Fraction radan Rat S9 Fraction S9: Siostam gnìomhachaidh metabolic airson deuchainnean genotocteireachdail vitro agus muttation

Faclan-luirg: OECD 471, OECD 473, OECD 476, thug OECD 487 Deuchainn, Meronucluse, HPTRUCUCLITY, HPTS / HGPT Assay

Bathar iphese

Ro-ràdh

Rat Rat S9 S9na phrìomh phàirt ann a bhith a 'measadh anpuinnseanachd ginteilcomas ceimigean, gu sònraichte ann an lìonadh-eòlas riaghlaidh. Tha e air a chleachdadh gu cumanta ann an co-bhonn ris ann an Assays Vitro, leithid anAmas deuchainn agusdeuchainnean mutation, gus measadh a dhèanamh air togalaichean mutaday de na connspaidean. Le bhith a 'toirt seachad siostam extymatic beairteach P450 (CYP450), tha pàirt disping Rat Liver Liver S9 a' nochdadh a 'chùis air na pròiseasan no aillse ginteil a dh' fhaodadh a bhith a 'toirt buaidh air mutairean ginteil no aillse.

Rat Rat S9 S9

Tha am baistidh grùthan S9 a 'toirt iomradh air dreuchd - SuperAntrantat Mitochondrial fhaighinn bho Rat Lùthan Homeonatentes às deidh sreath de cheumannan centrifugtion. Tha an teirm "mealladh" a 'toirt iomradh air làimhseachadh radain le todhan sònraichte a chuireas ri gnìomhachd nan grìobeachdan P450 (CYP450), far a bheil uallach airson metabolism raon farsaing de xobiotic.

Tha measgachadh de enzymean a tha ann an Rat Liver Liver Liver S9 a tha an sàs anns an ìre ìre I agus Ìre II Metabolism de cheimigean. Tha seo a 'toirt a-steach enzymes leithid Cytochromoe p450 MonoocanGenses, a bhios a' dèanamh bith-cleachdadh oxidatioating air subsadach, mar sin a 'dèanamh meabolism daonna.

Gnìomhachd Cyp450 agus Teisteanas Metabolic

Tha teaghlach Vizyme P450) Teaghlach Piveol (CYP450) a 'cluich pàirt de dh' iomadh stuth, a 'toirt a-steach mòran de stuthan, ceimigean àrainneachd agus carcinogens. The induced rat liver S9 fraction contains these enzymes and is essential for evaluating chemicals that may only become genotoxic after metabolic activation.

Is e mòran de choimeasgaidhean gun laghach an toiseach ach puinnseanta ach faodaidh iad a bhith puinnseanta às deidh metabolism anns an grùthan. Chan urrainnear na prog - badtages (a dh 'fheumas a bhith ann an gnìomh metabolic gus a bhith a' toirt a-mach agus a dh 'fheumas a bhith a' toirt a-mach às an aseatair anns am bi siostam gnìomh metabolic. Às aonais inntrigeadh metabolic mar c Thigc450, faodaidh coltas a bhith gun chron ann an deuchainnean Genotoxity àbhaisteach.

Le bhith a 'cur air adhart brosnachail SCIver S9 gu ann an Assays Vitro, faodaidh luchd-rannsachaidh measadh a dhèanamh air mar a tha susbaint susbaint ag eadar-obrachadh le enzymes cyp450. Tha seo gu sònraichte cudromach airson cungaidhean, mar metabolism le CYP450 Tha enzymes na cheum riatanach anns na preasmacokinetics de dh 'dhrogaichean.

Tagraidhean de Rat Liver S9

1. 1. Amasan ATHARRACHADH (OECD 471)

An deuchainn Amest, air a mhìneachadh ann an StiùireadhOECD 471, is e aon den fheadhainn as motha - Tha e a 'toirt a-steach a bhith a' nochdadh strainn de bacteria Salmonella gu Ceimigeach deuchainn gus faicinn a bheil e a 'cur bacadh air na bacteria gus a dhol air ais gu histidine - Stàit neo-eisimeileach.

