Koji su ljudski PBMC i njihova uloga u imunitetu?

Ljudski PBMCS, ili mononuklearne stanice periferne krvi, kritična su skupina imunoloških stanica koje cirkuliraju u vašem krvotoku. Te stanice uključuju limfocite, monocite i dendritičke stanice, a svaka igra jedinstvenu ulogu u obrani vašeg tijela. PBMC vas štite identificiranjem i neutraliziranjem štetnih patogena, poput bakterija i virusa, istovremeno održavajući imunološku ravnotežu.

Istraživanje pokazuje da PBMC s vremenom ostaju stabilni, a vitalnost stanica iznad 85% u većini uzoraka. Uz to, njihova se ekspresija gena može brzo prilagoditi. Na primjer, ekspresija TNFα povećava se za više od trostrukog u roku od nekoliko sati. Takva svestranost ističe njihovu važnost u regulaciji imunoloških odgovora.

Sastav ljudskih PBMC -a

Limfociti: T stanice, B stanice i NK stanice

Limfociti su vitalna komponenta ljudskih PBMC -a. Uključuju T stanice, B stanice i prirodne ubojice (NK), od kojih svaka ima različite uloge u imunitetu. T stanice pomažu u reguliranju imunoloških odgovora i izravno napadaju inficirane stanice. B stanice proizvode antitijela koja neutraliziraju štetne patogene. NK stanice, s druge strane, ciljaju i uništavaju abnormalne stanice, poput onih zaraženih virusima ili karcinoma.

Zanimljivo je da neki limfociti u ljudskim PBMC -ima, identificirani kao CD3+ CD19+ stanica, pokazuju dvostruku funkcionalnost. Te stanice mogu djelovati kao i T stanice i B stanice. Oni reagiraju na prijetnje putem signalnih putova T - staničnog receptora (TCR) i B - staničnog receptora (BCR). Ova dvostruka uloga omogućuje im da sudjeluju u humoralnim i staničnim imunološkim odgovorima. Na primjer, vežu antigene učinkovitije od konvencionalnih B stanica i proizvode interferon - gama (IFN - γ) na razinama sličnim T stanicama.

Monociti i njihove imunološke funkcije

Monociti su još jedna ključna skupina unutar ljudskih PBMC -a. Te stanice patroliraju krvotokom, tražeći znakove infekcije ili oštećenja tkiva. Jednom kada otkrije problem, migriraju u zahvaćeno područje i pretvaraju se u makrofage ili dendritičke stanice. Makrofagi zahvaćaju i probavljaju patogene, dok dendritičke stanice predstavljaju antigene u druge imunološke stanice.

Monociti također oslobađaju citokine, koji su signalne molekule koje pomažu u koordinaciji imunološkog odgovora. Radeći to, oni osiguravaju da vaše tijelo učinkovito reagira na infekcije ili ozljede.

Dendritičke stanice i njihova uloga u prezentaciji antigena

Dendritičke stanice su profesionalni antigen - predstavljaju stanice (APC) unutar ljudskih PBMC -a. Oni igraju ključnu ulogu u aktiviranju T stanica predstavljajući antigene na njihovoj površini. Istraživanje pokazuje da su dendritičke stanice jedini APC -ovi sposobni aktivirati i CD4+ i CD8+ naivne T stanice. Njihova učinkovitost dolazi od njihove sposobnosti usporavanja probave antigena, što povećava dostupnost peptida za MHC opterećenje.

Ove stanice osiguravaju da vaš imunološki sustav učinkovito prepozna i reagira na prijetnje, što ih čini neophodnim u imunitetu.

Izolacija ljudskih PBMC -a

Izvori PBMC -a: periferna krv i koštana srž

Ljudski PBMC mogu se izolirati iz dva primarna izvora: periferna krv i koštana srž. Periferna krv je najčešći izvor zbog njegove pristupačnosti i minimalne invazivnosti. Kosti srž, s druge strane, pruža bogatije okruženje za imunološke stanice, ali zahtijeva invazivniji postupak.

Prinos i čistoća PBMC -a mogu varirati ovisno o metodi izvora i izolacije. Na primjer, studije pokazuju da standardna FICOLL metoda postiže veći prinos i čistoću u usporedbi s metodama CPT (cijev za pripremu stanica). Tablica u nastavku ističe ove razlike:

Ficoll tehnika preklapanja za PBMC izolaciju

Tehnika preklapanja FICOLL -a široko je korištena metoda za izoliranje PBMC -a. Ovaj postupak uključuje slojevitu krv preko otopine Ficoll - Paque i centrifugiranje u razdvajanje stanica na temelju gustoće. PBMC -ovi tvore poseban sloj između plazme i ficoll -a, što ih olakšava prikupljanje.

Studije naglašavaju važnost pravilnog rukovanja tijekom ovog procesa kako bi se osigurale dosljedne rezultate. Na primjer, jedna studija otkrila je da ispravno korištenje FICOLL -a može postići čistoću do 97% uz minimalnu varijabilnost. Tablica u nastavku uspoređuje različite metode inkubacije za izolaciju PBMC:

Metode imunomagnetske razdvajanja

Imunomagnetsko razdvajanje je još jedna napredna tehnika za izoliranje PBMC -a. Ova metoda koristi magnetske kuglice obložene antitijelima za ciljanje specifičnih tipova stanica. Pozitivno sortiranje izolira stanice vežući ih na perle, dok negativno sortiranje uklanja neželjene stanice, ostavljajući željenu populaciju netaknutu.

