Kompara Analizo de Periferiaj Sangaj Mononukleaj Ĉeloj (PBMCoj): Trans specioj -aplikoj en imunologio kaj terapia esplorado

IFazaj produktoj

Periferiaj sangaj mononukleaj ĉeloj (PBMCoj)

Periferiaj sangaj mononukleaj ĉeloj (PBMCoj)estas heterogena populacio de imunaj ĉeloj trovitaj en ekstercentra sango, karakterizita de ununura ronda kerno. Ili inkluzivas limfocitojn - kiel T -ĉelojn, B -ĉelojn, kaj naturajn mortigajn (NK) ĉelojn - kaj monocitojn, kvankam ekskludante granulocitojn (t.e., neutrofiloj) kaj eritrocitojn. PBMCoj estas tipe izolitaj per centrifugado de denseca gradiento uzante rimedojn kiel Ficoll, kiu disigas ĉelojn bazitajn sur fluebleco. Ĉi tiu ne - invasiva metodo permesas facilan aliron al kritikaj imunaj komponentoj, igante PBMC -ojn senvaloraj en esplorado pri imunologio kaj terapia disvolviĝo.

PBMC IsoLation

La grandeco, morfologio kaj specifa gravito de unuopaj nukleaj ĉeloj diferencas de aliaj ĉeloj en la ekstercentra sango. La specifa gravito de ruĝaj globuloj kaj polimorfonukleaj leŭkocitoj superas 1.080, tiu de individuaj nukleaj ĉeloj estas ĉirkaŭ 1.070, kaj tiu de globuletoj estas ĉirkaŭ 1.030. Tial la diferenco inter la specifa gravito de diversaj sangaj ĉeloj kaj individuaj nukleaj ĉeloj povas esti uzata por disigi diversajn sangajn ĉelojn de individuaj nukleaj ĉeloj. Ficoll -denseca gradienta centrifugado estas la plej ofte uzata metodo porPBMC -izoladokaj purigo. Ficoll estas sukeroza multimero, neŭtrala, kun averaĝa molekula pezo de 400.000, kaj kiam la denseco estas 1,2 g/mL, ĝi ne superas la normalan fiziologian osmotan premon, kaj ne trapasas biologiajn membranojn, do ĝi estas ofte uzata por PBMC. Tial ĝi ofte estas uzata kiel la apartiga solvo por PBMC -disiĝo. Eritrocitoj kaj granulocitoj havas grandan specifan graviton kaj sinkon al la fundo de la tubo post centrifugado; Limfocitoj kaj monocitoj havas specifan graviton malpli ol aŭ egala al la specifa gravito de la apartiga solvo, kaj flosas sur la surfaco de la apartiga solvo post centrifugado, kaj malgranda parto de la ĉeloj ankaŭ povas esti ĉesigita en la disiga solvo. Aspirante la blankajn membranajn tavolajn ĉelojn sur la likva surfaco de la apartiga solvo kaj lavante ilin taŭge, pli altaj purecaj ununuraj nukleitaj ĉeloj, t.e., PBMC, povas esti izolitaj de ekstercentra sango.

PBMCoj en malsamaj specioj

En ne - homaj primatoj, aparte cynomolgus simioj kaj rhesus simio, PBMC -esplorado estas alte taksata pro la fiziologiaj similecoj, kiujn ili dividas kun homoj. Esplorado uzanteCynomolgus Simio PBMCKajRhesus Simio PBMCebligis detalajn studojn pri imunaj mekanismoj, kaj multnombraj studoj uzantaj simion PBMC substrekis ilian tradukan potencialon por homa imunoterapio. La uzo de simio PBMC en testado de vakcinoj, kribrado de drogoj kaj imuna modulado fariĝis angulo en kaj preklinika kaj klinika esplorado.

