Uvod uJetreni mikrosomii S9 frakcije
U području metabolizma lijeka i farmakokinetike je presudno razumijevanje zamršenosti mikrosoma jetre i frakcija S9. Ovi in vitro sustavi su ključni u ranim fazama otkrivanja lijekova, pružajući uvid u to kako se jetra metaboliziraju nove kemijske entitete (NCE). Sposobnost predviđanja metaboličke stabilnosti i potencijalnih interakcija lijekova je neprocjenjiva, štedeći vrijeme i resurse u razvoju novih lijekova. Ovaj se članak upušta u razlike između mikrosoma jetre i frakcija S9, istražujući njihov sastav, funkcionalnost, prednosti i ograničenja.Sastav i struktura jetrenih mikrosoma
● Mikrosomi kao dio endoplazmatskog retikuluma
Mikrosomi jetre su vezikula - poput artefakata dobivenih iz endoplazmatskog retikuluma u eukariotskim stanicama. Nastaju kada se stanice razgrađuju tijekom postupka homogenizacije, što rezultira sedimentacijom endoplazmatskog retikuluma. Ova subcelularna frakcija obogaćena je enzimima vezanim membranama i najvažnijim je u proučavanju metabolizma lijeka, posebno reakcijama faze I.● Uključeni ključni enzimi: citokrom P450 i UGTS
Visoka koncentracija enzima citokroma P450 (CYPS) u jetri mikrosoma je njihova odlučujuća značajka. Ovi enzimi igraju presudnu ulogu u oksidativnom metabolizmu ogromnog raspona ksenobiotika, uključujući lijekove i toksine okoliša. Također su prisutni uridin difosfat - glukuronoziltransferaze (UGT), koje doprinose konjugaciji i naknadnom uklanjanju metabolita, označavajući početni korak prema razumijevanju faze I i nekih reakcija faze II.Sastav i struktura S9 frakcija
● S9 kao kombinacija mikrosomskih i citosolnih frakcija
Frakcija S9, koja se često naziva supernatant od 9000G, subcelularna je komponenta dobivena iz jetre homogenata diferencijalnom centrifugiranjem. Za razliku od mikrosoma koji sadrže pretežno enzikulum enzima - vezanih enzima, frakcija S9 uključuje i mikrosomalne i citosolne enzime, predstavljajući sveobuhvatniji enzimski profil.● Enzimi prisutni u S9, uključujući fazu I i II
S9 frakcije pružaju bogatiji enzimski milje, inkapsulirajući i enzime faze I poput CYP -a i apartmana enzima faze II, poput sulfotransferaza, glukuronoziltransferaza i glutation - s - s - s - s - s - Ovaj niz omogućava opsežnije metaboličke transformacije, simulirajući jetreno in vivo okruženje preciznije od samog mikrosoma.Funkcionalnost: metabolizam faze I i II faze
● Razlike u aktivnosti enzima između mikrosoma i S9
Razlika jezgre leži u enzimskom opsegu. Mikrosomi jetre prvenstveno podržavaju metaboličke reakcije faze I, uključujući oksidaciju, redukciju i hidrolizu. Ove reakcije unose ili izlažu funkcionalne skupine na molekulama lijeka, a ubacujući put reakcijama faze II. Suprotno tome, frakcije S9 obuhvaćaju i faze I i II, čime olakšavaju reakcije konjugacije koje mikrosomi ne mogu neovisno izvesti.● Važnost faze I i II u metabolizmu lijekova
Sekvencijalna priroda reakcija faze I i II naglašava njihov značaj u metabolizmu lijekova. Modifikacije faze I općenito pripremaju spojeve za fazu II, što obično uključuje konjugaciju za povećanje topljivosti, pomažući u procesu izlučivanja. Razumijevanje ovih faza od vitalnog je značaja za predviđanje bioraspoloživosti, učinkovitosti i potencijalne toksičnosti lijeka.Primjene u studijama metabolizma lijekova
● Uporaba u ADME studijama: apsorpcija, distribucija, metabolizam, eliminacija
Mikrosomi jetre i frakcije S9 su ključni u ADME studijama koje procjenjuju apsorpciju, distribuciju, metabolizam i uklanjanje kandidata za lijekove. Ove su studije kritične za određivanje farmakokinetičkog profila lijekova, pružajući osnovne podatke koji informiraju o doziranju, potencijalnim interakcijama i nuspojavama.● Usporedne studije: Mikrosomi protiv S9 u otkrivanju lijekova
Usporedna analiza mikrosoma i frakcija S9 otkriva da, iako obje imaju svoju upotrebu, S9 frakcije nude cjelovitiji prikaz metaboličke stabilnosti zbog uključivanja enzima faze II. Ova sveobuhvatna analiza pomaže u identifikaciji metaboličkih putova koji možda nisu vidljivi kada se koriste samo mikrosome jetre.Prednosti jetrenih mikrosoma
● Trošak - Učinkovitost i dostupnost
