પ્રાથમિક હેપેટોસાઇટ્સ: વિટ્રો ડ્રગ રિસર્ચમાં નોન - ક્લિનિકલને આગળ વધારવા માટેનું એક નિર્ણાયક સાધન

પ્રાથમિક હેપેટોસાઇટ્સ: વિટ્રો ડ્રગ રિસર્ચમાં નોન - ક્લિનિકલને આગળ વધારવા માટેનું એક નિર્ણાયક સાધન

યકૃત, ડ્રગના સંપર્કમાં આવવા માટેના પ્રાથમિક અંગ તરીકે, ડ્રગ ચયાપચય અને ઝેરી પ્રક્રિયામાં નિર્ણાયક ભૂમિકા ભજવે છે. પ્રાથમિક હેપેટોસાઇટ્સ સેલ્યુલર લાક્ષણિકતાઓ અને એન્ઝાઇમ્સ અને કોફેક્ટર્સના શારીરિક સ્તરોનું સંપૂર્ણ સ્પેક્ટ્રમ ધરાવે છે, જેમાં મેમ્બ્રેન - બાઉન્ડ એન્ઝાઇમ્સ જેવા કે સાયટોક્રોમ પી 450 (એક મિશ્રિત - ફંક્શન ox ક્સિડેઝમાં સરળ એન્ડોપ્લાઝિક રેટિક્યુલમ) અને સાયટ os સોલિક એસ્ટેરાસ, બધા મેટબોલિક માર્ગમાં જોવા મળે છે. આ કારણોસર, પ્રાથમિક હેપેટોસાઇટ્સને વિટ્રો યકૃતના મ models ડેલોમાં બાંધવા માટે સોનાના ધોરણ તરીકે વ્યાપકપણે માનવામાં આવે છે અને ડ્રગની ક્રિયાપ્રતિક્રિયા, ડ્રગ ચયાપચય અને ઝેરી અભ્યાસના સંશોધનકારો દ્વારા તરફેણ કરવામાં આવે છે. આ લેખ પ્રાથમિક હેપેટોસાઇટ્સ અને ડ્રગના વિકાસમાં તેમની એપ્લિકેશનો પર આધારિત 2 ડી અને 3 ડી સંસ્કૃતિ મોડેલોની ઝાંખી પ્રદાન કરે છે.

કીવર્ડ્સ: પ્રાથમિક હિપેટોસાઇટ્સ, 2 ડી વાવેતર, 3 ડી વાવેતર, ઓર્ગેનોઇડ્સ, સીઓ - સંસ્કૃતિ.

1. 1. પ્રાથમિક હેપેટોસાઇટ્સનો અલગતા

વિટ્રો યકૃત મોડેલોમાં સ્થાપિત કરવા માટે પ્રાથમિક હેપેટોસાઇટ્સનો અલગતા એ એક નિર્ણાયક પગલું છે, જેમાં બે - સ્ટેપ કોલેજેનેઝ પરફ્યુઝન પદ્ધતિ સૌથી વધુ ઉપયોગમાં લેવાય છે. નાના પ્રાણીઓમાં, યકૃત પરફ્યુઝન પોર્ટલ નસ અથવા હલકી ગુણવત્તાવાળા વેના કાવા દ્વારા કરી શકાય છે, જ્યારે મોટા પ્રાણીઓને સામાન્ય રીતે યકૃત લોબ્સ અથવા સેગમેન્ટ્સ દ્વારા પરફેઝનની જરૂર પડે છે. કેટલાક મુખ્ય પરિબળો હિપેટોસાઇટ્સના સફળ અલગતાને પ્રભાવિત કરે છે: પ્રથમ, કોલેજેનેઝ નોન - સાયટોટોક્સિક હોવું જોઈએ. બીજું, પાચનનો સમય નિર્ણાયક છે—બંને હેઠળ - પાચન અને તેથી વધુ - પાચન હિપેટોસાઇટ ઉપજ અને સધ્ધરતા સાથે સમાધાન કરી શકે છે. ત્રીજું, યકૃતની સ્થિતિ શ્રેષ્ઠ હોવી જોઈએ, કારણ કે હેપેટોસાઇટ્સ ઇસ્કેમિક નુકસાન માટે ખૂબ સંવેદનશીલ હોય છે. મેટાબોલિક દર ઘટાડવા અને મેટાબોલિક હાયપોક્સિયા અને ત્યારબાદના ઇસ્કેમિયાને રોકવા માટે હેપેટોસાઇટ તૈયારી માટે ઉપયોગમાં લેવાતા યકૃતને ઝડપથી ઠંડુ કરવું જોઈએ.