Gus ath-sgrìobhadh a 'phròiseas mata-daonna daonna, tha radan brosnaichte S9 gu tric air a chur ris an t-siostam deuchainn gu tric. Tha an Mix a 'toirt seachad na enzymes riatanach, a' toirt a-steach CYP450, a dh 'fhaodadh a bhith ag iarraidh air a bhith a' cur dragh air a 'chuirm ann an cruth nas ath-ghnìomhach a dh' fhaodadh murtasan adhbhrachadh ann an DNA bacterial. Tha an cothlamadh seo de S9 leis an deuchainn Ame a 'ceadachadh measadh nas coileanta de chomas mut-deònach le bhith a' bruidhinn ri dòighean badtagenic agus metablemer.

2. 2.Deuchainnean mutadation (deuchainn leberration Chromosomal, Deuchainn Merronucluse, agus eile ann an Assays Vitro)

A bharrachd air na deuchainnean deuchainn nithean, tha deuchainnean mutailean air an cleachdadh gu cumanta airson a bhith a 'dèanamh measadh air an comas genocicteids Cheamicals. Tha na deuchainnean sin nas coileanta ann a bhith a 'measadh raon de mhilleadh ghinte, a' toirt a-steach mutachadh chromosomal, mutran gine, agus cruthachadh Micheronclei. Thathas a 'brosnachadh RAT Liver S9 air a chleachdadh ann an deuchainnean mutaraim airson na h-adhbharan a leanas:

Deuchainn Merronucleus (OECD 487)

Bidh an deuchainn seo a 'lorg cruthachadh Merronuclei ann an ceallan, a tha nan buidhnean beaga, extranuclear anns a bheil criomagan de chromosoman no chromosoman slàn nach deach a thoirt a-steach don ocluus ann an roinn cealla. An Deuchainn Merronuclususurrainn dhaibh Clastogenic (chromoSome - a 'briseadh) agus anemecic (a' toirt buaidh air àireamh chromosome). Tha Rat S9 S9 S9 S9 air a chleachdadh an seo gus an stuth deuchainn a chuir an gnìomh, oir chan eil cuid de cheimigean a-mhàin ag adhbhrachadh milleadh chromosomal aon uair 's gu bheil iad air an toirt air falbh le enzymes lizymes. Bidh a 'chùis S9 a' cur air cugallachd an deuchainn le bhith a 'dèanamh atharrais air a' ghnìomhachadh metabolic a dh 'fhaodadh tachairt ann an Vivo.

Deuchainn leberration Chromosomal (OECD 473)

Tha an deuchainn seo a 'dèanamh measadh an urrainn do stuth milleadh structarail adhbhrachadh chromosoman le bhith a' brosnachadh fois-brisidh, èideadh, gluasadan, no seòrsachan eile de shàraichean. Mar an deuchainn Michronuclus, anDeuchainn air-shruthach ChromosomalFaodar a chuir an sàs le bhith a 'cuirp no às aonais gnìomh metabolic. Thathas a 'brosnachadh RAT Lùthan S9 a chur ris an t-siostam deuchainn gus mimic a dhèanamh air na pròiseasan me-etabolic anns an grùthan a dh' fhaodadh milleadh chromosomal a dhèanamh anns an fhoirm bheag aca ach dh 'fhaodadh e sin a dhèanamh às deidh dhomh metabolism.

Clàr 1. Beachdaeachaidhean coimeasach de dheuchainnean muttation

HPT / HGPT Assay (OECD 476)

Anns aHPT / HGPT Assay, cultaran de Hamster Sìneach (Chean no V79) no ceallan Lymphoblastoid (TK6) Measgachadh Medicum450 a 'toirt a-steach gus batagns a thionndadh gu gnèithean DNA-ath-ghnìomhach. Às deidh làimhseachadh goirid agus ùine faireachdainn seachd-latha, tha ceallan air an dùbhlan le 6-thioguanine; Is e dìreach clones a tha a 'giùlan murtasan call call sam bith anns an hypoxethine-guanine phoshafosfersaferfeSelfere Le bhith a 'dèanamh coimeas eadar coloinidhean mutan, bidh luchd-rannsachaidh a' dearbhadh tricead muuting a tha air an togail, nan cumhachan coimheach, a 'comharrachadh comas genotoxic.

