CGT Thérapie innovante - Lentivirus - Car d'emballage - T cellules immunitaires

CGT Thérapie innovante - Lentivirus - Car d'emballage - T cellules immunitaires

La thérapie par cellules immunitaires est un traitement contre le cancer innovant qui améliore le système immunitaire du corps pour cibler et éliminer les cellules cancéreuses. Les formes clés comprennent la cytokine - Thérapie cellulaire tueuse induite, thérapie par cellule T - et thérapie par cellule T - T. La thérapie par la voiture implique la reprogrammation des cellules T pour exprimer les récepteurs de l'antigène chimérique (CAR) qui ciblent spécifiquement les cellules tumorales, montrant un succès significatif dans les cancers hématologiques comme la leucémie et le lymphome.

Mots-clés: voiture - t, vecteur lentiviral, lentiviral, lentivirus traceur

Préparation de la thérapie des cellules TO -

En général, les étapes clés pour préparer les cellules de voiture sont les suivantes:

Source de la figure: Dana - Farber Cancer Institute - Car T - Les essais cliniques cellulaires aident les patients atteints de myélome multiple à retourner en santé

1. 1.Sort (t - isolement cellulaire)

La première étape de la préparation des cellules de voiture consiste à isoler les cellules T - des globules blancs dans le sang périphérique du patient. Des techniques telles que la séparation des billes immunomagnétiques ou la cytométrie en flux sont généralement utilisées pour extraire les cellules T - riches CD3 + - riches du sang. Pour assurer la pureté cellulaire, le processus de tri doit être très précis, garantissant qu'un nombre suffisant de cellules t - de qualité élevées sont obtenues.

2. 2. stimulation (T - Activation cellulaire)

Les cellules T - extraites sont activées in vitro, en utilisant généralement unKit d'activation / expansion CD3 / CD28 T -. Les cellules T activées entrent dans un état actif, les préparant à la transfection des gènes. Grâce à ce processus, la fonction des lymphocytes T est améliorée, contribuant à la modification génétique et à l'amplification ultérieures.

3. 3.Transfection (édition de gènes)

Les cellules T activées subissent une transfection du gène pour exprimer un récepteur de l'antigène chimérique (CAR). Ce processus utilise généralementvecteur lentiviralpour introduire des gènes de voiture dans les cellules T. Le lentivirus est un outil de transduction du gène efficace, avec l'avantage d'intégrer de manière stable le gène cible (comme le gène de la voiture) dans le génome cellulaire. En infectant les cellules T et en transfectant le gène de la voiture en ADN des lymphocytes T, le lentivirus permet aux cellules T d'exprimer des voitures longues - terme. Le gène de la voiture comprend un seul fragment variable de chaîne (SCFV) d'un anticorps qui permet aux cellules T de reconnaître des antigènes spécifiques à la surface des cellules tumorales et de déclencher une réponse immunitaire en activant les régions de signalisation des cellules T. Comme le montre la figure 2. La transfection lentivirale a les caractéristiques d'une grande efficacité et de la stabilité, de sorte que le gène de la voiture peut être exprimé dans les cellules T pendant longtemps.

Source de la figure: Thérapie des cellules T de Singapour

4. 4. amplification (prolifération cellulaire)

Après transfection, les cellules de voiture entrent dans le stade d'amplification, où des facteurs de croissance tels queIl - 2sont ajoutés pour favoriser la prolifération cellulaire. Le but de ce processus est de s'assurer qu'un nombre suffisant de cellules de voiture sont disponibles pour une éventuelle perfusion chez le patient. Le processus d'amplification doit être effectué dans des conditions stériles pour garantir la qualité et la quantité cellulaire.

5. 5. Contrôle de la qualité (QC)
6. Avant de réinfusion dans le patient, le contrôle de la qualité est crucial pendant le processus de préparation. Les cellules de voiture préparée subissent des tests stricts pourAssurer leur pureté, leur activité, leur efficacité de transfection et leur conformité aux normes de traitement. De plus, un test de contamination des cellules ou d'effets indésirables est nécessaire pour assurer l'innocuité et l'efficacité thérapeutique des cellules après une réinfusion au patient.

