siRNA (oligo dwòg) etid: wòl nan Galnac - siRNA konjige nan lisosomal estabilite ak siRNA livrezon pou simonte siRNA chape

Mo kle: Galnac - siRNA, siRNA livrezon, siRNA chape, lizosom fwa, hepatocyte lizosomes, tritosome, lisosòm katabolism, lisosomal estabilite, lisosomal asid fosfataz

Pwodwi iPhase

Prezantasyon
RNA - ki baze sou therapeutics te parèt kòm yon apwòch transfòmasyon nan trete divès maladi nan silans vize jèn. Pami tretman sa yo, dwòg siRNA yo pran atansyon pou amelyore espesifik yo ak efikasite. Yon gwo defi nan livrezon siRNA se asire efikas siRNA chape soti nan chemen an endocytic anvan degradasyon nan lizosom fwa ak lizosomes epatosit. Nan etid in vitro de pli zan pli konsantre sou ki jan siRNA formulations ankouraje siRNA chape pandan y ap kominike avèk konpozan selilè. Entèraksyon sa a enplike nan faktè kritik tankou katabolism lysosome, lisosomal estabilite, ak degradasyon pa lisosomal asid fosfataz. Optimize paramèt sa yo esansyèl pou amelyore livrezon siRNA ak reyisi efikas siRNA chape.

Livrezon siRNA ak Lysosomal pyèj
Livrezon siRNA efikas nan epatosit souvan depann sou transpòtè tankou nanoparticles lipid (LNPs) oswa konjige tankou GalNAC - siRNA, ki sib fwa - reseptè espesifik. Malgre inovasyon sa yo, se yon fraksyon siyifikatif nan siRNA tráfico nan lisosom fwa ak lizosomes epatosit, kote katabolism rapid lisosòm mennen nan degradasyon. Anviwònman an asid, anrichi ak lisosomal asid fosfataz, defi lisosomal estabilite ak anpeche siRNA chape. Pou amelyore rezilta ki ka geri ou, rechèch sou siRNA ap konsantre sou amelyore siRNA chape soti nan sa yo konpatiman lysosomal, kidonk amelyore jeneral siRNA livrezon.

Mekanis nan Galnac - siRNA konjige

GalNAC - siRNA konjige yo se yon apwòch prometteur pou siRNA livrezon, swe segondè a espesifik nan N - asetilgalaktosamin (GalNAC) obligatwa nan reseptè Asialoglycoprotein (ASGPR) sou epatosit. Entèraksyon sa a fasilite endocytosis rapid, sa ki pèmèt siRNA antre nan selil fwa avèk efikasite. Sou absorption, konjigate yo internalize atravè clathrin - twou kouvwi, lage nan lumen selilè a, ak imedyatman aktive entèferans RNA (RNAi) pa dissociating soti nan sialyl -

Pou amelyore estabilite a ak efikasite ki ka geri ou nan GalNAC - siRNA konjige, plizyè modifikasyon chimik yo ap travay:

• 2 '- F ak 2' - OME Modifikasyon- Modifikasyon sa yo anpeche degradasyon RNase pandan w ap kenbe konpatibilite ak RNA entèferans (RNAi) machin, miman pwopriyete yo byofizik nan natirèl la 2 '- OH gwoup.
• Modifikasyon fosforotoat- Ajoute gwoup fosforothioate nan bout yo 5 'ak 3' nan siRNA seksyon ogmante puisans, estabilite, ak durabilite RNAi nan vivo.
• Optimize RNAi deklannche- Komen siRNA desen gen ladan 21/21 modèl la nukleotid ak 19 pè baz ak 3 'overhangs, ak 21/23 modèl la nukleotid, ki gen yon febli 5' gid Strand fen ak yon 3 'surandetman. Optimizasyon sa yo amelyore efikasite siRNA ak lonjevite.

Baryè lisosomal
Vwayaj la nan siRNA soti nan administrasyon nan sit li yo nan aksyon nan epatosit se plen ak obstak, espesyalman sezi a ak degradasyon nan lizosom fwa ak lizosomes epatosit. Agresif katabolism lizosòm nan konpatiman sa yo, kondwi an pati pa anzim tankou lisosomal asid fosfataz, konpwomi lisosomal estabilite ak limit siRNA chape. Simonte sa yo baryè lisosomal se kritik pou livrezon siRNA siksè. Pwogrè nan - siRNA teknoloji konsantre sou modulation lysosome katabolism amelyore lisosomal estabilite ak ankouraje pi efikas siRNA chape soti nan tou de lisosomes fwa ak lizosomes hepatocyte.

Lysosome katabolism ak siRNA degradasyon
Nan epatosit, katabolism lisosòm se yon gwo baryè nan estabilite nan siRNA ki ka geri ou. Nan milye asid la nan lizosom fwa ak lizosomes epatosit, aktivite anzimatik -ki gen ladan sa yo ki nan lisosomal asid fosfataz -accelerate siRNA degradasyon. Sa a degradasyon konpwomèt lisosomal estabilite ak diminye fenèt la pou efikas siRNA chape. Dènye etid sou formulations siRNA te demontre ke modulation lisosomal asid fosfataz aktivite ka bese lysosome katabolism, kidonk konsève siRNA entegrite ak amelyore siRNA livrezon ak siRNA chape.

Itilize modèl tritosome nan rechèch siRNA
Anplis de etid lisosomal konvansyonèl yo, tritosom izole yo ofri yon modèl avanse pou evalye konpòtman lisosomal. Espesyalman, rat tritosomes fwa -ki se lizosomes epatik ki chaje ak surfactants ki pa - iyonik -yo te travay kòm yon prediksyon nan sistèm vitro yo etidye katabolism lizosòm ak estabilite manbràn. Modèl sa yo tritosome pèmèt chèchè yo byen imite ak quantifier pwosesis yo degradasyon anzimatik ki enpak estabilite siRNA. Pa enkòpore Sur soti nan rat etid tritosome fwa, syantis yo ka pi byen optimize estrateji fòmilasyon amelyore siRNA chape, finalman kontribiye nan pi efikas RNA - ki baze sou therapeutics.

Sistèm rechèch metabolik ak seleksyon nan oligonucleotid

Menm jan ak dwòg tradisyonèl ti molekil, formulasyon siRNA mande pou konplè nan vitro etid estabilite metabolik pandan devlopman pre -klinik. Etid sa yo evalye enpak katabolism lisosòm ak wòl nan lisosomal asid fosfataz nan siRNA degradan nan lizosom fwa ak lizosomes hepatocyte. Se mete aksan sou optimize livrezon siRNA ak asire gaya siRNA chape. Plizyè sistèm tès - tankou homogenates fwa, lizosomi fwa izole, ak epatosit prensipal -yo ap travay imite anviwònman an epatik. Amelyore estabilite lisosomal nan evalyasyon sa yo se kle pou amelyore pèfòmans dwòg siRNA yo.

Konklizyon

SiRNA Therapeutics yo ap transfòme medikaman presizyon pa pèmèt sible silans jèn, menm si defi tankou lisosomal degradasyon rete. Lysosomes asid ak anzim tankou lisosomal asid fosfataz anpeche estabilite siRNA, men innovations tankou GalNAc - siRNA konjige ak modifikasyon chimik (eg. Nan etid in vitro ak modèl fwa plis optimize formulations sa yo, pavaj yon fason pou pi efikas RNA - tretman ki baze sou.