In vitro droga garraiatzailearen in vitro ebaluazioa: ABC Vesicles eta SLC garraiatzaileen zelulen rolak esploratzea

Keywords: ATP - Kasete loteslea (ABC), ABC garraiatzailea, SLC Transporter, MDRRAren Vesicle, MDR1 (Pa - GP), Mate2 - K, OAT1, OATP1B1, OAT1, transporter inhibizioa, transporta-bitartekotasuna Ikasketak, HEK293 Mock, Mock SLC Transporter.

IPHASE produktuak

Hondo

Aplikazio klinikoetan pazienteek askotan droga ugari erabiltzen dituzte aldi berean, eta droga horiek drogak sor ditzakete - droga-elkarreraginak (DDI), erreakzio kaltegarriak eragin edo tratamenduaren eraginkortasuna aldatzeko ahalmena duten drogak (DDI). DDI ebaluazioa normalean in vitro probak egiten hasten da droga-xedapenean eragina izan dezaketen faktoreak identifikatzeko DDI potentzialen mekanismoak argitzeko eta azterketa gehiago egiteko parametro zinetikoak lortzeko. Entzimak metabolizatzeko drogak DDI ikerketaren ardatza izan da aspaldidanik. Azken urteotan, biologia molekularraren teknologiaren garapenarekin, aurrerapen garrantzitsuak egin dira in vitro droga garraiatzaileen azterketan, eta Transporter-en oinarritutako DDISen in vitro ebaluazioaren garrantzia erakarri du arreta gero eta handiagoa izatea.

Garraiatzaileak eta haien rolak

Transporter Transmembrane proteinak aipatzen dira substantzia endogeno edo exogenoen sartzea eta matrikula biologikoen sarrera eta irteera bitartekatzen dituzten ehun ehunen zelula-zelulen zelulen zelulen mintzaren inguruan. In vitro drogen transporter termino orokorra da drogak substratu gisa hartzen dituzten proteinentzat, zelulen mintzaren gainazalean ehunen edo organoen gainazalean existitzen dira eta Transmembrane drogen garraioaren funtzioa hartzen dute, batez ere bi familiak barne: du ATP - Lotura kasete (ABC)Superfamilia eta solutu superfamilia (SLC garraioa), Transmembrane drogen garraio prozesua menderatzen duena.

ABC garraiatzaileakATP - Menpeko garraiatzaileek hainbat substratu (adibidez, ioiak, lipidoak eta drogak) aktiboki mugitzen dituzte zelulen mintzetan, askotan kontzentrazio gradienteen aurka. Droga erresistentziaren, metabolismoaren eta zelula desintoxikazioan funtsezko rolak betetzen dituzte.SLC garraiatzaileakgehienetan bigarren mailako garraio aktiboak edo errazten dira, glukosa, aminoazidoak eta neurotransmisoreak. ABC garraiatzaileek ez bezala, ez dute ATP behar zuzenean, baina ioi gradienteetan oinarritzen dira.

Droga eflux media bitartekatzen duten garraiatzaileek, batez ere, p - glicoproteina (P - GP), edo Aniztasun Erresistentzia 1 Proteina (MDR1), Bularreko Minbiziaren Erresistentzia Proteina (BCRP). ATPko kideak dira - Loting Cassette (ABC) garraiatzailearen familia, drogak eta substantzia endogenoak garraiatzeko ATP hidrolizatuaren energia erabiltzen dutenak. Drogak zelulan sartzea bitartekatzen duten garraiatzaileek substratuak har ditzakete efektu farmakologikoak egiteko eta, batez ere, anioi organikoko kideak (OATPS), anio anitzeko estrukturako proteinak (lagunak), Cation Transporter Organikoa, etab.

Gako garraiatzaileak eta haien rolak:

• -BSep(Bile Gatza esportatzeko ponpa):Gibeleko azido kiderako kitikoa, BSP disfuntzioak gibeleko gaixotasunarekin lotuta dago. Droga - Induced -- BSP inhibizioak hepatotoxikotasuna eragin dezake.
• -Bcr(Bularreko Minbiziaren Erresistentzia Proteina):BCRP-k kimioterapeutikoen eta antiviralen biodibertsitateari eragiten dio, zeluletatik substratuak esportatzen ditu eta plazentratu eta odolean eragiteko garuna hesiaren barneratzea.
• -Mate1 / mate2 - k(Multidrug eta toxina estrusio proteinak):Mate1 eta Mate2 - Kide Hepatikoen, Mate1 eta Mate2 - Koprokatutako droga kationikoak, urriaren sinergikoki lan eginez, uraren sekrezioa bitartekatzeko.
• -Oatp1b1(SLCO1B1):Estatistikarako iraupen hepatikoa kritikoa da. OATP1B1-ek funtsezko eginkizuna du konposatu endogenoen eta, hala nola, azido bilirubikoa, bilirubina, esteroidea - konposatu esteroideak eta tiroide hormonak, baita estatinak, antibiotikoak, antiviralak eta antigorputzak bezalako droga klinikoen sorta hepatikoa ere.
• -OAT1(SLC22A6):Anionen giltzurruneko upentsak mediatzen ditu, besteak beste, antiviralak eta naidak, nefrotoxikotasun arriskuan eragina izatea.

