Splenocytes իմունոլոգիական հետազոտություններում. Տեսակների եւ մեկուսացման, սառեցման, հալածելու քայլեր

Հիմնաբառեր:Splenocytes (spls); Cynomolgus Monkey Splenocytes; Rhesus Monkey Splenocytes; Շների բաճկոններ; Կենդանիներ splenocytes; Rat splenocytes; Մկնիկի splenocytes; Մկնիկներ splenocytes; Rabbit splenocytes; Splenocytes մեկուսացում; Սառեցնող splenocytes; Հալելով splenocytes

IPhase արտադրանք

Splenocytes (spls)Արյունից զտելու, իմունային արձագանքների մոնտաժման մեջ ներգրավված կենսական նշանակություն ունեցող անձեռնմխելի բջիջների տարասեռ բնակչություն է: Այս բջիջները ներառում են լիմֆոցիտներ (T բջիջներ, B բջիջներ), մակրոֆագներ, դենդրիտային բջիջներ եւ բնական մարդասպան (ԼՂ) բջիջներ, որոնք կրիտիկական դեր են խաղում հարմարվողական եւ բնածին անձեռնմխելիության մեջ: Splenocytes- ը լայնորեն օգտագործվում է իմունային գործառույթ, պատվաստանյութերի զարգացում, աուտոիմունային հիվանդություններ եւ քաղցկեղի իմունոթերապիա ուսումնասիրելու նախնական մակարդակի եւ թարգմանչական հետազոտություններում:

Splenocytes- ի (Spls) դերն ու կազմը

Փայծաղի ներսում, Splenocytes- ը բնակվում է հստակ շրջաններում. Կարմիր պղպեղը, որը զտում է արյունը եւ վերամշակում հին կարմիր բջիջները, իսկ սպիտակեղենը նախաձեռնում են իմունային պատասխանները: Սպիտակ պղպեղը կազմակերպվում է T բջջային գոտիներ եւ B բջջային ֆոլիկուլներ, հեշտացնում է հակագենում փոխազդեցությունները - Ներկայացնելով բջիջներ եւ լիմֆոցիտներ: Այս եզակի ճարտարապետությունը Splenocytes- ը (Spls) հզոր գործիք է դարձնում իմունոլոգիական փորձարկումներում, ինչպիսիք են Elispot, Flow Cytometry- ը եւ խառը լիմֆոցիտի ռեակցիաները:

Տեսակներ - Հատուկ splenocytes (spls)

-Cynomolgus Monkey Splenocytes:Cynomolgus Monkey Splenocytes- ն օգտագործվում է նախապատմական հետազոտություններում, քանի որ դրանք ավելի սերտորեն ընդօրինակում են մարդկային իմունային պատասխանները, պատրաստելով Cynomolgus Monkey Splenocytes- ը, իդեալական թարգմանության ուսումնասիրությունների համար:

-Rhesus Monkey Splenocytes:Rhesus Monkey Splenocytes- ը նմանապես գնահատվում է մարդկանց մոտ իմունոլոգիական նմանությունների համար: Rhesus Monkey Splenocytes- ի օգտագործմամբ ուսումնասիրությունները օգնում են կամրջել բացը կենդանիների մոդելների եւ կլինիկական ծրագրերի միջեւ:

-Dog Splenocytes / Canine Splenocytes:Անասնաբուժական հետազոտություններում Dog Splenocytes (կամ Canine Splenocytes) օգտագործվում են Canines- ի իմունային անկարգությունները ուսումնասիրելու եւ մարդկային իմունային պատասխաններով համեմատություններ կատարելու համար:

-Rabbit splenocytes: Rabbit Splenocytes- ը կարեւոր է հակամարմինների արտադրության եւ պատվաստանյութերի զարգացման վերաբերյալ: Rabbit Splenocytes- ն օգնում է բացահայտել մանրամասները, որոնք կարող են տարբերվել մկնիկի splenocytes- ից կամ առնետի splenocytes- ից:

-Մկնիկի splenocytes / մկների splenocytes:Մկնիկի splenocytes- ը իմունոլոգիայի մեջ ամենատարածված ուսումնասիրված splenocytes (spls) է: Մկների մեկուսացման splenocytes- ի արձանագրությունները լավ հաստատված են, եւ մկնիկի բուրմունքներն ու մկների բուրմունքները օգտագործվում են հոսքի ցիտոմետրիայի, ակնլոտի եւ այլ ֆունկցիոնալ փորձարկման համար:

-Rat Splenocytes:Rat Splenocytes- ը տրամադրում է իմունոտոքսիկոլոգիայի եւ պատվաստանյութերի ուսումնասիրությունների լրացուցիչ մոդել: Rat Splenocytes- ը հաճախ համեմատվում է մկնիկի splenocytes- ի հետ `խաչեկային տարբերությունները հասկանալու համար:

Splenocytes մեկուսացում

Splenocytes մեկուսացումԱրդյոք կիլենից իմունային բջիջները հանելու գործընթացը կօգտագործվի տարբեր հետազոտական ​​ծրագրերում, ինչպիսիք են հոսքի ցիտոմետրիան, ցիտոկինի արտադրության փորձերը կամ խառը լիմֆոցիտի ռեակցիաները:

