Cad iad PBMCanna daonna agus a ról i ndíolúine?

PBMC an duineS, nó cealla mononuclear fola forimeallacha, is grúpa criticiúil de chealla imdhíonachta iad a scaipeann i do shruth fola. I measc na gceall seo tá lymphocytes, monocytes, agus cealla dendritic, gach ceann acu ag imirt ról uathúil i gcosaint do choirp. Cosnaíonn PBMCanna tú trí phataiginí díobhálacha a aithint agus a neodrú, cosúil le baictéir agus víris, agus cothromaíocht imdhíonachta a choinneáil ag an am céanna.

Taispeánann taighde go bhfanann PBMCanna cobhsaí le himeacht ama, le hinmharthanacht na gceall os cionn 85% i bhformhór na samplaí. Ina theannta sin, is féidir a léiriú géine a oiriúnú go tapa. Mar shampla, méadaíonn slonn TNFα os cionn trí huaire laistigh de uair an chloig. Leagann solúbthacht den sórt sin béim ar a dtábhacht maidir le freagairtí imdhíonachta a rialáil.

Comhdhéanamh PBMCanna daonna

Lymphocytes: Cealla T, cealla B, agus cealla NK

Is cuid ríthábhachtach de PBMCanna daonna iad na lymphocytes. Ina measc tá cealla T, cealla B, agus cealla marú nádúrtha (NK), gach ceann acu le róil ar leith i ndíolúine. Cabhraíonn cealla T le freagairtí imdhíonachta a rialáil agus le cealla ionfhabhtaithe a ionsaí go díreach. Táirgeann cealla B antasubstaintí, a neodraíonn pataiginí díobhálacha. Cealla NK, ar an láimh eile, ag díriú agus ag scriosadh cealla neamhghnácha, amhail iad siúd atá ionfhabhtaithe ag víris nó cealla ailse.

Is díol spéise é go dtaispeánann roinnt lymphocytes i PBMCanna daonna, a aithníodh mar CD3+ CD19+ cealla, défheidhmíocht. Is féidir leis na cealla seo gníomhú mar chealla T agus cealla B araon. Freagraíonn siad do bhagairtí trí ghabhdóir cille (TCR) agus B - conairí comharthaíochta gabhdóra cille (BCR). Ligeann an ról dé seo dóibh páirt a ghlacadh i bhfreagraí imdhíonachta humoral agus ceallacha. Mar shampla, ceanglaíonn siad antaiginí níos éifeachtaí ná gnáthchealla B agus táirgeann siad interferon - gáma (IFN - γ) ag leibhéil atá cosúil le cealla T.

Monocytes agus a bhfeidhmeanna imdhíonachta

Is príomhghrúpa eile iad monocytes laistigh de PBMCanna daonna. Déanann na cealla seo patról ar do shruth fola, ag cuardach comharthaí ionfhabhtaithe nó damáiste fíocháin. Nuair a bhraitheann siad fadhb, aistríonn siad go dtí an limistéar lena mbaineann agus athraíonn siad go macrophages nó cealla dendritic. Macrophages ag ionsú agus ag díleá pataiginí, agus cuireann cealla dendritic antaiginí i láthair cealla imdhíonachta eile.

Scaoileann monocytes cytokines freisin, atá ina móilíní comharthaíochta a chabhraíonn leis an bhfreagairt imdhíonachta a chomhordú. Trí sin a dhéanamh, cinntíonn siad go n -imoibríonn do chorp go héifeachtach le hionfhabhtuithe nó le gortuithe.

Cealla dendritic agus a ról i gcur i láthair antaiginí

Is antaiginí gairmiúla iad cealla dendritic - Cealla a chur i láthair (APCanna) laistigh de PBMCanna daonna. Tá ról ríthábhachtach acu maidir le cealla T a ghníomhachtú trí antaiginí a chur i láthair ar a ndromchla. Léiríonn taighde gurb iad cealla dendritic an t -aon APCanna atá in ann cealla T CD4+ agus CD8+ a ghníomhachtú. Tagann a n -éifeachtúlacht óna gcumas díleá antaigin a mhoilliú, rud a mhéadaíonn infhaighteacht peiptídí do luchtú MHC.

Cinntíonn na cealla seo go n -aithníonn agus go bhfreagraíonn do chóras imdhíonachta do bhagairtí go héifeachtach, rud a fhágann go bhfuil siad fíor -riachtanach i ndíolúine.

Leithlisiú PBMCanna daonna

Foinsí PBMCS: Fuil Forimeallach agus Smeara

Is féidir PBMCanna daonna a bheith scoite amach ó dhá phríomhfhoinse: fuil imeallach agus smeara. Is í an fhuil imeallach an fhoinse is coitianta mar gheall ar a hinrochtaineacht agus a ionradh íosta. Soláthraíonn smior, ar an láimh eile, timpeallacht níos saibhre do chealla imdhíonachta ach teastaíonn nós imeachta níos ionraí uathu.

