Terapia innovativa CGT - Lentivirus - packaging auto - t cellule immunitarie

Terapia innovativa CGT - Lentivirus - packaging auto - t cellule immunitarie

La terapia con cellule immunitarie è un trattamento innovativo per il cancro che migliora il sistema immunitario del corpo per colpire ed eliminare le cellule tumorali. Le forme chiave includono citochine - terapia cellulare killer indotta, terapia cellulare T - e terapia con cellule CAR - T. La terapia CAR - T prevede la riprogrammazione delle cellule T per esprimere recettori antigene chimerici (CAR) che colpiscono specificamente le cellule tumorali, che mostrano un successo significativo nei tumori ematologici come la leucemia e il linfoma.

Parole chiave: auto - t, lentiviral, vettore lentivirale, tracer lentivirus

Preparazione della terapia delle cellule auto - t

In generale, i passaggi chiave per preparare le celle di auto sono le seguenti:

Figure Fonte: Dana - Farber Cancer Institute - CAR T - studi clinici cellulari aiutano più pazienti con mieloma a tornare in salute

1. 1.Sorting (T - Isolamento cellulare)

Il primo passo nella preparazione delle cellule CAR - T è isolare le cellule T - dai globuli bianchi nel sangue periferico del paziente. Tecniche come la separazione del tallone immunomagnetico o la citometria a flusso vengono in genere utilizzate per estrarre CD3+- Rich T - cellule dal sangue. Per garantire la purezza delle cellule, il processo di smistamento deve essere molto preciso, garantendo che si ottengano un numero sufficiente di celle T - di alta qualità.

2. 2.stimolazione (attivazione cellulare T -

Le cellule T - estratte sono attivate in vitro, di solito usando aKit di attivazione /espansione CD3 /CD28 T -. Le cellule T attivate entrano in uno stato attivo, preparandole per la trasfezione genica. Attraverso questo processo, la funzione delle cellule T è migliorata, contribuendo alla successiva modifica e amplificazione genetica.

3. 3. Trasfezione (editing genetico)

Le cellule T attivate subiscono la trasfezione genica per esprimere un recettore antigene chimerico (CAR). Questo processo in genere utilizzavettore lentiviraleper introdurre geni dell'auto nelle cellule T. Il lentivirus è uno strumento di trasduzione del gene efficace, con il vantaggio di integrare stabilmente il gene target (come il gene CAR) nel genoma cellulare. Infettando le cellule T e trasfettando il gene CAR nel DNA delle cellule T, il lentivirus consente alle cellule T di esprimere le auto a lungo - Il gene CAR include un frammento variabile a catena singola (SCFV) di un anticorpo che consente alle cellule T di riconoscere antigeni specifici sulla superficie delle cellule tumorali e iniziare una risposta immunitaria attivando le regioni di segnalazione delle cellule T. Come mostrato nella Figura 2. La trasfezione lentivirale ha le caratteristiche di alta efficienza e stabilità, in modo che il gene CAR possa essere espresso nelle cellule T per lungo tempo.

Figura Fonte: Singapore Car - T Therapy Cell Therapy

4. 4.amplificazione (proliferazione cellulare)

Dopo la trasfezione, le cellule CAR - T entrano nella fase di amplificazione, in cui fattori di crescita comeIL - 2vengono aggiunti per promuovere la proliferazione cellulare. Lo scopo di questo processo è garantire che un numero sufficiente di celle di auto sia disponibile per l'eventuale infusione nel paziente. Il processo di amplificazione deve essere condotto in condizioni sterili per garantire la qualità e la quantità delle cellule.

5. 5. Controllo della qualità (QC)
6. Prima di reinfusione nel paziente, il controllo di qualità è cruciale durante il processo di preparazione. Le cellule di auto preparate subite subiscono un rigoroso test aGarantire la loro purezza, attività, efficienza di trasfezione e conformità agli standard di trattamento. Inoltre, sono necessari test per la contaminazione cellulare o le reazioni avverse per garantire la sicurezza e l'efficacia terapeutica delle cellule dopo la reinfusione nel paziente.

