Mitkä ovat ihmisen PBMC: t ja niiden rooli immuniteetissa?

Ihmisen PBMCS tai perifeeriset veren mononukleaariset solut ovat kriittinen ryhmä immuunisoluja, jotka kiertävät verenkiertoa. Nämä solut sisältävät lymfosyytit, monosyytit ja dendriittisolut, joista jokaisella on ainutlaatuinen rooli kehon puolustamisessa. PBMC: t suojaavat sinua tunnistamalla ja neutraloimalla haitallisia taudinaiheuttajia, kuten bakteereja ja viruksia, pitäen samalla immuunitasapainoa.

Tutkimukset osoittavat, että PBMC: t ovat ajan myötä vakaita, solujen elinkyky on yli 85% useimmissa näytteissä. Lisäksi niiden geeniekspressio voi sopeutua nopeasti. Esimerkiksi TNFa -ekspressio kasvaa yli kolminkertaisesti muutamassa tunnissa. Tällainen monipuolisuus korostaa niiden merkitystä immuunivasteiden säätelyssä.

Ihmisen PBMC: n koostumus

Lymfosyytit: T -solut, B -solut ja NK -solut

Lymfosyytit ovat elintärkeä komponentti ihmisen PBMC: issä. Niihin kuuluvat T -solut, B -solut ja luonnolliset tappaja (NK) -solut, joista jokaisella on selkeät roolit immuniteetissa. T -solut auttavat säätelemään immuunivasteita ja hyökkäävät suoraan tartunnan saaneisiin soluihin. B -solut tuottavat vasta -aineita, jotka neutraloivat haitallisia taudinaiheuttajia. NK -solut puolestaan ​​kohdistavat ja tuhoavat epänormaalit solut, kuten virusten tai syöpäsolujen tartunnan saaneet.

Mielenkiintoista on, että joillakin ihmisen PBMC: ien lymfosyytteillä, jotka on tunnistettu CD3+ CD19+ -soluiksi, on kaksoisfunktionaalisuus. Nämä solut voivat toimia kuten sekä T -solut että B -solut. Ne reagoivat uhkiin T - solureseptorin (TCR) ja B - solureseptorin (BCR) signalointireittien kautta. Tämä kaksoisrooli antaa heidän osallistua sekä humoraalisiin että solujen immuunivasteisiin. Esimerkiksi ne sitovat antigeenejä tehokkaammin kuin tavanomaiset B -solut ja tuottavat interferonin - Gamma (IFN - γ) T -solujen kaltaisilla tasoilla.

Monosyytit ja niiden immuunitoiminnot

Monosyytit ovat toinen avainryhmä ihmisen PBMC: ssä. Nämä solut partioivat verenkiertosi etsivät tartuntaa tai kudosvaurioita. Kun he havaitsivat ongelman, ne siirtyvät vaurioituneelle alueelle ja muuttuvat makrofageiksi tai dendriittisoluiksi. Makrofagit imevät ja sulavat patogeenit, kun taas dendriittisolut esittävät antigeenejä muihin immuunisoluihin.

Monosyytit vapauttavat myös sytokiineja, jotka ovat signalointimolekyylejä, jotka auttavat koordinoimaan immuunivastetta. Näin tekemällä he varmistavat, että kehosi reagoi tehokkaasti infektioihin tai vammoihin.

Dendriittisolut ja niiden rooli antigeenin esityksessä

Dendriittisolut ovat ammattimaisia ​​antigeeniä - Esitetyt solut (APC) ihmisen PBMC -soluissa. Niillä on ratkaiseva rooli T -solujen aktivoinnissa esittämällä antigeenejä pinnallaan. Tutkimukset osoittavat, että dendriittisolut ovat ainoat APC: t, jotka kykenevät aktivoimaan sekä CD4+ että CD8+ naiivit T -solut. Niiden tehokkuus johtuu heidän kyvystään hidastaa antigeenien ruuansulatusta, mikä lisää peptidien saatavuutta MHC -kuormitukseen.

Nämä solut varmistavat, että immuunijärjestelmäsi tunnistaa ja reagoi tehokkaasti uhkiin, mikä tekee niistä välttämättömiä immuniteettia.

Ihmisen PBMC: n eristäminen

PBMC: n lähteet: perifeerinen veri ja luuydin

Ihmisen PBMC: t voidaan eristää kahdesta ensisijaisesta lähteestä: perifeerinen veri ja luuydin. Perifeerinen veri on yleisin lähde sen saavutettavuuden ja minimaalisen invasiivisuuden vuoksi. Luuydin puolestaan ​​tarjoaa rikkaamman ympäristön immuunisoluille, mutta vaatii invasiivisemman toimenpiteen.