Is féidir le toradh agus íonacht PBMCanna a bheith éagsúil ag brath ar an modh foinse agus aonraithe. Mar shampla, léiríonn staidéir go mbaineann an modh caighdeánach Ficoll toradh agus íonacht níos airde amach i gcomparáid le modhanna CPT (feadán ullmhúcháin cille). Leagann an tábla thíos béim ar na difríochtaí seo:

Teicníc Forleagan Ficoll do Leithlisiú PBMC

Is modh a úsáidtear go forleathan é an teicníc forleagan Ficoll chun PBMCanna a leithlisiú. Is éard atá i gceist leis an bpróiseas seo ná fuil a leagan thar thuaslagán ficoll - paque agus é a lártheifneoiriú chun cealla a dheighilt bunaithe ar dhlús. Tá PBMCanna ina gciseal ar leith idir plasma agus ficoll, rud a fhágann go bhfuil siad éasca iad a bhailiú.

Cuireann staidéir béim ar an tábhacht a bhaineann le láimhseáil chuí le linn an phróisis seo chun torthaí comhsheasmhacha a chinntiú. Mar shampla, fuair staidéar amháin amach gur féidir le Ficoll a úsáid i gceart íonacht suas le 97% a bhaint amach le héagsúlacht íosta. Déanann an tábla thíos comparáid idir modhanna éagsúla goir le haghaidh aonrú PBMC:

Modhanna deighilte imdhíontacha

Is teicníc ardleibhéil eile é scaradh imdhíonachta chun PBMCanna a leithlisiú. Baineann an modh seo úsáid as coirníní maighnéadacha atá brataithe le hantasubstaintí chun díriú ar chineálacha sonracha cille. Déanann sórtáil dhearfach cealla a leithlisiú trí iad a cheangal leis na coirníní, agus cuireann sórtáil dhiúltach cealla nach dteastaíonn uathu, ag fágáil an daonra inmhianaithe gan aon bhaint.

Léiríonn taighde go gcoinníonn sórtáil dhiúltach inmharthanacht na gceall agus nach dtéann sé i bhfeidhm ar mharcóirí gníomhachtaithe mar IL - 2R (CD25). I gcodarsnacht leis sin, is féidir le sórtáil dhearfach inmharthanacht agus cumas gníomhachtaithe a laghdú, go háirithe tar éis spreagadh. Tugann an tábla thíos achoimre ar na torthaí seo:

Tá an modh seo thar a bheith úsáideach nuair a bhíonn daonraí cille an -sainiúla de dhíth ort le haghaidh taighde nó feidhmchláir theiripeacha.

Iarratais PBMCanna daonna i dtaighde agus leigheas

Ról i bhforbairt teiripe cille carranna -

Tá ról lárnach ag PBMCanna daonna maidir le teiripe cille a chur chun cinn, cóireáil úrnua le haghaidh ailse áirithe. Feidhmíonn na cealla seo mar ábhar tosaigh chun cealla T a ghiniúint, a ndéantar innealtóireacht orthu chun cealla ailse a dhíriú agus a scriosadh. B'fhéidir go mbeadh ionadh ort cé chomh héifeachtach is atá PBMCanna sa phróiseas seo. Taispeánann staidéir torthaí suntasacha:

• Tar éis 11 lá de chultúr, is féidir le 1 × 10^7 PBMC reoite 1.48 × 10^9 cealla Mesocar a tháirgeadh, le níos mó ná 30% CAR+ cealla.

• Taispeánann tástálacha cíteatocsaineachta cealla Mesocar - Ag cóimheas éifeachtúil go dtí - Sprioc de 4: 1, tá a gcuid cíteatocsaineachta idir 91.02%- 100.00%agus 95.46%- 98.07%, faoi seach.

• Fiú ag cóimheas níos ísle de 2: 1, ní bhreathnaítear aon difríocht shuntasach i gcíteatocsaineacht.

Leagann na torthaí seo béim ar iontaofacht PBMCanna maidir le cealla éifeachtacha gluaisteán a tháirgeadh, fiú tar éis stórála téarma fada.

Úsáid i dtástáil drugaí agus i staidéir ar thocsaineacht

Tá PBMCanna fíorluachmhar i dtástáil drugaí agus i staidéir ar thocsaineacht. Soláthraíonn siad samhail ábhartha daonna chun meastóireacht a dhéanamh ar an dóigh a n -idirghníomhaíonn drugaí le cealla imdhíonachta. Mar shampla, tá taighdeoirí tar éis tástáil a dhéanamh ar an quinacrine drugaí ar PBMCanna chun a thocsaineacht a mheas. Tugann an tábla thíos achoimre ar na torthaí:

Léiríonn na torthaí seo go bhfreagraíonn PBMCanna go gníomhach do quinacrine, fiú ag leibhéil tocsaineachta ísle. Fágann sé seo gur uirlis iontaofa iad chun freagairtí imdhíonachta ar dhrugaí nua a thuar.