Փայծաղը հանվեց ասեպտիկ պայմաններում, հիմք ընդունելով մեկուսացման լուծույթում եւ փոխանցվեց ստերիլ խողովակ, որը պարունակում էր RPMI 1640 միջոց: Leukocyte շերտը ուշադիր հավաքվել է կենտրոնախումբից հետո: Խցերը լվացվել են RPMI 1640 միջին, կենտրոնախույս եւ գերակշռողն անտեսվել է: Լվացքի այս քայլը կրկնվեց 1 - մեկուսացված բջիջները օգտագործվել են մեկուսացված բջիջների հետագա փորձերի համար:

Սառեցնող splenocytes

Սառեցնող splenocytesապագա օգտագործման համար բջիջների պահպանման կարեւոր քայլ է: Cryopreservation- ը հետազոտողներին հնարավորություն է տալիս երկարատեւ ժամանակահատվածների համար սպունգիտներ պահել, առանց նրանց կենսունակության կամ գործունակության վարկաբեկելու:

Մեկուսացման քայլից լավ ցենտրիֆուգացված բջջային կախոցի գերբեռնվածությունը հանվում է, եւ բջջային կենտրոնացումը նոսրացվում էր սառեցման միջավայրում: Յուրաքանչյուր սառեցնող խողովակի համար ավելացրեք մի առարկա եւ տեղափոխեք սառեցման բեռնարկղ, ապահովելով, որ բջիջները մնում են կասեցման մեջ: Արագորեն սառեցրեք սառեցման տարաները a - 80 ° C սառնարանում: Տեղափոխում - երկար ժամանակ տերմինի պահեստավորման համար 150 ° C սառնարանային բեռնարկղ (կամ հեղուկ ազոտի բաք):

Հալելով splenocytes

Հալելով splenocytesպետք է արվի ուշադիր `ապահովել Cryopreservation- ի բարձր բջջային կենսունակությունը եւ գործառույթը: Հալելային գործընթացը, որպես կանոն, արագ է նվազագույնի հասցնել DMSO եւ սառցե բյուրեղապակի ձեւավորման վնասակար հետեւանքները:

Cryotubes- ը տեղափոխվում է 37 ° C ջրային բաղնիք եւ հալվել, քանի դեռ խողովակների մեջ մնացել են նուրբ սառցե բյուրեղներ: Ավելացնել 0,5 - 1 մլ բջջային մշակույթ ունեցող միջոցը սառեցված խողովակի համար, վերականգնել եւ կասեցումը փոխանցել բջջային մշակույթի միջով լցված 15 մլ խողովակի: Centrifuge, հեռացրեք գերբեռնվածը եւ թակել խողովակը `բջիջների կազմակերպումը թուլացնելու համար: Ավելացնել 1 մլ բջջային մշակույթի միջոց, հարվածել եւ վերափոխվել պղպեղի հետ, ավելացնել միջինից 15 մլ: Centrifuge, de - գերտեւացրեք, ավելացրեք 1 մլ բջջային մշակույթի միջին, ավելացնելով միջին բջջային կոնցենտրացիայի համաձայն: Տեղադրեք բջիջները CO2 ինկուբատորի մեջ եւ ինկուբացիա 1 ժամի համար `կափարիչի մի փոքր բացով: Ինկուբացիայի ավարտին վերափոխեք եւ թողեք 1 րոպե, որպեսզի թույլ տա, որ համախմբված բջջային բեկորները նստեն: Բջջային կասեցումը առանց տեղումների եղանակին խնամքով տեղափոխվել է նոր 15 մլ խողովակի: Բջիջները հաշվել են բջջային գործունեությունը որոշելու համար:

Եզրափակում

Splenocytes- ը, իրենց բազմազան կազմով եւ առանցքային դերի իմունային պատասխաններում, անգնահատելի գործիքներ են իմունոլոգիական հետազոտություններում: Անկախ նրանից, թե կրծողներից, պրիմատանտներից կամ նապաստակներից եւ շներին, Splenocytes- ը հեշտացնում են իմունային գործառույթների, հիվանդությունների մեխանիզմների, պատվաստանյութերի զարգացման եւ քաղցկեղի իմունոթերապիայի քննադատական ​​ուսումնասիրությունները: Մեկուսացման, սառեցման եւ հալելու գործընթացները անհրաժեշտ են իրենց ամբողջականության եւ կենսունակության պահպանման համար, ինչը հետազոտողներին հնարավորություն կտա ուսումնասիրել բջջային դինամիկան տարբեր մոդելներով: Որպես իմունոլոգիայի մեր պատկերացումները խորանում են, Splenocytes- ի օգտագործումը կշարունակի օգտակար լինել նախադիտական ​​ուսումնասիրությունների եւ կլինիկական դիմումների միջեւ բացը կամ կուլտուրայի միջեւ առկա բացը, ինչպես մարդկային, այնպես էլ անասնաբուժական բժշկության առաջխաղացում: