index

Pehea e hoʻomākaukau ai i nā stides no comet assay?

Pehea e hoʻomākaukau ai i nā stides no comet waiwai

'Ōlelocomet waiwai, ua kaulana hoʻi ma keʻano he leka uila - Cell Gell Electrophoresis,ʻo ia kahiʻano hana pilikino a me keʻano no ka loaʻaʻana o ka dona i nā pōʻino o DNA. Mākaukau kiʻekiʻe -Comet assay slideS he hana koʻikoʻi e hoʻoholo ai i ka hilinaʻi a me ka hopena o nā hopena waiwai. Hāʻawi kēiaʻatikala e hāʻawi i kahi alakaʻi kiʻekiʻe i nā slides e hoʻomoʻa i nā mea kanu, hoʻohui i nā meaʻike i ke kula. E uhi mākou i kēlā me kēia hana koʻikoʻi, mai ke koho koho i ka weheweheʻana i ka hōʻikeʻana, e hōʻoia pono ai i nā hopena maikaʻi loa hiki.

ʻO ka hoʻolahaʻana e hāpai i ka waiwai a me kona mea nui

● Opina o SET SETSAY

ʻO ka mea kanu comet, hoʻomohalaʻia i loko o nā makahiki 1980, he mea ikaika no ka nānāʻana i ka DNA PERSOTOTOT. Ua hoʻohana nuiʻia ia ma nā mahina e like me ka ho'āʻoʻana o Gonomicicicoisi, Moleculation Epidemiology, a me ke kolamu honua. ʻO ke kānāwai o ka waiwai o ka comet e pili ana i nā chell e pili ana i ka agarose, e hoʻololi iā lākou e wehe i nā membranes, a laila e kau ana i nā mea uila. ʻO ke kiʻi hopena, e like me keʻano o kahi comet,ʻaeʻia no ka loaʻaʻana o ka loaʻaʻana o ka pōʻino DNA.

● Nā noi noi ma DNA iʻikeʻia

He waiwai nui loa nā mea kanu i kaʻikeʻana i nā pōʻino dna i hōʻehaʻia e nā mea hana affinstal e nā mea a nā kaiāulu Ke pāʻani nei lākou i kahi hana koʻikoʻi i ka loiloiʻana i ka mea hoʻoponopono o DNA Repuna ma nāʻano likeʻole i nāʻano likeʻole. E hoʻohana i nā mea noiʻi e noi i nā mea kanu e aʻo i ka maʻi maʻi, a me nā maʻi'ē aʻe, a me nā maʻi'ē aʻe i hoʻopiliʻia i ka pōʻino DNA.

● Ma muli o ka hōʻikeʻana ma Genotoxicsity

ʻAʻole hiki ke hoʻopaʻiʻia ka'ōlelo aʻoʻana a me ka noiʻiʻana i nā mea kōkua o nā cometays. Lawelawe lākou e like me kahi mea e pono ai ka mea e pili ana i ka hōʻikeʻana no ka hōʻoiaʻana no kaʻikeʻana i nā hui genotopect. Hiki i nā hopena mai kēia mau mea waiwai e hiki ke hoʻoholo i ka hoʻoholo. E hana ana i nā kaʻina hana i ka hoʻolālāʻana a me nā loiloi palekana palekana.

Ke kohoʻana i nā cell kūpono no nā mea kanu comet

● i hoʻohanaʻia nāʻano o nā cell

Hiki i ke koho o nā cell ke hopena nui i ka hopena o kahi mea kanu comet. ʻO nā cells maʻamau i hoʻohanaʻia e nā lymphocytes, nā cell balcal, a me nā laina kelepona likeʻole. Ua koho pinepine nā mea noiʻi i nāʻano kelepona e pili ana i nā pahuhopu a nā aʻoʻana a me ka maʻalahi o ka loaʻaʻana o nā hiʻohiʻona.

