Usporedna analiza mononuklearnih stanica periferne krvi (PBMC): kroz primjene vrsta u imunologiji i terapijskim istraživanjima

IFazni proizvodi

Mononuklearne stanice periferne krvi (PBMC)

Mononuklearne stanice periferne krvi (PBMC)su heterogena populacija imunoloških stanica koje se nalaze u perifernoj krvi, karakterizirana je jednom okruglom jezgrom. Uključuju limfocite - poput T stanica, B stanice i prirodne ubojice (NK) stanice - i monocite, istovremeno isključujući granulocite (npr. Neutrofile) i eritrocite. PBMC se obično izoliraju centrifugiranjem gradijenta gustoće pomoću medija poput FICOLL -a, koji razdvaja stanice na temelju uzgona. Ova ne -- invazivna metoda omogućava jednostavan pristup kritičnim imunološkim komponentama, što PBMC čini neprocjenjivim u imunološkim istraživanjima i terapijskom razvoju.

PBMC isolation

Veličina, morfologija i specifična težina jednostrukih nukleiranih stanica razlikuju se od ostalih stanica u perifernoj krvi. Specifična težina crvenih krvnih zrnaca i polimorfonuklearnih leukocita prelazi 1,080, ON pojedinih nukleiranih stanica je oko 1,070, a od trombocita oko 1,030. Stoga se razlika između specifične težine različitih krvnih stanica i pojedinačnih nukleiranih stanica može upotrijebiti za odvajanje različitih krvnih stanica od pojedinih nukleiranih stanica. FICOLL CENTRIFUGACIJA GRAĐJENJE ZA MAJPBMC izolacijai pročišćavanje. FICOLL je multimer saharoze, neutralan, s prosječnom molekulskom težinom od 400 000, a kada je gustoća 1,2 g/ml, ne prelazi normalan fiziološki osmotski tlak i ne prolazi kroz biološke membrane, pa se obično koristi za PBMC. Stoga se često koristi kao otopina za odvajanje za odvajanje PBMC -a. Eritrociti i granulociti imaju veliku specifičnu težinu i potonu na dno cijevi nakon centrifugiranja; Limfociti i monociti imaju specifičnu težinu manju od ili jednake specifičnoj težini otopine za odvajanje i plutaju na površini otopine za odvajanje nakon centrifugiranja, a mali dio stanica se također može suspendirati u otopini za odvajanje. Aspiracijom stanica sloja bijele membrane na tekućoj površini otopine za odvajanje i ispiranjem na odgovarajući način, veće čistoće jednostruke nukleirane stanice, tj. PBMC, mogu se izolirati iz periferne krvi.

PBMC -ovi u različitim vrstama

U ne - ljudskih primata, posebno majmuna Cynomolgus i majmuna rezusa, istraživanje PBMC -a visoko je cijenjeno zbog fizioloških sličnosti koje dijele s ljudima. Istraživanje pomoćuCynomolgus majmun PBMCirezus majmun PBMComogućila je detaljne studije imunoloških mehanizama, a brojne studije koje su koristile majmunske PBMC naglasile su svoj translacijski potencijal za ljudsku imunoterapiju. Upotreba majmuna PBMC u ispitivanju cjepiva, probir lijekova i imunološka modulacija postala je kamen temeljac i u pretkliničkim i u kliničkom istraživanju.

Slično tome, istrage koje uključujupbmcznačajno su pridonijeli veterinarskoj imunologiji. Studije koje koriste pbmc pbmc osvijetlile su puteve imunološkog odgovora u očnjacima, dok su istraživanja koja uključujupasji pbmctakođer je istaknuo paralele s ljudskom imunološkom funkcijom. U području zoonotskih bolesti, i pbmc PBMC i pseće PBMC istraživanje pružili su kritične podatke o interakcijama patogena -, naglašavajući ulogu ovih stanica u nadzoru bolesti i razvoju liječenja. Ponavljajuća uporaba pse PBMC i pseće PBMC u komparativnim studijama naglašava njihovu važnost kao model sustava.

Modeli glodavaca, koji uključujuštakor PBMCimiša PBMC, tradicionalno su bili na čelu imunoloških istraživanja. Istraživanja koja su koristila PBMC štakora ponudila su detaljnu perspektivu imunološke regulacije u kroničnim upalnim uvjetima, a opsežna upotreba mišjeg PBMC -a bila je presudna za genetske i mehaničke studije autoimuniteta i infekcije. Istraživači se i dalje oslanjaju i na PBMC i PBMC štakora kako bi istražili složene imunološke procese, čineći ove modele neophodnim. Nadalje, integracijahrčak pbmcU eksperimentalnim postavkama dodao je još jednu dimenziju imunološkim istraživanjima, jer studije hrčka PBMC često pružaju nove uvide u virusnu patogenezu i strategije imunološke utaje. Budući da je hrčak PBMC nadopunio istraživanje PBMC -a štakora i miša PBMC, modeli glodavaca kolektivno tvore sveobuhvatan alat za imunološke studije.

