CGT ინოვაციური თერაპია - ლენტივირუსი - შეფუთვის მანქანა - t იმუნური უჯრედები

CGT ინოვაციური თერაპია - ლენტივირუსი - შეფუთვის მანქანა - t იმუნური უჯრედები

იმუნური უჯრედების თერაპია არის კიბოს ინოვაციური მკურნალობა, რომელიც აძლიერებს სხეულის იმუნურ სისტემას, რათა მოხდეს კიბოს უჯრედების მიზნობრივი და აღმოფხვრა. საკვანძო ფორმებში შედის ციტოკინი - გამოწვეული მკვლელი უჯრედული თერაპია, T - უჯრედული თერაპია და CAR - T უჯრედული თერაპია. CAR - T თერაპია მოიცავს T უჯრედების რეპროგრამას, რათა გამოხატონ ქიმერული ანტიგენის რეცეპტორები (CAR), რომლებიც კონკრეტულად მიზნად ისახავს სიმსივნურ უჯრედებს, რაც აჩვენებს მნიშვნელოვან წარმატებას ჰემატოლოგიურ კიბოებში, როგორიცაა ლეიკემია და ლიმფომა.

საკვანძო სიტყვები: მანქანა - T, ლენტივირუსული, ლენტივირუსული ვექტორი, ტრეკერი ლენტივირუსი

მანქანის მომზადება - T უჯრედული თერაპია

ზოგადად, საკვანძო ნაბიჯები CAR - T უჯრედების მოსამზადებლად შემდეგია:

ფიგურის წყარო: dana

1. 1. sorting (T - უჯრედის იზოლაცია)

პირველი ნაბიჯი CAR - T უჯრედების მომზადებაში არის T - უჯრედების იზოლირება სისხლის თეთრი უჯრედებიდან პაციენტის პერიფერულ სისხლში. ისეთი ტექნიკა, როგორიცაა იმუნომაგნიტური მძივის განცალკევება ან ნაკადის ციტომეტრია, როგორც წესი, გამოიყენება CD3+- მდიდარი T - უჯრედების სისხლიდან. უჯრედის სიწმინდის უზრუნველსაყოფად, დახარისხების პროცესი ძალიან ზუსტი უნდა იყოს, რაც უზრუნველყოფს მაღალი რაოდენობის მაღალი რაოდენობის - ხარისხის T - უჯრედების მიღებას.

2. 2. სტიმულაცია (T - უჯრედების გააქტიურება)

მოპოვებული T - უჯრედები გააქტიურებულია in vitro, ჩვეულებრივ იყენებს აCD3 /CD28 T - უჯრედების გააქტიურება /გაფართოების ნაკრები. გააქტიურებული T უჯრედები შედიან აქტიურ მდგომარეობაში, ამზადებენ მათ გენის ტრანსფექციისთვის. ამ პროცესის საშუალებით, T უჯრედების ფუნქცია გაუმჯობესებულია, რაც ხელს უწყობს შემდგომ გენეტიკურ მოდიფიკაციას და გამაძლიერებელს.

3. 3. ტრანსფექცია (გენის რედაქტირება)

გააქტიურებული T უჯრედები განიცდიან გენის ტრანსფექციას ქიმერული ანტიგენის რეცეპტორის (CAR) გამოხატვის მიზნით. ეს პროცესი, როგორც წესი, იყენებსლენტივირუსული ვექტორიმანქანის გენის დანერგვა T უჯრედებში. Lentivirus არის ეფექტური გენის გადამცემი ინსტრუმენტი, რომელსაც აქვს სამიზნე გენის (მაგალითად, მანქანის გენის) სტაბილურად ინტეგრირება უჯრედის გენომში. T უჯრედების ინფიცირებით და მანქანის გენის T უჯრედების დნმ -ში გადაქცევით, ლენტივირუსი საშუალებას აძლევს T უჯრედებს გამოხატონ მანქანები გრძელვადიანი - ვადა. CAR გენი მოიცავს ანტისხეულების ერთი - ჯაჭვის ცვლადი ფრაგმენტს (SCFV), რომელიც საშუალებას აძლევს T უჯრედებს აღიარონ სპეციფიკური ანტიგენები სიმსივნური უჯრედების ზედაპირზე და დაიწყონ იმუნური პასუხი T უჯრედების სასიგნალო რეგიონების გააქტიურებით. როგორც ნაჩვენებია სურათი 2 -ში. ლენტივირუსულ ტრანსფექტაციას აქვს მაღალი ეფექტურობისა და სტაბილურობის მახასიათებლები, ასე რომ CAR გენი შეიძლება გამოიხატოს T უჯრედებში დიდი ხნის განმავლობაში.