IMportanza della trasfezione del lentivirus nelle cellule immunitarie

La tecnologia di trasfezione lentivirale è cruciale nella terapia con cellule immunitarie, in particolare per l'editing genico e l'ingegneria cellulare. I vettori lentivirali, derivati ​​da HIV - 1 modificati, sono ampiamente utilizzati a causa della loro capacità di integrare i geni nel genoma ospite, garantendo un'espressione stabile, a lungo termine. Possono infettare le cellule di divisione e non - Questi vettori sono ora comunemente usati nella terapia genica, nell'editing genico e nella ricerca di biologia cellulare per la loro efficienza e durata nella consegna dei geni.

Figura Figura: Obiosh.com/product/ Diagramma schematico del packaging del lentivirus e del processo di trasfezione del lentivirus in 293t celle

1.Fefficiente trasduzione genica

Il vettore lentivirale può fornire in modo efficiente geni target, come il gene CAR, in cellule immunitarie e integrare questi geni stabilmente nel genoma cellulare, garantendo che il gene CAR sia continuamente espresso durante la divisione cellulare e la proliferazione. Questa capacità di trasduzione ad alta efficienza è fondamentale per il successo dell'immunoterapia.

2. Immunogenicità 

Rispetto ad altri vettori virali, le lentivirus hanno un'immunogenicità inferiore. Di conseguenza, quando i lentivirus vengono utilizzati per trasdurre le cellule immunitarie, il sistema immunitario del paziente genera una risposta immunitaria relativamente più debole al virus. Questo aiuta a ridurre al minimo le reazioni avverse, in particolare nella sopravvivenza a lungo termine delle cellule dopo l'infusione, impedendo così un eccessivo rigetto immunitario.

3. Alta adattabilità alle cellule immunitarie

Il vettore lentivirale è in grado di trasdurre in modo efficiente vari tipi di cellule immunitarie,in particolare cellule T e cellule NK. Attraverso la trasduzione lentivirale, le cellule immunitarie possono acquisire capacità di riconoscimento specifiche del tumore, migliorando così la loro capacità di colpire e uccidere le cellule tumorali.

4. Precisione delle cellule effettrici trasdotte nel riconoscimento delle cellule target 

Nell'immunoterapia,cellule effettrici trasdotteFare riferimento a cellule immunitarie che, dopo la trasduzione, esprimono auto ed esercitano attività anti - tumori. I vettori lentivirali possono fornire con precisione il gene CAR in queste cellule effettrici, consentendo loro di riconoscere e colpire le cellule tumorali.Cellule bersagliosono le cellule tumorali che vengono identificate e distrutte da queste cellule immunitarie. Attraverso la trasduzione lentivirale, le cellule immunitarie possono migliorare la loro specificità nel riconoscere e uccidere le cellule tumorali, migliorando così l'efficacia terapeutica.

In questo contesto, Iphase, leader nei reagenti di ricerca in vitro, ha sviluppato un kit di imballaggio lentivirus e un reagente di concentrazione di lentivirus per semplificare la complessità della trasduzione per i clienti di immunoterapia e migliorare il tasso di successo della trasfezione genica stabile. Questi prodotti offrono una soluzione di fermo per i clienti.

Iphase lentivirusProdotti

Il kit di imballaggio lentivirus iphasecontiene tutti i reagenti essenziali richiesti perimballaggio lentivirus, semplificando significativamente il processo sperimentale e risparmiando tempo e sforzi. Questo kit include:

• Mix di plasmide di imballaggio lentivirus
• Reagente trasfetto
• Plasmide EGFP
• Reagente di concentrazione del lentivirus iphase

Questo kit semplifica davvero l'esperimento! Senza necessità di una complicata preparazione del reagente, l'imballaggio lentivirus può essere completato in modo efficiente semplicemente seguendo le istruzioni incluse.I vantaggi unici del kit comprendono il tempo di imballaggio breve, il titolo virale elevato e il semplice funzionamento, rendendolo ideale per i principianti nella confezione lentivirus. Ogni insieme di reagenti subisce un forte controllo di qualità per garantire risultati accurati, affidabili e riproducibili, migliorando significativamente l'efficienza di trasfezione e la stabilità dei vettori virali, fornendo così un potente supporto tecnico per la preparazione delle cellule immunitarie.