Veliki životinjski modeli također su obogaćivali polje, sMiniPig PBMCigrajući glavnu ulogu u premošćivanju pretkliničkih studija i kliničkih primjena. Upotreba MINIPIG PBMC pokazala se korisnim u istraživanju regenerativne medicine i transplantacije organa, gdje MiniPig PBMC pruža fiziološki relevantnu platformu za testiranje novih terapija. Štoviše, istrage koristećizec pbmcbili su ključni u proizvodnji antitijela i proučavanju autoimunih poremećaja, a istraživanje zeca PBMC -a dosljedno daje vrijedne imunološke uvide. Korištenjem miniPig PBMC i zeca PBMC u tandemu, istraživači mogu procijeniti učinkovitost i sigurnost novih imunoterapija u sustavima koji usko oponašaju ljudsku fiziologiju.

Mačja iCAT PBMCIstraživanje je isklesalo svoju nišu u proučavanju retrovirusnih infekcija i imunološke disfunkcije. Istrage koristećimačji PBMCNapredovali smo naše razumijevanje mačjeg imunološkog sustava, dok su studije s CAT PBMC -om ponudile prozor u imunološke odgovore povezane s virusnim infekcijama. I mačji PBMC i CAT PBMC opetovano su istaknuti u istraživanjima koja istražuju paralele između virusa mačjeg i ljudskog imunodeficijencije, što dokazuje da je ponovljena upotreba mačjeg PBMC i CAT PBMC ključna za razvoj učinkovite dijagnostičke i terapijske strategije.

Ptičja imunologija nije zaostajala, sapileća pbmcipatka PBMCStudije koje pružaju kritički uvid u imunološke mehanizme ptica. Istraživanje pomoću pilećeg PBMC -a otkrilo je jedinstvene aspekte imunoloških odgovora ptičjeg ptičjeg ptičjeg ptičjeg ptičjeg ptičja, dok su istraživanja koja uključuju patke PBMC dodatno obogaćuju naše razumijevanje otpornosti na patogene kod ptičjih vrsta. Ponavljana upotreba pilećeg PBMC i patka PBMC u studijama koje ispituju virusne infekcije i učinkovitost cjepiva ilustrira njihovu važnost u kontroli bolesti koje utječu na životinjsku i ljudsku populaciju.
Uz to, studije koje koristeZamorca PBMCbili su središnji u istraživanju tuberkuloze i cjepiva, gdje zamorca PBMC dosljedno služi kao pouzdani pokazatelji imunološkog odgovora. Paralelno, istrage koje uključujuAlpaka PBMCiKamil PBMCprivukli su pažnju zbog jedinstvenih struktura antitijela prisutnih kod ovih vrsta. Istraživanje koje je uključivalo ALPACA PBMC i Camel PBMC otkrila su nove terapijske aplikacije, pri čemu se i Alpaca PBMC i Camel PBMC više puta koristio za istraživanje inovativnih tehnologija nanobody i imunoloških tretmana.

Doprinosigoveđi PBMCiOvca PBMCZa poljoprivrednu imunologiju također su bili izvanredni. Studije s goveđim PBMC -om pružile su duboke uvide u goveđi mastitis i respiratorne bolesti, a opsežno istraživanje pomoću goveđeg PBMC -a izravno je informirao strategije za poboljšanje zdravlja goveda. Jednako tako, opetovana uporaba ovčjih PBMC u imunološkim istraživanjima obogatila je naše razumijevanje imunoloških odgovora preživača, a istraživanje Ovčjih PBMC -a nastavlja voditi razvoj učinkovitih cjepiva i protokola upravljanja bolestima.

Uloga u imunološkim istraživanjima

PBMC može oponašati in vivo okruženje i pružiti učinkovit in vitro model za razvoj lijekova. Promatrajući učinke lijekova na PBMC proliferaciju, apoptozu i citotoksičnost, u početku se može procijeniti učinkovitost i sigurnost lijekova. Proučavanjem učinaka lijekova na ciljeve djelovanja i signalnih putova PBMC -a, pomaže u otkrivanju novih ciljeva djelovanja lijeka, a ti nalazi mogu pružiti nove ideje i upute za razvoj lijekova.

Primjene u antitijelu - ovisna stanica - posredovana citotoksičnost (ADCC)

Primjena PBMC -a u otkrivanju droga predstavljena jeAntitijelo - ovisna stanica - posredovana citotoksičnost (ADCC). Antitijelo - ovisna stanica - posredovana citotoksičnost, kao što naziv sugerira, oslanja se na ubojstvo antitijela - posredovanog stanica za ubijanje ciljnih stanica. Specifični postupak može se shvatiti na sljedeći način: FAB segment antitijela veže se na antigeni epitop na ciljnoj ćeliji. FC segment antitijela veže se na FCR na površini NK stanice (budući da su NK stanice glavne stanice koje mogu igrati ulogu ADCC -a, to se koristi kao primjer), pa se aktivira NK stanica, te se oslobađa perforin i granzim. Perforin i granzim ulaze u stanicu kroz pora formirane u ciljanoj staničnoj membrani i uzrokuju da ciljna stanica umre aktiviranjem apoptoze - srodnih enzima.