IMportance de la transfection du lentivirus dans les cellules immunitaires

La technologie de transfection lentivirale est cruciale en thérapie par cellules immunitaires, en particulier pour l'édition de gènes et l'ingénierie cellulaire. Les vecteurs lentiviraux, dérivés du VIH modifiés, sont largement utilisés en raison de leur capacité à intégrer les gènes dans le génome de l'hôte, assurant une expression stable et longue. Ils peuvent infecter à la fois les cellules divisées et non divisées, et leur sécurité a été améliorée en modifiant les gènes clés pour éviter la réplication. Ces vecteurs sont désormais couramment utilisés dans la thérapie génique, l'édition génique et la recherche en biologie cellulaire pour leur efficacité et leur durabilité dans la livraison des gènes.

Source de la figure: Obiosh.com/product/ Diagramme schématique de l'emballage du lentivirus et du processus de transfection du lentivirus dans les cellules 293T

1. transduction du gène efficace

Le vecteur lentiviral peut fournir efficacement des gènes cibles, tels que le gène de la voiture, dans les cellules immunitaires et intégrer ces gènes de manière stable dans le génome cellulaire, garantissant que le gène de la voiture est exprimé en permanence pendant la division et la prolifération cellulaire. Cette capacité de transduction élevée à l'efficacité est fondamentale pour le succès de l'immunothérapie.

2. Immunogénicité de plus en plus 

Par rapport à d'autres vecteurs viraux, les lentivirus ont une immunogénicité plus faible. En conséquence, lorsque les lentivirus sont utilisés pour transduire les cellules immunitaires, le système immunitaire du patient génère une réponse immunitaire relativement plus faible au virus. Cela aide à minimiser les effets indésirables, en particulier dans la longue survie des cellules après la perfusion, empêchant ainsi un rejet immunitaire excessif.

3. Adaptabilité élevée aux cellules immunitaires

Le vecteur lentiviral est capable de transduire efficacement divers types de cellules immunitaires,en particulier les cellules T et les cellules NK. Grâce à la transduction lentivirale, les cellules immunitaires peuvent acquérir des capacités de reconnaissance tumorales - améliorant ainsi leur capacité à cibler et à tuer les cellules tumorales.

4. Provision des cellules effectrices transduites dans la reconnaissance des cellules cibles 

En immunothérapie,cellules effectrices transduitesReportez-vous aux cellules immunitaires qui, après transduction, expriment la voiture et exercent une activité anti-- tumorale. Les vecteurs lentiviraux peuvent livrer avec précision le gène de la voiture dans ces cellules effectrices, leur permettant de reconnaître et de cibler les cellules tumorales.Cellules ciblessont les cellules tumorales identifiées et détruites par ces cellules immunitaires. Grâce à la transduction lentivirale, les cellules immunitaires peuvent améliorer leur spécificité en reconnaissant et en tuant les cellules tumorales, améliorant ainsi l'efficacité thérapeutique.

Dans ce contexte, Iphase, un leader des réactifs de recherche in vitro, a développé un kit d'emballage lentivirus et un réactif de concentration de lentivirus pour simplifier la complexité de la transduction pour les clients d'immunothérapie et améliorer le taux de réussite de la transfection des gènes stable. Ces produits offrent une solution One - Stop pour les clients.

Lentivirus iphaseProdUCTS

Le kit d'emballage du lentivirus iphasécontient tous les réactifs essentiels nécessaires àEmballage du lentivirus, simplifiant considérablement le processus expérimental et économisez du temps et des efforts. Ce kit comprend:

• Mélange de plasmides d'emballage lentivirus
• Réactif transfect
• plasmide EGFP
• Réactif de concentration en lentivirus iphase

Ce kit rationalise vraiment l'expérience! Sans besoin de préparation de réactifs compliqués, l'emballage du lentivirus peut être complété efficacement en suivant simplement les instructions incluses.Les avantages uniques du kit incluent le temps d'emballage court, le titre viral élevé et le fonctionnement facile, ce qui le rend idéal pour les débutants dans l'emballage du lentivirus. Chaque ensemble de réactifs subit un contrôle de qualité strict pour garantir des résultats précis, fiables et reproductibles, améliorant considérablement l'efficacité de la transfection et la stabilité des vecteurs viraux, fournissant ainsi un soutien technique puissant pour la préparation des cellules immunitaires.

