Antaŭenigoj en bioanalizo: La rolo de LC - MS/MS en oftalmika drog -disvolviĝo kaj akva kaj vitra humura studoj

Produktoj de Iphase

Likva Kromatografio - Tandema Masa Spektrometrio (LC - MS/MS)

Likva Kromatografio - Tandema Masa Spektrometrio (LC - MS/MS) estas potenca analiza tekniko, kiu kombinas la apartigajn kapablojn de likva kromatografio kun la masaj analizaj kapabloj de tandema mas -spektrometrio. En LC - MS/MS, ekzempla miksaĵo unue estas apartigita per likva kromatografio, kie komponentoj interagas malsame kun senmova fazo kaj movebla fazo, kondukante al ilia disiĝo dum ili trapasas la kolumnon. La apartaj komponentoj tiam estas ionizitaj kaj analizitaj per tandema mas -spektrometrio, kiu fragmentas jonojn en produktajn jonojn por detala struktura analizo.

Aplikoj de LC - MS/MS en bioanalizo

Bioanalizoimplikas la mezuradon de drogaj koncentriĝoj, metabolitoj kaj aliaj biologiaj komponaĵoj ene de biologiaj specimenoj, kiel sango, plasmo, urino kaj aliajBiofluidoj. LC - MS/MS estas aparte bone - taŭga por ĉi tiuj aplikoj pro ĝia alta sentiveco kaj kapablo detekti malaltajn koncentriĝojn de celaj analitoj ene de kompleksaj biologiaj matricoj.

LC - MS/MS -teknologio por la analizo de biologiaj specimenoj detektas ambaŭ ekzogenajn kaj endogenajn substancojn. La esploristoj simulis efektivajn specimenojn aldonante la substancon por mezuri almalplena Matricoformuli kvantan norman kurban specimenon kaj specimenon de kvalito -kontrolo. La koncentriĝo de la substanco mezurebla en biologia specimeno estas kvantigita per norma kurbo.

Endogenaj substancoj estas substancoj, kiuj okazas nature en la korpo. Endogena substanco - Rilataj drogoj fariĝis grava direkto por nova drog -disvolviĝo en la lastaj jaroj. Kune kun la naskiĝo de granda nombro da drogoj kun endogenaj substancoj, la bioanalizo de drogoj kun endogenaj substancoj fariĝis pli kaj pli grava. Tamen, nuntempe, la validumado de biologiaj specimenaj analizaj metodoj de FDA kaj aliaj hejmaj kaj eksterlandaj drog -reviziaj organizoj ĉefe fokusas pri ekzogenaj substancoj, inkluzive de precizeco, precizeco, matrica efiko, resaniĝa indico kaj stabileco. Ĉar la detekto de endogenaj substancoj kondukas al problemoj en la detektaj rezultoj pro sia propra efiko kiam ili akiras malplenan matricon por simuli la efektivan specimenon, la apero de alternativomalplena biologia matrico (artefarita malplena biologia matrico) solvas ĉi tiun problemon.

Tabelo 1: Priskribo de selektiveco en la ĉefaj bioanalizaj metodologiaj gvidlinioj de la industrio

Analiza metodo -disvolviĝo kaj analiza metodo -validumado

En bioanalizo, certigi la fidindecon kaj reprodukteblecon de analizaj rezultoj estas plej grava. Ĉi tio postulas la striktan disvolviĝon kajvalidumado de analizaMetodoj.

Analiza metodo -disvolviĝoimplikas la kreadon de optimumigitaj proceduroj por detekti kaj kvantigi analizojn de intereso. Ĉi tio inkluzivas selekti la taŭgajn kromatografiajn kondiĉojn (t.e., senmova fazo, movebla fazo, fluofluo) kaj MS -parametroj (t.e., joniga tekniko, kolizia energio) por atingi optimuman sentivecon, rezolucion kaj selektivecon. Aldone, la metodo devas povi precize kvantigi analizojn en ĉeesto de kompleksaj kaj ŝanĝiĝemaj biologiaj matricoj, kiuj ofte konsistas el proteinoj, lipidoj kaj aliaj komponaĵoj, kiuj povas intermiksi analizon.