Transporter Inhibizioa eta DDI

Transporter inhibizioadrogen garapenaren funtsezko alderdia da. Transporter Inhibizioak drogetan drogak (DDI) funtsezko eginkizuna du. MDR1 (P - GP) eta BCRP bezalako efflux garraiatzaileen inhibizioak drogen zelularen estrusioa murriztu dezake, eta litekeena da kontzentrazio zelular eta sistemiko handiagoak. Era berean, OATP1B1 bezalako uptake garraiatzaileek inhibitzeak droga hepatikoen baimena gutxitu dezake, eta BSP inhibizioak azido azidoen garraioa oztopatu dezake, kolestasiaren arriskua areagotzeko. Gainera, Mate1, Mate2 - K bezalako garraiatzaileek, inhibitzen dutenean, giltzurruneko drogak ezabatzeko funtsezkoak diren garraiatzaileak giltzurruneko kanporatzea aldatu eta drogen metaketa lagundu dezake. In vitro ereduetan, barneMDCK IIetaCaco - 2Zelulen lerroak, garraio-interakzio horiek ebaluatzeko oso erabiliak dira, DDI garapenean DDI potentzialaren funtsezko ikuspegiak eskainiz.

Garraioterako ikasketetarako in vitro ereduak

Transporter Funtzioa ulertzea eta transporter aurreikustea - Medikozko DDISek zelula eredu espezializatuetan oinarritzen dira. Ikertzaileek erabiltzen duteHek293 isekaZelulak kontrol negatibo gisa, ikusitako edozein garraio garraiatzaile espezifiko dela ziurtatuz. HEK293 iseka hondo koherentea da, HEK293 iseka funtsezkoa da berezitasun esperimentala balioztatzeko. Metodo batek erabiltzen duMintz VesiclesZeluletatik gainbegiratzeko garraiatzaileek, askotan HEK293 iseka zeluletatik isolatuta. Era berean,Mock SLC TransporterEreduak funtsezkoak dira garraiolari jarduera zehatzak ezabatzeko. Mock SLC Transporter-ek baieztatu du ikusitako substratuaren mugimendua garraiatzailea dela eta Menpekoa eta MOCK SLC Transporter esperimentuek ereduaren fidagarritasuna indartzen dute. Ikuspegi bikoitza HEK293 iseka eta Mock SLC garraiatzailearen bidez, ATP - Menpeko garraioa ikasteko gaitasuna hobetzen da, metabolismo zelularraren interferentziarik egin gabe.

CACO - 2 gelaxka-lerroa, giza koloneko kartzinomatik eratorritakoa, hesteetako drogen xurgapena simulatzeko erabiltzen den beste eredu estandarra da. Enterokitoetan bereizteko duen gaitasuna - hainbat garraiatzaile adierazten dituzten zelulak bezala, esaterako, P - GP eta BCRP-rekin, drogen iragazkortasuna eta potentzialtasuna duten elkarrekintzak ebaluatzeko aukera ematen du.

Gainera, garraiolaria - Giza BCRP espreskitutako zelulek bezalako eredu zehatzek substratuaren berezitasuna, drogen garraioaren portaera zinetikoa eta inhibitzaileek garraiatzaileen jarduera modulatu dezakete. Azterketa vesikularren datuekin konbinatuta daudenean, sistema zelularrek ikuspegi integralak eskaintzen dituzte garraiatzailearen dinamikan - bitartekaritza drogaren xedapena.

Bukaera

Laburbilduz, garraio-elkarreraginak ulertzea ezinbestekoa da drogen segurtasuna eta eraginkortasuna optimizatzeko. MDR1 (P - GP), BCRP eta BSPS-rekin egindako garraiatzaileek, OATP 1B1 eta OAT1 SLC garraiatzaileek egindako rol kritikoak egiten dituzte droga farmakokinetika. MDCK II, CACO - 2, CACO MDRP-en erabilerak, eta Giza MDR1 KNOCIN MDCK II zelulak barne, esparru sendoa eskaintzen du garraiatzailearen inhibizioak drogen arteko interakzioak eta droga-xedapen orokorra nola eragin dezakeen ulertzeko. Ikuspegi hauek eskerga dira drogak eraginkortasuna eta segurtasuna ezarpen klinikoetan optimizatzeko.