პირველადი ჰეპატოციტები: გადამწყვეტი ინსტრუმენტი არა - კლინიკური ინ ვიტრო წამლების კვლევის წინსვლისთვის

პირველადი ჰეპატოციტები: გადამწყვეტი ინსტრუმენტი არა - კლინიკური ინ ვიტრო წამლების კვლევის წინსვლისთვის

ღვიძლი, როგორც წამლის ზემოქმედების ძირითადი ორგანო, მნიშვნელოვან როლს ასრულებს წამლის მეტაბოლიზმისა და ტოქსიკურობის პროცესებში. პირველადი ჰეპატოციტები აქვთ უჯრედული მახასიათებლების და ფერმენტებისა და კოფაქტორების ფიზიოლოგიური დონის სრულ სპექტრს, მათ შორის მემბრანას - შეკრული ფერმენტები, როგორიცაა ციტოქრომული P450 (შერეული - ფუნქციის ოქსიდაზა გლუვ ენდოპლაზმურ რეტიკულუმში) და ციტოზოლური ესტერაზები, რომელიც მოიცავს ყველა მეტაბოლურ გზას. ამ მიზეზით, პირველადი ჰეპატოციტები ფართოდ განიხილება, როგორც ოქროს სტანდარტი ინ ვიტრო ღვიძლის მოდელების მშენებლობისთვის და მკვლევარებს ემხრობიან ნარკომანიის, ნარკომანიის მეტაბოლიზმისა და ტოქსიკურობის კვლევებში. ამ სტატიაში მოცემულია 2D და 3D კულტურის მოდელების მიმოხილვა, რომელიც დაფუძნებულია პირველადი ჰეპატოციტების საფუძველზე და მათი განაცხადები ნარკომანიის განვითარებაში.

საკვანძო სიტყვები: პირველადი ჰეპატოციტები, 2D კულტივირება, 3D კულტივირება, ორგანოიდები, CO - კულტურა.

1. 1. პირველადი ჰეპატოციტების იზოლაცია

პირველადი ჰეპატოციტების იზოლაცია არის მნიშვნელოვანი ნაბიჯი ინ ვიტრო ღვიძლის მოდელების დასადგენად, ხოლო ორი - ნაბიჯ კოლაგენაზას პერფუზიის მეთოდი ყველაზე ხშირად გამოიყენება. პატარა ცხოველებში, ღვიძლის პერფუზია შეიძლება განხორციელდეს პორტალური ვენების ან დაქვემდებარებული ვენის კავას საშუალებით, ხოლო უფრო დიდი ცხოველები, როგორც წესი, საჭიროებენ პერფუზიას ღვიძლის ლობებით ან სეგმენტებით. რამდენიმე ძირითადი ფაქტორი გავლენას ახდენს ჰეპატოციტების წარმატებულ იზოლაციაზე: პირველი, კოლაგენაზა უნდა იყოს არა - ციტოტოქსიური. მეორე, საჭმლის მონელების დრო გადამწყვეტიაროგორც - საჭმლის მონელება, ასევე მეტი - საჭმლის მონელებას შეუძლია კომპრომეტირება მოახდინოს ჰეპატოციტების მოსავლიანობასა და სიცოცხლისუნარიანობას. მესამე, ღვიძლის მდგომარეობა უნდა იყოს ოპტიმალური, რადგან ჰეპატოციტები ძალიან მგრძნობიარეა იშემიური დაზიანების მიმართ. ჰეპატოციტების მომზადებისთვის გამოყენებული ღვიძლი სწრაფად უნდა გაცივდეს მეტაბოლური მაჩვენებლების შესამცირებლად და მეტაბოლური ჰიპოქსიისა და შემდგომი იშემიის თავიდან ასაცილებლად.