● Nā noʻonoʻo no ke koho balota

Ke kohoʻana i nā cell, e noʻonoʻo i nā mea e like me ka loaʻaʻana o nā cell i ka loaʻaʻana o ka cell i ka manaʻo, a me ka pilina o ka mea noiʻi. No ka laʻana, ua loaʻa maʻalahiʻo Lymphocytes mai ke koko a he nānā i nāʻoihana Genototicy, e hana ana iā lākou i kahi koho maikaʻi loa no nā haʻawina he nui.

● hopena i nā hopena waiwai

Hiki i ke kumu a me ke kūlana o nā cell e pili i ka pae baseline i ka hopena o DNA o DNA i hōʻino a me ka paneʻana o ka Cell No laila,ʻo ke koho koho balota a me nā protocols a me nā promocols he mea koʻikoʻi e loaʻa i nā hualoaʻa a me nā hualoaʻa i loaʻa i nā mea waiwai.

Hoʻomakaʻana o ke Koi A Agarose Gels

● Nāʻano o ka agarose e hoʻohana ai

ʻO ke kohoʻana i ka agarose a me ka agarose no ke kūpaʻa o ka mea kanu comet. Ua makemakeʻo Lowing Meting Point Agarose no ka mea ua pau nā mea e luhi ai a hōʻemi i ka DNA DNA i ke kaʻina hana. Ke kiʻekiʻe -ʻO Agtarose mai nā mea kūʻai aku e like me nā mea i hilinaʻiʻia e ka mea i hilinaʻiʻia a iʻole nā ​​mea hana slide slide slide

● Ke nānāʻana a Agarose a me nā papa hoʻomākaukau

ʻO ka maʻamau, kahi 1% haʻahaʻa haʻahaʻa haʻahaʻa haʻahaʻa agurose e hoʻohanaʻia. E hoʻokaʻawale i ka AGarose i kahi Buffer kūpono, e wela a hiki i ka holoiʻana, a mālie i kahi mahana no ka hoʻopiliʻana. E hōʻoiaʻiʻo i ka agarose iʻole nā'ōpala a me nā lepo e pale ai i nā mea artifact i loko o ka mea loaʻa.

● E hōʻoia i ka maikaʻi o Gel Gel

Hiki i keʻano o ka gel o ka agarose e hiki ai i keʻano o ka manaʻo a me ka hana hou. Pono nā hana kūpono a me ka hoʻomākaukauʻana i nā hana hoʻomākaukau e hana i kahi gel homogenous gel me nā mea likeʻole o nā kiʻi likeʻole. E hōʻoia kēia i ka hana o ka comediat

Ke hoʻopauʻana i ka cell steppension a me nā mea e hoʻopili ai i nā cell i Agarose

● Ke hoʻomākaukau nei i ka hoʻokuʻuʻana o ka cell

E hoʻomaka e ka loaʻaʻana o kahi mea hoʻokahi. No nā hua kanu kanu, pili kēia i ka ho'āʻoʻana, hahaiʻia e ka neutralization a me ka holoiʻana. No nā mea nui e like me nā lymphocytes, centrifigation a me ka resuspefigation a me resurpension i kahi mea kūpono kūpono. E hoʻohana i kahi hemocytomter e hōʻoia ai i kahiʻano o ka cell e pili ana i kahi o nā mea e pili ana i ka 1 x 10 ^ a me nā cells / ml.

● Nā Kūlana i nā puka i loko o ka hoʻohaʻahaʻa haʻahaʻa haʻahaʻa

E kāwili i ka hoʻokuʻuʻana o ka cell me ka uku kālā me ka haʻahaʻa haʻahaʻa haʻahaʻa e hoʻoheheʻe ana i ka Agarose ma kahi o Agarose ma kahi'āpana e hōʻoia ai i kahi hoʻoili lole. Wikiwiki wikiwiki i ka huiʻana ma Preter Pret - nā kiʻi comet comet stides slides, hiki ke kūʻaiʻia mai kahi mea kūʻai aku a iʻole kahi mea kūʻai aku. E hoʻohana i kahi conespip e hoʻolaha i ka agarose a me ka paleʻana i nā'ōpū o ka ea.

