Zer dira gizakien PBMCak eta immunitatean duten papera?

Giza PBMCs, edo odol periferikoko zelula mononuklearrak, zure odolean zirkulatzen duten zelula immunologikoen multzoa dira. Zelula hauek linfozitoak, monokitoak eta zelula desnrimitikoak daude, bakoitza zure gorputza defendatzeko paper paregabea jokatzen du. Pbmcs-ek babesten zaitu patogeno kaltegarriak identifikatu eta neutralizatuz, bakteriak eta birusak bezala, oreka immunologikoa mantentzen duten bitartean.

Ikerketek erakusten dute PBMCak egonkor mantentzen direla denboran zehar, zelula bideragarritasunarekin% 85etik gorakoa da. Gainera, genearen adierazpena azkar moldatu daiteke. Adibidez, TNFα adierazpena hiru aldiz baino gehiago igo da. Aldakortasun horien garrantzia nabarmentzen du erantzun immunologikoak arautzeko.

Giza PBMCS konposizioa

Linfozitoak: T zelulak, b zelulak eta nk zelulak

Linfozitoak gizakien pbmcs funtsezko osagaia dira. T zelulak, b zelulak eta hiltzaile naturalak (NK) zelulak barne hartzen dituzte, bakoitza immunitatean rol desberdinak ditu. T zelulek erantzun immunologikoak erregulatzen laguntzen dute eta kutsatutako zelulei zuzenean erasotzen diete. B zelulek antigorputzak sortzen dituzte, patogeno kaltegarriak neutralizatzen dituztenak. NK zelulak, bestalde, zelula anormalak xedatu eta suntsitu, esaterako, birusak edo minbizi zelulak kutsatutakoak.

Interesgarria da, gizakien pbmcs-eko linfozito batzuk, CD3 + CD19 + zelula gisa identifikatuta, funtzionalitate bikoitza erakusten du. Zelula hauek T zelulak eta b zelulak bezala egin dezakete. Mehatxuriei erantzuten diete t - gelaxkaren hartzailearen (TCR) eta B - Cell Receptor (BCR) bideak seinaleztatzeko bideak. Eginkizun bikoitz honek umoral eta zelulen erantzun immunologikoetan parte hartzeko aukera ematen die. Adibidez, antigenoak modu eraginkorrean lotzen dituzte B zelulen konbentzionalak baino eta interferonak ekoizten dituzte - gamma (ifn - γ) T zelulen antzeko mailetan.

Monokitoak eta haien funtzio immunologikoak

Monocytes gizakiaren pbmcs-en beste talde bat da. Zelula hauek zure odolean patruilatzen dute, infekzioaren edo ehunen kalteen seinaleak bilatzen. Arazo bat antzematen dutenean, kaltetutako eremura migratzen dute eta makrofagoak edo zelulen dendritikoak eraldatzen dituzte. Makrofagoak patogenoak engainatu eta digeritzen dira, zelula dendritikoek antigenoak beste zelula immunologiko batzuetara aurkezten dituzten bitartean.

Monokituek zitokinak askatzen dituzte, erantzun immunologikoa koordinatzen duten molekulak adierazten dituztenak. Hori eginez gero, zure gorputzak infekzioak edo lesioak modu eraginkorrean erreakzionatzen dituela ziurtatzen dute.

Dendritikoen zelulak eta antigenoaren aurkezpenean duten papera

Dendritikoen zelulak antigeno profesionalak dira - zelulak (APC) aurkezten gizakien pbmcs barruan. Zelulak aktibatzeko funtsezko eginkizuna dute beren gainazalean antigenoak aurkeztuz. Ikerketek erakusten dute dendritiko zelulak CD4 + eta CD8 + naïve zelulak aktibatzeko gai diren APC bakarrak direla. Haien eraginkortasuna antigenoaren digestioa moteltzeko gaitasunetik dator, eta horrek mhc kargatzeko peptidoen eskuragarritasuna areagotzen du.

Zelula hauek ziurtatu dute zure sistema immunologikoak mehatxuak modu eraginkorrean aitortzen eta erantzutea, immunitatean ezinbestekoak direla.

Giza PBMCS isolatzea

PBMCS iturriak: odol periferikoa eta hezur-muin

Giza PBMCS lehen iturri nagusietatik isolatu daiteke: odol periferikoa eta hezur-muinoa. Odol periferikoa iturri ohikoena da irisgarritasuna eta gutxieneko inbaditasuna dela eta. Hezur-muinoak, bestalde, zelula immunologikoentzako ingurune aberatsagoa eskaintzen du, baina prozedura inbaditzaileagoa behar du.