პირველადი ჰეპატოციტების სტანდარტები, რომლებიც გამოიყენება ნარკომანიის კვლევაში, შემდეგია:

1. 2. პირველადი ჰეპატოციტების 2D კულტურა

შეჩერების ჰეპატოციტების მოდელი

იგი შეიცავს სრულ მედიკამენტებს - მეტაბოლიზებული ფერმენტებისა და კოფაქტორების მეტაბოლიზებული, რაც მას შესაფერისია მეტაბოლური განწმენდის სხვადასხვა გზების შესასწავლად. ამასთან, შეჩერებული ჰეპატოციტების სიცოცხლისუნარიანობა და წამლის მოქმედება - მეტაბოლიზაციის ფერმენტები თანდათან მცირდება, რადგან ინ ვიტრო ინკუბაციის დრო იზრდება, რაც შეზღუდავს ინკუბაციის დრო მაქსიმუმ 4 საათამდე. ეს მოდელი, როგორც წესი, გამოიყენება ნარკოტიკების განწმენდის შესაფასებლად, ზომიერი და მაღალი კლირენსის მაჩვენებლებით. როდესაც კლირენსის სიჩქარე 20%-ზე ნაკლებია, ზუსტი კლირენსის მნიშვნელობების დადგენა შეუძლებელია. ტრადიციული შეჩერების ჰეპატოციტი - ინ ვიტრო მეტაბოლიზმის მოდელები დაფუძნებული არასაკმარისია ნელი - მეტაბოლური ნაერთების გამოვლენილ მეტაბოლურ რეაქციებზე, რითაც ზღუდავს ამ ნაერთების კლირენსის მაჩვენებლებისა და მეტაბოლური პროდუქტების პროგნოზირებას. შეჩერების ჰეპატოციტების რელეს მეთოდი (სურათი 1) შეიძლება გამოყენებულ იქნას ინკუბაციის დროის 20 საათამდე ან კიდევ უფრო მეტხანს.

პროგრამა:ფერმენტის აქტივობა და მეტაბოლური სტაბილურობის შესწავლა მცირე მოლეკულური მედიკამენტებისთვის.

სურათი 1. შეჩერების ჰეპატოციტების რელეს მეთოდის გადაცემის პროცესი

წყარო: ნარკომანიის მეტაბა, 2012,40 (9): 1860–1865

პლანეტა ჰეპატოციტების მოდელი

პირველადი ჰეპატოციტები კულტივირებულია 2D სისტემაში კოლაგენზე - დაფარული კულტურის ფირფიტები. ჰეპატოციტები აჩვენებენ ეპითელური მორფოლოგიას, გაჭიანურებული ბირთვებით, რომლებიც ხშირად წარმოადგენენ ბინკულაციურ ფორმას. ერთჯერადი ჰეპატოციტების მონოლიტერის კულტურის ნაკლოვანებები მოიცავს: 1. უჯრედული პოლარისა და ფუნქციის შეცვლა .2. უჯრედების სხვა შესაბამისი ტიპების ნაკლებობა (ე.ი. არა - პარენქიმული უჯრედები), რომლებიც საჭიროა ნორმალური ფუნქციისთვის .3. საკმარისი საკვებ ნივთიერებებისა და პარაკრინის ფაქტორების მიწოდების შეუძლებლობა ჰეპატოციტების მხარდასაჭერად მათი ფუნქციების შესრულებაში (მაგალითად, ნაღვლის მჟავა და შრატის ცილის ბიოსინთეზი).

პროგრამები:

1). ნარკოტიკების შეფასება - ნარკომანიის ურთიერთქმედება:ეს მოიცავს ფერმენტის ინდუქციას, ფერმენტის ინჰიბირებას და გადამზიდავების კვლევებს. პირველ რიგში, როდესაც პრეპარატი მოქმედებს როგორც ინდუქციური, ამან შეიძლება გამოიწვიოს წამლის გამოხატვის გაზრდა - მეტაბოლიზებული ფერმენტებისა და გადამზიდავები. ძლიერ ინდუქტორებს შეუძლიათ ერთდროულად მრავალი გენის რეგულირება, მაგალითად, CYP2B6, CYP3A4, CYP2C9, UGT და ფენობარბიტალური ინდუქცია და რამდენიმე სატრანსპორტო ცილა, როგორიცაა MRP2. მეორეც, არსებობს სახეობები - სპეციფიკური განსხვავებები, თუ როგორ რეაგირებენ ჰეპატოციტები ინდუქტორებზე. მაგალითად, რიფამპიცინი არის ეფექტური ინდუქტორი ადამიანის და კურდღლის ჰეპატოციტებისთვის, მაგრამ არ აქვს ინდუქციური ეფექტი ვირთხის ჰეპატოციტებზე. დაბოლოს, პლატალური ჰეპატოციტების სუბოპტიმალური მოოქროვილი სიმკვრივე შეიძლება გამოიწვიოს P450- ების ბაზალური გამოხატულების შემცირება და ინდუქციური პასუხების ხელოვნურად გაზრდილი. როგორც ნაჩვენებია ფიგურაში 3, ჰეპატოციტები ქვედა მოოქროვილი სიმკვრივის დროს აჩვენებს CYP1A2, CYP2B6 და CYP3A4– ის უფრო დაბალ ბაზალურ მოქმედებას, მაგრამ უფრო ძლიერი ინდუქციური პასუხები. ამრიგად, ფიზიოლოგიურად შესაბამისი მონაცემების მისაღებად აუცილებელია ჯანსაღი ჰეპატოციტები სათანადო მოოქროვილი სიმკვრივის დროს.

