ઇમ્યુનોલોજિકલ રિસર્ચમાં સ્પ્લેનોસાઇટ્સ: પ્રજાતિઓ અને એકલતા, ઠંડું, પીગળવું પગલાં

કીવર્ડ્સ:સ્પ્લેનોસાઇટ્સ (એસપીએલએસ); સિનોમોલગસ મંકી સ્પ્લેનોસાઇટ્સ; રીસસ મંકી સ્પ્લેનોસાઇટ્સ; કૂતરો સ્પ્લેનોસાઇટ્સ; કેનાઇન સ્પ્લેનોસાઇટ્સ; ઉંદર સ્પ્લેનોસાઇટ્સ; માઉસ સ્પ્લેનોસાઇટ્સ; ઉંદર સ્પ્લેનોસાઇટ્સ; સસલું સ્પ્લેનોસાઇટ્સ; સ્પ્લેનોસાઇટ્સ આઇસોલેશન; ઠંડું સ્પ્લેનોસાઇટ્સ; ઓગળતાં સ્પ્લેનોસાઇટ્સ

Ifase ઉત્પાદન

સ્પ્લેનોસાઇટ્સ (એસપીએલ)બરોળથી અલગ રોગપ્રતિકારક કોષોની વિજાતીય વસ્તી છે, લોહીને ફિલ્ટર કરવા, રોગપ્રતિકારક પ્રતિક્રિયાઓ વધારવામાં અને હોમિયોસ્ટેસિસ જાળવવામાં શામેલ એક મહત્વપૂર્ણ અંગ છે. આ કોષોમાં લિમ્ફોસાઇટ્સ (ટી કોષો, બી કોષો), મેક્રોફેજેસ, ડેંડ્રિટિક સેલ્સ અને નેચરલ કિલર (એનકે) કોષો શામેલ છે, તે બધા અનુકૂલનશીલ અને જન્મજાત પ્રતિરક્ષામાં નિર્ણાયક ભૂમિકા ભજવે છે. સ્પ્લેનોસાઇટ્સનો ઉપયોગ રોગપ્રતિકારક કાર્ય, રસી વિકાસ, સ્વયંપ્રતિરક્ષા રોગો અને કેન્સર ઇમ્યુનોથેરાપીનો અભ્યાસ કરવા માટે પૂર્વવર્તી અને ભાષાંતર સંશોધન માટે થાય છે.

સ્પ્લેનોસાઇટ્સની ભૂમિકા અને રચના (એસપીએલ)

બરોળની અંદર, સ્પ્લેનોસાઇટ્સ અલગ પ્રદેશોમાં રહે છે: લાલ પલ્પ, જે લોહીને ફિલ્ટર કરે છે અને જૂના લાલ રક્ત કોશિકાઓને રિસાયકલ કરે છે, અને સફેદ પલ્પ, જ્યાં રોગપ્રતિકારક પ્રતિક્રિયાઓ શરૂ કરવામાં આવે છે. સફેદ પલ્પ ટી સેલ ઝોન અને બી સેલ ફોલિકલ્સમાં ગોઠવવામાં આવે છે, એન્ટિજેન - પ્રસ્તુત કોષો અને લિમ્ફોસાઇટ્સ વચ્ચેની ક્રિયાપ્રતિક્રિયાની સુવિધા આપે છે. આ અનન્ય આર્કિટેક્ચર સ્પ્લેનોસાઇટ્સ (એસપીએલ) ને ઇલિસ્પોટ, ફ્લો સાયટોમેટ્રી અને મિશ્ર લિમ્ફોસાઇટ પ્રતિક્રિયાઓ જેવા ઇમ્યુનોલોજિકલ એસેઝમાં એક શક્તિશાળી સાધન બનાવે છે.

પ્રજાતિઓ - વિશિષ્ટ સ્પ્લેનોસાઇટ્સ (એસપીએલ)

-સિનોમોલગસ મંકી સ્પ્લેનોસાઇટ્સ:સિનોમોલગસ મંકી સ્પ્લેનોસાઇટ્સનો ઉપયોગ પૂર્વવર્તી સંશોધન માટે થાય છે કારણ કે તેઓ માનવીય રોગપ્રતિકારક પ્રતિક્રિયાઓની વધુ નજીકથી નકલ કરે છે, જે સિનોમોલગસ મંકી સ્પ્લેનોસાઇટ્સને અનુવાદના અભ્યાસ માટે આદર્શ બનાવે છે.

-રીસસ મંકી સ્પ્લેનોસાઇટ્સ:રીસસ મંકી સ્પ્લેનોસાઇટ્સ એ જ રીતે મનુષ્યમાં તેમની નજીકના રોગપ્રતિકારક સમાનતા માટે મૂલ્યવાન છે. રીસસ મંકી સ્પ્લેનોસાઇટ્સનો ઉપયોગ એનિમલ મ models ડેલો અને ક્લિનિકલ એપ્લિકેશન વચ્ચેના અંતરને દૂર કરવામાં મદદ કરે છે.