ფიგურის წყარო: სინგაპურის მანქანა - T უჯრედული თერაპია

4. 4.MPLIFICATION (უჯრედების გამრავლება)

ტრანსფექციის შემდეგ, CAR - T უჯრედები შედიან გამაძლიერებელი ეტაპზე, სადაც ზრდის ფაქტორები, როგორიცააIL - 2ემატება უჯრედების გამრავლების ხელშესაწყობად. ამ პროცესის მიზანია უზრუნველყოს, რომ საკმარისი რაოდენობის CAR - T უჯრედები ხელმისაწვდომია პაციენტში საბოლოო ინფუზიისთვის. გამაძლიერებელი პროცესი უნდა ჩატარდეს სტერილურ პირობებში, უჯრედების ხარისხისა და რაოდენობის უზრუნველსაყოფად.

5. 5. ხარისხის კონტროლი (QC)
6. პაციენტში განლაგებამდე, ხარისხის კონტროლი გადამწყვეტია მომზადების პროცესში. მომზადებული მანქანის - t უჯრედები განიცდიან მკაცრ ტესტირებასუზრუნველყოს მათი სიწმინდე, აქტივობა, ტრანსფექციის ეფექტურობა და მკურნალობის სტანდარტებთან შესაბამისობა. გარდა ამისა, აუცილებელია უჯრედების დაბინძურების ან უარყოფითი რეაქციების ტესტირება, რათა უზრუნველყოს უჯრედების უსაფრთხოება და თერაპიული ეფექტურობა პაციენტში რეინფუზიის შემდეგ.

Iიმუნურ უჯრედებში ლენტივირუსის ტრანსფექციის mportance

ლენტივირუსული ტრანსფექციის ტექნოლოგია გადამწყვეტია იმუნური უჯრედების თერაპიაში, განსაკუთრებით გენის რედაქტირებისა და უჯრედების ინჟინერიისთვის. ლენტივირუსული ვექტორები, რომლებიც წარმოიქმნება მოდიფიცირებული აივ - 1 -დან, ფართოდ გამოიყენება გენების მასპინძელ გენომში ინტეგრაციის უნარის გამო, რაც უზრუნველყოფს სტაბილურ, გრძელვადიან - ვადაგადაცილებას. მათ შეუძლიათ დაინფიცირონ როგორც გამყოფი, ასევე არა - გამყოფი უჯრედები, ხოლო მათი უსაფრთხოება გაუმჯობესებულია საკვანძო გენების შეცვლით, რეპლიკაციის თავიდან ასაცილებლად. ეს ვექტორები ახლა ჩვეულებრივ გამოიყენება გენის თერაპიის, გენის რედაქტირების და უჯრედების ბიოლოგიის კვლევაში მათი ეფექტურობისა და გამძლეობისთვის გენის მიწოდებაში.

ფიგურის წყარო: obiosh.com/product/ ლენტივირუსული შეფუთვის სქემატური დიაგრამა და ლენტივირუსული ტრანსფექციის პროცესი 293T უჯრედებში

1. ეფექტური გენის ტრანსდუქცია

ლენტივირუსულ ვექტორს შეუძლია ეფექტურად მიაწოდოს სამიზნე გენები, მაგალითად, მანქანის გენი, იმუნურ უჯრედებში და ამ გენების ინტეგრირება უჯრედულ გენომში, რაც უზრუნველყოფს მანქანის გენის მუდმივად გამოხატვას უჯრედების გაყოფისა და პროლიფერაციის დროს. ეს მაღალი - ეფექტურობის ტრანსდუქციის შესაძლებლობა ფუნდამენტურია იმუნოთერაპიის წარმატებისთვის.