სურათი 2. ურთიერთობა კრიოპრესირებული ადამიანის ჰეპატოციტებისა და ფერმენტის ინდუქციის სიმკვრიეს შორის

წყარო: ამჟამინდელი ნარკომანიის აღმოჩენის ტექნოლოგიები, 2010, 7: 188 - 198

2). ჰეპატოტოქსიურობის შეფასება: მსუბუქი მიკროსკოპის ქვეშ მორფოლოგიური ცვლილებების დაკვირვება, როგორიცაა უჯრედების მორფოლოგია, ვაკუოლისა და ლიპიდური წვეთოვანი აგრეგაცია და უჯრედების მიმაგრება/რაზმი. ჰეპატოციტების ნეკროზის გამოვლენა (როგორც ეს მითითებულია ასპარტატ ამინოტრანსფერაზას, ლაქტატის დეჰიდროგენაზას და ალანინის ამინოტრანსფერაზას) და აპოპტოზით (დნმ ფრაგმენტაცია). ციტოკინისთვის - შუამავლობით ციტოტოქსიურობისთვის, ჰეპატოციტების ერთჯერადი მონოლიტერი კულტურები არ შეიძლება პროგნოზირონ ტოქსიკური პასუხები მეზობელი არა - პარენქიმული უჯრედებისგან, მაგალითად, კუპფერის უჯრედების, ვარსკვლავური უჯრედების და სინუსოიდული ენდოთელური უჯრედებისგან განთავისუფლებული ნივთიერებების რეგულირების გამო.

3). "რელეს მეთოდი" ნელი მეტაბოლიზაციის ნაერთის კლირენსისა და მისი მეტაბოლიტების შესასწავლად: ნარკოტიკების მოქმედება - პლატფორმის ჰეპატოციტებში ფერმენტების მეტაბოლიზაცია იწყებს შემცირებას 24 საათის შემდეგ. შრატში პლატალური ჰეპატოციტების ინკუბაციის შემდეგ - უფასო საშუალო, რომელიც შეიცავს ინტერესის ნაერთს 24 საათის განმავლობაში, საშუალო გროვდება და შერეულია, შემდეგ გადადის ახალ პლატფორმულ ჰეპატოციტებში შემდგომი შესწავლისთვის (სურათი 3).

სურათი 3. პლატფორმის ჰეპატოციტების რელეს მეთოდის გადაცემის პროცესი

წყარო: ნარკომანიის მეტაბოლიზმის წერილები, 2016, 10: 3 - 15

3). შეაფასეთ ფიჭური მიღება, ენდოციტოზი, ენდოსომური გაქცევა და დუმილის ზემოქმედება ჰეპატოციტების სამიზნე გენზე - მიზნობრივი მცირე ნუკლეინის მჟავების წამლები.

სენდვიჩის კულტივირების მოდელი

ინ ვიტრო, ჰეპატოციტების კულტივირება შესაძლებელია კოლაგენის ან მატრიგელის ორ ფენას შორის, რათა მოხდეს in vivo სტრუქტურების რეკონსტრუქცია, რომელიც ცნობილია როგორც სენდვიჩის კულტივირება. გელის კოლაგენის ორ ფენას შორის კულტივირებული ჰეპატოციტები (სენდვიჩის სტრუქტურა) შეუძლიათ გააუმჯობესონ უჯრედების მორფოლოგია და სიცოცხლისუნარიანობა და შეინარჩუნონ მათი ფუნქციონირება უფრო გრძელი პერიოდის განმავლობაში. გარდა ამისა, სენდვიჩის კულტურაში ჰეპატოციტებს შეუძლიათ აღადგინონ პოლარობა, რაც საშუალებას იძლევა სათანადო ლოკალიზაცია მოახდინოს ბაზოლატერალური და კანალიკულური გადამზიდავების, აგრეთვე ფუნქციური ნაღვლის სადინარის ქსელების წარმოქმნაზე (სურათი 4).

