Terapia innovadora CGT - Lentivirus - CAR de embalaje - T Células inmunes

Terapia innovadora CGT - Lentivirus - CAR de embalaje - T Células inmunes

La terapia de células inmunes es un tratamiento innovador contra el cáncer que mejora el sistema inmunitario del cuerpo para apuntar y eliminar las células cancerosas. Las formas clave incluyen la terapia de células asesinas inducidas por citocinas, terapia de células T - CAR y terapia de células T. La terapia CAR - T implica la reprogramación de las células T para expresar receptores de antígeno quimérico (CAR) que se dirigen específicamente a las células tumorales, mostrando un éxito significativo en los cánceres hematológicos como la leucemia y el linfoma.

Palabras clave: coche - t, lentiviral, vector lentiviral, lentivirus trazador

Preparación del automóvil - Terapia de células T

En general, los pasos clave para preparar las celdas de automóviles son las siguientes:

Fuente de la figura: Dana - Farber Cancer Institute - CAR T - Los ensayos clínicos de células ayudan a los pacientes con mieloma múltiple a regresar a la salud

1. 1.Sorting (t - aislamiento celular)

El primer paso para preparar las células CAR - T es aislar las células T - de los glóbulos blancos en la sangre periférica del paciente. Las técnicas como la separación de las perlas inmunomagnéticas o la citometría de flujo se usan típicamente para extraer células CD3+- ricas T - de la sangre. Para garantizar la pureza celular, el proceso de clasificación debe ser muy preciso, asegurando que se obtenga un número suficiente de células T - de alta calidad.

2. 2. Estimulación (T - Activación celular)

Las células t - extraídas se activan in vitro, generalmente usando unKit de activación /expansión de células CD3 /CD28 T -. Las células T activadas ingresan a un estado activo, preparándolas para la transfección génica. A través de este proceso, la función de las células T aumenta, lo que contribuye a la modificación y amplificación genética posteriores.

3. 3. Transfección (edición de genes)

Las células T activadas sufren transfección génica para expresar un receptor de antígeno quimérico (CAR). Este proceso generalmente usavector lentiviralpara introducir genes automovilísticos en células T. El lentivirus es una herramienta efectiva de transducción de genes, con la ventaja de integrar de manera estable el gen objetivo (como el gen del automóvil) en el genoma celular. Al infectar las células T y transfectar el gen CAR al ADN de células T, el lentivirus permite que las células T expresen automóviles a largo plazo. El gen del automóvil incluye un solo fragmento variable de cadena (SCFV) de un anticuerpo que permite a las células T reconocer antígenos específicos en la superficie de las células tumorales e iniciar una respuesta inmune activando regiones de señalización de las células T. Como se muestra en la Figura 2. La transfección lentiviral tiene las características de alta eficiencia y estabilidad, de modo que el gen del automóvil se puede expresar en las células T durante mucho tiempo.

Figura Figura: Singapur CAR - Terapia de células T

4. 4. Amplificación (proliferación celular)

Después de la transfección, las células CAR - T ingresan a la etapa de amplificación, donde factores de crecimiento comoIL - 2se agregan para promover la proliferación celular. El propósito de este proceso es garantizar que un número suficiente de células T CAR esté disponible para una eventual infusión en el paciente. El proceso de amplificación debe realizarse en condiciones estériles para garantizar la calidad y cantidad de células.

5. 5. Control de calidad (QC)
6. Antes de reinfusión en el paciente, el control de calidad es crucial durante el proceso de preparación. El automóvil preparado - Las células T experimentan pruebas estrictas paraGarantizar su pureza, actividad, eficiencia de transfección y cumplimiento de los estándares de tratamiento. Además, las pruebas de contaminación celular o reacciones adversas son necesarias para garantizar la seguridad y la eficacia terapéutica de las células después de la reinfusión en el paciente.

