Terapia innovadora CGT - Lentivirus - coche de envasado - T células inmunes

Terapia innovadora CGT - Lentivirus - coche de envasado - T células inmunes

A terapia con células inmunes é un tratamento innovador do cancro que mellora o sistema inmunitario do corpo para orientar e eliminar as células cancerosas. As formas clave inclúen citocina - Terapia de células asasinas inducidas, terapia celular T - e terapia con células T. A terapia do CAR - T implica reprogramación de células T para expresar receptores de antíxeno quiméricos (CAR) que dirixen específicamente as células tumorales, mostrando un éxito significativo en cancro hematolóxico como a leucemia e o linfoma.

Palabras clave: coche - T, lentiviral, vector lentiviral, Tracer Lentivirus

Preparación do coche - Terapia das células T

En xeral, os pasos clave para preparar as células do coche - T son os seguintes:

Figura Fonte: Dana - Farber Cancer Institute - Os ensaios clínicos do coche T - axudan a varios pacientes con mieloma a volver á saúde

1. 1.Sorting (T - Illamento de células)

O primeiro paso para preparar as células do coche - T é illar as células T - dos glóbulos brancos no sangue periférico do paciente. Técnicas como a separación de perlas inmunomagnéticas ou a citometría de fluxo úsanse normalmente para extraer CD3+- células ricas t - do sangue. Para garantir a pureza celular, o proceso de ordenación debe ser moi preciso, asegurando que se obteña un número suficiente de células T - de alta calidade.

2. 2. Estimulación (T - activación celular)

As células T - extraídas están activadas in vitro, normalmente usando aCD3 /CD28 T - Kit de activación /expansión de células. As células T activadas entran nun estado activo, preparándoas para a transfección de xenes. A través deste proceso, a función das células T é mellorada, contribuíndo á posterior modificación xenética e amplificación.

3. 3. Transfección (edición de xenes)

As células T activadas sofren unha transfección xénica para expresar un receptor de antíxeno quimérico (CAR). Normalmente usa este procesoVector lentiviralPara introducir xenes do coche nas células T. O lentivirus é unha ferramenta eficaz de transducción de xenes, coa vantaxe de integrar estable o xene obxectivo (como o xene do coche) no xenoma celular. Ao infectar as células T e transfectar o xene do coche en ADN das células T, o lentivirus permite ás células T expresar os coches longos - termo. O xene do coche inclúe un fragmento de variable de cadea única (SCFV) dun anticorpo que permite ás células T recoñecer antíxenos específicos na superficie das células tumorales e iniciar unha resposta inmune activando as rexións de sinalización das células T. Como se mostra na figura 2. A transfección lentiviral ten as características de alta eficiencia e estabilidade, de xeito que o xene do coche pode expresarse nas células T durante moito tempo.

Figura Fonte: Singapur Car - Terapia de células T

4. 4.Amplificación (proliferación de células)

Despois da transfección, as células do coche - T entran na fase de amplificación, onde factores de crecemento comoIl - 2engádense para promover a proliferación celular. O propósito deste proceso é asegurar que un número suficiente de células T CAR - T estean dispoñibles para a infusión eventual no paciente. O proceso de amplificación debe realizarse en condicións estériles para garantir a calidade e a cantidade das células.

5. 5. Control de calidade (QC)
6. Antes da reinfusión no paciente, o control de calidade é crucial durante o proceso de preparación. As células do coche preparadas - T sofren probas estritasAsegúrese da súa pureza, actividade, eficiencia de transfección e cumprimento das normas de tratamento. Ademais, é necesaria a proba de contaminación celular ou reaccións adversas para garantir a seguridade e a eficacia terapéutica das células despois da reinfusión no paciente.

