Hepatociták a gyógyszercserében és az siRNS gyógyszerszállításban: A modellrendszerek értékelése a fajok között

MEGJEGYZÉS: A szuszpenziós májsejteket olvadási tápközeggel és inkubációs közeggel kell használni; A tenyészthető májsejteket olvadási tápközeggel kell használni, Táblázható közepes, karbantartási táptalaj és kollagén bevonatú lemez. A CYP indukciója mRNS indukciós vizsgálati készletet is igényel.

Májsejtek

MájsejtekA máj elsődleges funkcionális sejtjei, amelyek központi szerepet játszanak az anyagcserében, a méregtelenítésben, az epetermelésben és a fehérjét szintézisben. Ezek képezik a májfunkció szerkezeti és biokémiai alapját, amelyek a különféle endogén és exogén vegyületek kevésbé káros anyagokká történő átalakításában a fő mediátorokként működnek, és megkönnyítik a gyógyszerek és a toxinok anyagcseréjét. A hepatocitáknak a vegyi anyagok feldolgozására szolgáló belső képessége nélkülözhetetlenné tette őket mind klinikai, mind kutatási körülmények között, különösen a gyógyszer -anyagcserében és a májtoxicitásban részt vevő utak vizsgálatakor.

Primer májsejtek

Az elsődleges májsejtek azokra a sejtekre utalnak, amelyeket a májszövetből frissen izoláltak - akár emberi, akár állatok -, anélkül, hogy az in vitro szaporodás meghosszabbodik. Mivel ezek a sejtek megtartják a májra jellemző enzimatikus aktivitás és fiziológiai funkciók nagy részét, gyakran a máj - specifikus aktivitást vizsgáló vizsgálatokban aranyszabálynak tekintik. A kutatásban való felhasználásuk kulcsfontosságú a metabolikus stabilitás és a gyógyszerek belső képességének megértésében, hogy átalakuláson menjenek át, vagy fennmaradjanak az eredeti formájukban, amikor egy biológiai rendszerbe kerültek.

Tenyészthető májsejtek és szuszpenziós májsejtek

A kísérleti kereteken belül a májsejteket tovább lehet kategorizálni tenyésztési körülményeik alapján. A tenyészthető májsejtek azok, amelyek ragaszkodnak egy tenyésztési szubsztráthoz, amely lehetővé teszi egy stabil kötődést és morfológiát, amely szorosan utánozza az in vivo környezetet. Ez a kötődés nemcsak támogatja ezeknek a sejteknek a polarizált szerkezetét, hanem fenntartja a hosszú -CYP450 enzim indukció- Ezzel szemben a szuszpenziós májsejteket nem - tapadó állapotban tartják fenn, általában rövid - A szuszpenziós tenyészetek megkönnyítik a sejtek egységesebb expozícióját a vegyületek tesztelésére, így ideálisak a metabolikus stabilitás és az akut hepatotoxikus válaszok gyors felmérésére.

Tükörképes májsejtek

Tükörképes májsejtekizolált májsejtek, amelyeket bevont vagy speciális tenyésztési ételeken tenyésztnek. Ez a kötődés lehetővé teszi a sejtek terjesztését, polarizálását és létrehozását az intercelluláris kapcsolatok kialakításához, sok in vivo - hasonló funkciót megőrizve több nap vagy akár hetek alatt. Mivel ezek a sejtek tapadnak, felhasználhatók a krónikus válaszok, a CYP450 enzim indukciójának idővel és a több - napos toxicitási vizsgálatok megfigyelésére. A tenyészthető májsejtek szintén robusztusabb cellát tartanak fenn a - sejtkommunikációhoz és az extracelluláris mátrix kölcsönhatásokhoz, amelyek kulcsfontosságúak a máj megőrzéséhez - specifikus funkcionalitás. Minden faj - akár emberi, nem - emberi főemlős, rágcsáló vagy más - optimalizált bevonási körülményekre (például specifikus bevonatok vagy média -kiegészítőkre) lehet szükség a fiziológiai körülmények legjobb megismétlésére.

Szuszpenziós májsejtek

Ezzel szemben:Szuszpenziós májsejteknem - ragaszkodó állapotban tenyésztik, fenntartva a kerek morfológiát, miközben rövidebb ideig maradnak életképesek. A szuszpenziós májsejtek ideálisak rövid - Mivel a sejteket nem korlátozzák a mátrixkapcsolók, gyorsan elkészíthetők és funkcionális tesztekhez használhatók a sejtek betartásához szükséges késleltetés nélkül. A szuszpenziós tenyészetek különösen hasznosak a fajkülönbségek összehasonlításakor, mivel ezek lehetővé teszik az emberek, a nem - emberi főemlősök, rágcsálók és más fajok szuszpenziós májsejtjeinek standardizált gyors vizsgálatait.