PBMC: ien saanto ja puhtaus voivat vaihdella lähteen ja eristysmenetelmän mukaan. Esimerkiksi tutkimukset osoittavat, että standardi Ficoll -menetelmä saavuttaa suuremman saannon ja puhtauden verrattuna CPT (solujen valmistusputken) menetelmiin. Alla oleva taulukko tuo esiin nämä erot:

Ficoll Peverlay -tekniikka PBMC: n eristämiseen

Ficoll Peverlay -tekniikka on laajalti käytetty menetelmä PBMC: ien eristämiseen. Tämä prosessi käsittää veren kerrostamisen Ficoll - paque -liuoksen päälle ja sentrifugoimalla solujen erottamiseksi tiheyden perusteella. PBMC: t muodostavat erillisen kerroksen plasman ja Ficollin välillä, mikä tekee niistä helpon kerätä.

Tutkimukset korostavat asianmukaisen käsittelyn merkitystä tämän prosessin aikana johdonmukaisten tulosten varmistamiseksi. Esimerkiksi yhdessä tutkimuksessa havaittiin, että Ficollin käyttäminen oikein voi saavuttaa jopa 97%: n puhtauden minimaalisella vaihtelulla. Alla olevassa taulukossa verrataan erilaisia ​​inkubaatiomenetelmiä PBMC: n eristämiseen:

Immunomagneettiset erotusmenetelmät

Immunomagneettinen erotus on toinen edistyksellinen tekniikka PBMC: n eristämiseksi. Tämä menetelmä käyttää magneettihelmiä, jotka on päällystetty vasta -aineilla tiettyjen solutyyppien kohdistamiseen. Positiiviset lajittelut eristävät solut sitomalla ne helmiin, kun taas negatiivinen lajittelu poistaa ei -toivotut solut jättäen halutun populaation koskemattomiksi.

Tutkimukset osoittavat, että negatiivinen lajittelu ylläpitää solujen elinkykyä eikä vaikuta aktivointimarkkereihin, kuten IL - 2R (CD25). Sitä vastoin positiivinen lajittelu voi vähentää elinkykyisyyttä ja aktivointia, etenkin stimulaation jälkeen. Alla olevassa taulukossa on yhteenveto näistä havainnoista:

Tämä menetelmä on erityisen hyödyllinen, kun tarvitset erittäin erityisiä solupopulaatioita tutkimukseen tai terapeuttisiin sovelluksiin.

Ihmisen PBMC: n sovellukset tutkimuksessa ja lääketieteessä

Rooli autojen soluhoidon kehittämisessä

Ihmisellä PBMC: llä on keskeinen rooli auton - T -soluterapian edistämisessä, tiettyjen syöpien uraauurtavasta hoidosta. Nämä solut toimivat aloitusmateriaalina autojen - T -solujen tuottamiseksi, jotka on suunniteltu kohdistamaan ja tuhoamaan syöpäsolut. Saatat ihmetellä, kuinka tehokkaat PBMC: t ovat tässä prosessissa. Tutkimukset paljastavat vaikuttavia tuloksia:

• 11 viljelmän jälkeen 1 × 10^7 jäädytetyt PBMC: t voivat tuottaa vähintään 1,48 × 10^9 mesokarin - T -soluja, yli 30% CAR+ -soluilla.

• Sytotoksisuuskokeet osoittavat, että tuoreista ja kylmäsäilytetyistä PBMC: stä johdetut mesokarin - T -solut toimivat samalla tavalla. Efektorissa - - Kohdisuhde 4: 1, niiden sytotoksisuus vaihtelee välillä 91,02%- 100,00% - 95,46%- 98,07%.

• Jopa pienemmällä suhteella 2: 1, sytotoksisuuden merkittävää eroa ei havaita.

Nämä havainnot korostavat PBMC: ien luotettavuutta tehokkaiden autojen - T -solujen tuottamisessa, jopa pitkän - termin varastoinnin jälkeen.

Käyttö huumetestauksissa ja toksisuustutkimuksissa

PBMC: t ovat korvaamattomia lääkkeen testauksessa ja toksisuustutkimuksissa. Ne tarjoavat ihmisen - merkityksellisen mallin arvioidakseen, kuinka lääkkeet ovat vuorovaikutuksessa immuunisolujen kanssa. Esimerkiksi tutkijat ovat testanneet lääkkeen kinakriinia PBMC: llä sen toksisuuden arvioimiseksi. Alla olevassa taulukossa on yhteenveto havainnoista:

Nämä tulokset osoittavat, että PBMC: t reagoivat aktiivisesti kinakriiniin, jopa alhaisella myrkyllisyydellä. Tämä tekee heistä luotettavan työkalun immuunivasteiden ennustamiseen uusille lääkkeille.