PBMCen etekina eta garbitasuna iturri eta isolamendu metodoaren arabera alda daiteke. Adibidez, ikerketek erakusten dute FICOLL metodo estandarrak errendimendu eta garbitasun handiagoa lortzen duela CPT (Cell Prestaketa Hodi) metodoekin alderatuta. Beheko taulan desberdintasun horiek nabarmentzen dira:

FICOLL Overlay teknika PBMC isolatzeko

Ficoll Overlay teknika PBMCs isolatzeko erabilitako metodoa da. Prozesu honek fikzioaren gaineko odola geruzatzea dakar - Paque Solution eta zentratu zen dentsitatean oinarritutako zelulak bereizteko. PBMCS plasmaren eta fikzioaren arteko geruza bereizgarria osatzen dute, biltzeko errazak bihurtuz.

Ikerketek prozesu honetan zehar maneiatzeak duen garrantzia azpimarratzen dute emaitza koherenteak ziurtatzeko. Adibidez, ikerketa batek aurkitu du Ficoll-ek behar bezala erabiltzea% 97ko garbitasuna lor daitekeela aldakortasun minimoarekin. Beheko taulan PBMC isolatzeko inkubazio metodo desberdinak alderatzen ditu:

Bereizketa immunomagnetikoko metodoak

Bereizketa immunomagnetikoa PBMCS isolatzeko beste teknika aurreratuagoa da. Metodo honek antigorputzak estalitako ale magnetikoak erabiltzen ditu zelula mota zehatzak bideratzeko. Sailkapen positiboak zelulak isolatu ditu, aleak lotuz, eta, hala ere, ordenazio negatiboak nahigabeko gelaxkak kentzen ditu, nahi den biztanleria ukitu gabe utziz.

Ikerketek erakusten dute ordenazio negatiboak zelulen bideragarritasuna mantentzen dutela eta ez du eragina Il - 2r (CD25) bezalako aktibazio-markatzaileei eragiten. Aitzitik, ordenazio positiboek bideragarritasuna eta aktibazio gaitasuna murriztu ditzakete, batez ere estimulazioaren ondoren. Jarraian dagoen taulak aurkikuntza hauek laburbiltzen ditu:

Metodo hau bereziki erabilgarria da ikerketa edo aplikazio terapeutikoentzako zelula populazio oso zehatzak behar dituzunean.

Ikerketa eta Medikuntzako Giza PBMCS aplikazioak

Autoan rola - T zelulen terapia garatzea

Giza Pbmcs-ek paper pibotala dute autoa - T zelulen terapia, zenbait minbizi beharreko tratamendua. Zelula hauek autoa sortzeko - zelulak sortzeko eta minbiziaren zelulak bideratzeko eta suntsitzeko diseinatzen direnak. Baliteke PBMCak nola funtzionatzen duten prozesu honetan. Ikerketek emaitza ikusgarriak erakusten dituzte:

• Kultura 11 egun igaro ondoren, 1 × 10 ^ 7 izoztutako pbmcs gutxienez 1,48 × 10 ^ 9 MESOCAR - T zelulak,% 30 baino gehiagoko autoekin + zelulak.

• Zitotoxikotasun probak Mesocar - Pbmcs fresko eta kriopreserved eratorritako zelulak era berean antzezten dira. Eraginkorrean - To - Target 4: 1-ko ratioa, haien zitotoxikotasuna% 91,02 artean% 100,00 eta% 95,46 artean% 98,07 -% 98,07a, hurrenez hurren.

• 2: 1eko erlazio baxuagoan ere, ez da diferentzia esanguratsua zitotoxikotasunean.

Aurkikuntza horiek PBMCSren fidagarritasuna nabarmentzen dute auto eraginkorra ekoizteko, denbora luzez - epe luzerako biltegia.

Drogak probatzeko eta toxikotasun azterketetan erabiltzea

PBMCs eskerga dira drogak probatzeko eta toxikotasun azterketetan. Giza bat - dagokion eredua eskaintzen dute drogak zelula immunologikoekin nola elkarreragiten duten ebaluatzeko. Adibidez, ikertzaileek PBMCS droga quinacrine probatu dute bere toxikotasuna ebaluatzeko. Beheko taulak aurkikuntzak laburbiltzen ditu:

Emaitza horiek erakusten dute PBMCS-ek aktiboki erantzuteko quinacrine-ri, baita toxikotasun maila baxuetan ere. Horrek tresna immunologikoak iragartzeko tresna fidagarria bihurtzen du droga berriei aurre egiteko.