Istraživanje pokazuje da negativno sortiranje održava vitalnost stanica i ne utječe na aktivacijske markere poput IL - 2R (CD25). Suprotno tome, pozitivno sortiranje može smanjiti sposobnost održivosti i aktivacije, posebno nakon stimulacije. Tablica u nastavku sažima ove nalaze:

Ova je metoda posebno korisna kada vam je potrebna vrlo specifična stanična populacija za istraživanje ili terapijske primjene.

Primjene ljudskih PBMC -a u istraživanju i medicini

Uloga u razvoju stanične terapije

Ljudski PBMC igraju glavnu ulogu u unapređenju stanične terapije, revolucionarnim tretmanom za određene karcinome. Te stanice služe kao početni materijal za generiranje automobila - T stanica, koje su projektirane za ciljanje i uništavanje stanica raka. Možete se zapitati koliko su učinkoviti PBMC u ovom procesu. Studije otkrivaju impresivne rezultate:

• Nakon 11 dana kulture, 1 × 10^7 smrznuti PBMC može proizvesti najmanje 1,48 × 10^9 Mesocar - T stanica, s preko 30% CAR+ stanica.

• Testovi citotoksičnosti pokazuju mesokar - T stanice dobivene iz svježih i krio konzerviranih PBMC -a. U efektoru - do - ciljanog omjera 4: 1, njihova se citotoksičnost kreće između 91,02%- 100,00%i 95,46%- 98,07%.

• Čak i s nižim omjerom od 2: 1, ne primjećuje se značajna razlika u citotoksičnosti.

Ovi nalazi ističu pouzdanost PBMC -a u proizvodnji efektivnih automobila - T ćelija, čak i nakon dugog - terminog skladištenja.

Upotreba u ispitivanju lijekova i studija toksičnosti

PBMC su neprocjenjivi u ispitivanju lijekova i studija toksičnosti. Oni pružaju ljudski - relevantni model za procjenu načina na koji lijekovi djeluju s imunološkim stanicama. Na primjer, istraživači su testirali kinahin lijeka na PBMC -ima kako bi procijenili njegovu toksičnost. Tablica u nastavku sažima nalaze:

Ovi rezultati pokazuju da PBMC aktivno reagiraju na kinahir, čak i na niskoj razini toksičnosti. To ih čini pouzdanim alatom za predviđanje imunoloških odgovora na nove lijekove.

Otkrivanje biomarkera i imunološko nadzor

PBMC su ključni za identificiranje biomarkera i nadzor imunološkog zdravlja. Biomarkeri su mjerljivi pokazatelji bioloških procesa ili bolesti. Analizom PBMC -a, možete otkriti biomarkere koji otkrivaju imunološku aktivnost, napredovanje bolesti ili učinkovitost liječenja. Na primjer, istraživači često mjere razinu citokina u PBMC -u za praćenje imunoloških odgovora tijekom infekcija ili terapija. Ovaj pristup pomaže prilagoditi tretmane pojedinim pacijentima, poboljšavajući ishode.

PBMC također omogućuju dugački imuni praćenje. Njihova stabilnost i prilagodljivost čine ih idealnim za praćenje promjena u imunološkoj funkciji tijekom vremena. To je posebno korisno kod kroničnih bolesti ili tijekom dugotrajnih tretmana.

Ljudski PBMC neophodni su u razumijevanju i napredovanju imunologije. Njihov raznolik sastav - limfociti, monociti i dendritičke stanice - omogućuje im da obavljaju kritične imunološke funkcije. Tehnike izolacije poput FICOLL -ovog sloja i imunomagnetskog razdvajanja osiguravaju da možete dobiti visoku - čistoću PBMC -a za istraživanje ili terapijsku upotrebu.

Njihove aplikacije obuhvaćaju širok raspon polja:

• Tisuće studija koristile su PBMC u kliničkim istraživanjima u posljednjih 50 godina.

• Oni su od vitalnog značaja za staničnu terapiju, razvoj lijekova i analizu imunološkog odgovora.

• PBMC doprinose otkrivanju biomarkera, stratifikaciji pacijenata i istraživanju rijetkih bolesti.

Korištenjem PBMC -a, možete otključati nove mogućnosti u imunologiji i razviti inovativne tretmane koji transformiraju zdravstvenu zaštitu.

FAQ

Za što se PBMC koriste u medicinskim istraživanjima?

PBMC pomažu istraživačima da prouče imunološke odgovore, testiraju nove lijekove i razvijaju terapije poput tretmana automobila. Njihova prilagodljivost i stabilnost čine ih idealnim za eksperimente koji zahtijevaju ljudske imunološke stanice.

Kako pohranjujete PBMC -ove za buduću upotrebu?

PBMC -ove možete pohranjivati ​​tako da ih kriopreservirate u tekući dušik. Ova metoda godinama održava njihovu održivost i funkcionalnost, omogućujući vam da ih koristite u dugoj - terapijskim studijama ili terapijskim primjenama.

Jesu li PBMC isti kao i bijele krvne stanice?

Nije baš. PBMC su podskup bijelih krvnih stanica koje uključuju limfocite, monocite i dendritičke stanice. Oni isključuju granulocite poput neutrofila, koji su također dio bijelih krvnih zrnaca.

Mogu li se PBMC koristiti za proučavanje autoimunih bolesti?

Da! PBMC su vrijedni za proučavanje autoimunih bolesti. Pomažu vam da analizirate ponašanje imunoloških stanica, proizvodnju citokina i genetske markere, pružajući uvid u mehanizme bolesti i potencijalne tretmane.

Je li PBMC izolacija kompliciran proces?

Ne baš. Tehnike poput metode preklapanja ficoll -a ili imunomagnetskog razdvajanja čine PBMC izolaciju izravnim. Uz odgovarajuću obuku i opremu, za svoje istraživanje možete postići visoke - čistoće.