CGT innovatív terápia - Lentivirus - csomagológép - T immunsejtek

CGT innovatív terápia - Lentivirus - csomagológép - T immunsejtek

Az immunsejt -terápia egy innovatív rákkezelés, amely javítja a test immunrendszerét a rákos sejtek célzására és kiküszöbölésére. A legfontosabb formák közé tartozik a citokin - indukált gyilkos sejtterápia, T - sejtterápia és CAR - T -sejtterápia. A CAR - T -terápia magában foglalja a T -sejtek átprogramozását a kiméra antigénreceptorok (CAR) expresszálására, amelyek kifejezetten a tumorsejteket célozzák meg, és jelentős sikert mutatnak a hematológiai rákban, például a leukémia és a limfóma területén.

Kulcsszavak: CAR - T, Lentiviral, Lentiviral Vector, Tracer Lentivirus

CAR előkészítése - T -sejtterápia

Általánosságban a CAR - T -sejtek előkészítésének legfontosabb lépései a következők:

Ábra Forrás: Dana - Farber Cancer Institute - CAR T - Sejtklinikai vizsgálatok segítenek a myeloma betegek többszörös visszatéréséhez

1. 1.A rendezés (T - Cell izoláció)

A CAR - T -sejtek előkészítésének első lépése a T - sejtek elkülönítése a beteg perifériás vérében a fehérvérsejtekből. Az olyan technikákat, mint az immunmágneses gyöngy elválasztás vagy az áramlási citometriás, általában a CD3+- gazdag T - sejtek kivonására használják a vérből. A sejtek tisztaságának biztosítása érdekében a válogatási folyamatnak nagyon pontosnak kell lennie, biztosítva, hogy elegendő számú magas - minőségű t - sejt érhető el.

2. 2.Stimuláció (T - sejtek aktiválása)

Az extrahált T - sejteket in vitro aktiválják, általában aCD3 /CD28 T - Sejtek aktiválási /bővítő készlet- Az aktivált T -sejtek aktív állapotba lépnek, előkészítve azokat a gén transzfekciójára. Ezen folyamat révén a T -sejt funkció javul, hozzájárulva a későbbi genetikai módosításhoz és amplifikációhoz.

3. 3.Transfection (génszerkesztés)

Az aktivált T -sejtek gén transzfekción mennek keresztül, hogy expresszálják a kiméra antigénreceptor (CAR). Ez a folyamat általában használjalentivirális vektorAz autógének bevezetése a T -sejtekbe. A Lentivirus egy hatékony gén -transzdukciós eszköz, azzal az előnnyel, hogy stabilan integrálja a célgént (például a CAR génet) a sejtgenomba. A T -sejtek megfertőzésével és a CAR gén T -sejt -DNS -be történő transzfektálásával a lentivírus lehetővé teszi a T -sejtek számára, hogy hosszú időtartamot expresszáljanak. A CAR gén tartalmaz egy antitest egyetlen - láncváltozó fragmentumát (SCFV), amely lehetővé teszi a T -sejtek számára, hogy felismerjék a tumorsejtek felületén lévő specifikus antigéneket, és immunválaszt indítsanak a T -sejtek jelátviteli régióinak aktiválásával. Amint az a 2. ábrán látható.

Ábraforrás: Szingapúr CAR - T Sejtterápia

4. 4.Mplifikáció (sejtproliferáció)

Transzfekció után a CAR - T -sejtek belépnek az amplifikációs szakaszba, ahol a növekedési faktorok, példáulIL - 2hozzáadják a sejtek proliferációjának elősegítéséhez. Ennek a folyamatnak a célja annak biztosítása, hogy elegendő számú CAR - T -sejt álljon rendelkezésre a beteg esetleges infúziójához. Az amplifikációs folyamatot steril körülmények között kell elvégezni a cella minőségének és mennyiségének garantálása érdekében.

5. 5. Minimális vezérlés (QC)
6. Mielőtt a betegbe való újrafertőzés előtt a minőség -ellenőrzés elengedhetetlen az előkészítési folyamat során. Készített CAR - T -sejtek szigorú tesztelésen mennek keresztülBiztosítsa tisztaságát, aktivitását, transzfekciós hatékonyságát és a kezelési előírások betartását- Ezenkívül a sejtek szennyeződésének vagy a mellékhatásoknak a tesztelésére van szükség a sejtek biztonságának és terápiás hatékonyságának biztosítása érdekében a betegbe történő újbóli fertőzés után.