IMportancia da transfección de lentivirus nas células inmunes

A tecnoloxía de transfección lentiviral é crucial na terapia con células inmunes, especialmente para a edición de xenes e a enxeñaría celular. Os vectores lentivirais, derivados do VIH modificados - 1, son amplamente utilizados debido á súa capacidade para integrar xenes no xenoma do hóspede, garantindo unha expresión estable e longa. Poden infectar as células divisoriais e non - divisoria e a súa seguridade foi mellorada modificando os xenes clave para evitar a replicación. Estes vectores úsanse agora na terapia xénica, na edición de xenes e na investigación de bioloxía celular para a súa eficiencia e durabilidade na entrega de xenes.

Figura Fonte: obiosh.com/product/ Diagrama esquemático dos envases de lentivirus e proceso de transfección de lentivirus en células 293T

1. Transducción de xenes eficientes

O vector lentiviral pode entregar de forma eficiente xenes diana, como o xene do coche, en células inmunes e integrar estes xenes de forma estable no xenoma celular, asegurando que o xene do coche se expresa continuamente durante a división e a proliferación celular. Esta capacidade de transducción de alta eficiencia é fundamental para o éxito da inmunoterapia.

2. Inmunoxenicidade de baixa 

En comparación con outros vectores virais, os lentivirus teñen unha menor inmunoxenicidade. Como resultado, cando os lentivirus se usan para transducir as células inmunes, o sistema inmunitario do paciente xera unha resposta inmune relativamente máis débil ao virus. Isto axuda a minimizar as reaccións adversas, particularmente no longo prazo de supervivencia das células despois da infusión, evitando así o rexeitamento inmune excesivo.

3. Adaptabilidade das células inmunes

O vector lentiviral é capaz de transducir de xeito eficiente varios tipos de células inmunes,particularmente as células T e as células NK. A través da transducción lentiviral, as células inmunes poden adquirir capacidades de recoñecemento tumoral -, aumentando así a súa capacidade para orientar e matar células tumorales.

4. Precisión de células efectoras transducidas no recoñecemento das células obxectivo 

En inmunoterapia,células efectoras transducidasConsulte as células inmunes que, despois da transducción, expresan o coche e exercen a actividade anti - tumor. Os vectores lentivirais poden entregar con precisión o xene do coche a estas células efectoras, permitíndolles recoñecer e dirixir as células tumorales.Células dianason as células tumorales que son identificadas e destruídas por estas células inmunes. A través da transducción lentiviral, as células inmunes poden mellorar a súa especificidade para recoñecer e matar células tumorales, mellorando así a eficacia terapéutica.

Neste contexto, IPHase, líder en reactivos de investigación in vitro, desenvolveu un kit de envasado de lentivirus e reactivo de concentración de lentivirus para simplificar a complexidade da transducción para clientes de inmunoterapia e mellorar a taxa de éxito da transfección de xenes estables. Estes produtos ofrecen unha solución de parada para os clientes.

Iphase lentivirusPRodutos

O kit de envasado de lentivirus de IPHasecontén todos os reactivos esenciais necesarios paraEnvases de lentivirus, simplificando significativamente o proceso experimental e aforrar tempo e esforzo. Este kit inclúe:

• Lentivirus Packaging Plasmid Mix
• Reactivo transfecto
• Plásmido EGFP
• Reactivo de concentración de lentivirus de IPHase

Este kit axiliza realmente o experimento. Sen necesidade de preparación de reactivos complicados, o envase lentivirus pode completarse de xeito eficiente simplemente seguindo as instrucións incluídas.As vantaxes únicas do kit inclúen tempo de envasado curto, alto título viral e fácil funcionamento, tornándoo ideal para principiantes nos envases de lentivirus. Cada conxunto de reactivos sofre un control estrito de calidade para garantir resultados precisos, fiables e reproducibles, mellorando significativamente a eficiencia de transfección e a estabilidade dos vectores virais, proporcionando así un potente soporte técnico para a preparación das células inmunes.