ડ્રગ રિસર્ચમાં ઉપયોગમાં લેવાતા પ્રાથમિક હેપેટોસાઇટ્સના ધોરણો નીચે મુજબ છે:

1. 2. પ્રાથમિક હેપેટોસાઇટ 2 ડી સંસ્કૃતિ

સસ્પેન્શન હેપેટોસાઇટ મોડેલ

તેમાં સંપૂર્ણ ડ્રગ - મેટાબોલાઇઝિંગ એન્ઝાઇમ્સ અને કોફેક્ટર્સ શામેલ છે, જે તેને વિવિધ મેટાબોલિક ક્લિયરન્સ માર્ગોનો અભ્યાસ કરવા માટે યોગ્ય બનાવે છે. જો કે, સસ્પેન્શન હેપેટોસાઇટ્સની સધ્ધરતા અને ડ્રગની પ્રવૃત્તિ - મેટાબોલાઇઝિંગ એન્ઝાઇમ્સ ધીમે ધીમે ઘટાડો થાય છે કારણ કે ઇન વિટ્રો સેવનનો સમય વધે છે, સેવનના સમયને મહત્તમ 4 કલાક સુધી મર્યાદિત કરે છે. આ મોડેલનો ઉપયોગ સામાન્ય રીતે મધ્યમથી ઉચ્ચ ક્લિયરન્સ દરવાળી દવાઓની મંજૂરીનો અંદાજ કા .વા માટે થાય છે. જ્યારે ક્લિયરન્સ રેટ 20%કરતા ઓછો હોય, ત્યારે સચોટ ક્લિયરન્સ મૂલ્યો નક્કી કરી શકાતા નથી. પરંપરાગત સસ્પેન્શન હેપેટોસાઇટ સસ્પેન્શન હેપેટોસાઇટ રિલે પદ્ધતિ (આકૃતિ 1) નો ઉપયોગ સેવનના સમયને 20 કલાક અથવા તેથી વધુ સુધી વિસ્તૃત કરવા માટે થઈ શકે છે.

અરજી:નાના પરમાણુ દવાઓ માટે એન્ઝાઇમ પ્રવૃત્તિ અને મેટાબોલિક સ્થિરતા અભ્યાસ.

આકૃતિ 1. સસ્પેન્શન હેપેટોસાઇટ રિલે મેથડ ટ્રાન્સફર પ્રક્રિયા

સોર્સ: ડ્રગ મેટાબ ડિસ્પોઝ, 2012,40 (9): 1860–1865

પ્લેટબલ હેપેટોસાઇટ્સ મોડેલ

કોલેજન - કોટેડ કલ્ચર પ્લેટો પર 2 ડી સિસ્ટમમાં પ્રાથમિક હેપેટોસાઇટ્સ સંસ્કારી છે. હેપેટોસાઇટ્સ એક ઉપકલા મોર્ફોલોજીનું પ્રદર્શન કરે છે, જેમાં ફેલાયેલા ન્યુક્લી સાથે, ઘણીવાર દ્વિસંગી સ્વરૂપમાં રજૂ થાય છે. સિંગલ હેપેટોસાઇટ મોનોલેયર સંસ્કૃતિની ખામીઓમાં શામેલ છે: 1. સેલ પોલેરિટી અને ફંક્શનમાં ફેરફાર .2. અન્ય સંબંધિત સેલ પ્રકારોનો અભાવ (એટલે ​​કે, નોન - પેરેન્કાયમલ કોષો) જે સામાન્ય કાર્ય માટે જરૂરી છે .3. તેમના કાર્યો કરવા માટે હેપેટોસાઇટ્સને ટેકો આપવા માટે પૂરતા પોષક તત્વો અને પેરાક્રાઇન પરિબળો પ્રદાન કરવામાં અસમર્થતા (જેમ કે પિત્ત એસિડ અને સીરમ પ્રોટીન બાયોસિન્થેસિસ).