Simile, esploroj implikantajHundo PBMCsignife kontribuis al veterinara imunologio. Studoj uzantaj hundan PBMC lumigis la vojojn de imuna respondo en kaninoj, dum esplorado implikantakanina PBMCankaŭ reliefigis paralelojn kun homa imuna funkcio. En la kampo de zoonotaj malsanoj, ambaŭ hundo PBMC kaj kanina PBMC -esplorado provizis kritikajn datumojn pri patogenaj - gastigaj interagoj, emfazante la rolon de ĉi tiuj ĉeloj en gvatado de malsanoj kaj kuracado. La ripetiĝanta uzo de hundaj PBMC kaj kanina PBMC en komparaj studoj substrekas sian gravecon kiel modela sistemo.

La modeloj de ronĝuloj, kiuj inkluzivasrato PBMCKajMuso PBMC, tradicie estis ĉe la avangardo de imunologia esplorado. Esploroj uzantaj RAT PBMC ofertis detalan perspektivon pri imuna regulado en kronikaj inflamaj kondiĉoj, kaj la vasta uzo de musa PBMC estis kerna por genetikaj kaj mekanismaj studoj de aŭtoimuneco kaj infekto. Esploristoj daŭre dependas de kaj rato PBMC kaj muso PBMC por esplori kompleksajn imunologiajn procezojn, igante ĉi tiujn modelojn nemalhaveblaj. Plue, la integriĝo deHamstro PBMCEn eksperimentaj aranĝoj aldonis alian dimension al imunologiaj esploroj, ĉar hamster PBMC -studoj ofte provizas novajn komprenojn pri viral -patogenesis kaj imunaj evasion -strategioj. Kun hamster PBMC kompletiganta la esploradon pri rato PBMC kaj muso PBMC, ronĝuloj kolektive formas kompletan ilaron por imunaj studoj.

Grandaj bestaj modeloj ankaŭ riĉigis la kampon, kunMinipig PBMCLudante pivotan rolon en bridado de preklinikaj studoj kaj klinikaj aplikoj. La uzo de Minipig PBMC pruvis utila en regenera medicino kaj esplorado pri transplantado de organoj, kie Minipig PBMC provizas fiziologie gravan platformon por testi novajn terapiojn. Plie, esploroj uzantajKuniklo PBMCestis instrumentaj en produktado de antikorpoj kaj la studo de aŭtoimunaj malordoj, kun kuniklo PBMC -esplorado konstante donante valorajn imunologiajn komprenojn. Per uzado de minipig PBMC kaj kuniklo PBMC en tandemo, esploristoj povas taksi la efikecon kaj sekurecon de novaj imunoterapioj en sistemoj, kiuj proksime imitas homan fiziologion.

Felino kajKato PBMCEsploro skulptis sian niĉon en la studo de retroviraj infektoj kaj imuna misfunkcio. Esploroj uzantajFelina PBMCantaŭis nian komprenon pri la felina imunsistemo, dum studoj kun CAT PBMC ofertis fenestron al la imunaj respondoj asociitaj kun viralaj infektoj. Ambaŭ felina PBMC kaj CAT PBMC estis ree reliefigitaj en esplorado esploranta la paralelojn inter felina kaj homa imunodefekta virusoj, pruvante ke la ripetita uzo de felina PBMC kaj CAT PBMC estas kerna por disvolvi efikajn diagnozajn kaj terapiajn strategiojn.

Aviada imunologio ne restis malantaŭe, kunKokido PBMCKajAnaso PBMCStudoj provizantaj kritikajn komprenojn pri la imunaj mekanismoj de birdoj. Esploro uzanta kokan PBMC malkaŝis unikajn aspektojn de aviaj imunaj respondoj, dum esploroj implikantaj anason PBMC plue riĉigis nian komprenon pri patogena rezisto en aviadaj specioj. La ripetita uzo de kokido PBMC kaj anaso PBMC en studoj ekzamenantaj viralajn infektojn kaj vakcinan efikecon ilustras sian gravecon en kontrolado de malsanoj, kiuj influas kaj bestojn kaj homajn loĝantarojn.
Aldone, studoj uzantajGvineo PBMCestis centraj en la esplorado pri tuberkulozo kaj vakcino, kie gvinea porko PBMC konstante servas kiel fidindaj indikiloj de imuna respondo. Paralele, esploroj implikantajAlpaca PBMCKajKamelo PBMCaltiris atenton pro la unikaj antikorpaj strukturoj ĉeestantaj en ĉi tiuj specioj. Esploro implikanta Alpaca PBMC kaj Camel PBMC malkaŝis novajn terapiajn aplikojn, kaj kaj Alpaka PBMC kaj CAMEL PBMC estis plurfoje uzataj por esplori novigajn nanoborajn teknologiojn kaj imunajn - bazitajn traktadojn.

