Plasmavalkude sidumisdünaamika: tasakaaludialüüsi ja ultrafiltreerimismeetodid ning kasutamine DDIS -is

Märksõnad: Tasakaalu dialüüs, ultrafiltratsioon, plasmavalkude seondumine (PPB), plasmavalgu (BRPP) seondumiskiirus, tasakaalu dialüüsiseade, tasakaalu dialüüsi membraan, kiire tasakaaludialüüs (punane), ravim - ravimi interaktsioonid (DDI), ADME, ADME

Sissejuhatus

Farmakokineetilistes uuringutes, Plasmavalkude sidumine (PPB) ja Plasmavalgu (BRPP) seondumiskiirus toimige ühendi farmakoloogilise käitumise pöördeliste määrajatena, mõjutades otseselt selle imendumist, jaotust, ainevahetust ja eritumist (Adm) omadused. Ühendid, millel on kõrgePlasmavalkude sidumine (PPB)Näidake piiratud vaba fraktsiooni kättesaadavust, moduleerides seeläbi terapeutilist efektiivsust ja ohutust. Samaaegselt pakub BRPP ravimi kineetilist eraldusvõimet - valkude interaktsioonid, selgitades välja ajalise seondumise dünaamika. Nende parameetrite täpsusega kvantifitseerimiseks Tasakaalu dialüüs ja Ultrafiltratsioon töötavad rutiinselt, eriti hindamisel ravim - ravimite koostoimed (DDI) ja ravimite väljatöötamise torustikud.

Tasakaalu dialüüs (toim)

Tasakaalu dialüüs on klassikaline biokeemiline tehnika PPB ja BRPP mõõtmiseks. SelleTasakaalu dialüüsiseadetöötab kahte kambrit, mis on eraldatud poolpaelaga tasakaalu dialüüsi membraan: Üks külg sisaldab makromolekuli -ligandi segu ja teine ​​ainult puhver. Aja jooksul liiguvad vabalt hajuvad ligandid üle tasakaaludialüüsi membraani, kuni nende kontsentratsioon on mõlemal küljel võrdne (tasakaal), samal ajal kui valguga seotud ligandid jäävad makromolekuli poolele, kuna need ei saa membraani pooride läbida. Mõõdetes ligandi kontsentratsioonid puhvri poolel pärast tasakaalu saavutamist, saavad teadlased määrata ligandi vaba fraktsiooni ja võrreldes kogu ligandi lisatud sidumise afiinsusi, mahutavust või vaba ravimite taset bioloogilistes proovides. Tasakaalu dialüüsi eeliseks on see, et see on väga täpne, kuid see on aeg - Tavalise tasakaaludialüüsiseadme tasakaalustamiseks kulub 3 - 48 tundi.

Kiire tasakaalu dialüüs (punane)

Kiire tasakaalu dialüüs(Punane)on klassikalise tasakaaludialüüsi suure läbilaskevõimega kohandamine, mis on loodud väikeste molekulide - tüüpiliselt ravimite - sidumata (vaba) fraktsiooni kiirendamiseks ja sujuvamaks muutmiseks keerukates bioloogilistes maatriksites. Kiire tasakaalu dialüüsi korral asetatakse proovid (nt ravimproteiinkompleksid sisaldavad plasma) ja puhver mitmekesise plaadi külgnevasse kambritesse, mis on eraldatud poolhaaval tasakaaludialüüsi membraaniga; Optimeeritud membraani pindala, plaadi kujundamine ja kontrollitud agitatsioon võimaldavad tasakaalu saavutada vaid mõne tunni jooksul, mitte üleöö. Kuna membraani võib ületada ainult vaba ravim, annab selle kontsentratsiooni kvantifitseerimine puhverkambris pärast tasakaaluga sidumata fraktsiooni. Punane seade on kiirem kui traditsioonilised tasakaaludialüüsiseadmed ilma täpsust ohverdamata, muutes punase ideaalseks paralleelseks ADDE sõelumiseks.

Ultrafiltratsioon

Ultrafiltratsioon on kiire, membraanipõhine eraldamise tehnika, mida kasutatakse vabade (sidumata) väikeste molekulide - näiteks ravimite, metaboliitide või ligandide - eristamiseks suurematest makromolekulidest nagu lahuses olevad valgud. Proov asetatakse pool -poolitava membraani kohale, mille pooride suurus säilitab valke ja valkude ja ligandi komplekse, võimaldades samal ajal vabad molekulid ja lahusti läbi viia rakendatud rõhu või tsentrifugaaljõu all. Kui filtraat teisel pool koguneb, sisaldab see ainult analüüdi sidumata osa; Selle kontsentratsiooni mõõtmisega saavad teadlased otseselt kindlaks teha vaba ravimi või ligandi taseme. Seda suure läbilaskevõimega lähenemisviisi kasutatakse laialdaselt farmakokineetilistes ja ADME uuringutes valgu seondumise hindamiseks ilma ulatusliku inkubatsiooniaega.

Mõju ravimil - ravimite koostoimed (DDIS)

Ravimi- ja tsükli interaktsioonides võivad kaks ainet, millel on samad sidumiskohad, üksteist konkureerivalt tõrjuda, tõstes ajutiselt ümberasumata ravimi sidumata osa; See nihe võib võimendada selle tõhusust või toksilisust ning muuta selle jaotuse ja kliirensi mahtu, kuni taastatakse uus tasakaal. Kliiniliselt on kõrge plasmavalkude sidumisega (PPB) ja plasmavalkude kõrge seondumiskiirusega ravimid selliste nihke interaktsioonide suhtes kõige kalduvamad, seega nõuab kaasmanustamine hoolikat jälgimist ja vajadusel ravimite kokkupuute ootamatute muutuste vältimiseks.

Järeldus

Plasmavalkude sidumise (PPB) ja plasmavalgu (BRPP) seondumise kiiruse mõistmine on farmakokineetika osas pöördeline, kuna need parameetrid mõjutavad kriitiliselt ravimi imendumist, jaotust ja terapeutilist efektiivsust. Sellised tehnikad nagu tasakaal dialüüs (toim), kiire tasakaaludialüüs (punane) ja ultrafiltratsioon pakuvad olulisi vahendeid vabade ravimite fraktsioonide kvantifitseerimiseks ja kineetika sidumiseks. Kui ED on endiselt täpsuse kuldstandard, pakub Red kõrget - läbilaskevõime alternatiivi, mis tasakaalustab kiirust ja täpsust ning ultrafiltratsioon võimaldab kiiret sõeluuringut vaatamata võimalikele täpsusele. Need meetodid on hädavajalikud ravimite hindamisel - ravimite koostoimed (DDIS), kus kõrge valgu konkurentsivõimeline nihkumine Ravimite väljatöötamise edenedes tagab PPB ja BRPP hindamiseks sobivate metoodikate valimine ohutumate terapeutiliste tulemuste, doosi kohandamise ja riske leevendamise kliinilises praktikas. Lõppkokkuvõttes suurendab nende tehnikate integreerimine farmakokineetilistesse uuringutesse meie võimet ennustada ja hallata ravimite käitumist, rõhutades nende olulist rolli ravimite arengu optimeerimisel ja patsientide ravi optimeerimisel.