სურათი 4. გადამზიდავების პოლარიზებული გამოხატულება ადამიანის ჰეპატოციტების სენდვიჩის მოდელში

წყარო: ამჟამინდელი ნარკომანიის აღმოჩენის ტექნოლოგიები, 2010, 7, 188 - 198

პროგრამები:

1. 1). ნაერთების ბილიარული ექსკრეციის შეფასება.
2. 2). ენდოგენური და ეგზოგენური ნაერთების და მეტაბოლიტების ღვიძლის და ბილიარული განაწილების შეფასება.
3. 3). მეტაბოლიზმისა და გადამზიდავების შუამავლობით განწმენდის შეფასება და ფიზიოლოგიის მშენებლობა - დაფუძნებული ფარმაკოკინეტიკური მოდელები.
4. 4). ჰეპატოტოქსიურობის შესწავლა და კლინიკური პრეპარატის მექანიზმების უზრუნველყოფა - ღვიძლის გამოწვეული დაზიანება. მონაცემები ინტეგრირებულია სისტემების ფარმაკოლოგიის მოდელებში, ადამიანებში ღვიძლის გამოწვეული დაზიანების გამოწვეული პოტენციური პრეპარატის პროგნოზირებისთვის.
5.  
   1. 3. პირველადი ჰეპატოციტების 3D კულტურა

6. 3D კულტურის სისტემებში, ჰეპატოციტები კულტივირებულია სამგანზომილებიან მატრიქსში, რაც უკეთესად ასახავს in vivo ღვიძლის არქიტექტურას 2D მონოლიტერულ კულტურებთან შედარებით. ეს სისტემები ხელს უწყობს უჯრედს და უჯრედს - მატრიქსის ურთიერთქმედებებს, რამაც შეიძლება აღადგინოს ღვიძლის ფიზიოლოგიური ფუნქციები, მათ შორის წამლის მეტაბოლიზმი, ცილის სეკრეცია და ნაღვლის წარმოქმნა. პირველადი ჰეპატოციტების 3D კულტურები შეიძლება გამოყენებულ იქნას ღვიძლის შესასწავლად - სპეციფიკური ფუნქციები უფრო in vivo - გარემოს მსგავსად, გთავაზობთ უპირატესობებს წამლის ტესტირებისთვის, ტოქსიკურობის შეფასებისა და დაავადების მოდელირებისთვის.

   სფერული მოდელი

ისეთი ტექნიკის საშუალებით, როგორიცაა ულტრა - დაბალი დანართის კულტურა, ჩამოკიდებული ვარდნის კულტურა და მაგნიტური უჯრედების კულტურა (სურათი 5), პირველადი ჰეპატოციტებს შეუძლიათ დაგროვონ სფერული აგრეგატები, რომელთა დიამეტრი 150 -მდეა - 175 μm გარეშე გარე მატრიცებზე დაყრდნობით. სფერული კულტურის ერთ - ერთი უპირატესობა ის არის, რომ თითოეულ სფერული მოითხოვს მხოლოდ 1,330 - 2,000 უჯრედს, რაც მნიშვნელოვნად ამცირებს უჯრედების რაოდენობას სხვა 3D კულტურის ტექნიკასთან შედარებით. ბოლოდროინდელმა კვლევებმა აჩვენა, რომ პირველადი ჰეპატოციტების სფერული კულტურები შეიძლება 5 კვირამდე შენარჩუნდეს, CYP ფერმენტის მოქმედება თითქმის უცვლელი დარჩა 8 -ე დღესა და 35 -ე დღეს შორის. პროტეომიკის ანალიზმა აჩვენა, რომ სენდვიჩის კულტურასთან შედარებით, ნარკომანიის, განაწილების, მეტაბოლიზმისა და ექსკრეციას უკეთესად არის განთავსებული 14 დღის განმავლობაში. ამასთან, ღვიძლი გაცილებით რთულია, ვიდრე უჯრედის აგრეგატი. ჰეპატოციტების ბაზოლატერალური მხარე ურთიერთქმედებს სისხლთან, ხოლო ნაღველი მიედინება აპიკური მხრიდან, რაც ღვიძლის ლობულის რთული სტრუქტურის მთავარი მახასიათებელია, და ეს ჯერ კიდევ არ შეიძლება განმეორდეს სფერული მოდელში.

