Samanburðargreining á einlægum frumum í útlægum blóði (PBMC): þvert á tegundir notkunar í ónæmisfræði og meðferðarrannsóknum

IFasa vörur

Einkennisfrumur í útlægum blóði (PBMC)

Einkennisfrumur í útlægum blóði (PBMC)eru ólíkir íbúar ónæmisfrumna sem finnast í útlægu blóði, sem einkennast af einum kringlóttum kjarna. Þau fela í sér eitilfrumur - svo sem T frumur, B frumur og náttúrulegar morðingja (NK) frumur - og einfrumur, en að undanskildum granulocytes (t.d. daufkyrningum) og rauðkornum. PBMC eru venjulega einangruð með þéttleika stigvökva með því að nota miðla eins og Ficoll, sem skilur frumur byggðar á floti. Þessi ekki - ífarandi aðferð gerir kleift að fá greiðan aðgang að mikilvægum ónæmisþáttum, sem gerir PBMC ómetanlegt í ónæmisfræðirannsóknum og meðferðarþróun.

PBMC isolation

Stærð, formgerð og sérþyngd stakra kjarna frumna er frábrugðin öðrum frumum í útlægu blóði. Sértæk þyngd rauðra blóðkorna og fjölbrigða kjarnorkuhvítfrumna fer yfir 1.080, það sem einstakar kjarnafrumur eru um 1.070 og það er um 1.030. Þess vegna er hægt að nota mismuninn á sértækum þyngdarafl ýmissa blóðkorna og einstakra kjarnafrumna til að aðgreina ýmsar blóðkorn frá einstökum kjarnafrumum. Ficoll þéttleiki stigvökvun er algengasta aðferðin fyrirPBMC einangrunog hreinsun. Ficoll er súkrósa multimer, hlutlaus, með að meðaltali mólmassa 400.000, og þegar þéttleiki er 1,2 g/ml fer hann ekki yfir eðlilegan lífeðlisfræðilegan osmósuþrýsting og fer ekki í gegnum líffræðilegar himnur, svo það er almennt notað fyrir PBMC. Þess vegna er það oft notað sem aðskilnaðarlausn fyrir PBMC aðskilnað. Rauðkornar og granulocytes hafa stóran sérþyngd og sökkva niður í botn slöngunnar eftir skilvindu; Eitilfrumur og einfrumur hafa sérþyngd minna en eða jafnt og sérþyngd aðskilnaðarlausnarinnar, og fljóta á yfirborði aðskilnaðarlausnarinnar eftir skilvindu, og einnig er hægt að stöðva lítinn hluta frumanna í aðskilnaðarlausninni. Með því að sogast á hvítu himnulagafrumunum á fljótandi yfirborði aðskilnaðarlausnarinnar og þvo þær á viðeigandi hátt, er hægt að einangra hærri hreinleika stakar kjarnar frumur, þ.e.a.s. PBMC, frá útlægu blóði.

PBMC í mismunandi tegundum

Hjá non - mönnum prímötum, sérstaklega cynomolgus öpum og rhesus api, eru PBMC rannsóknir mjög metnar vegna lífeðlisfræðilegra líkt sem þeir deila með mönnum. Rannsóknir með því að notaCynomolgus Monkey PBMCOgRhesus api PBMChefur gert ítarlegar rannsóknir á ónæmisaðferðum kleift og fjölmargar rannsóknir sem notaðar Api PBMC hafa undirstrikað þýðingarmöguleika þeirra til ónæmismeðferðar manna. Notkun apa PBMC í bóluefnisprófun, skimun lyfja og ónæmis mótun hefur orðið hornsteinn bæði í forklínískum og klínískum rannsóknum.