2. ლერწმის იმუნოგენურობა 

სხვა ვირუსულ ვექტორებთან შედარებით, ლენტივირუსებს აქვთ უფრო დაბალი იმუნოგენურობა. შედეგად, როდესაც ლენტივირუსები გამოიყენება იმუნური უჯრედების გადასატანად, პაციენტის იმუნური სისტემა წარმოქმნის შედარებით სუსტ იმუნურ პასუხს ვირუსზე. ეს ხელს უწყობს უარყოფითი რეაქციების მინიმუმამდე შემცირებას, განსაკუთრებით ინფუზიის შემდეგ უჯრედების გრძელვადიან ვადაზე გადარჩენაში, რითაც თავიდან აიცილებს ზედმეტი იმუნური უარის თქმას.

3. მაღალი ადაპტირება იმუნურ უჯრედებთან

ლენტივირუსულ ვექტორს შეუძლია ეფექტურად გადაიტანოს სხვადასხვა ტიპის იმუნური უჯრედები,განსაკუთრებით T უჯრედები და NK უჯრედები. ლენტივირუსული ტრანსდუქციის საშუალებით, იმუნურ უჯრედებს შეუძლიათ შეიძინონ სიმსივნე - სპეციფიკური აღიარების შესაძლებლობები, რითაც აძლიერებს სიმსივნური უჯრედების მიზნობრივი და მკვლელობის შესაძლებლობებს.

4. გადაცემული ეფექტურობის უჯრედების განსაზღვრა სამიზნე უჯრედების ამოცნობაში 

იმუნოთერაპიაშიგადაცემული ეფექტურობის უჯრედებიმიმართეთ იმუნურ უჯრედებს, რომლებიც, ტრანსდუქციის შემდეგ, გამოხატავენ მანქანას და ახდენენ ანტი - სიმსივნის მოქმედებას. ლენტივირუსულ ვექტორებს შეუძლიათ ზუსტად მიაწოდონ მანქანის გენი ამ ეფექტურ უჯრედებში, რაც მათ საშუალებას აძლევს მათ აღიარონ და სამიზნე სიმსივნური უჯრედები.სამიზნე უჯრედებიარის სიმსივნური უჯრედები, რომლებიც იდენტიფიცირდება და განადგურებულია ამ იმუნური უჯრედების მიერ. ლენტივირუსული ტრანსდუქციის საშუალებით, იმუნურ უჯრედებს შეუძლიათ გააძლიერონ თავიანთი სპეციფიკა სიმსივნური უჯრედების ამოცნობაში და მკვლელობაში, რითაც გაუმჯობესდეს თერაპიული ეფექტურობა.

ამ კონტექსტში, iPhase, ლიდერი ინ ვიტრო კვლევის რეაგენტებში, შეიმუშავა ლენტივირუსული შეფუთვის ნაკრები და ლენტივირუსის კონცენტრაციის რეაგენტი, რათა გაამარტივოს ტრანსდუქციის სირთულე იმუნოთერაპიის მომხმარებლებისთვის და გააუმჯობესოს სტაბილური გენის ტრანსფექციის წარმატების სიჩქარე. ეს პროდუქტები გთავაზობთ ერთი - შეჩერების გადაწყვეტას მომხმარებლებისთვის.