Ademais, para axudar aos clientes a aforrar custos, IPHase tamén desenvolveu e produciu o reactivo de concentración de Lentivirus, ofrecendo unha solución de concentración rápida e sinxela.Ao simplemente mesturar o sobrenadante do lentivirus co reactivo de concentración, seguido dunha breve incubación e centrifugación usando unha centrífuga estándar, as partículas lentivirais poden concentrarse rapidamente. Este proceso non require unha ultracentrífuga, o que o converte nunha opción cómoda e custo - para a maioría dos usuarios de laboratorio.

En resumo, o reactivo de concentración de lentivirus IPHase non só mellora significativamente a eficiencia de transfección, senón que tamén proporciona un soporte vector vectorial de alta calidade para a preparación das células inmunes. É un produto esencial para experimentos de rutina, investigación preclínica e outras áreas de aplicación.

En resumo, a inmunoterapia, especialmente o coche - Terapias de células T e CAR - NK, representa unha nova dirección no tratamento moderno do cancro. A través de procesos precisos como a ordenación de células, a activación, a transducción, a expansión e o control de calidade, os científicos poden preparar produtos de células inmunes eficientes e seguros para pacientes, permitindo o tratamento do cancro dirixido.A transducción lentiviral, como tecnoloxía básica, desempeña un papel crítico na preparación do coche - t e do coche - células NK debido á súa alta eficiencia e estabilidade.Con avances tecnolóxicos continuos, a inmunoterapia ten o potencial de ofrecer opcións de tratamento innovadoras para máis pacientes, proporcionando un maior valor clínico. No futuro, espérase que a inmunoterapia traia a esperanza terapéutica revolucionaria a máis pacientes con cancro.

Para satisfacer as necesidades de transducción de xenes, expresión e investigación de enfermidades, a IPHase ofrece kits de envasado de lentivirus, reactivos de concentración de lentivirus e lentivirus de rastrexo. Estes lentivirus de rastreadores están embalados con proteína fluorescente verde (GFP), proteína fluorescente vermella MCHERRY e luciferase, permitindo un seguimento doado de células diana tanto in vitro como in vivo.

Ademais, a IPHase tamén pode ofrecer dous lentivirus de rastreadores pre - envasados: GFP e luciferase e MCHERRY & LUCIFERASE. Estes rastreadores pódense seleccionar ou combinar en función das necesidades experimentais, axilizar os fluxos de traballo e mellorar a eficiencia para o seguimento e seguimento de tempo real das células diana.

IPHaseImmunoterapiaRamablePRodutos

Ademais de lentivirus - produtos relacionados empregados no coche - T ou Car - Terapias NK, Iphase, como líder en reactivos de investigación in vitro, tamén fixo contribucións importantes para apoiar as innovacións en CGT (terapia celular e xénica) e outros campos. A IPHase desenvolveu e produciu leucocitos e PBMCs (células mononucleares de sangue periférico) illadas a través da leucapéisis, xunto con varios kits de illamento de células inmunes, para apoiar o rápido desenvolvemento da inmunoterapia.

Os produtos IPHase ofrecen as seguintes vantaxes eun certificado de análise (COA)Verificado por IPHase está dispoñible para cada lote.

Seguridade 

Os produtos da IPHase proceden de doantes/animais sans que sufriron un cribado previo completo, con resultados negativos para probas virales (VIH - 1/2, VHB, VHC, Syphilis).

Cumprimento  

IPHase proporciona formularios de consentimento informados asinados polos doadores, cunha verificación de fontes claras e rastrexables.

Profesionalidade

Os produtos proporcionados por IPHase, obtidos a través de leucaferesis, son manexados por profesionais adestrados. Cada lote vai acompañado dun COA correspondente e os produtos son transportados baixo unha cadea fría estrita para garantir a seguridade, a entrega rápida e a garantía de calidade.

Atención ao cliente

A IPHase ofrece un servizo de alta calidade despois de - Servizo de vendas, asegurando unha experiencia suave e ininterrompida durante todo o proceso de proba.