Biomarkkereiden löytö ja immuunivalvonta

PBMC: t ovat välttämättömiä biomarkkereiden tunnistamiseksi ja immuuniterveyden seuraamiseksi. Biomarkkerit ovat biologisten prosessien tai sairauksien mitattavissa olevia indikaattoreita. Analysoimalla PBMC: t voit paljastaa biomarkkerit, jotka paljastavat immuunijärjestelmää, sairauden etenemistä tai hoidon tehokkuutta. Esimerkiksi tutkijat mittaavat usein sytokiinitasoja PBMC: ssä immuunivasteiden seuraamiseksi infektioiden tai terapioiden aikana. Tämä lähestymistapa auttaa räätälöimiä hoitoja yksittäisille potilaille parantamalla tuloksia.

PBMC: t mahdollistavat myös pitkän - termin immuunijärjestelmän. Niiden vakaus ja sopeutumiskyky tekevät heistä ihanteellisia immuunijärjestelmän muutosten seuraamiseen ajan myötä. Tämä on erityisen hyödyllistä kroonisissa sairauksissa tai pitkittyneiden hoidojen aikana.

Ihmisen PBMC: t ovat välttämättömiä immunologian ymmärtämisessä ja edistämisessä. Niiden monipuolinen koostumuksensa - lymfosyytit, monosyytit ja dendriittisolut - saa ne aikaan kriittisten immuunitoimintojen suorittamiseksi. Eristämistekniikat, kuten Ficoll -peittokuva ja immunomagneettinen erotus, varmistavat, että voit saada korkean - puhtauden PBMC: t tutkimusta tai terapeuttista käyttöä varten.

Niiden sovellukset kattavat laajan valikoiman kenttiä:

• Tuhannissa tutkimuksissa on käytetty PBMC: tä kliinisessä tutkimuksessa viimeisen 50 vuoden aikana.

• Ne ovat elintärkeitä autojen - T -soluterapialle, lääkkeen kehitykselle ja immuunivasteen analyysille.

• PBMC: t edistävät biomarkkereiden löytämistä, potilaan kerrostumista ja harvinaisten sairauksien tutkimusta.

Hyödyntämällä PBMC: itä voit avata uusia immunologian mahdollisuuksia ja kehittää innovatiivisia hoitoja, jotka muuttavat terveydenhuoltoa.

Faq

Mihin PBMC: iin käytetään lääketieteellisessä tutkimuksessa?

PBMC: t auttavat tutkijoita tutkimaan immuunivasteita, testaamaan uusia lääkkeitä ja kehittämään hoitoja, kuten CAR - T -soluhoito. Niiden sopeutumiskyky ja stabiilisuus tekevät heistä ihanteellisia kokeisiin, jotka vaativat ihmisen immuunisoluja.

Kuinka säilytät PBMC: t tulevaa käyttöä varten?

Voit säilyttää PBMC: t kryoperseroimalla ne nestemäisessä typessä. Tämä menetelmä ylläpitää niiden elinkelpoisuutta ja toiminnallisuuttaan vuosien ajan, jolloin voit käyttää niitä pitkissä - termitutkimuksissa tai terapeuttisissa sovelluksissa.

Ovatko PBMC: t samat kuin valkosolut?

Ei tarkalleen. PBMC: t ovat osa valkosoluja, jotka sisältävät lymfosyytit, monosyytit ja dendriittisolut. Ne sulkevat pois granulosyytit, kuten neutrofiilit, jotka ovat myös osa valkosoluja.

Voidaanko PBMC: tä käyttää autoimmuunisairauksien tutkimiseen?

Kyllä! PBMC: t ovat arvokkaita autoimmuunisairauksien tutkimiseksi. Ne auttavat sinua analysoimaan immuunisolujen käyttäytymistä, sytokiinien tuotantoa ja geneettisiä markkereita tarjoamalla tietoa sairausmekanismeista ja mahdollisista hoidoista.

Onko PBMC: n eristäminen monimutkainen prosessi?

Ei oikeastaan. Tekniikat, kuten Ficoll Overlay -menetelmä tai immunomagneettinen erotus, tekevät PBMC: n eristämisestä suoraviivaisen. Oikealla koulutuksella ja laitteilla voit saavuttaa korkeat - puhtausnäytteet tutkimuksellesi.