IPhase ლენტივირუსიPმომატება

IPhase Lentivirus შეფუთვის ნაკრებიშეიცავს ყველა აუცილებელ რეაგენტსლენტივირუსის შეფუთვა, მნიშვნელოვნად გაამარტივეთ ექსპერიმენტული პროცესის და დაზოგვის დრო და ძალისხმევა. ეს ნაკრები მოიცავს:

• ლენტივირუსის შეფუთვა პლაზმური მიქსი
• ტრანსფერული რეაგენტი
• EGFP პლაზმური
• IPhase Lentivirus კონცენტრაციის რეაგენტი

ეს ნაკრები ნამდვილად აძლიერებს ექსპერიმენტს! რთული რეაგენტის მომზადების საჭიროების გარეშე, ლენტივირუსის შეფუთვა ეფექტურად შეიძლება დასრულდეს, უბრალოდ მითითებული ინსტრუქციების შესაბამისად.ნაკრების უნიკალური უპირატესობები მოიცავს მოკლე შეფუთვის დროს, მაღალი ვირუსული ტიტერის და მარტივი ოპერაციით, რაც მას იდეალური გახდება დამწყებთათვის ლენტივირუსის შეფუთვაში. რეაგენტების თითოეული ნაკრები გადის მკაცრ ხარისხის კონტროლს, რათა უზრუნველყოს ზუსტი, საიმედო და რეპროდუქციული შედეგები, რაც მნიშვნელოვნად აუმჯობესებს ტრანსფექციის ეფექტურობას და ვირუსული ვექტორების სტაბილურობას, რითაც უზრუნველყოფს იმუნური უჯრედების მომზადებას.

გარდა ამისა, მომხმარებლების დასახმარებლად ხარჯების დაზოგვის მიზნით, IPhase ასევე შეიმუშავა და წარმოშვა ლენტივირუსის კონცენტრაციის რეაგენტი, რომელიც გთავაზობთ სწრაფ და მარტივ კონცენტრაციის გადაწყვეტას.უბრალოდ ლენტივირუსის ზებუნებრივი შერევით კონცენტრაციის რეაგენტთან, რასაც მოჰყვება მოკლე ინკუბაცია და ცენტრიფუგირება სტანდარტული ცენტრიფუგის გამოყენებით, ლენტივირუსული ნაწილაკები შეიძლება სწრაფად კონცენტრირებული იყოს. ეს პროცესი არ საჭიროებს ულტრასენტრიფუგს, რაც მას მოსახერხებელ და ღირებულებად აქცევს - ეფექტური ვარიანტი ლაბორატორიული მომხმარებლების უმეტესობისთვის.

მოკლედ რომ ვთქვათ, iPhase Lentivirus- ის კონცენტრაციის რეაგენტი არა მხოლოდ მნიშვნელოვნად აუმჯობესებს ტრანსფექციის ეფექტურობას, არამედ უზრუნველყოფს მაღალი - ხარისხის ვირუსული ვექტორის მხარდაჭერას იმუნური უჯრედების მომზადებისათვის. ეს არის აუცილებელი პროდუქტი რუტინული ექსპერიმენტებისთვის, პრეკლინიკური კვლევისა და სხვა განაცხადის სფეროებისთვის.

მოკლედ, იმუნოთერაპია, განსაკუთრებით CAR - T უჯრედი და CAR - NK უჯრედული თერაპიები, წარმოადგენს ახალ მიმართულებას თანამედროვე კიბოს მკურნალობაში. ზუსტი პროცესების საშუალებით, როგორიცაა უჯრედების დახარისხება, გააქტიურება, ტრანსდუქცია, გაფართოება და ხარისხის კონტროლი, მეცნიერებს შეუძლიათ მოამზადონ ეფექტური და უსაფრთხო იმუნური უჯრედების პროდუქტები პაციენტებისთვის, რაც საშუალებას აძლევს მიზნობრივ კიბოს მკურნალობას.ლენტივირუსული ტრანსდუქცია, როგორც ძირითადი ტექნოლოგია, მნიშვნელოვან როლს ასრულებს ავტომობილების და მანქანის - NK უჯრედების მომზადებაში მისი მაღალი ეფექტურობისა და სტაბილურობის გამო.უწყვეტი ტექნოლოგიური წინსვლებით, იმუნოთერაპია ფლობს პოტენციალს, რომ უფრო მეტი პაციენტისთვის გთავაზობთ ინოვაციური მკურნალობის ვარიანტებს, რაც უფრო მეტ კლინიკურ მნიშვნელობას უზრუნველყოფს. მომავალში, იმუნოთერაპია, სავარაუდოდ, რევოლუციური თერაპიული იმედს მოუტანს უფრო მეტ კიბოს პაციენტებს.