Að sama skapi rannsóknir sem fela í sérHundur PBMChafa stuðlað verulega að dýralækningum. Rannsóknir sem nota hunda PBMC hafa lýst upp leiðum ónæmissvörunar í hundum, en rannsóknir sem fela í sérhunda PBMChefur einnig bent á hliðstæður við ónæmisstarfsemi manna. Á sviði dýrasjúkdóma hafa bæði Dog PBMC og PBMC rannsóknir á hunda veitt mikilvæg gögn um sýkla - samspil hýsils, þar sem lagt er áherslu á hlutverk þessara frumna í eftirlitseftirliti og þróun meðferðar. Endurtekin notkun Dog PBMC og hunda PBMC í samanburðarrannsóknum undirstrikar mikilvægi þeirra sem fyrirmyndarkerfi.

Nagdýralíkönin, sem fela í sérRottu PBMCOgMús PBMC, hafa jafnan verið í fararbroddi ónæmisfræðilegra rannsókna. Rannsóknir sem nota PBMC rottu hafa boðið upp á ítarlegt sjónarhorn á ónæmisreglugerð við langvarandi bólgusjúkdóma og umfangsmikil notkun PBMC músar hefur skipt sköpum fyrir erfðafræðilegar og vélrænar rannsóknir á sjálfsnæmis og sýkingu. Vísindamenn halda áfram að treysta bæði á RAT PBMC og PBMC músar til að kanna flókna ónæmisfræðilega ferla, sem gerir þessi líkön ómissandi. Ennfremur, samþættingin áHamstur PBMCÍ tilraunauppsetningum hefur bætt annarri vídd við ónæmisfræðilegar rannsóknir, þar sem rannsóknir á Hamstur PBMC veita oft nýjar innsýn í veiru meingerð og ónæmisskilyrði. Með Hamster PBMC sem er viðbót við rannsóknir á PBMC rottum og músum PBMC, mynda nagdýralíkön sameiginlega yfirgripsmikla verkfæri fyrir ónæmisrannsóknir.

Stór dýralíkön hafa einnig auðgað akurinn meðMinipig PBMCgegna lykilhlutverki við að brúa forklínískar rannsóknir og klínískar notkanir. Notkun Minipig PBMC hefur reynst gagnleg í rannsóknum á endurnýjun og líffæragræðslu þar sem Minipig PBMC veitir lífeðlisfræðilega viðeigandi vettvang til að prófa nýjar meðferðir. Ennfremur, rannsóknir sem notaRabbit PBMChafa átt þátt í framleiðslu mótefna og rannsókn á sjálfsofnæmissjúkdómum, þar sem rannsóknir á Rabbit PBMC skila stöðugt dýrmætri ónæmisfræðilegri innsýn. Með því að nota Minipig PBMC og Rabbit PBMC í takt geta vísindamenn metið virkni og öryggi nýrra ónæmismeðferðar í kerfum sem líkja eftir lífeðlisfræði manna.

Feline ogCAT PBMCRannsóknir hafa skorið út sess sinn í rannsókn á afturvirkum sýkingum og ónæmisvökva. Rannsóknir með því að notakatta PBMChafa komið fram skilningi okkar á ónæmiskerfinu á kattum en rannsóknir með CAT PBMC hafa boðið glugga í ónæmissvörun sem tengist veirusýkingum. Bæði katta PBMC og CAT PBMC hafa ítrekað verið bent á í rannsóknum þar sem kannað var hliðstæður milli katta og ónæmisbrests veiru manna, sem sannar að endurtekin notkun katta PBMC og CAT PBMC skiptir sköpum fyrir að þróa árangursríkar greiningar- og meðferðaraðferðir.

