Introduktion tilLevermikrosomerog S9 -fraktioner
Inden for lægemiddelmetabolisme og farmakokinetik er det afgørende at forstå de forviklinger af levermikrosomer og S9 -fraktioner. Disse in vitro -systemer er medvirkende i de tidlige stadier af opdagelse af medikamenter, hvilket giver indsigt i, hvordan nye kemiske enheder (NCE'er) metaboliseres af leveren. Evnen til at forudsige metabolisk stabilitet og potentielle lægemiddelinteraktioner er uvurderlig, hvilket sparer tid og ressourcer i udviklingen af nye lægemidler. Denne artikel dykker ned i forskellene mellem levermikrosomer og S9 -fraktioner, hvor de undersøger deres sammensætning, funktionalitet, fordele og begrænsninger.Sammensætning og struktur af levermikrosomer
● Mikrosomer som en del af det endoplasmatiske retikulum
Levermikrosomer er vesikel - som artefakter afledt fra det endoplasmatiske retikulum i eukaryote celler. De dannes, når celler nedbrydes under homogeniseringsprocessen, hvilket resulterer i sedimentation af det endoplasmatiske retikulum. Denne subcellulære fraktion er beriget med membran - bundne enzymer og er vigtig for at studere medikamentmetabolisme, især fase I -reaktioner.● Indholdet nøgleenzymer: Cytochrome P450s og UGTS
Den høje koncentration af cytochrome P450 -enzymer (CYP'er) i levermikrosomer er deres definerende funktion. Disse enzymer spiller en afgørende rolle i den oxidative metabolisme af en lang række xenobiotika, herunder medikamenter og miljømæssige toksiner. Til stede er også uridindiphosphat - glucuronosyltransferaser (UGT'er), som bidrager til konjugeringen og efterfølgende eliminering af metabolitter, der markerer et indledende trin mod forståelse af fase I og nogle fase II -reaktioner.Sammensætning og struktur af S9 -fraktioner
● S9 som en kombination af mikrosomale og cytosoliske fraktioner
S9 -fraktionen, ofte omtalt som 9000G -supernatanten, er en subcellulær komponent opnået fra leverhomogenater gennem differentiel centrifugering. I modsætning til mikrosomer, der indeholder overvejende endoplasmatiske retikulum - bundne enzymer, inkluderer S9 -fraktionen både mikrosomale og cytosoliske enzymer, der præsenterer en mere omfattende enzymatisk profil.● Enzymer til stede i S9 inklusive fase I og II
S9 -fraktioner giver et rigere enzymatisk miljø, der indkapsler både fase I -enzymer som CYP'er og en pakke med fase II -enzymer, såsom sulfotransferaser, glucuronosyltransferaser og glutathion - S - transferaser. Denne matrix giver mulighed for mere omfattende metaboliske transformationer, der simulerer leverens in vivo -miljø mere nøjagtigt end mikrosomer alene.Funktionalitet: Fase I og fase II metabolisme
● Forskelle i enzymaktivitet mellem mikrosomer og S9
Kerneforskellen ligger i det enzymatiske omfang. Levermikrosomer understøtter primært metaboliske reaktioner i fase I, der involverer oxidation, reduktion og hydrolyse. Disse reaktioner introducerer eller udsætter funktionelle grupper på lægemiddelmolekylerne og baner vejen for fase II -reaktioner. I modsætning hertil omfatter S9 -fraktioner både faser I og II, hvilket letter konjugeringsreaktioner, som mikrosomer ikke uafhængigt kan udføre.● Betydningen af fase I og II i lægemiddelmetabolismen
Den sekventielle karakter af fase I og II -reaktionerne understreger deres betydning i lægemiddelmetabolismen. Fase I -modifikationer forbereder generelt forbindelserne til fase II, som typisk involverer konjugering for at øge opløseligheden og hjælpe i udskillelsesprocessen. At forstå disse faser er afgørende for at forudsige et lægemiddels biotilgængelighed, effektivitet og potentiel toksicitet.Anvendelser i lægemiddelmetabolismeundersøgelser
● Brug i ADME -studier: Absorption, distribution, metabolisme, eliminering
Levermikrosomer og S9 -fraktioner er afgørende i ADME -studier, der evaluerer absorption, distribution, stofskifte og eliminering af lægemiddelkandidater. Disse undersøgelser er kritiske til bestemmelse af den farmakokinetiske profil af lægemidler, der giver vigtige data, der informerer dosering, potentielle interaktioner og bivirkninger.● Sammenlignende undersøgelser: Mikrosomer vs. S9 i lægemiddelopdagelse
Sammenlignende analyse mellem mikrosomer og S9 -fraktioner afslører, at selvom begge har deres anvendelse, tilbyder S9 -fraktioner et mere holistisk syn på metabolisk stabilitet på grund af inkluderingen af fase II -enzymer. Denne omfattende analyse hjælper med identifikationen af metaboliske veje, der muligvis ikke er synlige, når man bruger levermikrosomer alene.Fordele ved levermikrosomer
● Omkostninger - Effektivitet og tilgængelighed
