CGT革新療法- Lentivirus -パッケージングカー- t免疫細胞

CGT革新療法- Lentivirus -パッケージングカー- t免疫細胞

免疫細胞療法は、がん細胞を標的にして排除するために体の免疫系を強化する革新的な癌治療です。重要な形態には、サイトカイン-誘発キラー細胞療法、t -細胞療法、およびCAR - T細胞療法が含まれます。 CAR - T療法では、T細胞を再プログラミングして、腫瘍細胞を特異的に標的とするキメラ抗原受容体（CAR）を発現し、白血病やリンパ腫などの血液癌で有意な成功を示します。

キーワード：車- T、レンチウイルス、レンチウイルスベクター、トレーサーレンチウイルス

CAR - T細胞療法の準備

一般に、車を準備するための重要な手順は次のとおりです。

図出典：Dana - Farber Cancer Institute - Car T -細胞臨床試験は、多発性骨髄腫患者が健康に戻るのに役立ちます

1. 1.ソート（T -細胞分離）

CAR - T細胞を準備する最初のステップは、患者の末梢血の白血球からT -細胞を分離することです。免疫磁気ビーズ分離やフローサイトメトリーなどの技術は、通常、血液からCD3+-リッチT -細胞を抽出するために使用されます。細胞の純度を確保するには、ソートプロセスを非常に正確にする必要があり、十分な数の高品質T -セルが得られるようにします。

2. 2.刺激（T -細胞の活性化）

抽出されたt -細胞はin vitroで活性化され、通常はCD3 /CD28 T -細胞の活性化 /拡張キット。活性化されたT細胞は活性状態に入り、遺伝子トランスフェクションの準備をします。このプロセスを通じて、T細胞機能が強化され、その後の遺伝的修飾と増幅に貢献します。

3. 3.トランスフェクト（遺伝子編集）

活性化T細胞は遺伝子トランスフェクションを受けて、キメラ抗原受容体（CAR）を発現します。このプロセスは通常、使用しますレンチウイルスベクターT細胞にCAR遺伝子を導入します。レンチウイルスは効果的な遺伝子変換ツールであり、標的遺伝子（CAR遺伝子など）を細胞ゲノムに安定に統合するという利点があります。 T細胞に感染し、CAR遺伝子をT細胞DNAにトランスフェクトすることにより、LentivirusはT細胞が長期にわたって車を発現できるようにします。 CAR遺伝子には、T細胞が腫瘍細胞の表面に特定の抗原を認識し、T細胞のシグナル伝達領域を活性化することにより免疫応答を開始できる抗体の単一-鎖可変フラグメント（SCFV）が含まれています。図2に示すように。レンチウイルストランスフェクションには、高効率と安定性の特性があり、CAR遺伝子を長時間T細胞で発現させることができます。

図出典：シンガポール車- T細胞療法

4. 4.増幅（細胞増殖）

トランスフェクション後、CAR - T細胞は増幅段階に入ります。IL - 2細胞の増殖を促進するために追加されます。このプロセスの目的は、患者に最終的に注入するために十分な数の車- T細胞が利用できるようにすることです。増幅プロセスは、細胞の品質と量を保証するために、無菌条件下で実施する必要があります。

5. 5.品質管理（QC）
6. 患者に再灌流する前に、準備プロセス中に品質管理が重要です。準備された車- T細胞は厳密なテストを受けますそれらの純度、活動、トランスフェクション効率、および治療基準のコンプライアンスを確保する。さらに、患者への再灌流後に細胞の安全性と治療効果を確保するために、細胞汚染または副作用の検査が必要です。

I免疫細胞におけるレンチウイルストランスフェクションの存在

レンチウイルストランスフェクション技術は、免疫細胞療法、特に遺伝子編集と細胞工学にとって非常に重要です。修飾されたHIV - 1に由来するレンチウイルスベクターは、遺伝子を宿主ゲノムに統合する能力により広く使用され、安定した長期の発現を確保します。彼らは分割細胞と非分割細胞の両方に感染する可能性があり、それらの安全性は、複製を防ぐために重要な遺伝子を変更することにより改善されました。これらのベクターは、現在、遺伝子療法、遺伝子編集、および遺伝子送達における効率と耐久性のために細胞生物学の研究で一般的に使用されています。

図出典：obiosh.com/product/ 293T細胞のレンチウイルス包装とレンチウイルストランスフェクションプロセスの概略図

1.効率的な遺伝子形質導入

レンチウイルスベクターは、CAR遺伝子などの標的遺伝子を免疫細胞に効率的に送達し、これらの遺伝子を細胞ゲノムに安定に統合し、CAR遺伝子が細胞分裂と増殖中に継続的に発現するようにします。この高い-効率変換能力は、免疫療法の成功の基本です。

2.低い免疫原性 

他のウイルスベクターと比較して、レンチウイルスは免疫原性が低い。その結果、レンチウイルスが免疫細胞を伝達するために使用されると、患者の免疫系はウイルスに対する比較的弱い免疫応答を生成します。これは、特に注入後の細胞の長期生存において、副作用を最小限に抑えるのに役立ち、それにより過度の免疫拒絶を防ぎます。

3.免疫細胞への高度適応性

レンチウイルスベクターは、さまざまな種類の免疫細胞を効率的に伝達できる、特にT細胞とNK細胞。レンチウイルスの形質導入により、免疫細胞は腫瘍-特定の認識能力を獲得し、それにより腫瘍細胞を標的にして殺す能力を高めることができます。