Anyagcsere -stabilitás és hepatotoxicitás

Anyagcsere -stabilitásA hepatocita -kutatás összefüggésben egy molekula, gyakran egy gyógyszerjelölt képességére utal, hogy ellenálljon a biokémiai transzformációnak a máj enzimek által. A metabolikus stabilitás vizsgálata a hepatocitákkal lehetővé teszi a kutatók számára, hogy előrejelzik ezen anyagok fele élettartamát és potenciális bontási termékeit, ami kritikus jelentőségű a gyógyszerfejlesztés szempontjából. Egy vegyület anyagcsere -profilja nemcsak annak hatékonyságát, hanem biztonságát is meghatározhatja, mivel a metabolitok néha toxikus hatást mutathatnak, amelyet a szülővegyületben nem látnak.

Hepatotoxicitás, másrészt, magában foglalja a kémiai anyagok káros hatásait a májsejtekre. Az elsődleges és a tenyésztett májsejtek mind a toxicitási vizsgálatokban történő alkalmazása segít a májkárosodáshoz vezető mechanizmusok tisztázásában. Ez elengedhetetlen, mivel a máj, mivel a központi anyagcsere -szerv, nagyon érzékeny mind a környezeti vegyi anyagok, mind a gyógyszeripari szerek mérgező sértésére. Az ezen sejtek felhasználásával végzett vizsgálatok kimutathatják a sejtkárosodás vagy a diszfunkció mintáit, betekintést nyújthatnak a májkárosodás korai eseményeibe és elősegítik a káros kimenetelek klinikai körülmények között.

Az enzim indukciója egy másik fontos szempont, amely a májsejtek funkciójához kapcsolódik, utalva arra a folyamatra, amellyel egyes anyagok növelik a gyógyszer - metabolizáló enzimek szintézisét. Ez a jelenség különösen szignifikáns, mivel a Co - beadott gyógyszerek fokozott metabolizmusához vezethet, potenciálisan csökkentve hatékonyságukat vagy növelve a káros metabolitok termelését. A tenyészthető májsejtek felhasználásával végzett kutatások gyakran célja az enzim indukcióját szabályozó szabályozási útvonalak vizsgálata, ezáltal rávilágítva a különféle xenobiotikumok és a máj anyagcsere -képessége közötti komplex kölcsönhatásokra.

Májos siRNS kézbesítés és célzási stratégiák

Az RNS -interferencia (RNAI) terápiákban a legújabb fejlemények új stratégiákat vezettek be amájcélzott kézbesítéskis zavaró RNS -ek (siRNS) felhasználásával. A kulcsfontosságú megközelítés magában foglalja az siRNS molekulák N - acetilgalaktozaminnal (GALNAC) konjugálását, amely megkönnyíti a májsejtek szelektív felvételét az aszialoglikoprotein receptoron keresztül (ASGPR). Az ASGPR nagymértékben expresszálódik a májsejtek felületén, és központi szerepet játszik az endocitikus internalizációbanGalnac - siRNSKonjugátumok, ezáltal létfontosságú út a májhoz - specifikus gyógyszerbejuttatás.

In vitro tanulmányok általában alkalmazzákElsődleges májsejtes siRNS transzfekciótechnikák asiRNS galnac hepatocyták kézbesítése- Ezek a módszerek lehetővé teszik a kutatók számára, hogy a gén leütési hatásait fiziológiai szempontból releváns kontextusban tanulmányozzák, és optimalizálják a szállítási készítményeket az intracelluláris felvétel és a gén elnémítás hatékonysága érdekében.

Összességében az RNS -terápiák májcélzott átadása ASGPR - által közvetített GALNAC - Az siRNS rendszerek rendkívül specifikus és nem - vírusos megközelítést jelentenek a genetikai májbetegségek és az anyagcsere -rendellenességek kezelésére, tovább erősítve az elsődleges hepatocita -modellek alkalmazhatóságát mind a transzlációs kutatásban, mind a gyógyszerfejlesztésben.

