Human & dýra gall af auðu líffræðilegum fylki fyrir þróun lífgreiningaraðferða og lífgreiningaraðferð

1 iPhase vörur

2 auður Biomatrix

Ýmsar gerðir afLíffræðilegar fylkingar, þar á meðal autt heilblóð, sermi, plasma, gall, mjólk, þvag, saur, innihald í þörmum, innyflum, glerhúmor, vatnskenndan húmor, heila- og mænuvökva osfrv., Safnað frá heilbrigðum einstaklingum eða heilbrigðum tilraunadýrum, er sameiginlega vísað til sem auða líffræðilegir fylkingar.

3 Nauðsyn þess að nota auða líffræðilega fylki í forklínískum rannsóknum

In Forklínískar rannsóknir, autt líffræðilegt fylki er hornsteinninn til að koma á fót og staðfestaLíffræðileg greiningaraðferðir. Með því að nota auða fylki frá heilbrigðum einstaklingum eða tilraunadýrum geta vísindamenn útbúið nákvæmlega kvörðunarstaðla og gæðaeftirlitssýni, metið sérstöðu, næmi, nákvæmni og fylkisáhrif greiningaraðferða og tryggt áreiðanleika magngreiningar niðurstaðna lyfja.

4 Líffræðileg aðferð staðfesting og stofnun og beitingu auða líffræðilega fylkis

Eins og krafist er í leiðbeiningum FDA/EMA, við stofnun og staðfestingu á líffræðilegum fylkisgreiningaraðferðum, þarf að nota auða líffræðilega fylki til að tryggja nákvæmni og áreiðanleika greiningaraðferðarinnar. Sérstaklega í LC - MS/MS greiningu getur munur á fylkisþáttum frá mismunandi aðilum haft veruleg áhrif á jónunarvirkni. Autt fylki er aðallega notað til að undirbúa kvörðunarstaðla, undirbúa gæðaeftirlitssýni til að skoða sérstöðu, sértækni, nákvæmni, nákvæmni, fylkisáhrif, endurheimtunarhraða, stöðugleika, þynningarlínu, truflunaráhrif osfrv. Greiningaraðferða. Sértækni og fylkisáhrif uppgötvunaraðferðarinnar þurfa hærri kröfur fyrir autt fylki.

5 Notkunarsviðsmyndir af galli auða fylki í lyfjaþróun

Gervi gallmassa (hermt eftir gallmassa)er tilbúin lausn sem líkir eftir náttúrulegum gallþáttum og er notuð við umbrot lyfja, eiturefnafræði og líffræðilegar greiningarrannsóknir.Gall autt fylkihefur mikilvægt notkunargildi í eftirfarandi atburðarás lyfja: Lyfjahvörf (PK) rannsóknir á lifrarfræðiskerfislyfjum, frásog og fyrst gefa rannsóknir á umbrotum á lyfjum, rannsóknir á gallsýra í gallsýru, mat á eituráhrifum á lifur og rannsóknir á galli á galli og þróun líffræðilegra greiningaraðferða (LC - MS).

6 Lyf í lifur

Við þróun lyfja fyrir lifrarakerfið gegnir gall auður fylki óbætanlegt hlutverk sem staðlað in vitro uppgerðarkerfi í lyfjahvörfum (PK), eiturefnafræðilegum og líffræðilegum greiningum.

6.1 Metið útskilnaðareinkenni galls lyfja

Rannsóknir á blóðrás lifrarins: Gall er ein mikilvæg leið til útskilnaðar lyfja og umbrotsefna þeirra. Með því að nota gervi gallmassa er hægt að herma eftir styrkbreytingum lyfja í galli til að meta hvort þær séu aftur í gegnum blóðrásina í lifrarþörmum.

Ákvörðun gallgæsluhlutfalls: Fyrir lyf sem eru virk með galli (svo sem statínum og ákveðnum sýklalyfjum) getur gervi galli (hermað gall) hjálpað til við að mæla skilvirkni þeirra og hámarka skömmtunaráætlunina.

6.2 Rannsakaðu áhrif gallsýrna á frásog lyfja

Leysingaráhrif: Gallsýrur geta stuðlað að upplausn og frásog í þörmum fitusækna lyfja eins og D -vítamín. Gervi gall getur hermt eftir mismunandi gallsýrusamsetningum og metið áhrif þeirra á aðgengi lyfja.

Milliverkanir gegn gallsýru: Sum lyf (svo sem liraglutide) geta keppt við gallsýruflutninga (svo sem BSEP, MRP2) og tilbúna gall er hægt að nota til að rannsaka slíkar milliverkanir til að forðast mögulega gallstígáhættu.

6.3 Áhættumat á eituráhrifum á lifur og gallteppi

Lyf af völdum gallteppu: Gervi gall getur hermt eftir meinafræðilegum aðstæðum eins og hindrun í gallgöngum og blóðflæði og er notað til að greina hvort lyf trufla flæði galls eða skemmda gallbrautufrumur.