-કૂતરો સ્પ્લેનોસાઇટ્સ / કેનાઇન સ્પ્લેનોસાઇટ્સ:પશુચિકિત્સક સંશોધનમાં, કૂતરા સ્પ્લેનોસાઇટ્સ (અથવા કેનાઇન સ્પ્લેનોસાઇટ્સ) નો ઉપયોગ કેનિનમાં રોગપ્રતિકારક વિકારનો અભ્યાસ કરવા અને માનવ રોગપ્રતિકારક પ્રતિક્રિયાઓ સાથેની તુલના કરવા માટે થાય છે.

-સસલું સ્પ્લેનોસાઇટ્સ: એન્ટિબોડી ઉત્પાદન અને રસી વિકાસના અભ્યાસમાં સસલું સ્પ્લેનોસાઇટ્સ મહત્વપૂર્ણ છે. સસલું સ્પ્લેનોસાઇટ્સ વિગતોને જાહેર કરવામાં મદદ કરે છે જે માઉસ સ્પ્લેનોસાઇટ્સ અથવા ઉંદર સ્પ્લેનોસાઇટ્સથી અલગ હોઈ શકે છે.

-માઉસ સ્પ્લેનોસાઇટ્સ / ઉંદર સ્પ્લેનોસાઇટ્સ:ઇમ્યુનોલોજીમાં માઉસ સ્પ્લેનોસાઇટ્સ સૌથી વધુ અભ્યાસ કરાયેલ સ્પ્લેનોસાઇટ્સ (એસપીએલ) છે. ઉંદરથી આઇસોલેશન સ્પ્લેનોસાઇટ્સ માટેના પ્રોટોકોલ સારી રીતે સ્થાપિત છે, અને બંને માઉસ સ્પ્લેનોસાઇટ્સ અને ઉંદર સ્પ્લેનોસાઇટ્સનો ઉપયોગ ફ્લો સાયટોમેટ્રી, એલિસ્પોટ અને અન્ય કાર્યાત્મક સહાય માટે થાય છે.

-ઉંદર સ્પ્લેનોસાઇટ્સ:ઉંદર સ્પ્લેનોસાઇટ્સ ઇમ્યુનોટોક્સિકોલોજી અને રસી અભ્યાસ માટે પૂરક મોડેલ પ્રદાન કરે છે. આંતરદૃષ્ટિના તફાવતોને સમજવા માટે ઉંદર સ્પ્લેનોસાઇટ્સની તુલના ઘણીવાર માઉસ સ્પ્લેનોસાઇટ્સ સાથે કરવામાં આવે છે.

સ્પ્લેનોસાઇટ્સ આઇસોલેશન

સ્પ્લેનોસાઇટ્સ આઇસોલેશનફ્લો સાયટોમેટ્રી, સાયટોકાઇન પ્રોડક્શન એસેઝ અથવા મિશ્ર લિમ્ફોસાઇટ પ્રતિક્રિયાઓ જેવા વિવિધ સંશોધન કાર્યક્રમોમાં ઉપયોગમાં લેવાતા બરોળમાંથી રોગપ્રતિકારક કોષો કા ract વાની પ્રક્રિયા છે.

બરોળને એસેપ્ટીક પરિસ્થિતિઓ, અલગતા સોલ્યુશનમાં જમીન અને આરપીએમઆઈ 1640 માધ્યમવાળી જંતુરહિત ટ્યુબમાં સ્થાનાંતરિત કરવામાં આવી હતી. સેન્ટ્રીફ્યુગેશન પછી લ્યુકોસાઇટ સ્તર કાળજીપૂર્વક એકત્રિત કરવામાં આવ્યો હતો. કોષોને આરપીએમઆઈ 1640 માધ્યમથી ધોવાયા હતા, કેન્દ્રત્યાગી અને અલૌકિક કા ed ી નાખવામાં આવ્યા હતા. આ ધોવાનાં પગલાને વધુ પ્રયોગો માટે અલગ કોષોનો ઉપયોગ કરતા પહેલા 1 - 2 વખત પુનરાવર્તિત કરવામાં આવ્યો હતો.

ઠંડું સ્પ્લેનોસાઇટ્સ

ઠંડું સ્પ્લેનોસાઇટ્સભવિષ્યના ઉપયોગ માટે કોષોને સાચવવા માટે એક નિર્ણાયક પગલું છે. ક્રિઓપ્રિઝર્વેશન સંશોધનકારોને તેમની સધ્ધરતા અથવા કાર્યક્ષમતા સાથે સમાધાન કર્યા વિના વિસ્તૃત સમયગાળા માટે સ્પ્લેનોસાઇટ્સ સંગ્રહિત કરવાની મંજૂરી આપે છે.