Faj - Specifikus májsejt részletek

Emberi májsejtek

Tenyészthető emberi májsejtek nélkülözhetetlenek az emberi gyógyszerek metabolizmusának és toxicitásának előrejelzéséhez, nagy funkcionális relevanciát kínálva. A speciális lemezeken történő tapadásuk lehetővé teszi a metabolikus enzim indukciójának, az I/II fázisú anyagcserének és a transzporter aktivitásának tanulmányozását.

Nem - tapadó formátumban,Felfüggesztés emberi májsejtek Gyorsan reagáljon a xenobiotikumokra, így ideálisak a gyors anyagcsere -értékelésekhez, a clearance vizsgálatokhoz és a rövid toxikológiai teszteléshez.

Nem - Emberi főemlős májsejtek

Az emberekkel való fiziológiai hasonlóságTenyészthető cynomolgus majom májsejtekésTenyészthető rhesus majom májsejtek Értékes a preklinikai vizsgálatok áthidalásához az emberi eredményekkel. Ezeket a gyógyszer metabolizmusának, az enzim indukciójának és a fajok - specifikus biztonsági profiljainak értékelésére használják.

Szuszpenzió cynomolgus Majom májsejtekésSzuszpenziós rhesus majom májsejtek Engedélyezze a metabolikus funkciók és az akut válaszok gyors, összehasonlító értékelését, akkor hasznos, ha rövid -

Kutya májsejtek

Elsősorban állatorvosi és transzlációs kutatásban alkalmazzák,Tenyészthető kutya májsejtekésTenyészthető beagle májsejtekMimikum in vivo máj fiziológiája a gyógyszer által kiváltott májkárosodást és az állatgyógyászati ​​gyógyszerek anyagcseréjét.

Ezek gyors metabolizmus -vizsgálatokat nyújtanak, és a korai - stádiumú szűrési vizsgálatokban alkalmazzák, amelyek részesülnek a felfüggesztési modell gyors forgalmának.

Sprague - Dawley patkány májsejtek

EzekTenyészthető sprague - Dawley patkány májsejtekelkülönítik a Sprague - Dawley patkányoktól, és tapadó vagy tenyészthető formátumban tenyésztik őket. A tenyészthető módszernél a sejtek a tenyésztési ételhez kapcsolódnak, amely lehetővé teszi számukra, hogy stabil intercelluláris kölcsönhatásokat alakítsanak ki és megőrizzék a máj - specifikus funkciókat hosszabb ideig. Ez a formátum különösen alkalmas hosszú - metabolikus folyamatok, enzim indukciójának és krónikus toxikológiai értékelésének tanulmányozására, Sprague - Dawley patkány májsejtekkel.

Ha nem - ragaszkodó állapotban tartják fenn,Szuszpenziós sprague - Dawley patkány májsejtekelsősorban rövid - A szuszpenziós formátum megkönnyíti a gyors vizsgálatokat, például az akut gyógyszer -metabolizmus vizsgálatokat és az enzim kinetikájának értékelését, ahol azonnali funkcionális válaszokra van szükség. Ez az üzemmód hasznos, ha összehasonlítja az akut metabolikus válaszokat a különböző fajok vagy állapotok között.

ICR/CD - 1 egér májsejtek

ICR/CD - 1 egerekből izolálva, ezek Plateable ICR/CD - 1 egér májsejtekTartsa be a kulturális ételt, lehetővé téve számukra, hogy hosszabb időtartamon belül fenntartsák a kulcstárfunkciókat. A kutatók az ICR/CD - 1 egér májsejtek tenyészthető módszerét részesítik előnyben, ha a kísérleti megfigyelésekhez stabil, hosszabb tenyésztési időszak szükséges.

Ezzel szemben a szuszpenziós ICR/CD - 1 egér májsejteket tapadás nélkül tenyésztik, így megőrizve a lekerekített morfológiát, amely rövid -Szuszpenzió ICR/CD - 1 egér májsejtekLehetővé teszi a metabolikus válaszok gyors értékelését, és különösen hasznos az előzetes szűrésekben, vagy ha magas - átmeneti tesztelésre van szükség. A szuszpenziós májsejtek használata az ICR/CD - 1 egerekben segít gyorsan meghatározni a kiindulási metabolikus profilokat, és összehasonlítani azokat más fajokkal vagy különböző kísérleti állapotokkal.