გენის ტრანსდუქციის, გამოხატვისა და დაავადების კვლევის საჭიროებების დასაკმაყოფილებლად, iPhase გთავაზობთ ლენტივირუსული შეფუთვის ნაკრებებს, ლენტივირუსულ კონცენტრაციის რეაგენტებს და ტრეკერის ლენტივირუსებს. ეს ტრეკერი ლენტივირუსები შეფუთულია მწვანე ფლუორესცენტული ცილებით (GFP), წითელი ფლუორესცენტული ცილის mCherry და ლუციფერაზა, რაც საშუალებას აძლევს სამიზნე უჯრედების მარტივად თვალყურის დევნას როგორც in vitro, ასევე in vivo.

გარდა ამისა, iPhase ასევე შეგიძლიათ გთავაზობთ ორი წინასწარ შეფუთული ტრეკერის ლენტივირუსებს: GFP & Luciferase და MCherry & Luciferase. ამ ტრეკერების შერჩევა ან კომბინაცია შესაძლებელია ექსპერიმენტული საჭიროებების, სამუშაოების გამარტივებისა და ეფექტურობის გაძლიერების საფუძველზე, რეალური - დროის თვალყურის დევნება და სამიზნე უჯრედების მონიტორინგი.

IPhaseIმმუნოთერაპიაRარადირებულიPმომატება

ლენტივირუსის გარდა - დაკავშირებული პროდუქტები, რომლებიც გამოიყენება მანქანაში - t ან მანქანაში - nk თერაპიები, iPhase, როგორც ლიდერი ინ ვიტრო კვლევის რეაგენტებში, ასევე მნიშვნელოვანი წვლილი შეიტანა CGT (უჯრედისა და გენის თერაპია) და სხვა სფეროებში ინოვაციების მხარდასაჭერად. იფაზამ შეიმუშავა და წარმოქმნა ლეიკოციტები და PBMC (პერიფერიული სისხლის მონონუკლეარული უჯრედები), რომლებიც იზოლირებულია ლეიკოფერეზის მეშვეობით, სხვადასხვა იმუნური უჯრედების იზოლაციის ნაკრებებთან ერთად, იმუნოთერაპიის სწრაფი განვითარების მხარდასაჭერად.

IPhase პროდუქტები გთავაზობთ შემდეგ უპირატესობებს დაანალიზის სერთიფიკატი (COA)IPhase- ის მიერ დადასტურებული ხელმისაწვდომია თითოეული ჯგუფისთვის.

უშიშროება 

IPhase პროდუქტები მიიღება ჯანმრთელი დონორებისგან/ცხოველებისგან, რომლებმაც გაიარა საფუძვლიანი წინასწარი - სკრინინგი, ვირუსული ტესტირებისთვის უარყოფითი შედეგებით (აივ - 1/2, HBV, HCV, სიფილისი).

დამყოლობა  

IPhase გთავაზობთ თანხმობის ინფორმირებულ ფორმებს, რომლებიც ხელს აწერენ დონორების მიერ, სუფთა და კვალდაკვალ წყაროს გადამოწმებით.

პროფესიონალიზმი

IPhase- ის მიერ მოწოდებული პროდუქტები, რომლებიც მიღებულია ლეიკოფერეზის საშუალებით, გაწვრთნილი პროფესიონალების მიერ. თითოეულ ჯგუფს თან ახლავს შესაბამისი COA, ხოლო პროდუქტები ტრანსპორტირდება მკაცრი ცივი ჯაჭვის ქვეშ, უსაფრთხოების, სწრაფი მიწოდების და ხარისხის უზრუნველყოფის უზრუნველსაყოფად.

მომხმარებელთა მომსახურება

IPhase გთავაზობთ მაღალ - ხარისხს - გაყიდვების მომსახურება, რაც უზრუნველყოფს გლუვი და უწყვეტი გამოცდილების მიღებას მთელი საცდელი პროცესის განმავლობაში.