Biomarker aurkikuntza eta immunitatearen jarraipena

PBMCS funtsezkoak dira biomarkatzaileak identifikatzeko eta osasun immunologikoa kontrolatzeko. Biomarkatzaileak prozesu edo gaixotasun biologikoen adierazle neurgarriak dira. PBMCS aztertuz, jarduera immunologikoa, gaixotasunaren aurrerapena edo tratamenduaren eraginkortasuna agerian uzten dituzten biomarkatzaileak deskubritu ditzakezu. Adibidez, ikertzaileek askotan zitokinaren maila neurtzen dute PBMCS in infekzio edo terapietan erantzun immunologikoak kontrolatzeko. Ikuspegi honek tratamenduak egiten ditu paziente indibidualei, emaitzak hobetuz.

Pbmcs-ek, halaber, epe luzerako jarraipena ahalbidetzen du. Haien egonkortasuna eta egokitasuna apropos bihurtzen dira denboran zehar immunitate-funtzioan aldaketak jarraitzeko. Hau bereziki erabilgarria da gaixotasun kronikoetan edo tratamendu luzeetan zehar.

Giza PBMCak ezinbestekoak dira immunologia ulertzeko eta aurrera egiteko. Haien konposizio-linfozito, monokitoak eta zelulen dendritiko askotarikoak, immunitate-funtzio kritikoak egiteko aukera ematen die. Ficoll gainjartzearen eta bereizketa immunomagnetikoaren bezalako isolamendu teknikak. Garbitasuna lor dezakezu ikerketa edo erabilera terapeutikoetarako pbmcs.

Haien aplikazioek eremu zabala zabaltzen dute:

• Milaka ikasketek PBMCS erabili dute ikerketa klinikoetan azken 50 urteetan.

• Autoentzako ezinbestekoak dira CORES - T zelulen terapia, drogen garapena eta erantzun immunologikoaren azterketa.

• PBMCS-ek biomarkatzailearen aurkikuntza, pazientearen estratifikazio eta gaixotasun arraroen ikerketa laguntzen dute.

PBMCS aprobetxatuz, aukera berriak desblokeatu ditzakezu immunologian eta osasun-laguntza eraldatzen duten tratamendu berritzaileak garatu ditzakezu.

Ohigai

Zertan erabiltzen dira PBMCS ikerketa medikoetan?

PBMCS-ek ikertzaileei erantzun immunologikoak aztertzen laguntzen die, droga berriak probatu eta autoa bezalako terapiak garatzen dituzte zelulen tratamenduak. Haien egokitasuna eta egonkortasuna ezin hobeak dira gizakien zelula immunologikoak behar dituzten esperimentuetarako.

Nola gordetzen dituzu PBMCS etorkizuneko erabilerarako?

Nitrogeno likidoan kriopreserving bidez gorde ditzakezu pbmcs. Metodo honek urtez euren bideragarritasuna eta funtzionaltasuna mantentzen ditu, epe luzeko ikasketak edo aplikazio terapeutikoak erabiltzeko aukera emanez.

Pbmcs globulu zurien berdina al da?

Ez zehazki. PBMCS globulu zurien azpimultzoa da, linfozito, monokitoak eta zelulen dendritikoak. Neutrofiloak bezala granulokitoak baztertzen dituzte, odol zelula zurien parte ere badira.

Gaixotasun autoimmuneak aztertzeko erabil daitezke PBMCak?

Bai! PBMCS baliotsuak dira gaixotasun autoimmuneak aztertzeko. Zelulen portaera immunologikoa, zitokina ekoizpena eta markatzaile genetikoak aztertzen laguntzen dizute, gaixotasun mekanismoei eta tratamendu potentzialei buruzko ikuspegi ugari eskaintzen baitituzte.

PBMC isolamendua prozesu konplikatua al da?

Ez benetan. Ficoll gainjartze metodoa edo bereizketa immunomagnetikoak bezalako teknikek PBMC isolamendua zuzen bihurtzen dute. Prestakuntza eta ekipamendu egokiarekin, altua - garbitasun laginak lor ditzakezu zure ikerketarako.