Post kiam metodo estas disvolvita, ĝi devas suferiAnaliza metodo -validumadoPor certigi, ke ĝi plenumas antaŭdifinitajn agadkriteriojn. Ĉi tiu valida procezo estas necesa por konfirmi, ke la metodo taŭgas por sia celita celo kaj konformas al reguligaj postuloj. Por bioanalizaj metodoj, validumado tipe inkluzivas plurajn ŝlosilajn parametrojn:

• - Precizeco kaj precizeco:Certigi la metodon donas ĝustajn kaj konsekvencajn rezultojn.
• - Sentemo:La kapablo detekti malaltajn koncentriĝojn de la analito.
• - Selektiveco:La kapablo de la metodo distingi la analiton disde aliaj komponaĵoj en la matrico.
• - Reakiro:La efikeco kun kiu la analito estas ĉerpita el la biologia specimeno.
• - Stabileco:La stabileco de la analito en malsamaj stokaj kaj uzantaj kondiĉoj.
• - Lineareco:La kapablo de la metodo produkti rezultojn rekte proporciajn al la analiza koncentriĝo super specifita gamo.

Blanka biologia matrico kaj malplena matrico ludas kritikajn rolojn en ĉi tiu validiga procezo. Ĉi tiuj kontrolaj specimenoj, kiuj ne enhavas la analizon de intereso, estas esencaj por identigi eblajn matricajn efikojn aŭ interferojn dum la analizo. Ili helpas establi bazajn nivelojn por la analitoj kaj certigi, ke la matrico mem ne kontribuas al signala poluado aŭ forigo. Simile, la uzo dedrogo - senpagaj matricojestas kerna por validigi, ke neniuj postrestantaj drogoj aŭ metabolitoj ĉeestas en la specimeno, kiu povus deklivi la rezultojn.

Bioanalizo de oftalmaj medikamentoj

La muro de la okulglobo estas dividita en tri tavolojn, la ekstera tavolo estas la fibra membrano; La meza membrano estas la pigmenta membrano, vaskula membrano aŭ uvea; Kaj la interna membrano estas la retino. La okulglobo estas dividita en du partojn, la antaŭaj kaj postaj regionoj de la okulo, limigitaj per la malantaŭo de la lenso.

Figuro 1. Anatomio de homa okulo.

La ĉefaj strukturoj implikitaj en drog -metabolo inkluzivas:

• Kornea- La primara loko por topika absorción de drogoj, enhavanta esterasojn kaj citokromajn P450 (CYP) enzimojn, kiuj metaboligas prodrogojn.
• Konjunktiva- Riĉa je drogo - metaboligantaj enzimoj (ekz., Esterasoj kaj CYPS), kontribuante al la unua - pasi metabolon antaŭ sistema absorbo.
• Akva humuro- Limigita metabola agado sed ludas rolon en distribuo kaj malleviĝo de drogoj.
• Vitreca- Intravitra injekto povas agi rekte sur la retino kaj redukti toksecon en la somata cirkulado. Malgrandaj molekulaj drogoj disvastiĝas rapide, kaj grandaj molekulaj drogoj havas pli longan duonon - vivo. Vitraj ŝanĝoj kun aĝo influas farmacokinetikon.
• Sclera- Sclera estas pli permeable al grandaj molekulaj drogoj kaj drog -trairejo tra la sclera estas ĉefe trafita de molekula grandeco. Subkonjunktivaj injektoj permesas al drogoj eniri la oroorulon, sed la procezo estas komplika. Sklera melanino ligas la drogon kaj influas ĝian liberigon kaj daŭron de agado.
• Posta okula regiono- La retrookulaj histoj estas riĉaj je sangofluo kaj drogoj povas esti forigitaj per la korpa cirkulado aŭ limfo. Choroida vaskula hiperpermebleco permesas al drogoj facile eniri la eksteran spacon, sed malfacilas transiri la epitelion de retina pigmento, kiu efikas efikecon kaj kondukas al perdo. Melanino - Ligantaj drogoj povas plilongigi la daŭron de agado.

Akva humuro kaj vitreca humuro

Laakva humuroKajvitra humuroestas esencaj okulaj fluidoj, kiuj ludas kritikajn rolojn por konservi intraokulan premon, provizante nutraĵojn kaj faciligante optikan klarecon. La akva humuro estas la maldika, klara, akva fluido, kiu plenigas ambaŭ la antaŭajn kaj postajn ĉambrojn de la okulo, enhavante jonojn, proteinojn, karbonhidratojn kaj oksigenon. La plej granda parto de la akva humuro produktita de la cilia korpo, eliras el la okulo ĉe la angulo formita de la krucvojo de la iriso kaj kornea. Ĉi tiuj fluidoj varias laŭ specioj, inkluzive de homoj, simioj, kunikloj kaj aliaj ne - homaj primatoj. Ili kutime kolektis kun grandaj grandecoj de individuaj bestoj aŭ naĝejoj.