Fionnachtain bithchomharthaí agus monatóireacht imdhíonachta

Tá PBMCanna riachtanach chun bithchomharthaí a aithint agus chun monatóireacht a dhéanamh ar shláinte imdhíonachta. Is táscairí intomhaiste iad bithchomharthaí ar phróisis bhitheolaíocha nó ar ghalair bhitheolaíocha. Trí anailís a dhéanamh ar PBMCanna, is féidir leat bithchomharthaí a nochtadh a nochtann gníomhaíocht imdhíonachta, dul chun cinn galair, nó éifeachtúlacht cóireála. Mar shampla, is minic a thomhaiseann taighdeoirí leibhéil cytokine i PBMCanna chun monatóireacht a dhéanamh ar fhreagraí imdhíonachta le linn ionfhabhtuithe nó teiripí. Cuidíonn an cur chuige seo le cóireálacha a chur in oiriúint d'othair aonair, ag feabhsú torthaí.

Cumasaíonn PBMCanna monatóireacht fhadtéarmach imdhíonachta freisin. Fágann a gcobhsaíocht agus a n -inoiriúnaitheacht go bhfuil siad oiriúnach chun athruithe i bhfeidhm imdhíonachta a rianú le himeacht ama. Tá sé seo thar a bheith úsáideach i ngalair ainsealacha nó le linn cóireálacha fada.

Tá PBMCanna daonna fíor -riachtanach chun imdhíoneolaíocht a thuiscint agus a chur chun cinn. Tá a gcomhdhéanamh ilghnéitheach - lymphocytes, monocytes, agus cealla dendritic - in ann feidhmeanna criticiúla imdhíonachta a dhéanamh. Cinntíonn teicnící aonraithe cosúil leis an bhforleagan ficoll agus an deighilt imdhíon -imdhíonta gur féidir leat PBMCanna íonachta ard a fháil le haghaidh taighde nó úsáid theiripeach.

Cuimsíonn a n -iarratais raon leathan réimsí:

• D'úsáid na mílte staidéar PBMCanna i dtaighde cliniciúil le 50 bliain anuas.

• Tá siad ríthábhachtach le haghaidh teiripe cille carranna, forbairt drugaí, agus anailís freagartha imdhíonachta.

• Cuireann PBMCanna le fionnachtain bithchomharthaí, le srathú othar, agus le taighde galar neamhchoitianta.

Trí PBMCanna a ghiaráil, is féidir leat féidearthachtaí nua a dhíghlasáil in imdhíoneolaíocht agus cóireálacha nuálacha a fhorbairt a athraíonn cúram sláinte.

Ceisteanna CCanna

Cad a úsáidtear PBMCanna i dtaighde leighis?

Cabhraíonn PBMCanna le taighdeoirí staidéar a dhéanamh ar fhreagraí imdhíonachta, drugaí nua a thástáil, agus teiripí a fhorbairt mar chóireálacha cille carranna. Fágann a n -inoiriúnaitheacht agus a gcobhsaíocht go bhfuil siad oiriúnach do thurgnaimh a dteastaíonn cealla imdhíonachta daonna uathu.

Conas a stórálann tú PBMCS lena n -úsáid sa todhchaí?

Is féidir leat PBMCanna a stóráil trí iad a charnadh i nítrigin leachtach. Coinníonn an modh seo a n -inmharthanacht agus a bhfeidhmiúlacht ar feadh na mblianta, rud a ligeann duit iad a úsáid i staidéir fhadtéarmacha nó i bhfeidhmchláir theiripeacha.

An bhfuil PBMCanna mar an gcéanna le cealla fola bána?

Ní díreach. Is fo -thacar de chealla fola bána iad PBMCanna lena n -áirítear limficítí, monocytes, agus cealla dendritic. Ní chuimsíonn siad granulocytes cosúil le neutrophils, atá mar chuid de chealla fola bána freisin.

An féidir PBMCanna a úsáid chun staidéar a dhéanamh ar ghalair autoimmune?

Sea! Tá PBMCanna luachmhar chun staidéar a dhéanamh ar ghalair autoimmune. Cabhraíonn siad leat anailís a dhéanamh ar iompar cille imdhíonachta, táirgeadh cytokine, agus marcóirí géiniteacha, ag soláthar léargas ar mheicníochtaí galair agus ar chóireálacha féideartha.

An próiseas casta é leithlisiú PBMC?

Ní i ndáiríre. Mar gheall ar theicnící cosúil leis an modh forleagan ficoll nó deighilt imdhíon -imdhíonta, is furasta aonrú PBMC a dhéanamh. Le hoiliúint agus trealamh cuí, is féidir leat samplaí íonachta ard a bhaint amach do do thaighde.