Ljudska i životinjska žuči prazne biološke matrice za razvoj bioanalitičke metode i validacija bioanalitičke metode

1 ifazni proizvodi

2 prazna biomatriksa

Razne vrstebiološke matrice, uključujući praznu cijelu krv, serum, plazmu, žuč, Mlijeko, urin, izmet, crijevni sadržaj, visceralni organ, humor stakla, vodeni humor, cerebrospinalna tekućina itd., Prikupljeno od zdravih ispitanika ili zdravih eksperimentalnih životinja, kolektivno se nazivaju praznim biološkim matricama.

3 Potreba korištenja praznih bioloških matrica u pretkliničkim studijama

In lijek pretkliničko istraživanje, prazna biološka matrica je kamen temeljac za uspostavljanje i potvrđivanjeMetode biološke analize. Korištenjem praznih matrica zdravih ispitanika ili eksperimentalnih životinja, istraživači mogu precizno pripremiti standarde kalibracije i uzorke kontrole kvalitete, procijeniti specifičnost, osjetljivost, preciznost i matrične učinke analitičkih metoda i osigurati pouzdanost rezultata kvantifikacije koncentracije lijeka.

4 Validacija i uspostavljanje biološke metode i primjena prazne biološke matrice

Kako to zahtijevaju smjernice FDA/EMA, u uspostavljanju i validaciji metoda analize biološke matrice, prazne biološke matrice moraju se koristiti kako bi se osigurala točnost i pouzdanost metode analize. Osobito u LC - MS/MS analizi, razlike u komponentama matrice iz različitih izvora mogu značajno utjecati na učinkovitost ionizacije. Prazna matrica uglavnom se koristi za pripremu kalibracijskih standarda, pripremu uzoraka za kontrolu kvalitete za ispitivanje specifičnosti, selektivnosti, preciznosti, točnosti, efekata matrice, stope oporavka, stabilnosti, linearnosti razrjeđivanja, interferencijskih učinaka itd. Analitičkih metoda. Efekt selektivnosti i matrice metode otkrivanja zahtijevaju veće zahtjeve za praznu matricu.

5 Scenariji primjene žuči prazne matrice u razvoju lijekova

Umjetna žučna matrica (simulirana bitna matrica)je sintetičko rješenje koje simulira prirodne žučne komponente i koristi se za istraživanje metabolizma lijeka, toksikologije i biološke analize.Žučna prazna matricaima važnu vrijednost primjene u sljedećim scenarijima razvoja lijeka: Farmakokinetičke (PK) studije lijekova hepatobilijarnog sustava, apsorpciju i prvo prolazak metabolizma studija oralnih lijekova, studija interakcije žučnih kiselina, procjene hepatotoksičnosti i studije stasisa žuči i razvoj metoda biološke analize (LC - MS/MS).

6 lijekova za hepatobiliarni sustav

U razvoju lijekova za hepatobiliarni sustav, Blank Matrix žučna prazna igra igra nezamjenjivu ulogu kao standardizirani in vitro simulacijski sustav u farmakokinetičkim (PK), toksikološkoj i biološkoj analizi.

6.1 Procijenite karakteristike izlučivanja žuči lijekova

Istraživanje hepatointestinalne cirkulacije: BILE je jedan od važnih putova za izlučivanje lijekova i njihovih metabolita. Korištenjem umjetne žučne matrice, promjene koncentracije lijekova u žuči mogu se simulirati kako bi se procijenila jesu li reapsorbirani kroz jetrenu crijevnu cirkulaciju.

Određivanje brzine žuči: Za lijekove koji se aktivno izlučuju kroz žuč (poput statina i određenih antibiotika), umjetna žuč (simulirana žuči) može pomoći kvantificirati njihovu učinkovitost uklanjanja i optimizirati režim doziranja.

6.2 Proučite učinak žučnih kiselina na apsorpciju lijeka

Učinak solubilizacije: Žučne kiseline mogu promicati otapanje i crijevnu apsorpciju lipofilnih lijekova kao što je vitamin D. Umjetna žuč može simulirati različite sastava žučne kiseline i procijeniti njihov utjecaj na bioraspoloživost lijekova.

Interakcije žučne kiseline lijeka: Neki lijekovi (poput liraglutida) mogu se natjecati s transportorima žučne kiseline (poput BSEP, MRP2), a umjetna žuč mogu se koristiti za proučavanje takvih interakcija kako bi se izbjegli potencijalni rizik od žučne staze.

6.3 Procjena rizika od hepatotoksičnosti i kolestaze

Model holestaze izazvan lijekom: Umjetna žuč može simulirati patološke stanja poput opstrukcije žučnih kanala i hiperbilirubinemije, a koristi se za otkrivanje jesu li lijekovi ometali protok žuči ili oštećenje stanica žučnih kanala.