Mikrosomi jetre favorizirani su za njihovu trošku - učinkovitost i široku dostupnost. Procesi za njihovu pripremu i upotrebu dobro su uspostavljeni, što ih čini praktičnim izborom za mnoge laboratorije.● Kompatibilnost visoke propusnosti i automatizacije
Jednostavnost ispitivanja mikrosoma čini ih podložnim visokim propusnosti i automatizacijom, što je bitna značajka za brzo provjeru velikih knjižnica spojeva. Ova je prednost presudna u pojednostavljenju cjevovoda za otkrivanje droga, omogućavajući ranu identifikaciju obećavajućih kandidata.Prednosti frakcija jetre S9
● Sveobuhvatni metabolički prikaz
S enzimima faze I i II, frakcije S9 nude potpuniju procjenu metaboličke sudbine spoja. Ovaj sveobuhvatni prikaz posebno je koristan za identificiranje potencijalnih metabolita u ranom procesu razvoja lijekova.● Uključivanje metabolizma faze II i troškova
Uključivanje enzima faze II znači da frakcije S9 mogu pružiti uvid u reakcije konjugacije, predviđajući kako će se lijekovi obrađivati u tijelu. Iako im može zahtijevati dodatne kofaktore za određene reakcije, oni i dalje nude povoljan saldo troškova i korisnosti u postavkama visoke propusnosti.Ograničenja jetrenih mikrosoma
● Nepostojanje citosolnih enzima koji utječu na podatke o punom metabolizmu
Značajno ograničenje mikrosoma jetre je njihov nedostatak citosolnih enzima, koji su ključni za potpunu metaboličku sliku. Ova odsutnost znači da bi se neki metaboliti mogu zanemariti, a nedostajući kritični putovi važni za razumijevanje sigurnosti i učinkovitosti lijekova.● Zahtjev za dodatnim sustavima za studiju faze II
Za sveobuhvatno proučavanje reakcija faze II potrebni su dodatni sustavi ili suplementacija vanjskim enzimima/kofaktorima prilikom korištenja mikrosoma. Ovaj zahtjev može komplicirati dizajn i tumačenje ispitivanja.Ograničenja frakcija jetre S9
● Potreba za faktorima i mogućim razrjeđivanjem enzima
Unatoč svojoj sveobuhvatnoj prirodi, frakcije S9 često zahtijevaju dodavanje kofaktora kako bi podržali određene enzimske aktivnosti. Ova potreba može uvesti varijabilnost i složenost u testove. Uz to, razrjeđivanje enzima u S9 frakcijama, u usporedbi s izoliranim pripravcima, može utjecati na osjetljivost otkrivanja nekih metaboličkih reakcija.● Izazovi skladištenja i pripreme u usporedbi s mikrosomima
Priprema i skladištenje S9 frakcija mogu biti izazovnija nego za mikrosome. Pravilno održavanje enzimske aktivnosti pažljivim rukovanjem i skladištenjem ključno je za postizanje pouzdanih rezultata, što malo komplicira njihovu upotrebu u velikim studijama o skali.Zaključak i preporuke
● Sažetak najboljeg - Koristite scenarije za svaku metodu
Jetreni mikrosomi i S9 frakcije imaju različite snage i slabosti. Mikrosomi jetre najbolje se koriste kada je potreban trošak - učinkovit, brza faza I metabolizam. Suprotno tome, frakcije S9 prikladnije za sveobuhvatne studije koje zahtijevaju uvid u metabolizam faze I i II. Odabir odgovarajućeg sustava ovisi o specifičnim zahtjevima istraživanja i raspoloživim resursima.● Prijedlozi za optimalnu upotrebu u procesima razvoja lijekova
Za one u fazama ranog razvoja lijekova, koristeći visoke - kvalitetne mikrosome jetre od uglednog dobavljača mikrosoma jetre ili proizvođača mikrosoma jetre može pojednostaviti početne projekcije. Kako istraživanje napreduje, uključivanjejetra s9Frakcije, možda dobivene iz pouzdane tvornice mikrosoma jetre, pružit će puniju sliku metaboličke stabilnosti, osiguravajući robusnu procjenu kandidata za lijekove.● Uvod uIfaza
Sa sjedištem u Sjevernom Walesu, Pennsylvaniji, iPhase Biosciences je "specijalizirana, nova i inovativna" visoka - tehnološka poduzeća koja integriraju istraživanje, razvoj, proizvodnju, prodaju i tehničke usluge inovativnih bioloških reagensa. Koristeći opsežno znanje i strast za znanstvenim istraživanjima, naš je znanstveni tim posvećen pružanju kvalitetnih inovativnih bioloških reagensa znanstvenicima širom svijeta i pomaganju istraživačima tijekom njihovog znanstvenog nastojanja kako bi pomogli u postizanju svojih istraživačkih ciljeva. Slijedeći ideal istraživanja i razvoja "inovativnih reagensa, istraživanja budućnosti", iPhase je uspostavio više objekata za istraživanje i razvoj, prodajne centre, skladišta i distribucijske partnere širom svijeta.
Post Vrijeme: 2024 - 11 - 26 16:50:02