IA lentivírus transzfekciójának mportance immunsejtekben

A lentivirális transzfekciós technológia elengedhetetlen az immunsejt -terápiában, különösen a gént szerkesztés és a sejtmérnöki munka szempontjából. A módosított HIV - 1 -ből származó lentivirális vektorokat széles körben használják, mivel képesek a gének integrálására a gazda -genomba, biztosítva a stabil, hosszú - kifejezés expresszióját. Megfertőzhetik mind az elválasztó, mind a nem osztó sejteket, és biztonságukat javították a kulcsfontosságú gének módosításával a replikáció megelőzése érdekében. Ezeket a vektorokat most általában alkalmazzák a génterápiában, a gént szerkesztésben és a sejtbiológiai kutatásokban, amelyek hatékonyságát és tartósságát a génszállításban tartják.

Ábra: obiosh.com/product/ A Lentivírus csomagolás és a Lentivírus transzfekciós folyamat vázlatos diagramja a 293T cellákban

1. Hatható gén transzdukció

A lentivirális vektor hatékonyan képes átadni a célgének, például a CAR génbe, és ezeket a géneket stabilan integrálhatja a sejtgenomba, biztosítva, hogy a CAR gén folyamatosan expresszálódjon a sejtosztódás és a proliferáció során. Ez a magas hatékonysági transzdukciós képesség alapvető fontosságú az immunterápia sikeréhez.

2. Élvező immunogenitás 

Más vírusvektorokkal összehasonlítva a lentivírusok alacsonyabb immunogenitással rendelkeznek. Ennek eredményeként, amikor a lentivírusokat immunsejtek transzdukálására használják, a beteg immunrendszere viszonylag gyengébb immunválaszt generál a vírusra. Ez elősegíti a mellékhatások minimalizálását, különösen az infúzió utáni sejtek hosszú -

3. Az immunsejtekhez való nagy alkalmazkodóképesség

A lentivirális vektor képes különféle immunsejtek hatékony átalakítására,Különösen a T -sejtek és az NK sejtek- A lentivirális transzdukció révén az immunsejtek megszerezhetik a tumor - specifikus felismerési képességeit, ezáltal javítva képességüket a tumorsejtek megcélzására és elpusztítására.

4. A transzdukált effektor sejtek pontosítása a célsejtek felismerésében 

Immunterápiában,transzdukált effektor sejtekLásd az immunsejteket, amelyek a transzdukció után expresszálják a CAR -t és anti - tumor aktivitást gyakorolnak. A lentivirális vektorok pontosan átadhatják a CAR gént ezekbe az effektor sejtekbe, lehetővé téve számukra a tumorsejtek felismerését és megcélzását.Célsejtekazok a tumorsejtek, amelyeket ezen immunsejtek azonosítanak és megsemmisítenek. A lentivirális transzdukció révén az immunsejtek javíthatják specifitásukat a tumorsejtek felismerésében és elpusztításában, ezáltal javítva a terápiás hatékonyságot.

Ebben az összefüggésben az Iphase, az in vitro kutatási reagensek vezetője kifejlesztett egy Lentivirus csomagolókészletet és a lentivírus koncentráció -reagenst, hogy egyszerűsítse az immunterápiás ügyfelek transzdukciójának összetettségét és javítsa a stabil génátvitel sikerességi sebességét. Ezek a termékek egy - stop megoldást kínálnak az ügyfelek számára.

Iphase lentivirusPrúd

Az iphase lentivírus csomagoló készlettartalmazza az összes alapvető reagenstlentivírus csomagolás, jelentősen egyszerűsítve a kísérleti folyamatot, és időt és erőfeszítést takaríthat meg. Ez a készlet tartalmazza:

• Lentivírus csomagolási plazmid keverék
• Reagens transzfektálási reagens
• EGFP plazmid
• Iphase lentivirus koncentráció reagens

Ez a készlet valóban egyszerűsíti a kísérletet! A bonyolult reagensek előkészítésének nélkül a Lentivírus csomagolás hatékonyan befejezhető a mellékelt utasítások egyszerűen történő betartásával.A készlet egyedi előnyei között szerepel a rövid csomagolási idő, a magas vírusos titer és a könnyű működés, így ideális a kezdőknek a Lentivírus csomagolásban. A reagensek minden sorozatának szigorú minőség -ellenőrzésen megy keresztül a pontos, megbízható és reprodukálható eredmények biztosítása érdekében, jelentősen javítva a transzfekció hatékonyságát és a vírusvektorok stabilitását, ezáltal erős technikai támogatást nyújtva az immunsejtek előkészítéséhez.