Analiza biomarkera: Dodavanjem specifičnih komponenti poput bilirubina, žučnih kiselina i upalnih čimbenika, može se procijeniti utjecaj lijekova na komponente žuči i može se predvidjeti klinička sigurnost.

6.4 Etičke i praktične prednosti zamjene prirodne žuči

Bavljenje problemom oskudice uzorka: Prirodna žuč treba dobiti invazivnim metodama poput kateterizacije žučnih kanala, dok se umjetna žuč može beskonačno pripremiti za izbjegavanje etičkih ograničenja.

Dosljednost šarže: Sastav umjetne matrice (simulirana matrica) može se kontrolirati, smanjujući utjecaj individualnih razlika u prirodnoj žuči na eksperimentalne rezultate.

6.5 Podržite razvoj metoda LC - MS/MS Biološke analize

Korekcija učinka matrice: Složeni sastav prirodne žuči (visoke žučne soli, fosfolipidi, pigmenti) lako mogu dovesti do supresije ili povećanja iona u analizi LC - MS/MS. Umjetna žučna matrica (simulirana žučna matrica) može pružiti stabilnu pozadinu, optimizirati osjetljivost i točnost metode.

7 Istraživanje poprečnih vrsta

Sastav žuči uvelike varira među različitim životinjama (štakori, psi, majmuni) i umjetna žuči mogu standardizirati razlike u vrstama i poboljšati prenosivost pretkliničkih podataka.

7.1 Cynomolgus Monkey Bile (NHP BILE)

Bile od Cynomolgus majmuna vrlo je slična onoj kod ljudi u smislu sastava (poput profila žučne kiseline) i ekspresije transportera lijekova (poput BSEP, MRP2), što ga čini zlatnim standardom koji nije - ljudski primat model za procjenu jetrenih bilijarnih izlučivanja i interakcija lijekova žučnih kiselina.

7.2 Beagle pas žuč

Sadržaj fosfolipida u žuči Beagle je relativno visok, što ga čini pogodnim za proučavanje izlučivanja žuči i žučne soli ovisne o apsorpciji lipofilnih lijekova. Međutim, razlike u sastavu žučne kiseline između beagle -a i ljudi zahtijevaju umjeravanje umjetnim matricama.

7.3 SD Rat Bile

Volumen prikupljanja žuči SD štakora je relativno velik (~ 1 ml/vrijeme), što se široko koristi za studije hepatotoksičnosti jetre i hepatotoksičnosti lijekova. Međutim, treba napomenuti da njihova visoka osnovna vrijednost bilirubina može ometati LC - MS/MS analizu.

7.4 ICR/CD - 1 mišja žuči

CD - 1 miš imaju mali volumen žuči (50 - 200 µl), što ih čini prikladnim za proučavanje mehanizama modela modifikacije gena (poput FXR/PXR puta), ali za prilagodbu su potrebne tehnike mikro kvantifikacije.

7.5 C57BL/6 miša žuči

C57BL/6 miš se obično koristi u modelima metaboličkih bolesti, a promjene u njihovom sastavama žuči mogu odražavati patološka stanja, zahtijevajući uporabu umjetne matrice žuči za simulaciju patologije.

Gornji modeli moraju se kombinirati s umjetnom žučnom matricom kako bi se kontrolirao razlike u vrstama i optimizirao usporedivost poprečnih vrsta LC - MS/MS metoda.

Zaključak

Umjetna matrica žuči, kao ključni alat za simulaciju funkcije prirodne žuči, igra nezamjenjivu ulogu u razvoju hepatobilijarnih lijekova. Standardiziranjem sastava žuči različitih vrsta (poput majmuna Cynomolgus, pasa Beagle -a, štakora SD, CD - 1 štakora, C57BL/6 štakora), umjetna matrica žuči učinkovito se bavi temeljnim izazovima poput etičkih ograničenja, individualnih razlika i patološke simulacije prirodnih uzoraka, a ne ograničavaju se.

S razvojem precizne medicine, umjetna žučna matrica dodatno će kombinirati patološke specifične komponente i mikrofluidnu tehnologiju kako bi se dinamički simulirala mikrookološ jetre i žučnog mjehura, pružajući jaču potporu inovativnom razvoju lijekova.

Ključne riječi:Prazna biološka analiza, uzorak biološke matrice, analiza biomatriksa, ljudska žuč, životinjska žuč, uzorak žuči, umjetna žuč, simulirana žuč, NHP žuči, cinomolgus majmun žuč, žuč majmuna rezusa, pasa pasa, žuči štakora, mišja metoda, BIONALICALY RAZVOJ, BIOANALYS

Referenca

Li T, Chiang Jy. Signalizacija žučne kiseline u metaboličkoj bolesti i terapiji lijekovima. Pharmacol Rev. 2014. OCT; 66 (4): 948 - 83. Doi: 10.1124/pr.113.008201. PMID: 25073467; PMCID: PMC4180336.