અરજીઓ:

1). ડ્રગનું મૂલ્યાંકન - ડ્રગ ક્રિયાપ્રતિક્રિયાઓ:આમાં એન્ઝાઇમ ઇન્ડક્શન, એન્ઝાઇમ અવરોધ અને ટ્રાન્સપોર્ટર અભ્યાસ શામેલ છે. પ્રથમ, જ્યારે કોઈ દવા પ્રેરક તરીકે કાર્ય કરે છે, ત્યારે તે ડ્રગ - મેટાબોલિંગ એન્ઝાઇમ્સ અને ટ્રાન્સપોર્ટર્સની અભિવ્યક્તિ તરફ દોરી શકે છે. મજબૂત પ્રેરકો એક સાથે બહુવિધ જનીનોને ઉત્તેજિત કરી શકે છે, જેમ કે સીવાયપી 2 બી 6, સીવાયપી 3 એ 4, સીવાયપી 2 સી 9, યુજીટી અને એમઆરપી 2 જેવા ઘણા પરિવહન પ્રોટીન જેવા ફેનોબાર્બીટલ ઇન્ડક્શન. બીજું, ત્યાં પ્રજાતિઓ છે - હેપેટોસાઇટ્સ પ્રેરકોને કેવી પ્રતિક્રિયા આપે છે તેમાં વિશિષ્ટ તફાવતો. ઉદાહરણ તરીકે, રિફામ્પિસિન માનવ અને સસલાના હેપેટોસાઇટ્સ માટે અસરકારક પ્રેરક છે, પરંતુ ઉંદર હેપેટોસાઇટ્સ પર કોઈ ઇન્ડક્શન અસર નથી. છેવટે, પ્લેટબલ હેપેટોસાઇટ્સની સબઓપ્ટિમલ પ્લેટિંગ ઘનતા, પી 450 ની મૂળભૂત અભિવ્યક્તિમાં ઘટાડો અને કૃત્રિમ રીતે ઇન્ડક્શન પ્રતિસાદમાં વધારો કરી શકે છે. આકૃતિ 3 માં બતાવ્યા પ્રમાણે, લોઅર પ્લેટિંગ ડેન્સિટીઝ પર હેપેટોસાઇટ્સ સીવાયપી 1 એ 2, સીવાયપી 2 બી 6, અને સીવાયપી 3 એ 4 ની નીચી મૂળભૂત પ્રવૃત્તિ દર્શાવે છે, પરંતુ મજબૂત ઇન્ડક્શન પ્રતિક્રિયાઓ. તેથી, શારીરિક રીતે સંબંધિત ડેટા મેળવવા માટે યોગ્ય પ્લેટિંગ ઘનતા પર તંદુરસ્ત હિપેટોસાઇટ્સ જરૂરી છે.

આકૃતિ 2.

સોર્સ: વર્તમાન ડ્રગ ડિસ્કવરી ટેક્નોલોજીઓ, 2010, 7: 188 - 198

2). હેપેટોટોક્સિસીટી આકારણી: સેલ મોર્ફોલોજી, વેક્યુલ અને લિપિડ ટીપું એકત્રીકરણ, અને સેલ જોડાણ/ટુકડી જેવા પ્રકાશ માઇક્રોસ્કોપ હેઠળ મોર્ફોલોજિકલ ફેરફારોનું નિરીક્ષણ કરવું. હેપેટોસાઇટ નેક્રોસિસ (એસ્પાર્ટેટ એમિનોટ્રાન્સફેરેઝ, લેક્ટેટ ડિહાઇડ્રોજેનેઝ અને એલેનાઇન એમિનોટ્રાન્સફેરેઝ દ્વારા સૂચવાયેલ) અને એપોપ્ટોસિસ (ડીએનએ ફ્રેગમેન્ટેશન) ની તપાસ. સાયટોકાઇન - મધ્યસ્થી સાયટોટોક્સિસીટી માટે, હેપેટોસાઇટ્સની એકલ મોનોલેયર સંસ્કૃતિઓ પડોશી નોન - પેરેન્કાયમલ કોષો, જેમ કે કુપ્ફર કોષો, તારલેટ કોષો અને સિનુસાઇડલ એન્ડોથેલિયલ કોષોમાંથી પ્રકાશિત પદાર્થો દ્વારા નિયમનને કારણે ઝેરી પ્રતિક્રિયાઓની આગાહી કરી શકતી નથી.

3). ધીમી ચયાપચય સંયોજન ક્લિયરન્સ અને તેના ચયાપચયના અભ્યાસ માટે "રિલે પદ્ધતિ": ડ્રગની પ્રવૃત્તિ - પ્લેટબલ હેપેટોસાઇટ્સમાં મેટાબોલાઇઝિંગ ઉત્સેચકો 24 કલાક પ્લેટિંગ પછી ઘટવા માંડે છે. સીરમ સાથે પ્લેટબલ હેપેટોસાઇટ્સને સેવન કર્યા પછી, 24 કલાક માટે રસનું સંયોજન ધરાવતા મફત માધ્યમ, માધ્યમ એકત્રિત અને મિશ્રિત કરવામાં આવે છે, પછી વધુ અભ્યાસ માટે નવા પ્લેટબલ હેપેટોસાઇટ્સમાં સ્થાનાંતરિત કરવામાં આવે છે (આકૃતિ 3).

