Nan evalyasyon vitro nan transporter nan vitro dwòg: eksplore wòl yo nan vezikul ABC ak selil transporter SLC

Mo kle: ATP - Kasèt obligatwa (ABC), Transporter ABC, SLC Transporter, manbràn vezikul, MDR1 (P - GP), BSEP, BCRP, MATE1, MATE2 - K, OAT1, OATP1B1, MDCK II, CACO - Etid, HEK293 Mock, Mock SLC Transporter.

Pwodwi iPhase

Fon

Nan aplikasyon klinik pasyan yo souvan itilize plizyè dwòg ansanm, ak medikaman sa yo ka pwodwi dwòg - entèraksyon dwòg (DDI) ki gen potansyèl la ki lakòz grav reyaksyon negatif oswa chanje efikasite nan tretman an. Evalyasyon DDI anjeneral kòmanse ak tès in vitro yo idantifye faktè ki ka afekte dispozisyon dwòg elucidate mekanis potansyèl DDI ak jwenn paramèt sinetik pou etid pi lwen. Dwòg metabolize anzim yo te lontan yo te konsantre nan rechèch DDI. Nan dènye ane yo, ak devlopman nan teknoloji byoloji molekilè, yo te fè pwogrè siyifikatif nan etid la nan transpò nan vitro dwòg, ak enpòtans ki genyen nan nan evalyasyon vitro nan transporter ki baze sou DDIs te atire ogmante atansyon.

Transpò ak wòl yo

Transporter refere a pwoteyin transmembrane nan tout manbràn selilè a nan divès tisi ki medyasyon antre a ak sòti nan sibstans ki sou andojèn oswa ègzojèn nan ak soti nan manbràn byolojik. Transpò dwòg in vitro se yon tèm jeneral pou pwoteyin ki pran dwòg kòm substrats, egziste sou sifas la manbràn selilè nan tisi oswa ògàn, epi pran fonksyon an nan transpò dwòg transmembrane, sitou ki gen ladan de fanmi yo: la ATP - Kasèt obligatwa (ABC)Superfamily ak solit konpayi asirans superfamily (SLC transpò), ki domine transmembrane pwosesis la transpò dwòg.

ABC Transportersse ATP - transpò depandan ki aktivman deplase divès substrats (eg, iyon, lipid, ak dwòg) atravè manbràn selilè, souvan kont pant konsantrasyon. Yo jwe wòl kle nan rezistans dwòg, metabolis, ak dezentoksikasyon selilè.SLC Transportersyo se sitou segondè transpò aktif oswa fasilite ki medyasyon mouvman an nan solute tankou glikoz, asid amine, ak nerotransmeteur. Kontrèman ak transpò ABC yo, yo pa mande pou ATP dirèkteman men konte sou gradyan ion.

Transpò ki medyasyon eflux dwòg sitou gen ladan p - glikoprotein (p - gp), oswa milti - rezistans dwòg 1 pwoteyin (MDR1), kansè nan rezistans kansè nan tete (BCRP). Yo se manm nan ATP - obligatwa kasèt (ABC) fanmi an transporter, ki sèvi ak enèji nan idrolize ATP pou transpò a nan dwòg ak sibstans ki sou andojèn. Transpò ki medyasyon antre nan dwòg nan selil la ka pran moute substrats nan sit la sib fè egzèsis efè famasi, ak apatni a manm yo fanmi transpòtè solute, sitou ki gen ladan anyon òganik transpòte polipeptid (OATPs), transporter anyon òganik (avwan), multidrug ak toksin ekstruzyon, pwoteyin (

Transpòtè kle yo ak wòl yo:

• -Bs(Kòlè sèl ponp ekspòtasyon):Kritik pou sekresyon asid kòlè nan fwa a, se malfonksyònman BSEP lye nan maladi fwa kolestatik. Dwòg - induit -- BSEP anpèchman ka lakòz epatotoksisite.
• -Bcrp(Pwoteyin rezistans kansè nan tete):BCRP afekte byodisponibilite nan chimyoterapi ak antiviral, ekspòte substrats soti nan selil yo ak enfliyanman placenta ak san - pénétration baryè nan sèvo.
• -Mate1/Mate2 - K(Multidrug ak toksin pwoteyin extrusion):Sitiye nan tisi ren ak epatik, MATE1 ak MATE2 - k excrete dwòg katyonik, k ap travay sinèrjik ak OCT2 medyasyon sekresyon ren.
• -OATP1B1(SLCO1B1):Yon transpòte absorption epatik kritik pou clearance statin. OATP1B1 jwe yon wòl enpòtan anpil nan medyatè absorption nan konpoze andojèn tankou asid bilirubic, bilirubin, esteroyid - konpoze makonnen, ak òmòn tiwoyid, osi byen ke clearance nan epatik nan yon pakèt domèn dwòg tankou statin
• -OAT1(SLC22A6):Media absorption ren nan anyon, ki gen ladan antiviral ak NSAIDs, enfliyanman risk nefrotoksisite.