IMortance de la transfección de lentivirus en células inmunes

La tecnología de transfección lentiviral es crucial en la terapia de células inmunes, especialmente para la edición de genes e ingeniería celular. Los vectores lentivirales, derivados del VIH modificado, se usan ampliamente debido a su capacidad para integrar genes en el genoma del huésped, asegurando la expresión estable a largo plazo. Pueden infectar las células divisorias y no divisorias, y su seguridad se ha mejorado modificando los genes clave para evitar la replicación. Estos vectores ahora se usan comúnmente en terapia génica, edición de genes e investigación de biología celular para su eficiencia y durabilidad en la entrega de genes.

Fuente de la figura: Obiosh.com/product/ Diagrama esquemático del envasado de lentivirus y proceso de transfección del lentivirus en células 293T

1.Feficiente Transducción de genes

El vector lentiviral puede administrar eficientemente genes diana, como el gen CAR, en células inmunes e integrar estos genes de manera estable en el genoma celular, asegurando que el gen del automóvil se exprese continuamente durante la división y la proliferación celular. Esta capacidad de transducción de alta eficiencia es fundamental para el éxito de la inmunoterapia.

2. inmunogenicidad a la baja 

En comparación con otros vectores virales, los lentivirus tienen una inmunogenicidad más baja. Como resultado, cuando los lentivirus se usan para transducir células inmunes, el sistema inmunitario del paciente genera una respuesta inmune relativamente más débil al virus. Esto ayuda a minimizar las reacciones adversas, particularmente en la supervivencia a largo plazo de las células después de la infusión, evitando así el rechazo inmune excesivo.

3. Alta adaptabilidad a las células inmunes

El vector lentiviral es capaz de transducir eficientemente varios tipos de células inmunes,particularmente las células T y las células NK. A través de la transducción lentiviral, las células inmunes pueden adquirir habilidades de reconocimiento tumorales, mejorando así su capacidad para apuntar y matar células tumorales.

4. Precisión de células efectoras transducidas en el reconocimiento de células objetivo 

En inmunoterapia,células efectoras transducidasConsulte las células inmunes que, después de la transducción, expresan CAR y ejercen la actividad anti - Los vectores lentivirales pueden administrar con precisión el gen CAR en estas células efectoras, lo que les permite reconocer y atacar a las células tumorales.Células dianason las células tumorales que son identificadas y destruidas por estas células inmunes. A través de la transducción lentiviral, las células inmunes pueden mejorar su especificidad para reconocer y matar las células tumorales, mejorando así la eficacia terapéutica.

En este contexto, iPhase, líder en reactivos de investigación in vitro, ha desarrollado un kit de envasado de lentivirus y un reactivo de concentración de lentivirus para simplificar la complejidad de la transducción para los clientes de inmunoterapia y mejorar la tasa de éxito de la transfección genética estable. Estos productos ofrecen una solución única para los clientes.

Lentivirus de iPhasePsecuaces

El kit de envasado de lentivirus iPhasecontiene todos los reactivos esenciales requeridos paraembalaje de lentivirus, simplificando significativamente el proceso experimental y el ahorro de tiempo y esfuerzo. Este kit incluye:

• Mezcla de plásmido de envasado de lentivirus
• Reactivo transfecto
• plásmido EGFP
• Reactivo de concentración de lentivirus de iPhase

¡Este kit realmente agiliza el experimento! Sin necesidad de una preparación complicada de reactivos, el envasado de lentivirus se puede completar de manera eficiente simplemente siguiendo las instrucciones incluidas.Las ventajas únicas del kit incluyen un tiempo de embalaje corto, un alto título viral y una operación fácil, lo que lo convierte en ideal para principiantes en el envasado de lentivirus. Cada conjunto de reactivos sufre un estricto control de calidad para garantizar resultados precisos, confiables y reproducibles, mejorando significativamente la eficiencia de la transfección y la estabilidad de los vectores virales, proporcionando así un potente soporte técnico para la preparación de células inmunes.