La kontribuoj deBovina PBMCKajŜafo PBMCAl agrikultura imunologio ankaŭ estis rimarkindaj. Studoj kun bovina PBMC provizis profundajn komprenojn pri bovina mastito kaj spiraj malsanoj, kaj vasta esplorado uzanta bovan PBMC rekte informis strategiojn por plibonigi la sanon de brutoj. Egale, la ripetita uzo de ŝafaj PBMC en imunologiaj esploroj riĉigis nian komprenon pri ruminaj imunaj respondoj, kaj ŝafaj PBMC -esplorado daŭre gvidas la disvolviĝon de efikaj vakcinoj kaj protokoloj pri malsano.

Rolo en imuna esplorado

PBMC povas imiti la in vivo -medion kaj provizi efikan in vitro -modelon por drog -disvolviĝo. Observante la efikojn de drogoj sur PBMC -proliferado, apoptozo kaj citotokseco, la efikeco kaj sekureco de drogoj povas esti komence taksitaj. Studante la efikojn de drogoj sur la celoj de agado kaj signalantaj vojoj de PBMC, ĝi helpas malkovri novajn celojn de drog -agado, kaj ĉi tiuj trovoj povas doni novajn ideojn kaj direktojn por disvolviĝo de drogoj.

Aplikoj en Antikorpo - Dependa Ĉelo - Mediatita Citotokseco (ADCC)

La apliko de PBMC en malkovro de drogoj estas reprezentita perAntikorpo - Dependa Ĉelo - Mediatita Citotokseco (ADCC). Antikorpo - Dependa Ĉelo - Mediatita citotokseco, kiel la nomo sugestas, dependas de antikorpoj - mediaciita ĉelo mortiganta por mortigi celajn ĉelojn. La specifa procezo kompreneblas jene: la FAB -segmento de la antikorpo ligas al antigenika epitopo sur la cela ĉelo. La FC -segmento de la antikorpo ligas al la FCR sur la surfaco de la NK -ĉelo (ĉar NK -ĉeloj estas la ĉefaj ĉeloj, kiuj povas ludi la rolon de ADCC, ĉi tio estas uzata kiel ekzemplo), kaj tiel la NK -ĉelo estas aktivigita, kaj perfortino kaj granzimo estas liberigitaj. La perforno kaj granzimo eniras la ĉelon tra la poro formita en la cela ĉela membrano kaj kaŭzas, ke la cela ĉelo mortas per aktivigo de apoptozo - rilataj enzimoj.

Aplikoj enOTHer imunoterapia drog -disvolviĝo

• - Miksita limfocita reago (MLR)

Primaraj DC -ĉeloj kaj T -ĉeloj estas ko -kultivitaj en sistemo uzebla por taksi DC - mediaciitan T -ĉelan aktivadon. DC -ĉeloj esprimas Pd - L1 en grandaj kvantoj sur ilia surfaco, kiu ligas al Pd - 1 sur la surfaco de T -ĉeloj por inhibi ĝin. Se la drogo povas efike bloki la reagan vojon inter ambaŭ, ĝi povas stimuli la proliferadon de T -ĉeloj en grandaj kvantoj, tiel kontrolante la funkcian agadon de la drogo.