આકૃતિ 3. પ્લેટબલ હેપેટોસાઇટ રિલે મેથડ ટ્રાન્સફર પ્રક્રિયા

સોર્સ: ડ્રગ મેટાબોલિઝમ લેટર્સ, 2016, 10: 3 - 15

3). સેલ્યુલર અપટેક, એન્ડોસાઇટોસિસ, એન્ડોસોમલ એસ્કેપ અને હિપેટોસાઇટ - લક્ષિત નાના ન્યુક્લિક એસિડ દવાઓના લક્ષ્ય જનીન પર મૌન અસરોનું મૂલ્યાંકન કરો.

સેન્ડવિચ વાવેતરનું મોડેલ

વિટ્રોમાં, હેપેટોસાઇટ્સને સેન્ડવિચ વાવેતર તરીકે ઓળખાતા વિવો સ્ટ્રક્ચર્સમાં ફરીથી બાંધવા માટે કોલેજન અથવા મેટ્રિજેલના બે સ્તરો વચ્ચે સંસ્કારી થઈ શકે છે. જેલ - કોલેજન (સેન્ડવિચ સ્ટ્રક્ચર) ના બે સ્તરો વચ્ચે સંસ્કારી હેપેટોસાઇટ્સ કોષોની મોર્ફોલોજી અને સધ્ધરતામાં સુધારો કરી શકે છે, અને લાંબા સમય સુધી તેમની કાર્યક્ષમતા જાળવી શકે છે. તદુપરાંત, સેન્ડવિચ સંસ્કૃતિમાં હેપેટોસાઇટ્સ ધ્રુવીયતાને પુન restore સ્થાપિત કરી શકે છે, જે બેસોલ્ટ્રલ અને કેનાલિક્યુલર ટ્રાન્સપોર્ટરોના યોગ્ય સ્થાનિકીકરણને મંજૂરી આપે છે, તેમજ કાર્યાત્મક પિત્ત નળીના નેટવર્ક (આકૃતિ 4) ની રચના.

આકૃતિ 4. માનવ હેપેટોસાઇટ સેન્ડવિચ મોડેલમાં ટ્રાન્સપોર્ટર્સની ધ્રુવીકૃત અભિવ્યક્તિ

સોર્સ: વર્તમાન ડ્રગ ડિસ્કવરી ટેક્નોલોજીઓ, 2010, 7, 188 - 198

અરજીઓ:

1. 1). સંયોજનોના પિત્તાશયના વિસર્જનનો અંદાજ.
2. 2). અંતર્જાત અને બાહ્ય સંયોજનો અને ચયાપચયના યકૃત અને પિત્તરસ વિષયનું મૂલ્યાંકન.
3. 3). ચયાપચય અને ટ્રાન્સપોર્ટરો દ્વારા મધ્યસ્થી ક્લિઅરન્સનો અંદાજ કા, ો, અને ફિઝિયોલોજીનું નિર્માણ - આધારિત ફાર્માકોકિનેટિક મોડેલો.
4. 4). હિપેટોટોક્સિસીટીનો અભ્યાસ કરવો અને ક્લિનિકલ ડ્રગ માટે પદ્ધતિઓ પ્રદાન કરવી - યકૃતની ઇજા. સંભવિત ડ્રગ - મનુષ્યમાં યકૃતની ઇજાની આગાહી કરવા માટે ડેટા સિસ્ટમો ફાર્માકોલોજી મોડેલોમાં એકીકૃત છે.
5.  
   1. 3. પ્રાથમિક હેપેટોસાઇટ 3 ડી સંસ્કૃતિ