Ezenkívül az ügyfelek költségeinek megmentése érdekében az Iphase kifejlesztette és előállította a Lentivírus koncentráció reagenst, gyors és egyszerű koncentrációs megoldást kínálva.A lentivírus felülúszóval és a koncentráció reagenssel történő egyszerű keverésével, amelyet egy rövid inkubálás és centrifugálás követ egy standard centrifuga, a lentivirális részecskék felhasználásával, gyorsan koncentrálódhat. Ez a folyamat nem igényel ultracentrifugát, így kényelmes és költség - hatékony lehetőség a legtöbb laboratóriumi felhasználó számára.

Röviden: az iphase lentivirus koncentráció -reagens nemcsak szignifikánsan javítja a transzfekció hatékonyságát, hanem magas - minőségi vírusvektor -támogatást is nyújt az immunsejtek előkészítéséhez. Alapvető termék a rutin kísérletek, a preklinikai kutatás és más alkalmazási területek számára.

Összefoglalva: az immunterápia, különösen a CAR - T -sejt és a CAR - NK sejtterápiák, új irányt képvisel a modern rákkezelésben. Pontos folyamatokon keresztül, például a sejtváladás, az aktiválás, a transzdukció, a bővítés és a minőség -ellenőrzés révén a tudósok hatékony és biztonságos immunsejt -termékeket készíthetnek a betegek számára, lehetővé téve a célzott rákkezelést.A lentivirális transzdukció, mint alaptechnika, kritikus szerepet játszik a CAR - T és CAR - NK sejtek előkészítésében, annak nagy hatékonysága és stabilitása miatt.A folyamatos technológiai fejlődéssel az immunterápia képes innovatív kezelési lehetőségeket kínálni több beteg számára, nagyobb klinikai értéket biztosítva. A jövőben az immunterápia várhatóan forradalmi terápiás reményt hoz több rákos beteg számára.

A gén transzdukció, az expresszió és a betegségkutatás igényeinek kielégítése érdekében az Iphase lentivírus csomagolási készleteket, lentivírus koncentráció -reagenseket és nyomjelző lentivírusokat kínál. Ezeket a nyomjelző lentivírusokat zöld fluoreszcens protein (GFP), vörös fluoreszcens mCherry protein és luciferáz csomagolják, lehetővé téve a célsejtek könnyű nyomon követését mind in vitro, mind in vivo.

Emellett az iPhase két Pre - csomagolt nyomjelző lentivírusot is kínálhat: GFP & luciferáz és MCHerry & Luciferase. Ezeket a nyomjelzőket a kísérleti igények alapján választhatjuk meg vagy kombinálhatjuk, ésszerűsíthetik a munkafolyamatokat, és javíthatják a hatékonyságot a valódi - a célsejtek időkövetése és megfigyelése érdekében.

IpázImmunoterápiaRfelajzottPrúd

A Lentivírus mellett a CAR - T vagy CAR - NK terápiákban használt termékek mellett az Iphase, mint az in vitro kutatási reagensek vezetője, szintén jelentős mértékben hozzájárult a CGT (sejt- és génterápia) és más területek innovációinak támogatásához. Az iphase leukocitákat és PBMC -ket (perifériás vér mononukleáris sejteket) fejlesztett ki, leukapherézissel, valamint különféle immunsejt -izolációs készletekkel együtt., az immunterápia gyors fejlődésének támogatása érdekében.

Az iphase termékek a következő előnyöket kínálják, éselemzési tanúsítvány (COA)Az iphase által ellenőrzött minden egyes tételhez rendelkezésre áll.

Biztonság 

Az iphase termékek egészséges donorokból/állatokból származnak, amelyek alapos szűrésen mentek keresztül, negatív eredményekkel a vírusvizsgálathoz (HIV - 1/2, HBV, HCV, szifilisz).

Megfelelés  

Az Iphase tájékozott hozzájárulási űrlapokat biztosít a donorok által aláírt, tiszta és nyomon követhető forrás -ellenőrzéssel.

Szakmaiság

Az Iphase által a leukapheresis útján kapott termékeket képzett szakemberek kezelik. Mindegyik tételt egy megfelelő COA kíséri, és a termékeket szigorú hideg lánc alatt szállítják a biztonság, a gyors szállítás és a minőségbiztosítás biztosítása érdekében.

Ügyfélszolgálat

Az iphase magas - minőségi - értékesítési szolgáltatást kínál, biztosítva a zökkenőmentes és megszakítás nélküli élményt a próbaverzió során.