Fugl ónæmisfræði hefur ekki verið skilin eftir, meðKjúklingur PBMCOgÖnd PBMCRannsóknir sem veita gagnrýna innsýn í ónæmisaðferð fugla. Rannsóknir sem nota kjúkling PBMC hafa leitt í ljós einstaka þætti ónæmissvörunar fugla, meðan rannsóknir sem fela í sér Duck PBMC hafa auðgað skilning okkar á sýklaviðnám hjá fuglategundum. Endurtekin notkun kjúklinga PBMC og Duck PBMC í rannsóknum þar sem skoðað var veirusýkingar og virkni bóluefna sýnir mikilvægi þeirra við stjórnun sjúkdóma sem hafa áhrif á bæði íbúa dýra og manna.
Að auki, rannsóknir sem notaNaggrís PBMChafa verið lykilatriði í berklum og rannsóknum á bóluefni, þar sem naggrís PBMC þjóna stöðugt sem áreiðanlegar vísbendingar um ónæmissvörun. Samhliða rannsóknir sem fela í sérAlpaca PBMCOgCamel PBMChafa vakið athygli vegna hinna einstöku mótefnavirkja sem eru til staðar í þessum tegundum. Rannsóknir sem fela í sér Alpaca PBMC og CAMEL PBMC hafa afhjúpað nýjar meðferðarumsóknir, þar sem bæði Alpaca PBMC og Camel PBMC eru ítrekað notaðar til að kanna nýstárlega nanobody tækni og ónæmismeðferð.

FramlögNautgripir PBMCOgsauðfjár PBMCTil landbúnaðar ónæmisfræði hefur einnig verið merkilegt. Rannsóknir með nautgripum PBMC hafa veitt djúpa innsýn í nautgripabólgu og öndunarfærasjúkdóma og umfangsmiklar rannsóknir með því að nota nautgripa PBMC hafa beinlínis upplýstar aðferðir til að bæta heilsu nautgripa. Jafnframt hefur endurtekin notkun sauðfjár PBMC við ónæmisrannsóknir auðgað skilning okkar á jórturdýrum ónæmissvörun og rannsóknir á sauðfé PBMC halda áfram að leiðbeina þróun árangursríkra bóluefna og samskiptareglna fyrir sjúkdómum.

Hlutverk í ónæmisrannsóknum

PBMC getur líkað eftir umhverfi in vivo og veitt áhrifaríkt in vitro líkan fyrir þróun lyfja. Með því að fylgjast með áhrifum lyfja á útbreiðslu PBMC, apoptosis og frumudrepandi áhrifum er upphaflega hægt að meta virkni og öryggi lyfja. Með því að rannsaka áhrif lyfja á markmið verkunar og merkjaslóða PBMC hjálpar það til við að uppgötva ný markmið lyfjaaðgerða og þessar niðurstöður geta veitt nýjar hugmyndir og leiðbeiningar um þróun lyfja.

Forrit í mótefni - háð frumu - miðlað frumudrepandi áhrif (ADCC)

Notkun PBMC í uppgötvun lyfja er táknuð meðMótefni - háð frumu - miðlað frumudrepandi áhrif (ADCC). Mótefni - háð frumu - miðlað frumudrepandi áhrif, eins og nafnið gefur til kynna, treystir á mótefni - miðlað frumudráp til að drepa markfrumur. Hægt er að skilja sérstaka ferlið á eftirfarandi hátt: Fab hluti mótefnisins binst við mótefnavaka eftirlíkingu á markfrumunni. FC hluti mótefnisins binst við FCR á yfirborði NK frumunnar (þar sem NK frumur eru aðalfrumurnar sem geta gegnt hlutverki ADCC, er þetta notað sem dæmi) og því losnar NK fruman og perforin og granzyme losnar. Perforin og granzyme fara inn í frumuna í gegnum svitahola sem myndast í markfrumuhimnunni og valda því að markfruman deyja með því að virkja apoptosis - tengd ensím.

Forrit íOTHER ónæmisþroski

• - Blandað eitilfrumuviðbrögð (MLR)

Aðal DC frumur og T frumur eru samsettar í kerfi sem hægt er að nota til að meta DC - miðlað virkjun T frumna. DC frumur tjá PD - L1 í miklu magni á yfirborði þeirra, sem binst Pd - 1 á yfirborði T frumna til að hindra það. Ef lyfið getur í raun hindrað viðbragðsleiðina á milli þeirra, getur það örvað útbreiðslu T frumna í miklu magni og þannig sannað virkni virkni lyfsins.