6. 3 ડી સંસ્કૃતિ સિસ્ટમોમાં, હેપેટોસાઇટ્સ ત્રણ - પરિમાણીય મેટ્રિક્સમાં સંસ્કારી છે, જે 2 ડી મોનોલેયર સંસ્કૃતિઓની તુલનામાં વિવો યકૃત આર્કિટેક્ચરમાં વધુ સારી રીતે નકલ કરે છે. આ સિસ્ટમો સેલ - સેલ અને સેલ - મેટ્રિક્સ ક્રિયાપ્રતિક્રિયાઓને પ્રોત્સાહન આપે છે, જે ડ્રગ ચયાપચય, પ્રોટીન સ્ત્રાવ અને પિત્ત રચના સહિતના યકૃતના વધુ શારીરિક કાર્યોને પુનર્સ્થાપિત કરી શકે છે. પ્રાથમિક હેપેટોસાઇટ 3 ડી સંસ્કૃતિઓનો ઉપયોગ યકૃતનો અભ્યાસ કરવા માટે થઈ શકે છે - વિવોમાં વધુ વિશિષ્ટ કાર્યો - પર્યાવરણ જેવા, ડ્રગ પરીક્ષણ, ઝેરી આકારણી અને રોગના મોડેલિંગ માટેના ફાયદાઓ પ્રદાન કરે છે.

   ગોધા

અલ્ટ્રા - ઓછી જોડાણ સંસ્કૃતિ, લટકતી ડ્રોપ સંસ્કૃતિ અને ચુંબકીય કોષ સંસ્કૃતિ (આકૃતિ 5) જેવી તકનીકો દ્વારા, પ્રાથમિક હિપેટોસાઇટ્સ બાહ્ય મેટ્રિસ પર આધાર રાખ્યા વિના 150 - 175 µm સુધીના વ્યાસ સાથે સ્પેર oid ઇડલ એકંદરમાં એકઠા થઈ શકે છે. ગોળાકાર સંસ્કૃતિનો એક ફાયદો એ છે કે દરેક ગોળાકારને ફક્ત 1,330 - 2,000 કોષોની જરૂર હોય છે, જે અન્ય 3 ડી સંસ્કૃતિ તકનીકોની તુલનામાં કોષોની સંખ્યામાં નોંધપાત્ર ઘટાડો કરે છે. તાજેતરના અધ્યયનોએ બતાવ્યું છે કે પ્રાથમિક હેપેટોસાઇટ ગોળાકાર સંસ્કૃતિઓ 5 અઠવાડિયા સુધી ટકાવી શકે છે, સીવાયપી એન્ઝાઇમ પ્રવૃત્તિ 8 અને દિવસ 35 ની વચ્ચે લગભગ યથાવત રહી છે. પ્રોટીઓમિક્સ વિશ્લેષણમાં બહાર આવ્યું છે કે, સેન્ડવિચ સંસ્કૃતિની તુલનામાં, ડ્રગ શોષણ, વિતરણ, ચયાપચય માટે જવાબદાર ઉત્સેચકો વધુ સારી રીતે સચોટ છે. જો કે, યકૃત સેલ એકંદર કરતા વધુ જટિલ છે. હેપેટોસાઇટ્સની બાસોલેટરલ બાજુ લોહી સાથે સંપર્ક કરે છે, જ્યારે પિત્ત ical પિકલ બાજુથી બહાર નીકળે છે, જે જટિલ યકૃત લોબ્યુલ સ્ટ્રક્ચરની મુખ્ય લાક્ષણિકતા છે, અને આને ગોળાકાર મોડેલમાં નકલ કરી શકાતી નથી.

અરજીઓ:

1. 1). ધીમી ચયાપચય સંયોજન ક્લિયરન્સ અને તેના ચયાપચયનો અભ્યાસ.
2. 2). હેપેટોટોક્સિસીટી સંશોધન.
3. 3). સેલ્યુલર અપટેક, એન્ડોસાઇટોસિસ, એન્ડોસોમલ એસ્કેપ અને હિપેટોસાઇટના લક્ષ્ય જનીનો પર મૌન અસરોનું મૂલ્યાંકન - લક્ષિત નાના ન્યુક્લિક એસિડ દવાઓ.

આકૃતિ 5. ગોળાકાર સંસ્કૃતિ પદ્ધતિ

યકૃત ઓર્ગેનોઇડ્સ મોડેલ

ઓર્ગેનોઇડ્સની સર્વસંમતિ વ્યાખ્યા છે: સ્ટેમ સેલ્સ, પૂર્વજ કોષો અથવા વિભિન્ન કોષોમાંથી તારવેલી 3 ડી સ્ટ્રક્ચર્સ, વિટ્રોમાં મૂળ પેશીઓના કેટલાક કાર્યો અને માળખાંનું પુન rod ઉત્પાદન કરવામાં સક્ષમ, વિવો માઇક્રોએનવાયર્નમેન્ટ અને સેલ - થી - સેલ ક્રિયાપ્રતિક્રિયામાં અસરકારક રીતે નકલ કરે છે. યકૃત ઓર્ગેનોઇડ્સને માનવ યકૃત બાયોલોજી સંશોધન માટેના સૌથી અદ્યતન મોડેલ તરીકે ઓળખવામાં આવ્યા છે.