એકલતા પગલાથી સારી રીતે કેન્દ્રત્યાગી કોષ સસ્પેન્શનનો અલૌકિક કા discard ી નાખવામાં આવે છે અને કોષની સાંદ્રતા ઠંડક માધ્યમમાં પાતળી હતી. દરેક ફ્રીઝિંગ ટ્યુબમાં એલિકોટ ઉમેરો અને ઠંડક કન્ટેનરમાં સ્થાનાંતરિત કરો, કોષો સસ્પેન્શનમાં રહે છે તેની ખાતરી કરો. - 80 ° સે ફ્રીઝરમાં ઠંડું કન્ટેનરને ઝડપથી સ્થિર કરો. લાંબા - ટર્મ સ્ટોરેજ માટે - 150 ° સે ફ્રીઝર કન્ટેનર (અથવા પ્રવાહી નાઇટ્રોજન ટાંકી) પર સ્થાનાંતરિત કરો.

ઓગળતાં સ્પ્લેનોસાઇટ્સ

ઓગળતાં સ્પ્લેનોસાઇટ્સક્રિઓપ્રિઝર્વેશન પછી ઉચ્ચ સેલ સદ્ધરતા અને કાર્યક્ષમતાને સુનિશ્ચિત કરવા માટે કાળજીપૂર્વક કરવું આવશ્યક છે. ડીએમએસઓ અને આઇસ આઇસ ક્રિસ્ટલ રચનાની નુકસાનકારક અસરોને ઘટાડવા માટે સામાન્ય રીતે પીગળવાની પ્રક્રિયા ઝડપી છે.

ક્રિઓટ્યુબ્સ 37 ° સે પાણીના સ્નાનમાં સ્થાનાંતરિત થાય છે અને ત્યાં સુધી ફક્ત દંડ બરફના સ્ફટિકો નળીઓમાં ન રહે ત્યાં સુધી પીગળી જાય છે. ફ્રોઝન ટ્યુબમાં સેલ કલ્ચર માધ્યમના 0.5 - 1 એમએલ ઉમેરો, ફરીથી ગોઠવો અને સસ્પેન્શનને સેલ કલ્ચર માધ્યમથી ભરેલી 15 એમએલ ટ્યુબમાં સ્થાનાંતરિત કરો. સેન્ટ્રીફ્યુજ, સુપરનેટન્ટને દૂર કરો અને કોષની ગોઠવણીને oo ીલી કરવા માટે ટ્યુબને ટેપ કરો. સેલ કલ્ચર માધ્યમના 1 એમએલ ઉમેરો, ફટકો અને પાઇપેટથી ફરી વળવું, 15 મિલીના વોલ્યુમમાં માધ્યમ ઉમેરો. સેન્ટ્રીફ્યુજ, ડી - સુપરનાટાઇઝ કરો, સેલ સંસ્કૃતિ માધ્યમના 1 એમએલ ઉમેરો, અપેક્ષિત કોષની સાંદ્રતા અનુસાર માધ્યમ ઉમેરશે. કોષોને સીઓ 2 ઇન્ક્યુબેટરમાં મૂકો અને id ાંકણમાં થોડો અંતર સાથે 1 એચ માટે સેવન કરો. સેવનના અંતે, એકીકૃત સેલ કાટમાળને વરસાદની મંજૂરી આપવા માટે 1 મિનિટની બહાર નીકળી જાય છે અને છોડી દો. વરસાદ વિના સેલ સસ્પેન્શન કાળજીપૂર્વક નવી 15 એમએલ ટ્યુબમાં સ્થાનાંતરિત કરવામાં આવ્યું હતું. કોષોની પ્રવૃત્તિ નક્કી કરવા માટે કોષોની ગણતરી કરવામાં આવી હતી.

અંત

સ્પ્લેનોસાઇટ્સ, તેમની વિવિધ રચના અને રોગપ્રતિકારક પ્રતિક્રિયાઓમાં મુખ્ય ભૂમિકા સાથે, રોગપ્રતિકારક સંશોધનમાં અમૂલ્ય સાધનો છે. સસલા અને કૂતરાઓ જેવી ઉંદરો, પ્રાઈમેટ્સ અથવા અન્ય પ્રજાતિઓ, સ્પ્લેનોસાઇટ્સમાંથી મેળવાયેલી, રોગપ્રતિકારક કાર્ય, રોગ પદ્ધતિઓ, રસી વિકાસ અને કેન્સર ઇમ્યુનોથેરાપીના નિર્ણાયક અભ્યાસની સુવિધા આપે છે. તેમની અખંડિતતા અને સધ્ધરતાને સાચવવા માટે અલગતા, ઠંડું અને પીગળવાની પ્રક્રિયાઓ જરૂરી છે, સંશોધનકારોને વિવિધ મોડેલોમાં સેલ્યુલર ગતિશીલતાનું અન્વેષણ કરવા માટે સક્ષમ બનાવે છે. જેમ જેમ ઇમ્યુનોલોજી વિશેની અમારી સમજણ વધારે છે, સ્પ્લેનોસાઇટ્સનો ઉપયોગ પૂર્વવર્તી અભ્યાસ અને ક્લિનિકલ એપ્લિકેશન્સ વચ્ચેના અંતરને દૂર કરવામાં, માનવ અને પશુચિકિત્સા બંને દવાઓમાં પ્રગતિની ખાતરી કરવા માટે નિમિત્ત બનશે.