Levermikrosomer foretrækkes for deres omkostninger - effektivitet og udbredt tilgængelighed. Processerne til deres forberedelse og anvendelse er godt - etableret, hvilket gør dem til et praktisk valg for mange laboratorier.● Høj gennemstrømning og automatiseringskompatibilitet
Enkelheden af mikrosome -assays gør dem tilgængelige for høj gennemstrømning og automatisering, en vigtig funktion til screening af store biblioteker med forbindelser hurtigt. Denne fordel er afgørende i strømlining af lægemiddelopdagelsesrørledningen, hvilket tillader tidlig identifikation af lovende kandidater.Fordele ved lever S9 -fraktioner
● Omfattende metabolisk repræsentation
Med både fase I og II -enzymer tilbyder S9 -fraktioner en mere komplet vurdering af en forbindelsens metaboliske skæbne. Denne omfattende repræsentation er især nyttig til at identificere potentielle metabolitter tidligt i lægemiddeludviklingsprocessen.● Inkludering af fase II metabolisme og omkostningsovervejelser
At inkludere fase II -enzymer betyder, at S9 -fraktioner kan give indsigt i konjugeringsreaktioner, hvilket forudsiger, hvordan lægemidler vil blive behandlet i kroppen. Selvom de muligvis kræver yderligere kofaktorer for visse reaktioner, tilbyder de stadig en gunstig balance mellem omkostninger og nytteværdi i indstillinger med høj gennemstrømning.Begrænsninger af levermikrosomer
● Fravær af cytosoliske enzymer, der påvirker data om fuld stofskifte
En betydelig begrænsning af levermikrosomer er deres mangel på cytosoliske enzymer, som er vigtige for et fuldt metabolisk billede. Dette fravær betyder, at nogle metabolitter kan overses, mangler kritiske veje, der er vigtige for at forstå lægemiddelsikkerhed og effektivitet.● Krav til yderligere systemer til fase II -undersøgelse
For at studere fase II -reaktioner omfattende er yderligere systemer eller tilskud med eksterne enzymer/cofaktorer nødvendig, når de bruger mikrosomer. Dette krav kan komplicere assaytesign og fortolkning.Begrænsninger af lever S9 -fraktioner
● Behov for co - faktorer og mulig enzymfortynding
På trods af deres omfattende karakter kræver S9 -fraktioner ofte tilsætning af kofaktorer til at understøtte visse enzymatiske aktiviteter. Dette behov kan indføre variation og kompleksitet i assays. Derudover kan fortynding af enzymer i S9 -fraktioner sammenlignet med isolerede præparater påvirke detektionsfølsomheden for nogle metaboliske reaktioner.● Opbevarings- og forberedelsesudfordringer sammenlignet med mikrosomer
Forberedelse og opbevaring af S9 -fraktioner kan være mere udfordrende end for mikrosomer. Korrekt vedligeholdelse af enzymatisk aktivitet gennem omhyggelig håndtering og opbevaring er afgørende for at opnå pålidelige resultater, hvilket lidt komplicerer deres anvendelse i store - skalaundersøgelser.Konklusion og anbefalinger
● Resumé af de bedste - Brug scenarier til hver metode
Levermikrosomer og S9 -fraktioner har hver især forskellige styrker og svagheder. Levermikrosomer bruges bedst, når der er behov for omkostninger - Effektiv screening af hurtig fase I -metabolisme. I modsætning hertil er S9 -fraktioner bedre egnet til omfattende undersøgelser, der kræver indsigt i både fase I og II metabolisme. Valg af det relevante system afhænger af de specifikke krav i forskningen og de tilgængelige ressourcer.● Forslag til optimal brug i lægemiddeludviklingsprocesser
For dem i tidlige lægemiddeludviklingsstadier kan anvendelse af høje - levermikrosomer med kvalitet fra en velrenommeret levermikrosomer leverandør eller levermikrosomer producenten strømline de indledende screeninger. Efterhånden som forskningen skrider frem, inkorporererLever S9Fraktioner, muligvis hentet fra en pålidelig levermikrosomerfabrik, giver et fyldigere billede af metabolisk stabilitet, hvilket sikrer robust evaluering af lægemiddelkandidat.● Introduktion tilIPhase
Hovedkvarter i North Wales, Pennsylvania, er Iphase Biosciences en "specialiseret, ny og innovativ" High - Tech Enterprise Integrating Research, Development, Production, Sales og Technical Services of Innovative Biologicle Reagents. Udnyttelse af omfattende viden og lidenskab for videnskabelig forskning er vores videnskabelige team forpligtet til at levere innovative biologiske reagenser af høj kvalitet til forskere over hele verden og hjælpe forskere i hele deres videnskabelige bestræbelser på at hjælpe med at nå deres forskningsmål. At forfølge F & U -idealet om "innovative reagenser, undersøge fremtiden", etablerede iPhase flere F & U -faciliteter, salgscentre, lagre og distributionspartnere over hele kloden.
Posttid: 2024 - 11 - 26 16:50:02