યકૃત ઓર્ગેનોઇડ બાંધકામ માટે સેલ સ્રોત:

① પ્લુરીપોટેન્ટ સ્ટેમ સેલ્સ (પીએસસી):

એમ્બ્રોયોનિક સ્ટેમ સેલ્સ (ઇએસસી) અને પ્રેરિત પ્લુરીપોટેન્ટ સ્ટેમ સેલ્સ (આઇપીએસસી) પાસે ઉચ્ચ પ્લુરીપોટેન્સી, પ્લાસ્ટિસિટી અને અમર્યાદિત ફેલાયેલી ક્ષમતા છે. વિશિષ્ટ સિગ્નલિંગ પરિબળોના પ્રભાવ હેઠળ, તેઓ હેપેટોસાઇટ - પ્રવૃત્તિ અને કાર્ય સાથેના કોષોની જેમ તફાવત કરે છે. જો કે, પીએસસીમાંથી ઉદ્દભવેલા યકૃત ઓર્ગેનોઇડ્સ એપીજેનેટિક અને આનુવંશિક ફેરફારોમાંથી પસાર થઈ શકે છે, એમ્પ્લીફિકેશન દરમિયાન રંગસૂત્રીય એનેપ્લોઇડિ ફેરફારોનું પ્રદર્શન કરે છે.

અરજીઓ:

1. 1). આનુવંશિક યકૃત રોગના નમૂનાઓ
2. 2). ચેપી યકૃત રોગના મોડેલો
3. 3). નશામાં નળ પરીક્ષણ

② યકૃત પેશી - તારવેલા કોષો: આમાં કોલેંગિઓસાઇટ્સ અને હિપેટોસાઇટ્સ શામેલ છે. પરિપક્વ હિપેટોસાઇટ્સ ચોક્કસ વાતાવરણમાં સ્ટેમ સેલ સંભવિત અને ફેલાયેલી ક્ષમતા જાળવી રાખે છે. પીએસસી - તારવેલા ઓર્ગેનોઇડ્સની તુલનામાં, પ્રાથમિક પેશીઓમાંથી મેળવેલા ઓર્ગેનોઇડ્સ વધુ સ્થિર જીનોમ સાથે વધુ પરિપક્વ હોય છે, અને વિટ્રો સંસ્કૃતિમાં લાંબા - ટર્મ દરમિયાન ફેનોટાઇપિક અને આનુવંશિક સ્થિરતા જાળવી રાખે છે. જો કે, ગર્ભના માનવ હેપેટોસાયટ્સ અથવા પુખ્ત માઉસ પ્રાથમિક હિપેટોસાઇટ્સની તુલનામાં પુખ્ત માનવ હેપેટોસાઇટ ઓર્ગેનોઇડ્સની લાંબી - ટર્મ ફેલાવવાની ક્ષમતા મર્યાદિત છે. પુખ્ત વયના હેપેટોસાઇટ ઓર્ગેનોઇડ્સની સંસ્કૃતિ પડકારજનક રહે છે.

સંસ્કૃતિ પદ્ધતિ (આકૃતિ 6): યકૃત પેશીઓ એક કોષોમાં પચાય છે, અને મેટ્રિજેલ અને કોષોનું મિશ્રણ 24 - સારી પ્લેટમાં ગુંબજ - આકારની રચનાઓ બનાવવા માટે સીડ કરવામાં આવે છે. સેલ કલ્ચર ઇન્ક્યુબેટર (37 ° સે) માં 15 મિનિટ માટે સેવન કરો. નક્કરકરણ પછી, ચોક્કસ સંસ્કૃતિ માધ્યમ ઉમેરો. લગભગ 14 દિવસ પછીનો માર્ગ. મૂળ માધ્યમને 7 - 10 દિવસ પછી તફાવત માધ્યમથી બદલો.