De plus, pour aider les clients à économiser les coûts, iPhase a également développé et produit le réactif de concentration de lentivirus, offrant une solution de concentration rapide et simple.En mélangeant simplement le surnageant lentivirus avec le réactif de concentration, suivi d'une brève incubation et de la centrifugation en utilisant une centrifugeuse standard, les particules lentivirales peuvent être rapidement concentrées. Ce processus ne nécessite pas une ultracentrifugeuse, ce qui en fait une option pratique et efficace pour la plupart des utilisateurs de laboratoire.

En bref, le réactif de concentration de lentivirus iphase améliore non seulement considérablement l'efficacité de la transfection, mais fournit également un support de vecteur viral de qualité élevé pour la préparation des cellules immunitaires. Il s'agit d'un produit essentiel pour les expériences de routine, la recherche préclinique et d'autres domaines d'application.

En résumé, l'immunothérapie, en particulier les thérapies sur les cellules et les cellules de la voiture T, représente une nouvelle direction dans le traitement du cancer moderne. Grâce à des processus précis tels que le tri des cellules, l'activation, la transduction, l'expansion et le contrôle de la qualité, les scientifiques peuvent préparer des produits de cellules immunitaires efficaces et sûrs pour les patients, permettant un traitement ciblé sur le cancer.La transduction lentivirale, en tant que technologie de base, joue un rôle essentiel dans la préparation des cellules de voiture et de voiture en raison de sa grande efficacité et de sa stabilité.Avec les progrès technologiques continus, l'immunothérapie a le potentiel d'offrir des options de traitement innovantes pour plus de patients, offrant une plus grande valeur clinique. À l'avenir, l'immunothérapie devrait apporter un espoir thérapeutique révolutionnaire à davantage de patients cancéreux.

Pour répondre aux besoins de la transduction des gènes, de l'expression et de la recherche sur les maladies, l'iphase propose des kits d'emballage lentivirus, des réactifs de concentration de lentivirus et des lentivirus de traceur. Ces lentivirus de traceurs sont emballés avec des protéines fluorescentes vertes (GFP), une protéine fluorescente rouge mCherry et la luciférase, permettant un suivi facile des cellules cibles in vitro et in vivo.

En outre, iPhase peut également offrir deux lentivirus de traceurs pré - emballés: GFP et luciférase et mcherry & luciférase. Ces traceurs peuvent être sélectionnés ou combinés sur la base des besoins expérimentaux, rationaliser les flux de travail et améliorer l'efficacité pour le suivi et la surveillance du temps réels des cellules cibles.

IphaseImmunothérapieRexagéréProdUCTS

En plus du lentivirus - produits connexes utilisés dans les thérapies en voiture ou en voiture, iphase, en tant que leader des réactifs de recherche in vitro, a également apporté des contributions significatives pour soutenir les innovations en CGT (thérapie cellulaire et génique) et d'autres domaines. L'iphase a développé et produit des leucocytes et des PBMC (cellules mononucléaires du sang périphérique) isolées par leukaphérèse, ainsi que divers kits d'isolement des cellules immunitaires, pour soutenir le développement rapide de l'immunothérapie.

Les produits iPhase offrent les avantages suivants, etUn certificat d'analyse (COA)Vérifié par iPhase est disponible pour chaque lot.

Sécurité 

Les produits iphases proviennent de donneurs / animaux sains qui ont subi un dépistage approfondi, avec des résultats négatifs pour les tests viraux (VIH - 1/2, VHB, VHC, syphilis).

Conformité  

Iphase fournit des formulaires de consentement éclairés signés par les donneurs, avec une vérification de source claire et traçable.

Professionnalisme

Les produits fournis par iPhase, obtenus par leukaphérèse, sont gérés par des professionnels formés. Chaque lot est accompagné d'un COA correspondant, et les produits sont transportés sous une chaîne froide stricte pour assurer la sécurité, la livraison rapide et l'assurance qualité.

Service client

IPhase offre une haute - qualité après - Service de vente, assurant une expérience fluide et ininterrompue tout au long du processus d'essai.