● E hoʻolaha i nā cell i nā slides

Ke pālahalaha nei ka agarose, eʻae i nā kiʻi i ka leʻaleʻa a hoʻopaʻa i ka lewa ma kahi ākea a iʻole ka hoʻokaʻawaleʻana. Pono e hana pono kēia hana e pale ai i ka Agarose mai kahi iʻikeʻoleʻia, e hiki ai ke hōʻeha i keʻano o ka nānāʻana i ka wā e nānā ai.

ʻO Lysis o nā cells ma nā kiʻi

● Nā Kūlana Kūlana Lyis

ʻO ka hopena lysis e loaʻa ana i nā mea kiʻekiʻe kiʻekiʻe o nā paʻakai a me nā pale, e like me nacl, edta

● Ke kaʻina hanaʻo Lysis a me nā kūlana

Hoʻopili i nā Slides i nā slides i ka sult o ka lysis a me ka incubate ma 4 E hōʻoia i ka uhiʻana o ka lysis tank e pale i ka evaporation a me kaʻoluʻolu. ʻO nā kūlana o ka hana o keʻano he mea koʻikoʻi no ka weheʻana i nā mea hana collar me kaʻole o ka hoʻokaʻawaleʻana i ka DNA.

● He nui o ka uku o ka cell litis

Hiki i ke lysispete ka hopena i hiki ke hopena i ka hoʻokumuʻana i ka hana comet a me kaʻikeʻoleʻole. No laila,ʻo ia ka mea e makemake ai e hahai i ka postocol psycoulously, e hōʻoia ana i ka hoʻonāʻana i nā'āpana āpau a me kēlā mau manawa incubation paha no ka hoʻopauʻana i nā manawa āpau.

Alkaline unwinding a me nā kūlana electrophoresis

● Hoʻomau ihola i ka hoʻonā Alkailne

ʻO ka hopena alkaline, pinepine pinepine kahi mix a Edta, hoʻohanaʻia e wehe i ka DNA. E hana pono ana kona hoʻomākaukauʻana, e hōʻoia i ka pono kūpono o ka ph a me ka molarity. E hoʻomākaukau hou i ka hopena e mālama ai i kona hopena.

● Alkaline e wehe i ka mea nui a me ka manawa

Hoʻopili i nā slides ma ka hopena alkaline, maʻamau no 20 -ʻO 40 mau minuke, eʻae i nā DNA i makemakeʻole. He mea koʻikoʻi kēia hana no ka nānāʻana i hoʻokahi -ʻO nā wahi hoʻomaha a me Alkali - Nā pūnaewele Labile. E hoʻohālikelike i ka manawa makemakeʻole e pili ana i kāu protocol kiko'ī a me kāu kelepona.

● Nā Kūlana Elepophoresis a me nā'āpana

E hoʻonohonoho i ka talphorophoresis talk me kahi bulpophores electrophoresis electrophoresis. E kau i nā slides i loko o ka pahu, e hōʻoiaʻia lākou ua hoʻemiʻia lākou. E hoʻopili i kahi Votage Consistent (maʻamau ma kahi o 25 v) no 20 - 30 mau minuke. ʻO nā kūlana Electroophoresis, me ka leka uila a me ka manawa a me ka manawa, pono e koho e hoʻokō i ka hoʻonā maikaʻi loa o DNA ma ka lele.

ʻO keʻano o ke kaʻina hana a me ke kaʻina hana

● Bituralization Buffer hoʻomākaukau a hoʻohana

Ma hope o ka electroophoresis, e hana hou i nā kiʻina e pani i ka hopena a hoʻopaʻa i ka DNA. ʻO kahi buffization maʻamau ma ke kumuʻo Tris Criff ma kahi PH o 7.5. E hoʻomoʻi mālie i nā kiʻi i loko o kēia buffer i kekahi mau manawa e wehe i nāʻano āpau o ka alkaline.