Assays TK (OECD 490 & OECD 476)

AnTK Assay a 'fastadh ceallan lymphoma luchag lu5178y (OECD 490) no ceallan choOECD 476) heterozygous innleadaireachd aig lous thymidine Kighe. Às deidh nochdaidh ceimigeach ± ​​S9 Mix, Ceallan a 'faighinn seachad air agus tha iad air an sgapadh ann am meadhan anns a bheil Triflurorororororororororororororothymicus, a bhios a' marbhadh cheallan le com-chomasachaidh. Tha muts a 'tighinn beò mutants a' cruthachadh coloinidhean thairis air 10-14 latha, le mutants beaga choloinidh gu tric a 'nochdadh mutants mòr a' nochdadh mutichan àite. Mar a bha ann an HPT / HGPT Assay, smuaintean Cytotesicationales Cletotestotes agus Hightend agus slatan de sgoilearan adhartach Getagen Dèan cinnteach gu bheil cunnart genotociend compotachail ann an cunnart.

4. 4. Measadh Cunnairt aillse

Tha Rat Liver S9 cuideachd air a chleachdadh ann an sgrùdaidhean a tha ag amas air a 'chiad aillse a mheasadh - ag adhbhrachadh comas stuthan. Le bhith a 'dèanamh atharrais air pròiseasan me-etabolic a tha a' tachairt anns an grùthan daonna, faodaidh am bagannan S9 cuideachadh le bhith a 'comharrachadh ceangal ri DNA agus a dh' fhaodadh mu choinneamhan a dh 'fhaodadh a bhith a' leantainn aillse.

Deuchainn ISES nas fheàrr le Hamster Hamster Hamster S9

A rèir an stiùiridh as ùire a chaidh a chuir a-mach le Buidheann Leigheis na h-Eòrpa (EMA), is dòcha nach bi an deuchainn traidiseanta Atharraich mothachail gu leòr gus a bhith a 'lorg a' chomasan badtageny de neach-dèanamh airson cuid de neach-brathaidh nas fheàrr, n - Nitrosumpythethy (ndma), am measg feadhainn eile, am measg feadhainn eile, am measg feadhainn eile, am measg eile. Mar sin, chaidh an deuchainn as fheàrr a leasachadh, a chaidh a leasachadh leis an ionad nàiseanta airson sgrùdadh picalogical (NCR), roinn de rianachd bidhe is dhrogaichean (FDA) a mholadh mar roghainn nas earbsaiche. Thug an deuchainn leasaichte a chaidh a thoirt a-steach cuir a-steach grùthan Hamster Hamster S9, a chluich ann an àite 30% RAT Liver S9 agus 30% Hamster Liver S9. Bu chòir step-stadan Desmosomal (S9s) a bhith air an ullachadh bho ialtairean credent le Cytochrome p450 enzyme - a 'dèanamhachadh stuthan. Le bhith a 'cleachdadh Hamster Hamster Hamster S9, tha an deuchainn leasaichte seo a' simulate nas fheàrr metabolism daonna agus a 'meudachadh earbsachd nan toraidhean.

Co-dhùnadh

Tha Scre Scre S9 mar inneal èiginneach ann an deuchainnean Genotoxicity, a 'cuideachadh luchd-rannsachaidh agus gnìomhan riaghlaidh measadh air comas badtagenic agus carcinogenic de cheimigean. Le bhith a 'toirt seachad siostam gnìomh metabolic, bidh e a' cur ri comas Asmaidhean mar na deuchainnean deuchainn, mutaireachd, agus sgrùdaidhean gnìomhachd Cyp450 gus stuthan a lorg a dh 'fheumas a bhith nan genotoxic. Tha na tagraidhean aige riatanach airson dèanamh cinnteach à sàbhailteachd dhrogaichean ùra, ceimigean, agus toraidhean luchd-cleachdaidh. Leis an àite aca ann a bhith a 'dèanamh atharrais daingeann, tha a' chùis le grian S9 a 'leantainn air adhart gu ìre riatanach de mheasaidhean Togailteachd agus Sàbhailteachd Riaghlaidh.