პროგრამები:

1. 1). ნაერთის ნელი მეტაბოლიზაციის შესწავლა და მისი მეტაბოლიტები.
2. 2). ჰეპატოტოქსიურობის კვლევა.
3. 3). უჯრედული შეყვანის, ენდოციტოზის, ენდოციტოზის, ენდოსომური გაქცევის და ჰეპატოციტების სამიზნე გენებზე ზემოქმედების შეფასება - მიზნობრივი მცირე ნუკლეინის მჟავების წამლები.

სურათი 5. სფერული კულტურის მეთოდი

ღვიძლის ორგანოიდების მოდელი

ორგანოიდების კონსენსუსის განმარტებაა: 3D სტრუქტურები, რომლებიც მიღებულია ღეროვანი უჯრედებიდან, პროგენიტორული უჯრედებიდან ან დიფერენცირებული უჯრედებიდან, რომელთა საშუალებითაც შესაძლებელია ადგილობრივი ქსოვილის გარკვეული ფუნქციების და სტრუქტურების რეპროდუცირება in vitro, ეფექტურად მიბაძოს in vivo microenurionment და cell - to - უჯრედულ ურთიერთობებს. ღვიძლის ორგანოიდები გამოვლენილია, როგორც ყველაზე მოწინავე მოდელი ადამიანის ღვიძლის ბიოლოგიის კვლევისთვის.

უჯრედის წყაროები ღვიძლის ორგანოიდული მშენებლობისთვის:

Pluripotent ღეროვანი უჯრედები (PSCs):

ემბრიონის ღეროვანი უჯრედები (ESCs) და გამოწვეული პლურიპოტენტური ღეროვანი უჯრედები (IPSCs) ფლობენ მაღალ პლურიპოტენციას, პლასტიურობას და შეუზღუდავი პროლიფერაციული შესაძლებლობებს. სპეციფიკური სასიგნალო ფაქტორების გავლენის პირობებში, ისინი განასხვავებენ ჰეპატოციტს - მსგავსი უჯრედები, რომელთაც აქვთ აქტივობა და ფუნქციონირება. ამასთან, PSC– ებიდან მიღებული ღვიძლის ორგანოიდები შეიძლება გაიარონ ეპიგენეტიკური და გენეტიკური ცვლილებები, რაც გამაძლიერებელია ქრომოსომული ანეიფლოიდების ცვლილებების გამაძლიერებლის დროს.

პროგრამები:

1. 1). გენეტიკური ღვიძლის დაავადების მოდელები
2. 2). ინფექციური ღვიძლის დაავადების მოდელები
3. 3). წამლის ციტოტოქსიურობის ტესტირება

② ღვიძლის ქსოვილი - წარმოქმნილი უჯრედები: ეს მოიცავს ქოლანგიოციტებს და ჰეპატოციტებს. სექსუალურ ჰეპატოციტები ინარჩუნებენ ღეროვანი უჯრედების პოტენციალს და პროლიფერაციულ უნარს კონკრეტულ გარემოში. PSC - წარმოქმნილ ორგანოიდებთან შედარებით, პირველადი ქსოვილისგან მიღებული ორგანოიდები უფრო მომწიფებულია, უფრო სტაბილური გენომით და ინარჩუნებენ ფენოტიპურ და გენეტიკურ სტაბილურობას გრძელვადიან პერიოდში - ვიტრო კულტურის პერიოდში. ამასთან, ადამიანის სექსუალურ ჰეპატოციტების ორგანოიდების გრძელვადიანი პროლიფერაციული შესაძლებლობები შეზღუდულია ნაყოფის ადამიანის ჰეპატოციტებთან ან მოზრდილ თაგვის პირველადი ჰეპატოციტებთან შედარებით. მოზრდილთა ჰეპატოციტების ორგანოიდების კულტივირება რთული რჩება.

