Κατανόηση του ρόλου των επαγόμενων κλασμάτων S9 σε μελέτες μεταβολισμού φαρμάκων

Τα in vitro μοντέλα έχουν καταστεί απαραίτητα στη σύγχρονη τοξικολογία και τη φαρμακοκινητική, ιδιαίτερα όταν αξιολογείται ο τρόπος με τον οποίο μια ένωση συμπεριφέρεται μεταβολικά πριν προχωρήσει σε in vivo στάδια. Ένα ευρέως υιοθετημένο εργαλείο σε αυτές τις μελέτες είναι το επαγόμενο κλάσμα S9, ένα υποκυτταρικό παρασκεύασμα που προέρχεται από ομογενοποιήσεις του ήπατος που διατηρεί τόσο μικροσωμικά όσο και κυτοσολικά ένζυμα. Αυτά τα κλάσματα επιτρέπουν την αποτελεσματική αξιολόγηση του ξενοβιοτικού μεταβολισμού, της ενζυμικής δραστικότητας και της πιθανής μεταβολικής ενεργοποίησης των δοκιμαστικών ουσιών.

ΟΚλάσμα S9συνήθως προέρχεται από τους ήπατες ιστούς των τρωκτικών - οι rats και τα χάμστερ είναι πιο συνηθισμένα - αντιμετωπίζονται με ενζυμικούς επαγωγείς για την ενίσχυση της έκφρασης του μεταβολικού ενζύμου. Το προκύπτον επαγόμενο μίγμα S9 περιέχει ένζυμα φάσης Ι όπως οξειδάσες κυτοχρώματος Ρ450, καθώς και ένζυμα συζεύξεων φάσης ΙΙ όπως γλυκουροζυλοτρανσφεράσες και σουλφοτρανσφεράσες. Αυτή η διπλή παρουσία ενζύμων είναι απαραίτητη κατά την αξιολόγηση των σύνθετων μεταβολικών οδών σε ένα εργαστηριακό περιβάλλον.

Ο ρόλος τουΕπαγόμενο συκώτι αρουραίου S9

Επαγόμενο συκώτι αρουραίου S9είναι η πιο συχνά χρησιμοποιούμενη παραλλαγή, ειδικά σε δοκιμές γονιδιοτοξικότητας όπως η δοκιμασία AMES ή η δοκιμή Micronucleus. Αυτά τα κλάσματα συνήθως παρασκευάζονται μετά από προ -θεραπεία αρουραίων με Aroclor 1254, φαινοβαρβιτάλη, ή β - Νάπθοφλαβας. Το Aroclor 1254, ειδικότερα, έχει χρησιμοποιηθεί ευρέως για την παραγωγή S9 που προκαλείται από Aroclor, η οποία προσφέρει ισχυρή επαγωγή διαφόρων ισοζύμων κυτοχρώματος P450. Αυτά είναι απαραίτητα για την προσομοίωση της δραστικότητας του ήπατος ενζύμου που βρίσκεται in vivo, παρέχοντας κρίσιμη εικόνα για το πώς μια χημική ουσία μπορεί να ενεργοποιηθεί σε μεταλλαξιογόνο ή τοξική ένωση.

Οι εφαρμογές για το Aroclor - επαγόμενο S9 περιλαμβάνουν:

• Προσομοίωση μεταβολικής ενεργοποίησης θηλαστικών σε δοκιμασίες βακτηριακής μεταλλαξιογένεσης

• Διερεύνηση της Βιομηχανικής Φάσης Ι Βιομετατροπής Βιομηχανικών Χημικών

• Πρόβλεψη του μεταβολισμού των ανθρώπινων φαρμάκων μελετώντας δομικά ανάλογα
  
  
  
  

Πότε να χρησιμοποιήσετεΕπαγόμενο ήπαρ του χάμστερ S9

Αν και οι αρουραίοι είναι το πρότυπο σε πολλά εργαστήρια,Επαγόμενο ήπαρ του χάμστερ S9προσφέρει ένα διαφορετικό προφίλ έκφρασης ενζύμου. Ορισμένες ενώσεις μπορούν να μεταβολιστούν διαφορετικά ανάλογα με τα είδη - Ειδικά συστήματα ενζύμων, καθιστώντας το χάμστερ - παράγωγο S9 χρήσιμο όταν οι ερευνητές αναζητούν συγκριτικά μεταβολικά δεδομένα ή όταν είναι γνωστές μεταβολικές οδούς σε αρουραίους είναι ανεπαρκείς. Αυτή η ποικιλομορφία διευρύνει το πεδίο της έρευνας και συμβάλλει στη μείωση των ψευδών αρνητικών ή πάνω από τις ερμηνείες που προκαλούνται από την προκατάληψη των ειδών.

Σκέψεις στη χρήση S9

Κατά την επιλογή ενός κατάλληλου επαγόμενου συστήματος S9, οι ερευνητές πρέπει να εξετάσουν:

• Η φύση της ένωσης (Pro - Drug vs. Direct - Ένωση δράσης)

• Ο τύπος των απαιτούμενων ενζύμων (οξείδωση έναντι δεσπόζουσας συζεύξεως)

• Οι ρυθμιστικές προσδοκίες (π.χ., ΟΟΣΑ ή FDA κατευθυντήριας προσκόλλησης)

• Η συνέπεια της παρτίδας και η ενζυματική δραστικότητα του χρησιμοποιούμενου κλάσματος S9 που χρησιμοποιήθηκε
  
  
  

IPHASE: Αξιόπιστη υποστήριξη για τη μεταβολική έρευνα S9 -

At IPhaseΚατανοούμε την πολυπλοκότητα των πρώιμων - διαλογής φάσης και ρυθμιστικών δοκιμών. Προσφέρουμε τυποποιημένα επαγόμενα κλάσματα S9, συμπεριλαμβανομένου του επαγόμενου ήπατος αρουραίου S9, που προκαλείται από το ήπαρ Hamster S9 και το Aroclor - επαγόμενο S9, όλα κατασκευασμένα υπό αυστηρά πρωτόκολλα ελέγχου ποιότητας. Κάθε παρτίδα δοκιμάζεται για ενζυματική δραστηριότητα και παρτίδα - έως συνάφεια, εξασφαλίζοντας ακριβή και αναπαραγώγιμα αποτελέσματα σε μια σειρά in vitro μελετών.

Με την εμπειρία που υποστηρίζει τα παγκόσμια φαρμακευτικά, περιβαλλοντικά και ακαδημαϊκά ιδρύματα, η IPHASE παραμένει αξιόπιστος συνεργάτης στην παροχή υποκυτταρικών κραγμάτων προσαρμοσμένων για πολύπλοκες ερευνητικές ανάγκες. Τα υλικά S9 μας παράγονται από προσεκτικά επαγόμενα εργαστηριακά ζώα και χειρίζονται σύμφωνα με διεθνώς αναγνωρισμένες κατευθυντήριες γραμμές, εξασφαλίζοντας ότι κάθε προετοιμασία ανταποκρίνεται στις απαιτήσεις των σύγχρονων δοκιμών μεταβολισμού.