Prijave udrugiER imunoterapeutski razvoj lijekova

• - Pomiješana reakcija limfocita (MLR)

Primarne DC stanice i T stanice uzgajaju se u sustavu koji se može koristiti za procjenu aktivacije T ćelija. DC stanice izražavaju pd - l1 u velikim količinama na njihovoj površini, što se veže na pd - 1 na površini T stanica da ga inhibiraju. Ako lijek može učinkovito blokirati reakcijski put između dva, on može potaknuti proliferaciju T stanica u velikim količinama, provjeravajući tako funkcionalnu aktivnost lijeka.

- T testacirajući testovi

T - Analiza aktivacije stanica jedan je od najčešće korištenih testova za procjenu učinaka imunoterapijskih lijekova. U ispitivanjima aktivacije T stanica, obično se koriste in vitro uzgojene T stanice i daju odgovarajuće podražaje, poput antigena ili antitijela, za induciranje aktivacije T stanica

- T test proliferacije stanica

T - testovi proliferacije stanica mogu se koristiti za provjeru kandidata za imunoterapiju lijekova i za procjenu učinkovitosti lijekova uspoređujući stupanj proliferacije stanične stanice u različitim lijekovima -

- Stimulacija PBMC -a stafilokoknog enterotoksina B

Stafilokokni enterotoksin B je superantigen koji se izravno veže na MHC molekule na antigenu - predstavljaju stanice i prikazani su T - staničnim receptorima. Stafilokokni enterotoksin B ima mogućnost ne - posebno aktiviranja T - stanica i inducirati oslobađanje pro - upalnih citokina, poput IL - 2, IL - 6, itd.

Uloga PBMC u sindromu oslobađanja citokina

PBMC igra glavnu ulogu u razvojusindrom oslobađanja citokina(CRS), akutni i potencijalno po život opasan sistemski upalni odgovor. Kada se stimuliraju - bilo imunoterapijom poput CAR -T stanica, monoklonskih antitijela ili infekcija - te stanice postaju visoko aktivirane i brzo izdvajaju raspon citokina poput IL -6, IL -1, IFN -γ i TNF -α. Ova prekomjerna proizvodnja citokina može pokrenuti kaskadu događaja, uključujući groznicu, vaskularno istjecanje, hipotenziju i disfunkciju s više organa. Razumijevanje doprinosa PBMC -a u CRS -u dovelo je do razvoja ciljanih intervencija, poput inhibitora IL -6 receptora, kako bi se pomoglo ublažavanju sindroma ublažavanjem citokinske oluje uz očuvanje željenih imunoterapijskih učinaka.

Utrkusukob

Ukratko, ovaj članak naglašava ključnu ulogu koju PBMC igraju u napredovanju našeg razumijevanja imunoloških mehanizama u širokom spektru vrsta. Ispitujući jedinstvene doprinose - od modela primata koji zrcale ljudsku fiziologiju do glodavaca, velikih životinjskih i ptičjih sustava koji svaka nude karakteristične prednosti istraživanja - ovaj pregled naglašava kako komparativne studije ne samo da usavršavaju pretkliničke procjene, već i unose put inovativnim imunoterapeutskim strategijama. Integracija PBMC istraživanja u različite domene kao što su razvoj cjepiva, testiranje učinkovitosti lijekova i istraživanje novih imunoloških putova pokazuje njegovu neophodnu ulogu i u osnovnoj znanosti i kliničkim primjenama. U konačnici, Cross - Analiza vrsta PBMC -a potvrđuje vrijednost ovih staničnih modela kao temeljnih alata u prevođenju otkrića na Benchsideu u učinkovite tretmane za širok raspon imunoloških izazova.

KEywords: Mononuklearna stanica periferne krvi, Cynomolgus majmun PBMC, Rezus majmun PBMC, Pbmc, Pasji pbmc, Štakor pbmc, miša pbmc, Miševi PBMC, hrčak PBMC, MiniPig PBMC, Zec pbmc, mačji pbmc, CAT PBMC, Pileća pbmc, patka pbmc, Zamorca PBMC, Alpaka PBMC, Camel PBMC, goveđi PBMC, Ovca PBMC, Antitijelo - ovisna stanica - posredovana citotoksičnost (ADCC), Sindrom puštanja citokina, smrznuti PBMC, kriokonzervirani PBMC,PBMC izolacija, Odmrzavanje PBMC, Kultiviranje PBMC, Leukopak, Leukapheresis PBMC, HLA je tipkao PBMC.