4.標的細胞認識における形質導入エフェクター細胞の記述 

免疫療法では、伝達エフェクター細胞輸血後、車を発現し、抗腫瘍活性を発揮する免疫細胞を参照してください。レンチウイルスベクターは、これらのエフェクター細胞にCAR遺伝子を正確に供給し、腫瘍細胞を認識して標的にすることができます。ターゲットセルこれらの免疫細胞によって同定および破壊される腫瘍細胞です。レンチウイルスの形質導入により、免疫細胞は腫瘍細胞の認識と殺害における特異性を高め、それによって治療効果を改善することができます。

これに関連して、in vitro研究試薬のリーダーであるIphaseは、免疫療法の顧客の形質導入の複雑さを簡素化し、安定した遺伝子トランスフェクションの成功率を改善するために、レンチウイルス包装キットとレンチウイルス濃度試薬を開発しました。これらの製品は、顧客向けの1つの停止ソリューションを提供します。

iPhase LentivirusPロダクト

iPhase Lentivirusパッケージングキット必要なすべての必須試薬が含まれていますレンチウイルス包装、実験プロセスを大幅に簡素化し、時間と労力を節約します。このキットには以下が含まれます。

• レンチウイルス包装プラスミド混合
• トランスフェクト試薬
• EGFPプラスミド
• iPhase Lentivirus濃度試薬

このキットは本当に実験を合理化します！複雑な試薬の準備が必要な場合、レンチウイルスの包装は、単に付属の指示に​​従うだけで効率的に完了できます。キットのユニークな利点には、短いパッケージング時間、高いウイルスの力価、簡単な操作が含まれるため、レンチウイルスパッケージの初心者に最適です。試薬の各セットは、正確で信頼性があり、再現可能な結果を​​確保するために厳格な品質管理を受け、トランスフェクションの効率とウイルスベクターの安定性を大幅に改善し、それにより免疫細胞調製の強力な技術的サポートを提供します。

さらに、顧客がコストを節約するのを支援するために、iPhaseはレンチウイルス濃度試薬も開発および生産し、迅速でシンプルな濃度ソリューションを提供しています。レンチウイルス上清と濃度試薬を混合し、その後、標準遠心分離機を使用した短いインキュベーションと遠心分離を単純に混合することにより、レンチウイルス粒子を急速に濃縮できます。このプロセスでは、超遠心を必要としないため、ほとんどの実験室ユーザーにとって便利でコスト-効果的なオプションになります。

簡単に言えば、iPhaseレンチウイルス濃度試薬はトランスフェクション効率を大幅に改善するだけでなく、免疫細胞調製のための高品質のウイルスベクターのサポートも提供します。これは、日常的な実験、前臨床研究、およびその他のアプリケーション分野に不可欠な製品です。

要約すると、免疫療法、特にCAR - T細胞およびCAR - NK細胞療法は、現代の癌治療における新しい方向を表しています。科学者は、細胞の並べ替え、活性化、伝達、導入、拡張、品質管理などの正確なプロセスを通じて、患者向け​​の効率的で安全な免疫細胞産物を準備し、標的癌治療を可能にすることができます。コアテクノロジーとしてのレンチウイルスの形質導入は、高効率と安定性のために、車- TおよびCAR - NK細胞の調製において重要な役割を果たします。継続的な技術の進歩により、免疫療法は、より多くの患者に革新的な治療オプションを提供する可能性を秘めており、より大きな臨床的価値を提供します。将来、免疫療法は、より多くのがん患者に革命的な治療的希望をもたらすことが期待されています。

遺伝子形質導入、発現、および疾患研究のニーズを満たすために、iPhaseはレンチウイルス包装キット、レンチウイルス濃度試薬、およびトレーサーレンチウイルスを提供します。これらのトレーサーレンチウイルスは、緑色蛍光タンパク質（GFP）、赤蛍光タンパク質マケリー、ルシフェラーゼで包装されており、in vitroおよびin vivoの両方で標的細胞の簡単な追跡を可能にします。

また、iPhaseは、GFP＆ルシフェラーゼとMCHERRY＆LUCIFERASEの2つの前のトレーサーレンチウイルスを提供できます。これらのトレーサーは、実験的ニーズ、ワークフローの合理化、標的セルの実際の追跡と監視の効率を高めることに基づいて選択または組み合わせることができます。

iPhaseIムノ療法R大喜びPロダクト

Lentivirus - CAR - TまたはCAR - NK療法で使用される関連製品に加えて、IPHASEは、in vitro研究試薬のリーダーとして、CGT（細胞および遺伝子療法）およびその他の分野の革新をサポートするために多大な貢献をしています。 iphaseは、白血球細胞から分離された白血球およびPBMC（末梢血単核細胞）を開発および生成し、さまざまな免疫細胞分離キットとともに生産しました。、免疫療法の急速な発展をサポートする。

iPhase製品は、次の利点を提供します分析証明書（COA）iPhaseによって検証されていることは、各バッチで使用できます。

安全性 

iPhase製品は、徹底的な前スクリーニングを受けた健康なドナー/動物から供給され、ウイルス検査（HIV - 1/2、HBV、HCV、梅毒）の負の結果が得られます。

コンプライアンス  

iPhaseは、明確で追跡可能なソース検証を備えたドナーによって署名されたインフォームドコンセントフォームを提供します。

プロフェッショナリズム

Leukapheresisを通じて得られたiPhaseが提供する製品は、訓練された専門家によって処理されます。各バッチには対応するCOAが添付され、製品には厳格なコールドチェーンの下で輸送され、安全性、迅速な配信、品質保証が確保されます。

顧客サービス

iPhaseは、高品質-セールスサービスを提供し、試行プロセス全体でスムーズで中断のないエクスペリエンスを確保します。