- T -Cellactivation -testoj

T - ĉela aktiviga provo estas unu el la ofte uzataj provoj por taksi la efikojn de imunoterapiaj drogoj. En T -ĉelaj aktivigaj provoj, in vitro kulturitaj T -ĉeloj estas kutime uzataj kaj donitaj taŭgajn stimulojn, kiel antigenoj aŭ antikorpoj, por indukti T -ĉelan aktivadon

- T -ĉela prolifera provo

T - ĉelaj proliferaj provoj povas esti uzataj por kribri imunoterapiajn drogajn kandidatojn kaj taksi la efikecon de drogoj komparante la gradon de T - ĉela proliferado en malsamaj drogoj - traktitaj grupoj kontraŭ kontrolgrupo

- Staphylococcal Enterotoxin B Stimulado de PBMCs

Staphylococcal enterotoxin B estas superantigeno kiu ligas rekte al MHC -molekuloj sur antigenoj - prezentantaj ĉeloj kaj estas prezentita al T - ĉelaj riceviloj. Staphylococcal enterotoxin B havas la kapablon ne - specife aktivigi t - ĉeloj kaj indukti la liberigon de pro - inflamaj citokinoj, kiel IL - 2, IL - 6, ktp.

PBMC -rolo en citokina liberiga sindromo

PBMC ludas pivotan rolon en la disvolviĝo deCitokina liberiga sindromo(CRS), akra kaj eble vivminaca sistema inflama respondo. Se stimulitaj - ĉu per imunoterapioj kiel CAR -T -ĉeloj, monoklonaj antikorpoj, aŭ per infektoj - ĉi tiuj ĉeloj fariĝas tre aktivigitaj kaj rapide sekrecias gamon da citokinoj kiel IL -6, IL -1, IFN -γ kaj TNF -α. Ĉi tiu troa produktado de citokinoj povas deĉenigi akvofalon de eventoj inkluzive de febro, vaskula filtrado, hipotensio kaj mult -organa misfunkcio. Kompreni la kontribuon de PBMCoj en CRS kaŭzis la disvolviĝon de celitaj intervenoj, kiel IL -6 -receptoroj, por helpi mildigi la sindromon per hardado de la citokina ŝtormo konservante la deziratajn imunoterapiajn efikojn.

ConKluzo

En resumo, ĉi tiu artikolo substrekas la ŝlosilan rolon, kiun PBMCoj ludas por progresigi nian komprenon de imunaj mekanismoj tra larĝa spektro de specioj. Ekzamenante la unikajn kontribuojn - de primataj modeloj, kiuj spegulas homan fiziologion al ronĝuloj, grandaj bestaj kaj aviadaj sistemoj, kiujn ĉiu ofertas distingajn esploradajn avantaĝojn - ĉi tio recenzas, kiel komparaj studoj ne nur rafinas preklinikajn taksojn, sed ankaŭ malfermas la vojon al novigaj imunoterapiaj strategioj. La integriĝo de PBMC -esplorado en diversaj domajnoj kiel ekzemple vakcina disvolviĝo, testado de drogoj kaj esplorado de novaj imunaj vojoj ekzempligas ĝian nemalhaveblan rolon en kaj bazaj scienco kaj klinikaj aplikoj. Finfine, la analizo de krucoj - specioj de PBMCs reasertas la valoron de ĉi tiuj ĉelaj modeloj kiel fundamentaj iloj en tradukado de benkaj malkovroj en efikajn traktadojn por vasta gamo de imunologiaj defioj.

KEywords: Periferia sango -mononuklea ĉelo, Cynomolgus Simio PBMC, Rhesus Simio PBMC, Hundo PBMC, Kanina PBMC, Rato PBMC, muso PBMC, Musoj PBMC, Hamster PBMC, Minipig PBMC, Kuniklo PBMC, Feline PBMC, Kato PBMC, Kokido PBMC, Anaso PBMC, Gvineo PBMC, Alpaca PBMC, Kamelo PBMC, bovina PBMC, Ŝafo PBMC, Antikorpo - Dependa Ĉelo - Mediatita Citotokseco (ADCC), Citokina liberiga sindromo, frosta PBMC, kriopreservita PBMC,Izolado de PBMC, Thewing PBMC, Kulturado PBMC, Leukopak, Leukaperesis PBMC, HLA tajpis PBMC.