અરજીઓ:

1. 1). હેપેટોટોક્સિસીટી મોડેલો
2. 2). વિટ્રો મેટાબોલિઝમ ડિસઓર્ડર અભ્યાસ
3. 3). નોન - આલ્કોહોલિક ફેટી યકૃત રોગ
4. 4). સૌમ્ય અને જીવલેણ યકૃત રોગો માટે ડ્રગ વિકાસ

આકૃતિ 6. પેશીઓની સંસ્કૃતિ અને પેસેજ પ્રક્રિયા - લીવર ઓર્ગેનોઇડ્સ મેળવે છે

સોર્સ: સેલ અને બાયોસાયન્સ (2023) 13: 197

ગોળાકાર સંસ્કૃતિ અને ઓર્ગેનોઇડ સંસ્કૃતિની તુલના

4. પ્રાથમિક હેપેટોસાઇટ કો - સંસ્કૃતિ મોડેલ

1. 1. 2 ડી પ્રાથમિક હેપેટોસાઇટ કો - સંસ્કૃતિ મોડેલ
      

      2 ડી પ્રાથમિક હેપેટોસાઇટ કો - સંસ્કૃતિ મોડેલમાં, બે અથવા વધુ જુદા જુદા સેલ પ્રકારો મિશ્રિત અને બે - પરિમાણીય વાતાવરણમાં સંસ્કારી છે. આ મોડેલની મુખ્ય લાક્ષણિકતા એ વિવિધ કોષ પ્રકારો, કોષો અને એક્સ્ટ્રા સેલ્યુલર મેટ્રિક્સ વચ્ચેની ક્રિયાપ્રતિક્રિયા, અથવા સાયટોકાઇન્સ અને રાસાયણિક સંદેશાવ્યવહાર દ્વારા પરોક્ષ સિગ્નલ ટ્રાન્સમિશન વચ્ચેની સીધી ક્રિયાપ્રતિક્રિયા છે. આલ્બ્યુમિન પ્રોડક્શન અને ડ્રગ મેટાબોલિઝમ ક્ષમતા જેવા પ્રાથમિક હેપેટોસાઇટ કાર્યો ત્રણ અઠવાડિયા સુધી જાળવી શકાય છે.

      અરજીઓ:

      1. 1). પ્રાથમિક હેપેટોસાઇટ્સ કો
      2. 2). પ્રાથમિક હેપેટોસાઇટ્સ કો - નોન - પેરેન્કાયમલ યકૃત કોષો (દા.ત., સ્ટેલેટ સેલ્સ, સિનુસાઇડલ એન્ડોથેલિયલ સેલ્સ) સાથે સંસ્કારી છે: આ મોડેલ ડ્રગ - પ્રેરિત યકૃતની ઇજા (ડીઆઈએલઆઈ) ના સંશોધન માટે ઉપયોગી છે, કારણ કે તે સાયટોકિન્સ, કેમોકિન્સ અને ડ્રગના એક્સપોઝર પછી યકૃતના અનુકૂળતાના જવાબોને મોડ્યુલેશનમાં વૃદ્ધિના પરિબળોની તપાસ કરવામાં મદદ કરે છે.
      3. 3). પ્રાથમિક હેપેટોસાઇટ્સ કો
      4. 4). આઇફેસનું હેપેટોમેક્સ ™સીઓ - સંસ્કૃતિ સિસ્ટમ: આઇફેસે વિવિધ જાતિઓમાંથી પ્રાથમિક હિપેટોસાઇટ્સ સાથે સીઓ - સંસ્કૃતિ સિસ્ટમ વિકસાવી છે, જેને હેપેટોમેક્સ તરીકે ઓળખવામાં આવે છે.. સહ - સ્ટ્રોમલ કોષો સાથે માનવ પ્રાથમિક હિપેટોસાઇટ્સની સંસ્કૃતિ દ્વારા, સારી દવા જાળવવી શક્ય છે આ સિસ્ટમ ધીમી - મેટાબોલાઇઝિંગ કમ્પાઉન્ડ ક્લિયરન્સ રેટ અને તેમના ચયાપચયનો અભ્યાસ કરવા માટે યોગ્ય છે.

      આ સહ - સંસ્કૃતિ મોડેલ ડ્રગ ચયાપચય, ઝેરી અને યકૃત - સંબંધિત રોગ પ્રક્રિયાઓનું મૂલ્યાંકન કરવા માટે વધુ શારીરિક રીતે સંબંધિત પ્લેટફોર્મ પ્રદાન કરે છે, જેમાં વિવિધ કોષ પ્રકારો યકૃતના કાર્ય અને રોગમાં કેવી રીતે ફાળો આપે છે તેની આંતરદૃષ્ટિ આપે છે.
      