Transporter anpèchman ak DDI

Transporter anpèchmanse yon aspè esansyèl nan devlopman dwòg. Anpèchman Transporter jwe yon wòl esansyèl nan dwòg - entèraksyon dwòg (DDI) pa afekte absòpsyon a, distribisyon, metabolis, ak eskresyon nan CO - administre dwòg. Anpèchman nan transpòtè eflux tankou MDR1 (P - GP) ak BCRP ka diminye èkstruzyon selilè nan dwòg, ki kapab mennen nan pi wo konsantrasyon entranglè ak sistemik. Menm jan tou, transpòtè absorption anpeche tankou OATP1B1 ka diminye clearance dwòg epatik, pandan y ap anpèchman BSEP ka entèfere ak transpò asid kòlè, ogmante risk pou yo kolestaz. Anplis de sa, transpò tankou Mate1, Mate2 - K, ak Oat1, ki se kritik pou eliminasyon dwòg ren, lè inibe, ka chanje eskresyon ren ak kontribye nan akimilasyon dwòg. Modèl in vitro, ki gen ladanMDCK IIakCaco - 2Liy selil yo, yo lajman itilize pou evalye entèraksyon transporter sa yo, ki bay Sur esansyèl nan potansyèl DDI pandan devlopman dwòg.

Modèl in vitro pou etid transporter

Konprann Fonksyon Transporter ak Predi ke Transporter - medyatè DDIS konte sou modèl selil espesyalize yo. Chèchè yo itilizeHek293 MockSelil yo kòm yon kontwòl negatif, asire ke nenpòt ki transpò obsève se akòz transporter la espesifik. HEK293 Mock bay yon background ki konsistan, pandan y ap HEK293 Mock rete santral nan validation eksperimantal espesifik. Yon metòd anplwayeVezikul manbrànSoti nan selil overexpressing transpòte, souvan izole soti nan HEK293 selil Mock. Menm jan an,Mock SLC transporterModèl yo kritik pou distenge aktivite transporter espesifik soti nan absorption nonspecific. Mock SLC transporter assay konfime ke obsève mouvman substrate se transporter - depandan, ak Mock SLC transporter eksperyans ranfòse fyab la nan modèl la. Apwòch sa a doub lè l sèvi avèk HEK293 Mock ak Mock SLC transporter amelyore kapasite nou yo etidye ATP - transpò depandan san entèferans soti nan metabolis selilè.

Liy Caco - 2 selil la, ki sòti nan kannin kolon imen, se yon lòt modèl estanda ki itilize pou simule absòpsyon dwòg entesten. Kapasite li nan diferansye nan enterocyte - tankou selil ki eksprime transpò divès - tankou P - GP ak BCRP -fè li anpil valè pou evalye tou de pèmeyabilite dwòg ak entèraksyon potansyèl yo.

Anplis, transporter - modèl espesifik tankou imen BCRP eksprime selil pèmèt ankèt la nan espesifik substrate, konpòtman an sinetik nan transpò dwòg, ak nan ki pwen inhibiteurs ka modile aktivite transporter. Lè konbine avèk done ki sòti nan analiz vesikulèr, sistèm sa yo selilè bay Sur konplè nan dinamik yo nan transporter - medyatè dispozisyon dwòg.

Konklizyon

An rezime, konpreyansyon entèraksyon transporter enpòtan anpil pou optimize sekirite dwòg ak efikasite. Transpò tankou MDR1 (P - GP), BCRP, ak BSEP ansanm ak transpòte absorption tankou OATP 1B1 ak OAT1 SLC Transporter jwe wòl kritik nan farmakokinetik dwòg. Itilize nan modèl in vitro ki gen ladan MDCK II, Caco - 2, imen BCRP eksprime selil yo, ak moun MDR1 knockin MDCK II selil bay yon fondasyon gaya pou konprann ki jan transporter anpèchman kapab afekte dwòg -dwòg entèraksyon ak dispozisyon an jeneral dwòg. Sur sa yo se anpil valè pou optimize efikasite dwòg ak sekirite nan anviwònman klinik yo.