Inoltre, per aiutare i clienti a risparmiare i costi, Iphase ha anche sviluppato e prodotto il reagente di concentrazione del lentivirus, offrendo una soluzione di concentrazione rapida e semplice.Semplicemente mescolando il surnatante lentivirus con il reagente di concentrazione, seguito da una breve incubazione e centrifugazione usando una centrifuga standard, le particelle lentivirali possono essere rapidamente concentrate. Questo processo non richiede un'ultracentrifuga, rendendolo un'opzione conveniente ed economica per la maggior parte degli utenti di laboratorio.

In breve, il reagente di concentrazione del lentivirus iphase non solo migliora significativamente l'efficienza di trasfezione, ma fornisce anche supporto vettoriale virale di alta qualità per la preparazione delle cellule immunitarie. È un prodotto essenziale per esperimenti di routine, ricerca preclinica e altre aree di applicazione.

In sintesi, l'immunoterapia, in particolare le cellule CAR - T e le terapie delle cellule NK, rappresenta una nuova direzione nel trattamento del cancro moderno. Attraverso processi precisi come l'ordinamento cellulare, l'attivazione, la trasduzione, l'espansione e il controllo della qualità, gli scienziati possono preparare prodotti a cellule immunitarie efficienti e sicure per i pazienti, consentendo un trattamento di cancro mirato.La trasduzione lentivirale, come tecnologia di base, svolge un ruolo fondamentale nella preparazione delle cellule di auto e auto - nk a causa della sua elevata efficienza e stabilità.Con i progressi tecnologici continui, l'immunoterapia ha il potenziale per offrire opzioni di trattamento innovative per più pazienti, fornendo un valore clinico maggiore. In futuro, l'immunoterapia dovrebbe portare speranza terapeutica rivoluzionaria a più malati di cancro.

Per soddisfare le esigenze della trasduzione genica, dell'espressione e della ricerca sulla malattia, iphase offre kit di imballaggio lentivirus, reagenti di concentrazione del lentivirus e lentivirus traccianti. Questi lentivirus traccianti sono confezionati con proteina fluorescente verde (GFP), proteina fluorescente rossa MCHERRY e luciferasi, consentendo un facile tracciamento delle cellule target sia in vitro che in vivo.

Inoltre, Iphase può anche offrire due lentivirus tracer pre - confezionati: GFP e luciferasi e mcherry e luciferasi. Questi traccianti possono essere selezionati o combinati in base a esigenze sperimentali, razionalizzando i flussi di lavoro e migliorando l'efficienza per il monitoraggio e il monitoraggio del tempo reali delle cellule target.

IphaseImmunoterapiaReuforicoProdotti

Oltre ai prodotti correlati in lentivirus utilizzati nelle terapie automobilistiche, iphase, come leader nei reagenti di ricerca in vitro, ha anche dato un contributo significativo per supportare le innovazioni nella CGT (terapia cellulare e genica) e in altri campi. Iphase ha sviluppato e prodotto leucociti e PBMC (cellule mononucleate del sangue periferico) isolate attraverso leukaferesi, insieme a vari kit di isolamento delle cellule immunitarie, per supportare il rapido sviluppo dell'immunoterapia.

I prodotti iphase offrono i seguenti vantaggi eUn certificato di analisi (COA)Verificato da Iphase è disponibile per ogni lotto.

Sicurezza 

I prodotti iphase provengono da donatori/animali sani che hanno subito un pre -screening approfondito, con risultati negativi per il test virale (HIV - 1/2, HBV, HCV, sifilide).

Conformità  

Iphase fornisce moduli di consenso informato firmati dai donatori, con una verifica della fonte chiara e tracciabile.

Professionalità

I prodotti forniti da Iphase, ottenuti attraverso la leukapheresi, sono gestiti da professionisti qualificati. Ogni lotto è accompagnato da un COA corrispondente e i prodotti vengono trasportati in una rigida catena del freddo per garantire sicurezza, consegna rapida e garanzia della qualità.

Assistenza clienti

Iphase offre un servizio di vendita ad alta qualità - qualità, garantendo un'esperienza regolare e ininterrotta durante il processo di prova.