      

      3 ડી પ્રાથમિક હેપેટોસાઇટ કો - સંસ્કૃતિ મોડેલ

      ડાયરેક્ટ 3 ડી કો - સંસ્કૃતિ: આ મ model ડેલમાં સ્વ -રચના કરવા માટે બે અથવા વધુ વિવિધ પ્રકારના યકૃત કોષો (દા.ત., પ્રાથમિક હિપેટોસાઇટ્સ, સિનુસાઇડલ એન્ડોથેલિયલ કોષો, હિપેટિક સ્ટેલેટ સેલ્સ, કુપ્ફર સેલ્સ) નો સમાવેશ થાય છે. ડાયરેક્ટ 3 ડી સીઓ - સંસ્કૃતિ સેલ - થી સેલ એડહેશન, દ્રાવ્ય સાયટોકાઇન્સ દ્વારા પેરાક્રાઇન સિગ્નલિંગ અને એક્સ્ટ્રા સેલ્યુલર મેટ્રિક્સ એડહેશન, હિપેટોસાઇટ્સ વચ્ચેના સંદેશાવ્યવહારને સક્ષમ કરવા જેવા વિવિધ યકૃત કોષો વચ્ચે ગા close ક્રિયાપ્રતિક્રિયાને મંજૂરી આપે છે.

      અરજીઓ:

      1. 1). યકૃત ફાઇબ્રોસિસ મોડેલ: યકૃત ફાઇબ્રોસિસની પદ્ધતિઓ અને પ્રગતિનો અભ્યાસ કરવા માટે વપરાય છે.
      2. 2). ડ્રગ - પ્રેરિત યકૃતની ઇજા (ડીઆઈએલઆઈ) મોડેલ: ડ્રગ્સ દ્વારા થતાં યકૃતના નુકસાનનું અનુકરણ અને આકારણી કરવામાં મદદ કરે છે.
      3. 3). ડ્રગની ક્રિયાપ્રતિક્રિયાઓ, ડ્રગ ચયાપચય અને એન્ઝાઇમ ઇન્ડક્શન: વિવિધ દવાઓ કેવી રીતે ક્રિયાપ્રતિક્રિયા કરે છે, તેઓ કેવી રીતે ચયાપચય કરે છે, અને તેઓ યકૃતના ઉત્સેચકોને કેવી રીતે પ્રેરિત કરે છે તેનું મૂલ્યાંકન કરે છે.

      પરોક્ષ 3 ડી સીઓ - સંસ્કૃતિ: આ પદ્ધતિ 3 ડી વાતાવરણમાં બે અથવા વધુ પ્રકારનાં કોષો (જેમ કે એનઆઈએચ/3 ટી 3 કોષો અથવા સિનુસાઇડલ એન્ડોથેલિયલ કોષોવાળા પ્રાથમિક હિપેટોસાઇટ્સ) સંસ્કૃતિ માટે શારીરિક અલગ સિસ્ટમ (દા.ત., ટ્રાન્સવેલ અથવા અન્ય સામગ્રી) નો ઉપયોગ કરે છે, જ્યાં સીધો કોષ - થી - સેલ સંપર્કને અટકાવવામાં આવે છે. કોષો વચ્ચેનો સંદેશાવ્યવહાર દ્રાવ્ય સાયટોકાઇન્સ દ્વારા થાય છે.

      અરજીઓ:
      શરીરમાં યકૃત કોષો વચ્ચે નોન - સંપર્ક સંદેશાવ્યવહારનો અભ્યાસ કરવા માટે વપરાય છે.

      
      સારાંશમાં, આઇફેસ, વિટ્રો બાયોલોજિકલ રિસર્ચમાં નેતા તરીકે, નોન - ક્લિનિકલ ડ્રગ પરીક્ષણ માટે વ્યાપક ઉકેલો પ્રદાન કરે છે. વિવિધ જાતિઓથી પ્રાથમિક હેપેટોસાઇટ્સની અલગતા અને સંસ્કૃતિથી લઈને ચોક્કસ એપ્લિકેશનો માટે સંસ્કૃતિ મીડિયા અથવા મલ્ટિ - સ્પષ્ટીકરણ કોલેજન - કોટેડ પ્લેટો જેવા સહાયક ઉત્પાદનોના વિકાસ સુધી, આઇફેસ ડ્રગ શોધ અને વિકાસ માટેના વિટ્રો સંશોધન સાધનોની શ્રેષ્ઠ ઓફર કરવા માટે સમર્પિત છે. અમે ફાર્માસ્યુટિકલ ઉદ્યોગના ગ્રાહકો માટે વિશ્વસનીય ભાગીદાર છીએ, ન non ન - ક્લિનિકલ સંશોધન માટે કટીંગ - એજ સોલ્યુશન્સ પ્રદાન કરવા માટે પ્રતિબદ્ધ છે.