Liberación de escisión y carga útil de enlazador en drogas ADC
Anticuerpos - Los conjugados de fármacos (ADC) se basan en enlazadores especializados que conectan anticuerpos dirigidos a cargas útiles de toxina de moléculas pequeñas. Estos enlazadores se clasifican como escindibles o no afectables, dependiendo de cómo se degraden dentro de la célula.
Enlazadores escindibles
Los enlazadores escindibles están diseñados para ser químicamente inestables, aprovechando las diferencias entre las condiciones extracelulares e intracelulares, como los niveles de pH y el potencial redox. También pueden degradarse enzimáticamente dentro de los lisosomas.
Los enlazadores químicamente escindibles incluyen principalmente enlazadores ácidos (enlazadores sensibles (como enlaces de perileno o carbonato) y enlazadores reducibles (como enlaces disulfuro). Los enlazadores ácidos - Los enlazadores sensibles se descomponen en entornos ácidos, específicamente en endosomas (pH 5.5–6.2) y lisosomas (pH 4.5–5.0), lo que desencadena la liberación de carga útil.
Otro tipo clave de enlazador escindible es el enlazador sensible enzima, que se descompone por enzimas hidrolíticas intracelulares. Entre estos, los enlazadores basados en péptidos facilitan la internalización de los fármacos ADC a través de la endocitosis y confían en las catepsinas lisosómicas para la escisión. Enzimas comunes - Los enlazadores sensibles incluyen GGFG (Gly - Gly - Phe - Gly) y VC (Val - CIT) enlazadores. El enlazador GGFG responde particularmente a la catepsina L, que permite la liberación casi completa de DXD de su ADC dentro de las 72 horas, mientras que la catepsina B exhibe una actividad mínima en este proceso. Sin embargo, los enlazadores GGFG y VC sufren escisión por la catepsina B en lisosomas o endosomas de células tumorales, lo que garantiza una liberación eficiente del fármaco.
En comparación con el ácido - conmovedores escindibles y de glutatión (GSH) - conlazadores escindibles, el enlazador GGFG ofrece una mayor estabilidad en el torrente sanguíneo, minimizando la liberación de carga útil involuntaria y la mejora de la seguridad de los medicamentos. Del mismo modo, el enlazador VC permanece estable en el plasma y libera efectivamente el fármaco en las células tumorales, asegurando el suministro dirigido.
Dado que los enlazadores escindibles varían en el mecanismo, seleccionar el sistema de escisión correcto es crucial para pruebas de drogas efectivas. Los sistemas de prueba in vitro comunes para la liberación de la carga útil incluyen homogeneizado hepático acidificado (pH 5.0–6.0), fracción hepática S9 acidificada (pH 5.0–6.0), lisosomas hepáticos, células tumorales y enzimas específicas como las catepsinas B, M y L, glucuronidasa, glutatión (GSH) y Legumain. La elección del sistema depende del tipo de enlazador que sea teste
Non - enlazadores escindibles
Los enlazadores no escindibles dependen de la desglose completa de los anticuerpos ADC por proteasas citoplasmáticas y lisosómicas, liberando en última instancia la carga útil adjunta a un producto de degradación de anticuerpos. Sin embargo, su efectividad se basa en gran medida en la alta expresión de antígeno en las células tumorales y la fuerte capacidad de internalización del fármaco conjugado para garantizar la liberación eficiente de la carga útil.
Para estudios in vitro, los sistemas de prueba como el homogeneizado de hígado acidificado, la fracción hepática S9 acidificada y los lisosomas pueden degradar de manera efectiva el componente de anticuerpos, lo que facilita la liberación de carga útil. Estos sistemas son esenciales para evaluar las propiedades farmacocinéticas de los ADC que utilizan enlazadores no afectables.
Palabras clave: enlazador ADC, liberación de carga útil, lisosoma de hígado, estabilidad lisosomal, catabolismo del lisosoma, catepsina B, DS8201A, GGFG - DXD
Tiempo de publicación: 2025 - 03 - 21 12:00:09