Además, para ayudar a los clientes a ahorrar costos, iPhase también ha desarrollado y producido el reactivo de concentración de lentivirus, ofreciendo una solución de concentración rápida y simple.Simplemente mezclando el sobrenadante del lentivirus con el reactivo de concentración, seguido de una breve incubación y centrifugación utilizando una centrífuga estándar, las partículas lentivirales pueden concentrarse rápidamente. Este proceso no requiere una ultracentrífuga, lo que lo convierte en una opción conveniente y de costo - efectivo para la mayoría de los usuarios de laboratorio.

En resumen, el reactivo de concentración de lentivirus de iPhase no solo mejora significativamente la eficiencia de la transfección, sino que también proporciona soporte de vectores virales de alta calidad para la preparación de células inmunes. Es un producto esencial para experimentos de rutina, investigación preclínica y otras áreas de aplicación.

En resumen, la inmunoterapia, particularmente las terapias de células de automóviles y CAR - NK, representa una nueva dirección en el tratamiento moderno del cáncer. A través de procesos precisos como la clasificación celular, la activación, la transducción, la expansión y el control de calidad, los científicos pueden preparar productos de células inmunes eficientes y seguros para pacientes, lo que permite el tratamiento dirigido contra el cáncer.La transducción lentiviral, como tecnología central, juega un papel fundamental en la preparación de las células CAR y CAR - NK debido a su alta eficiencia y estabilidad.Con avances tecnológicos continuos, la inmunoterapia tiene el potencial de ofrecer opciones de tratamiento innovadoras para más pacientes, proporcionando un mayor valor clínico. En el futuro, se espera que la inmunoterapia traiga una esperanza terapéutica revolucionaria a más pacientes con cáncer.

Para satisfacer las necesidades de la transducción de genes, la expresión y la investigación de la enfermedad, la iPhase ofrece kits de envasado de lentivirus, reactivos de concentración de lentivirus y lentivirus trazadores. Estos lentivirus trazadores están empaquetados con proteína fluorescente verde (GFP), proteína fluorescente roja mCherry y luciferasa, lo que permite un seguimiento fácil de las células objetivo tanto in vitro como in vivo.

Además, iPhase Can también ofrece dos lentivirus de trazador pre - empaquetado: GFP y luciferasa y Mcherry & Luciferase. Estos trazadores se pueden seleccionar o combinar en función de las necesidades experimentales, racionalizar los flujos de trabajo y mejorar la eficiencia para el seguimiento y el monitoreo de tiempo de tiempo real de las células objetivo.

IcaseImunoterapiaRexaltadoPsecuaces

Además de los productos relacionados con el lentivirus utilizados en las terapias CAR - T o CAR - NK, la iPhase, como líder en reactivos de investigación in vitro, también ha realizado contribuciones significativas para apoyar las innovaciones en CGT (terapia celular y génica) y otros campos. IPhase ha desarrollado y producido leucocitos y PBMC (células mononucleares de sangre periférica) aisladas a través de la leucaféresis, junto con varios kits de aislamiento de células inmunes, para apoyar el rápido desarrollo de inmunoterapia.

Los productos de iPhase ofrecen las siguientes ventajas yUn certificado de análisis (COA)Verificado por iPhase está disponible para cada lote.

Seguridad 

Los productos de iPhase se obtienen de donantes/animales saludables que se han sometido a una preliminar exhaustiva, con resultados negativos para pruebas virales (VIH - 1/2, VHB, VHC, sífilis).

Cumplimiento  

IPhase proporciona formularios de consentimiento informado firmados por los donantes, con verificación de fuente clara y rastreable.

Profesionalismo

Los productos proporcionados por iPhase, obtenidos a través de leucaféresis, son manejados por profesionales capacitados. Cada lote se acompaña de un COA correspondiente, y los productos se transportan bajo una estricta cadena de frío para garantizar la seguridad, la entrega rápida y el garantía de calidad.

Servicio al cliente

IPhase ofrece alta calidad después del servicio de ventas, asegurando una experiencia fluida e ininterrumpida durante todo el proceso de prueba.