კულტურის მეთოდი (სურათი 6): ღვიძლის ქსოვილი ერთჯერადი უჯრედებშია მონელდება, ხოლო მატრიგელისა და უჯრედების ნარევი თესლით 24 - კარგად ფირფიტაში, რათა შექმნან გუმბათის - ფორმის სტრუქტურები. ინკუბაცია უჯრედების კულტურის ინკუბატორში (37 ° C) 15 წუთის განმავლობაში. გამაგრების შემდეგ, დაამატეთ სპეციფიკური კულტურის საშუალო საშუალება. გადასასვლელი დაახლოებით 14 დღის შემდეგ. შეცვალეთ ორიგინალი საშუალო დიფერენციაციის საშუალებებით 7 - 10 დღის შემდეგ.

პროგრამები:

1. 1). ჰეპატოტოქსიურობის მოდელები
2. 2). ინ ვიტრო მეტაბოლიზმის აშლილობის შესწავლა
3. 3). არა - ალკოჰოლური ცხიმოვანი ღვიძლის დაავადება
4. 4). ნარკოტიკების განვითარება ღვიძლის კეთილთვისებიანი და ავთვისებიანი დაავადებებისთვის

სურათი 6. ქსოვილის კულტურა და გადასასვლელი პროცესი - წარმოქმნილი ღვიძლის ორგანოიდები

წყარო: Cell & Bioscience (2023) 13: 197

სფერული კულტურისა და ორგანოიდული კულტურის შედარება

4. პირველადი ჰეპატოციტების CO - კულტურის მოდელი

1. 1. 2D პირველადი ჰეპატოციტების CO - კულტურის მოდელი
      

      2D პირველადი ჰეპატოციტების CO - კულტურის მოდელში, ორი ან მეტი განსხვავებული უჯრედის ტიპი შერეული და კულტივირებულია ორ განზომილებიან გარემოში. ამ მოდელის მთავარი მახასიათებელია პირდაპირი ურთიერთქმედება უჯრედების სხვადასხვა ტიპებს შორის, უჯრედებსა და უჯრედულ მატრიქსს შორის ურთიერთქმედება, ან არაპირდაპირი სიგნალის გადაცემა ციტოკინებისა და ქიმიური კომუნიკაციების საშუალებით. ჰეპატოციტების პირველადი ფუნქციები, როგორიცაა ალბუმინის წარმოება და ნარკომანიის მეტაბოლიზმის უნარი, შეიძლება შენარჩუნდეს სამ კვირამდე.

      პროგრამები:

      1. 1). პირველადი ჰეპატოციტები Co - კულტივირებული ფიბრობლასტებით: ეს მოდელი გამოიყენება ნელი - მეტაბოლიზებული ნაერთების და მათი მეტაბოლიტების შესწავლის მიზნით.
      2. 2). პირველადი ჰეპატოციტები CO - კულტივირებული ღვიძლის პარენქიმული უჯრედებით (მაგ., ვარსკვლავური უჯრედები, სინუსოიდული ენდოთელური უჯრედები): ეს მოდელი სასარგებლოა ნარკოტიკების გამოკვლევისთვის - ღვიძლის დაზიანების გამოწვევისთვის (DILI), რადგან ის ხელს უწყობს ციტოკინების, ქიმიოკინების და ზრდის ფაქტორების როლს გამოიკვლიოს ღვიძლის ადაპტაციის შემდეგ წამლის ექსპოზიციის შემდეგ.
      3. 3). პირველადი ჰეპატოციტები CO - კულტივირებული T უჯრედებით: ეს მოდელი გამოიყენება ღვიძლის წამლების მეტაბოლიზმის გამოსავლენად - სპეციფიკური T უჯრედების პასუხები.
      4. 4). IPhase's HepatomaxCO - კულტურის სისტემა: iPhase– მა შეიმუშავა CO - კულტურის სისტემა სხვადასხვა სახეობიდან პირველადი ჰეპატოციტებით, რომელიც ცნობილია როგორც ჰეპატომაქსი-. CO - ადამიანის პირველადი ჰეპატოციტების კულტურული სტრომული უჯრედებით, შესაძლებელია კარგი პრეპარატის შენარჩუნება - ადამიანის ჰეპატოციტებში ფერმენტის აქტივობის მეტაბოლიზაცია 3 კვირამდე. ეს სისტემა შესაფერისია ნელი შესასწავლად - ნაერთის კლირენსის მაჩვენებლებისა და მათი მეტაბოლიტების მეტაბოლიზაციისთვის.