- T frumuaðgerðir

T - Virkjunargreining frumna er ein af algengum prófunum til að meta áhrif ónæmismeðferðarlyfja. Í virkjunargreiningum T -frumna eru in vitro ræktaðar T frumur venjulega notaðar og gefnar viðeigandi áreiti, svo sem mótefnavaka eða mótefni, til að örva virkjun T frumna

- T -frumufjölgunargreining

Hægt er að nota T - frumufjölgunargreiningar til að skima ónæmismeðferðarlyfja og til að meta árangur lyfja með því að bera saman stig T - frumufjölgun í mismunandi lyfjum - Meðhöndlaðir hópar á móti samanburðarhópi

- Staphylococcal Enterotoxin B örvun PBMC

Staphylococcal enterotoxin B er ofurantigen sem bindur beint við MHC sameindir á mótefnavaka - kynningu frumna og er kynnt T - frumuviðtökum. Staphylococcal enterotoxin B hefur getu til að virkja ekki sérstaklega T - frumur og örva losun Pro - bólgueyðandi frumna, svo sem IL - 2, IL - 6, etc.

PBMC hlutverk í cýtókín losunarheilkenni

PBMC gegnir lykilhlutverki í þróunLosunarheilkenni cýtókíns(CRS), bráð og hugsanlega lífshættuleg almenn bólgusvörun. Þegar örvað er - hvort sem það er með ónæmismeðferð eins og CAR -T frumum, einstofna mótefnum eða sýkingum - verða þessar frumur mjög virkjaðar og seyta hratt úrval af cýtókínum eins og IL -6, IL -1, IFN - γ og TNF -α. Þessi óhóflega cýtókínframleiðsla getur hrundið af stað hylli af atburðum, þ.mt hiti, æðaleka, lágþrýstingur og truflun á fjölbyggingu. Að skilja framlag PBMC í CRS hefur leitt til þróunar markvissra inngripa, svo sem IL -6 viðtakahemla, til að hjálpa til við að draga úr heilkenninu með því að herða cýtókínstorminn en varðveita æskileg ónæmisáhrif.

ConCLUSSION

Í stuttu máli, þessi grein undirstrikar lykilhlutverkið sem PBMC gegna til að efla skilning okkar á ónæmisleiðum yfir breitt svið tegunda. Með því að skoða einstök framlög - frá frumgerðum sem endurspegla lífeðlisfræði manna til nagdýra, stórra dýra og fuglakerfa sem hver og einn býður upp á áberandi rannsóknar kosti - dregur þessi endurskoðun á hvernig samanburðarrannsóknir betrum ekki aðeins betrumbæta forklínískt mat heldur einnig að ryðja brautina fyrir nýstárlegar ónæmisaðferðir. Sameining PBMC rannsókna á ýmsum sviðum eins og þróun bóluefna, prófun lyfja og könnun á nýjum ónæmisleiðum sýnir dæmi um ómissandi hlutverk þess bæði í grunnvísindum og klínískum forritum. Á endanum staðfestir krossinn - tegundagreining PBMC gildi þessara frumulíkana sem grundvallaratriði til að þýða uppgötvanir á bekknum í árangursríkar meðferðir við fjölbreytt úrval af ónæmisfræðilegum áskorunum.

Kaugnorð: Jaðarblóð einfrumufrumur, Cynomolgus Monkey PBMC, Rhesus api PBMC, Hundur PBMC, Hunda PBMC, Rottu PBMC, mús PBMC, Mýs PBMC, Hamster PBMC, Minipig PBMC, Kanína PBMC, katta PBMC, CAT PBMC, Kjúkling PBMC, önd PBMC, Naggrís PBMC, Alpaca PBMC, Úlfalda PBMC, nautgripir PBMC, Sauðfjár PBMC, Mótefni - háð frumu - miðlað frumudrepandi áhrif (ADCC), Cýtókín losunarheilkenni, frosinn PBMC, kryóvarinn PBMC,PBMC einangrun, Þíðandi PBMC, Ræktun PBMC, Leukopak, Leukapheresis pbmc, HLA skrifaði PBMC.