●ʻO Kāleʻa Hoʻokele

E nānā i nā kiʻi likeʻole me ka maʻi maʻi dna -ʻO ka hoʻopaʻaʻana i nā bely, e like me ka grodium bromide a syrr green. ʻO Edidium Bromdide,ʻoiaiʻo Classic, koi pono i ka mālama ponoʻana ma muli o kāna mau wahi muttagenic. Hāʻawiʻo Syrr Green i kahi ala palekana me ka noʻonoʻo kiʻekiʻe. Incubate i nā slides i loko o ka stident i ka hopena kūpono no kahi manawa kūpono (maʻamau 15 - 30 mau minuke) i ka pōʻeleʻele.

●ʻO ka'ikeʻikepili o DNA

Ma hope o ka hoʻouluʻana, holoi i nā'ōwili i ka lohiʻana e wehe i ka stain nui. E nānā i nā kiʻi i lalo o kahi microscope fluorscence. ʻO keʻano o ka hoʻouluʻana a me ka hoʻoholoʻana o kaʻaeʻana o ka microscope no ka loaʻaʻana o nā kiʻi maopopo o nā koho.

Microscopy a me ke kiʻi kiʻi kiʻi

● ke kohoʻana i ka microscope kūpono

Ua hoʻolakoʻia kahi microscope microscope me kahi kiʻi kiʻi kūpono e pono ai no ka nānāʻana iā DNA. E koho i kahi microscope me nā hoʻonā kiʻekiʻe a me kahi'ōnaehana kelepona hiki ke hopu i nā kiʻi kiko'ī o nā koho.

● hopu i nā kiʻi kiʻekiʻe - kiʻi maikaʻi

Hopu i nā kiʻi o ka liʻiliʻi ma kahi o 50 mau papa no ka slide e hōʻoia i keʻano nui. E hōʻoiaʻiʻo i ka hoʻomālamalama a me ka noʻonoʻo e pale i nā mea artifact. Hiki i ke calibration kūpono o ka microscope a me nā hoʻonohonohoʻana i nā hoʻonohonoho kelepona e hoʻonui nui i ke kiʻi kiʻi kiʻi.

● He polokalamu no ka loiloi comet

Loaʻa nā papahana polokalamu i loaʻa no ka loiloi comement, e like me keʻano he cometcore. ʻO kēia mau polokalamu e hoʻohālikelike ai i nā pākeke e like me ka lōʻihi ka lōʻihi, a me ka ikaika ikaika, a me ka huelo,ʻo ia ka mea koʻikoʻi no ka loaʻaʻana o DNA.

ʻO nā pilikia maʻamau

● Nā pilikia maʻamau

Nā pilikia maʻamau i nā wā e hoʻopili ai i nā mea kanu i nā mea kīʻaha kiʻekiʻe, haʻahaʻa haʻahaʻa haʻahaʻa, a me nā hopena maʻamau ma waena o nā kiʻi. O kēia mau pilikia hiki pono i nā pilikia mai nā kumuʻoleʻole, e pili ana i nā mana mollina o ka hana, ua pono pahaʻo ka maʻi lysroophoson.

● Nā hopena a me nā ana pale

E hoʻoikaika i nā mea elima kiʻekiʻe, e hōʻoia i ka pauʻana o nā mea a pau a me nā gels a me nā gels. No ka hana haʻahaʻa haʻahaʻa, hōʻoia i ke kiʻekiʻe o ke kelepona, he kiʻekiʻe a me nāʻano lysos. ʻO ka hoʻomākaukauʻana i ka papa koho a me ka paʻa o ka adtherence adherence e loaʻa ana nā kī pale pale.