Greining á lífmerkjum: Með því að bæta við sérstökum íhlutum eins og bilirubini, gallsýrum og bólguþáttum er hægt að meta áhrif lyfja á gallþætti og spá fyrir um klínískt öryggi.

6.4 Siðferðilegir og hagnýtir kostir við að skipta um náttúrulega gall

Að takast á við málið um skort á úrtaki: Náttúrulegt gall þarf að fá með ífarandi aðferðum eins og gallaleiðbeiningu, meðan hægt er að undirbúa gervi gallinn óendanlega til að forðast siðferðilegar takmarkanir.

Samkvæmni lotu: Samsetning gervi fylkisins (hermað fylki) er stjórnanleg, sem dregur úr áhrifum einstakra munar á náttúrulegum galli á niðurstöður tilrauna.

6.5 Styðjið þróun LC - MS/MS líffræðilegrar greiningaraðferðir

Leiðrétting fylkisáhrifa: flókin samsetning náttúrulegs galls (há gallsölt, fosfólípíð, litarefni) getur auðveldlega leitt til jónbælingu eða aukningar í LC - MS/MS greiningu. Gervi gallmassa (hermað gallmassa) getur veitt stöðugan bakgrunn, hagrætt næmi og nákvæmni.

7 Rannsóknir á tegundum

Samsetning galls er mjög mismunandi milli mismunandi dýra (rottur, hundar, öpum) og gervi gallar geta staðlað tegund á tegundum og bætt þýðanleika forklínískra gagna.

7.1 Cynomolgus api (NHP gall)

Gallinn af cynomolgus apanum er mjög svipaður og hjá mönnum hvað varðar samsetningu (svo sem gallsýrusnið) og tjáningu lyfja (svo sem BSEP, MRP2), sem gerir það að gullstaðlinum sem ekki er non - manna fyrir að meta útskilnað lifrar galla og milliverkanir gegn gallsýra.

7.2 Beagle Dog Bile

Fosfólípíðinnihaldið í Beagle galli er tiltölulega hátt, sem gerir það hentugt til að rannsaka útskilnað gallsins og frásog gallsalts á fitusæknum lyfjum. Mismunurinn á gallsýrusamsetningu milli beagle og manna þarf þó kvörðun með gervi fylkjum.

7.3 SD rotta gall

Gallasöfnunarrúmmál SD rottna er tiltölulega stórt (~ 1 ml/tíma), sem er mikið notað við lifrarþörmum og rannsóknum á eiturverkunum á eiturverkunum á lyfjum. Hins vegar skal tekið fram að mikil grunnlínu þeirra í bilirubin getur truflað LC - MS/MS greiningu.

7.4 ICR/CD - 1 músargall

Cd - 1 mús er með lítið gallrúmmál (50 - 200 μ L), sem gerir þau hentug til að rannsaka fyrirkomulag genabreytingarlíkana (svo sem FXR/PXR leið), en nauðsynlegar micro magngreiningaraðferðir eru nauðsynlegar til aðlögunar.

7.5 C57BL/6 músargall

C57BL/6 mús eru oft notuð í líkönum um efnaskiptasjúkdóm og breytingar á gallasamsetningu þeirra geta endurspeglað meinafræðilegar aðstæður, sem krefjast notkunar gervi gallmassa til að líkja eftir meinafræði.

Ofangreind líkön þarf að sameina með gervi gallmassa til að stjórna mismun á tegundum og hámarka krossategundir samanburð á LC - MS/MS aðferðum.

Niðurstaða

Gervi gallmassa, sem lykilatriði til að líkja eftir virkni náttúrulegs galls, gegnir óbætanlegu hlutverki í þróun lifrarlyfja. Með því að staðla gallsamsetningu mismunandi tegunda (svo sem Cynomolgus öpum, Beagle hundum, SD rottum, CD - 1 rottum, C57BL/6 rottum), gervi gallmassa tekur á áhrifaríkan hátt kjarnaáskoranir eins og siðferðis takmarkanir, einstaklingsmismunur og meinafræðilegri eftirlíkingu á náttúrulegum sýnum, verulega aukning á áreiðanleika og þýðingargildisgildi.

Með þróun nákvæmni lyfja mun gervi gallmassa enn frekar sameina meinafræðilega sérstaka hluti og örflæðandi tækni til að líkja eftir lifrar- og gallblöðru örumhverfi, sem veitir sterkari stuðning við nýstárlega lyfjaþróun.

Lykilorð:autt líffræðileg greining, líffræðileg fylkissýni, líffræðileg greining, manna galli, dýrabrú, gallsýni, gervi galli, hermað gall, NHP gall

Tilvísun

Li T, Chiang Jy. Gallsýrumerki við efnaskipta sjúkdóm og lyfjameðferð. Pharmacol Rev. 2014 okt; 66 (4): 948 - 83. Doi: 10.1124/pr.113.008201. PMID: 25073467; PMCID: PMC4180336.