Akva humuro trans specioj

Homa akva humuro

Lahoma akva humuroestas klara, nutra - riĉa fluido, kiu konservas intraokulan premon kaj subtenas metabolajn funkciojn de la kornea kaj lenso. Ĝi estas produktita de la cilia korpo kaj fluas tra la antaŭa ĉambro antaŭ ol malplenigi tra la trabecula maŝo.

Simia akva humuro

LaSimia akva humuroproksime similas al tiu de homoj en kunmetaĵo kaj dinamiko. Konsiderante la anatomiajn similecojn inter primatoj kaj homoj,ne - homa primata akva humuroservas kiel esenca referenco por oftalmaj studoj.

Kuniklo Akva Humuro

LaKuniklo Akva Humurodiferencas signife de tiu de primatoj, precipe en ĝia proteina koncentriĝo kaj indico de turno. Kunikloj estas ofte uzataj en okula esplorado, kvankam specioj - specifaj variaĵoj devas esti pripensitaj.

Vitra humuro inter specioj

Homa vitra humuro

Lahoma vitra humuroestas ĝelo - kiel substanco kunmetita ĉefe de akvo, kolageno kaj hialurona acido. Ĝi subtenas okulan formon, sorbas skuojn kaj servas kiel konduto por transporto de nutraĵoj.

Simio vitreca humuro

Lasimio vitreca humurodividas similan konsiston al homa vitreca humuro, farantene - homa primata vitra humurosenvalora modelo por studado de aĝo - rilata vitreca degenerado kaj rilataj patologioj.

Kuniklo vitreca humuro

Lakuniklo vitreca humuroestas strukture malsama, estante pli likva - kiel kaj havanta pli malaltan kolagenan densecon. Ĉi tiuj diferencoj influas ĝian respondon al kirurgiaj intervenoj kaj farmakologiaj traktadoj.

Disvolviĝo de artefaritaj kaj simulitaj okulaj fluidoj

Artefarita akva kaj artefarita akva vitra humuro

Artefarita akva humuroKajartefarita vitra humuroestas kreitaj anstataŭantoj desegnitaj por uzi en oftalmaj kirurgioj, liverado de drogoj kaj esploraj aplikoj. Ĉi tiuj sintezaj fluidoj imitas la biokemiajn kaj fizikajn proprietojn de siaj naturaj ekvivalentoj.

Simulita akva kaj simulita vitreca humuro

Simulita akva humuroKajSimulita vitreca humuroestas laboratorio - preparitaj solvoj uzataj por in vitro -eksperimentado kaj modeligado de okula fiziologio. Ili faciligas kontrolitajn studojn sen la etikaj limigoj asociitaj kun bestaj aŭ homaj specimenoj.

Konkludo

La uzo de likva kromatografio - tandema mas -spektrometrio (LC - MS/MS) en bioanalizo reprezentas kernan progreson en analizaj teknikoj por detekti kaj kvantigi biologiajn komponaĵojn, inkluzive de drogoj kaj metabolitoj en biologiaj matricoj. La alta sentiveco, precizeco kaj selektiveco de la metodo igas ĝin senvalora en kaj ekzogena kaj endogena substanco -analizo, precipe en oftalma disvolviĝo de drogoj. La detala kompreno de okula anatomio kaj la rolo de fluidoj kiel la akva kaj vitra humuro emfazas la gravecon de ĉi tiuj korpaj komponentoj en liveraj sistemoj. Plie, la disvolviĝo de artefaritaj kaj simulitaj okulaj fluidoj antaŭenigas esploradajn eblecojn samtempe certigante etikajn konsiderojn. Ĉar analiza metodo -validumado daŭre evoluas, ĝi certigas la fidindecon kaj reprodukteblecon necesajn por efikaj klinikaj aplikoj, precipe en oftalmologio.

Ŝlosilvortoj: LC - MS/MS, Blank Biological Matrix, Blank Matrix, Drug - Senpaga Matrico, Biofluidoj, Bioanalizo, Biologia Analizo, Validigo de Analiza, Analiza Metodo -Validigo, Analiza Metodo -Disvolviĝo, Humora Humora Humora Humora Humoro, Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humora Humoro. Kuniklo vitreca humuro, ne - homa primata vitreca humuro,Simulita akva humuro, simulita vitreca humuro, artefarita akva humuro, artefarita vitra humuro.

Referenco

Seyedpour, S. M., Lambers, L., Rezazadeh, G., & Ricken, T. (2023). Matematika modeligado de la dinamika respondo de enplantaĵa plibonigita kapacita glaŭkoma prema sensilo.Mezuro: Sensiloj, 30, 100936. Https://doi.org/10.1016/j.measen.2023.100936