Macska májsejtek

A tenyészthető formátum különösen hasznos a hosszú távú vizsgálatokhoz, amelyek tartós májat igényelnek - specifikus funkciók, például krónikus toxicitási értékelések és enzim -indukciós kísérletek. A macskákra, a macskákra specifikus anyagcsere -károsodásokra, a gyógyszer által kiváltott macska májbetegségekre összpontosító vizsgálatokbanTenyészthető macska májsejtekKínáljon egy robusztus modellt. Belépésük javítja a morfológiai és funkcionális végpontok reprodukálhatóságát is, így az állatgyógyászati ​​és hepatológiai kutatás előnyben részesített modelljévé válik.

A szuszpenziós formátum megkönnyíti a xenobiotikumokra adott azonnali sejtválaszok mérését, ahol a kötés hiánya minimalizálja a hosszabb - tenyészeteknél észlelt válasz késleltetését.Szuszpenziós macska májsejtek Ezért kulcsfontosságúak a korai biokémiai változások és az új vegyületeknek való kitettség utáni potenciális mellékhatások azonosításához.

Csirke májsejtek

Mint madármodellek képviselői,Tükrözhető csirke májsejtekösszehasonlító vizsgálatokban használják a májfunkciók evolúciós különbségeinek megértésére, különösen az endokrin zavaró értékelések során.

Szuszpenziós csirke májsejtekEngedélyezi a madarak máj anyagcseréjének gyors, akut - fázisú vizsgálatát, és közvetlenül összehasonlítható az emlős társaival.

Más fajok

Más fajok számára, Tenyészthető minipig májsejtek, Szuszpenzió minipig májsejtek, Tenyészthető új -zélandi fehér nyúl májsejtek, Szuszpenzió Új -Zéland fehér nyúl májsejtek Mindegyik gyakori modell a gyógyszer - gyógyszerkölcsönhatások előrejelzésére és magyarázatára, valamint a gyógyszerek citotoxicitásának tanulmányozására.

Következtetés

A májsejtek kulcsszerepet játszanak a májfunkció fenntartásában anyagcserében, méregtelenítés, epetermelés és fehérjét szintézis révén. A cikk hangsúlyozza a primer májsejtek és azok tenyésztett formáinak - a szuszpenziós és a szuszpenziós májsejtek - megkülönböztetését a különböző kísérleti célokhoz optimalizálva. A tenyészthető májsejtek, a tapadásukkal és a hosszabb életképességükkel, kritikus fontosságúak a krónikus hatások, az enzim indukciójának és a hosszú - Ezenkívül az elemzés kiterjed a fajokra - specifikus alkalmazásokra, tükrözve, hogy a hepatocita modellek - az embertől az állati rendszerekig - mennyire szólnak a gyógyszer -metabolizmus előrejelzésében, a hepatotoxicitás értékelésében és a célzott terápiák, például az RNS - alapú beavatkozások megtervezésében. Ez az átfogó áttekintés bemutatja a májsejtek szerves szerepét mind a klinikai kutatásban, mind a farmakológiai fejlődésben, alapvető betekintést nyújtva a máj fiziológiájába, valamint a gyógyszerbiztonság alapjául szolgáló mechanizmusokba.

Kulcsszavak: májsejtek, primer májsejtek, tenyészthető májsejtek, szuszpenziós májsejtek, májsejtek metabolikus stabilitása, májsoxicitás, primer humán hepatociták (PHH), primer cynomolgus moncey -hepatocytes (Pch), Pch), Pche -humytok (Pch), Pche Human Pchyták (PHH) Hepatociták ason a tenyészthető cynomolgus majom májsejtek, tenyészthető rhesus majom májsejtek, tenyészthető kutya májsejtek, tenyészthető beagle májsejtek, tenyészthető sprague - Dawley patkány májsejtek, átlátszó ICR/CD - Hepatociták, tenyészthető arany, szír hörcsög májsejtek, tenyészthető macskák májsejtek, tenyészthető minipig májsejtek, tenyészthető új -zélandi fehér nyúl májsejtek, tenyészthető csirke májsejtek, szuszpenziós hepatociták, szuszpenzió cynomolgus monkey hePatocytes. Májlociták, szuszpenziós kutya májsejtek, szuszpenziós hepatociták májsejtek, szuszpenziós sprague - Dawley patkány májsejtek, szuszpenziós ICR/CD - Hepatociták, szuszpenziós minipig májsejtek, szuszpenziós új -zélandi fehér nyúl májsejtek, szuszpenziós csirke májsejtek ，ASGPR, GalNAC - siRNS, primer májsejt siRNS transzfekció siRNS GalNAC hepatocyták bejuttatása，Májcélzott kézbesítés.