● E hōʻoia i ka hana hou a me ka pololei

Loaʻa ka loaʻaʻana o ka hana hou i nā mea waiwai e koi ai i nā'ōnaehana protocol a me ka hōʻoia maʻamau o kēlā me kēia pae. ʻO nā mea kūʻai maʻamau maʻamau, e hoʻohana i nā uku kiʻekiʻe - Nā uku uku maikaʻi loa, a mālama i nā palapala hōʻike o nā hōʻike hoʻokolohua e hōʻoia i ka pololei.

ʻO ka ho'ākākaʻikepili a me ka hōʻikeʻana i nā hopena

● Nā Kūlana Kūʻai Kūʻai Kūʻai Kūʻai

ʻO nā hōʻailona nui no ka heluʻana i ka pōʻino DNA i ka lōʻihi o ka lōʻihi, e hōʻike ana i ka nui o ka DNA i ka nui o DNA i ka huʻu. ʻO ka huikani olite, he ana i waena, ua hoʻohanaʻia.

● Nā Manaʻo Statistical ma ka hōʻike hōʻikeʻike

Pono ka loiloi helu helu helu kūpono no ka weheweheʻana i ka hōʻike. E hoʻohana i nā hoʻokolohua statistical kūpono e hoʻohālikelike ai i nā pae hōʻino DNA ma waena o nā hui likeʻole. E hōʻoiaʻiʻo i nāʻikepili mai nā kiʻi he nui a me nā hoʻokolohua e kuhikuhiʻia i ka moʻokāki no ka loli.

● Ke hōʻikeʻana a me ka weheweheʻana i nā loaʻa

E hōʻike i kāu mau hopena i kahiʻano maʻalahi a me ka condies, e hoʻohana ana i nā kiʻi a me nā papa e hōʻike ai i nā loaʻa nui. E kūkākūkā i nā hopena o nā pae hōʻino o DNA iʻikeʻia a me ka hopena hopena ma keʻano o keʻano o ke aʻoʻana ma lalo o ke aʻoʻana.

Nā hopena: hoʻokō i nā kiʻekiʻe kiʻekiʻe - Nā Kiʻi Kūʻai Kūʻai Nui

E hoʻomākaukau i ka kiʻekiʻe kiʻekiʻe - Nā Kiʻi Kūʻai Kūʻai maikaʻi loa e pili ana i ka noʻonoʻoʻana,ʻo Agsormoportisis, nā Electropphorporesis, Stalwings. Pono kēlā me kēlā me kēia pae i manaʻoʻia a noʻonoʻoʻia e hōʻoia i ka hōʻoiaʻana i nā hopena kūpono a me nā hopena hou. Ka huiʻana me nā mea e pono ai nā mea waiwai e pono ai nā mea kūʻai aku a me nā mea hana e hoʻomaikaʻi i ka maikaʻi o kāu waiwai ma ka hāʻawiʻana i ke kālā kiʻekiʻe.

● MaiIphoeNa Bioscien Nā Ola

HeadueHaver i nā WalesʻO North, Pensyylvania,ʻo Iphie Bioscience Aʻo Aʻoaʻo,ʻo Nonoivative, a me nā Hana Kūʻai Kūʻai Nui loa. ʻO kaʻike nui loa a me ka makemake nui no ka noiʻiʻepekema,ʻo kā mākou mea loeaʻepekemaʻoi aku ka hoʻokōʻana i nā mea loea iʻoi aku ma mua o ko lākou mau loea loea Ke alualu nei i ka R & D kūpono o nā "revnovative revings, e hoʻohana ana i nā'āina'ē aʻe, a me nā'āina kūʻai aku, a me nā wahi kūʻai aku ma mua o 12,000 mau wahi kūʻai aku.
Nā manawa post: 2024 - 208 - 28-1:21
  • MAUI:
  • Akahi:
  • Palapala Koho'ōlelo