      ეს CO - კულტურის მოდელი უზრუნველყოფს ფიზიოლოგიურად მნიშვნელოვან პლატფორმას ნარკომანიის მეტაბოლიზმის, ტოქსიკურობისა და ღვიძლის შესაფასებლად - დაავადების პროცესების შესაფასებლად, გთავაზობთ იმის გარკვევას, თუ როგორ უწყობს ხელს უჯრედების სხვადასხვა ტიპები ღვიძლის ფუნქციონირებასა და დაავადებას.
      
      

      3D პირველადი ჰეპატოციტების CO - კულტურის მოდელი

      პირდაპირი 3D CO - კულტურა: ეს მოდელი გულისხმობს ღვიძლის უჯრედების ორი ან მეტი განსხვავებული ტიპის შერევით (მაგ., პირველადი ჰეპატოციტები, სინუსოიდული ენდოთელური უჯრედები, ღვიძლის ვარსკვლავური უჯრედები, კუპფერის უჯრედები), რომ ჩამოყალიბდეს საკუთარი თავი - აწყობილი სფეროიდები ან CO - მათი კულტივირება 3D გარემოში, როგორიცაა კოლაგენი, ფიბრინი, ალგატური ან ჰიდროგელები. Direct 3D Co - კულტურა საშუალებას იძლევა მჭიდრო ურთიერთქმედება ღვიძლის სხვადასხვა უჯრედებს შორის, ისეთი მექანიზმების საშუალებით, როგორიცაა Cell - to - უჯრედების ადჰეზია, პარაკრინის სიგნალიზაცია ხსნადი ციტოკინების საშუალებით და უჯრედული მატრიქსის ადჰეზიის საშუალებით, რაც საშუალებას აძლევს ჰეპატოციტებს შორის კომუნიკაციას.

      პროგრამები:

      1. 1). ღვიძლის ფიბროზის მოდელი: გამოიყენება ღვიძლის ფიბროზის მექანიზმებისა და პროგრესირების შესასწავლად.
      2. 2). პრეპარატი - გამოწვეული ღვიძლის დაზიანების (DILI) მოდელი: ხელს უწყობს წამლების მიერ გამოწვეული ღვიძლის დაზიანების სიმულაციას და შეფასებას.
      3. 3). ნარკოტიკების ურთიერთქმედება, წამლის მეტაბოლიზმი და ფერმენტის ინდუქცია: აფასებს, თუ როგორ ურთიერთქმედებენ სხვადასხვა წამლები, როგორ ხდება მათი მეტაბოლიზაცია და როგორ იწვევს ისინი ღვიძლის ფერმენტებს.

      არაპირდაპირი 3D CO - კულტურა: ეს მეთოდი იყენებს ფიზიკური განცალკევების სისტემას (მაგ., ტრანსუელი ან სხვა მასალები) კულტურის ორი ან მეტი ტიპის უჯრედების (მაგალითად, პირველადი ჰეპატოციტები NIH/3T3 უჯრედებით ან სინუსოიდული ენდოთელური უჯრედებით) 3D გარემოში, სადაც უშუალო უჯრედი - უჯრედული კონტაქტი თავიდან აიცილებს. უჯრედებს შორის კომუნიკაცია ხდება ხსნადი ციტოკინების საშუალებით.

      პროგრამები:
      გამოიყენება ორგანიზმში ღვიძლის უჯრედებს შორის არა - საკონტაქტო კომუნიკაციის შესასწავლად.

      
      მოკლედ რომ ვთქვათ, iPhase, როგორც ლიდერი ინ ვიტრო ბიოლოგიურ კვლევებში, გთავაზობთ ყოვლისმომცველ გადაწყვეტილებებს არა - კლინიკური წამლების ტესტირებისთვის. პირველადი ჰეპატოციტების იზოლაციიდან და კულტურიდან სხვადასხვა სახეობიდან დამხმარე პროდუქტების შემუშავებაში, როგორიცაა კულტურის მედია სპეციფიკური პროგრამებისთვის ან სპეციფიკაციური კოლაგენის - დაფარული ფირფიტებისთვის, iPhase ეძღვნება საუკეთესო ინ ვიტრო კვლევის ინსტრუმენტებს ნარკომანიის აღმოჩენისა და განვითარებისათვის. ჩვენ ვართ სანდო პარტნიორი ფარმაცევტული ინდუსტრიის კლიენტებისთვის, ვალდებულნი ვართ მოგაწოდოთ შეწყვეტის გადაწყვეტილებები არა - კლინიკური კვლევებისთვის.