rizikům pro žlučo.

6.3 Hodnocení rizika hepatotoxicity a cholestázy

Model cholestasis vyvolaný léčivem: Umělý žluč může simulovat patologické stavy, jako je obstrukce žlučovodů a hyperbilirubinémie, a používá se k detekci, zda léky narušují tok žlučo nebo poškození žlučových kanálů.

Analýza biomarkerů: Přidáním specifických složek, jako je bilirubin, žlučové kyseliny a zánětlivé faktory, lze vyhodnotit dopad léků na žlučové složky a lze předvídat klinickou bezpečnost.

6.4 Etické a praktické výhody nahrazení přírodního žluči

Řešení problému nedostatku vzorku: Přírodní žluč je třeba získat invazivními metodami, jako je katetrizace žlučovodů, zatímco umělá žluč může být nekonečně připraven, aby se zabránilo etickým omezením.

Batch konzistence: Složení umělé matice (simulovaná matice) je kontrolovatelná a snižuje dopad individuálních rozdílů v přirozeném žluči na experimentální výsledky.

6.5 Podpořte vývoj metod biologické analýzy LC - MS/MS

Korekce matice efektů: Komplexní složení přírodního žluči (vysokých žlučových solí, fosfolipidů, pigmentů) může snadno vést k potlačení nebo zlepšení iontů v analýze LC - MS/MS. Umělá matice žluči (simulovaná matice žluči) může poskytnout stabilní pozadí, optimalizovat citlivost a přesnost metody.

7 Cross Druh Research

Složení žluči se velmi liší u různých zvířat (potkanů, psů, opic) a umělé žluč může standardizovat rozdíly druhů a zlepšit překladatelnost předklinických dat.

7.1 Cynomolgus Monkey Bile (NHP žluč)

BULA CYNOMOLGUS MONKEY je vysoce podobný tomu, aby se u lidí z hlediska složení (jako je profil žlučové kyseliny) a exprese transportéru léčiva (jako je BSEP, MRP2), stal zlatým standardním modelem lidského primátu pro hodnocení jaterních biliárních vylučování a interakcí s kyselinou drogou.

7.2 Beagle Dog Bile

Obsah fosfolipidů v Beagle žluči je relativně vysoký, takže je vhodný pro studium vylučování žlučové a žlučové soli závislé absorpce lipofilních léčiv. Rozdíly ve složení žlučových kyselin mezi Beagle a lidmi však vyžadují kalibraci prostřednictvím umělých matic.

7.3 SD krysí žluč

Objem sběru žlučů u potkanů ​​SD je relativně velký (~ 1 ml/čas), který se široce používá pro studie střevního oběhu jater a studie hepatotoxicity léčiva. Je však třeba poznamenat, že jejich vysoká základní linie bilirubinu může narušit analýzu LC - MS/MS.

7.4 ICR/CD - 1 Mouse Bile

Mouse CD - 1 má malý objem žluči (50 - 200 μl), díky čemuž jsou vhodné pro studium mechanismů modelů modifikace genu (jako je například cesta FXR/PXR), ale pro přizpůsobení jsou zapotřebí mikro kvantifikační techniky.

7.5 C57BL/6 Mouse Bile

Myš C57BL/6 se běžně používá v modelech metabolických onemocnění a změny ve složení žlučových hmot mohou odrážet patologické stavy, které vyžadují použití umělé žlučové matrice k simulaci patologie.

Výše uvedené modely musí být kombinovány s umělou žlučovou matricí, aby se kontrolovaly rozdíly druhů a optimalizovaly srovnatelnost křížových druhů LC - MS/MS metod.

Závěr

Umělá žlučová matrice, jako klíčový nástroj pro simulaci funkce přírodní žluči, hraje nenahraditelnou roli ve vývoji hepatobiliárních léků. Standardizací kompozice žluči různých druhů (jako jsou opice Cynomolgus, beagle psi, SD krysy, CD - 1 krysy, C57BL/6 potkanů), umělá žlučová matice účinně řeší základní výzvy, jako jsou etické omezení, individuální rozdíly a patologický simulaci přírodních vzorků, což významně zvyšuje spolehlivost a překladatelskou hodnotu výzkumu léku.

S vývojem přesné medicíny bude umělá žlučová matrice dále kombinovat patologické specifické komponenty a mikrofluidní technologii, aby dynamicky simulovala mikroprostředí jater a žlučníku, což poskytuje silnější podporu pro inovativní vývoj léčiv.

Klíčová slova:Prázdná biologická analýza, vzorek biologické matrice, analýza biomatrix, lidská žluč, žluč zvířat, vzorek žluči, umělý žluč, simulovaný žluč, žluč NHP, cynomolgus opičí žluč, vývoj BIOLALYTICKÉHO metody, Vrchní metoda

Odkaz

Li T, Chiang JY. Signalizace žlučové kyseliny při metabolickém onemocnění a léčivé terapii. Pharmacol Rev. 2014 OCT; 66 (4): 948 - 83. Doi: 10.1124/pr.113.008201. PMID: 25073467; PMCID: PMC4180336.