რა არის ადამიანის PBMC და მათი როლი იმუნიტეტში?

ადამიანის PBMCS, ანუ პერიფერიული სისხლის მონონუკლეარული უჯრედები, იმუნური უჯრედების კრიტიკულ ჯგუფს წარმოადგენს, რომელიც მიმოქცევაშია თქვენს სისხლში. ამ უჯრედებში შედის ლიმფოციტები, მონოციტები და დენდრიტული უჯრედები, რომელთაგან თითოეული უნიკალურ როლს ასრულებს თქვენი სხეულის დასაცავად. PBMCs გიცავთ მავნე პათოგენების იდენტიფიცირებით და განეიტრალებით, როგორიცაა ბაქტერიები და ვირუსები, ამასთანავე იმუნური ბალანსის შენარჩუნებით.

გამოკვლევა აჩვენებს, რომ PBMC– ები დროთა განმავლობაში სტაბილური რჩებიან, უჯრედების სიცოცხლისუნარიანობა 85% -ზე მეტია უმეტეს ნიმუშებში. გარდა ამისა, მათი გენის გამოხატვა შეიძლება სწრაფად მოერგოს. მაგალითად, TNFα გამოხატულება იზრდება სამჯერ მეტი საათის განმავლობაში. ასეთი მრავალფეროვნება ხაზს უსვამს მათ მნიშვნელობას იმუნური პასუხების რეგულირებაში.

ადამიანის PBMC- ების შემადგენლობა

ლიმფოციტები: T უჯრედები, B უჯრედები და NK უჯრედები

ლიმფოციტები ადამიანის PBMC– ების მნიშვნელოვანი კომპონენტია. მათში შედის T უჯრედები, B უჯრედები და ბუნებრივი მკვლელი (NK) უჯრედები, რომელთაგან თითოეული იმუნიტეტის მკაფიო როლებია. T უჯრედები ხელს უწყობენ იმუნური პასუხების რეგულირებას და პირდაპირ შეტევაზე ინფიცირებულ უჯრედებს. B უჯრედები წარმოქმნიან ანტისხეულებს, რომლებიც ანეიტრალებენ მავნე პათოგენებს. NK უჯრედები, მეორეს მხრივ, მიზნად ისახავს და ანადგურებენ არანორმალურ უჯრედებს, მაგალითად, ვირუსების ან კიბოს უჯრედებით ინფიცირებულ პირებს.

საინტერესოა, რომ ზოგიერთი ლიმფოციტი ადამიანის PBMC- ში, რომელიც აღინიშნება როგორც CD3+ CD19+ უჯრედები, აჩვენებს ორმაგ ფუნქციონირებას. ამ უჯრედებს შეუძლიათ იმოქმედონ როგორც T უჯრედები, ასევე B უჯრედები. ისინი პასუხობენ T - უჯრედის რეცეპტორის (TCR) და B - უჯრედის რეცეპტორის (BCR) სასიგნალო გზების მეშვეობით. ეს ორმაგი როლი საშუალებას აძლევს მათ მონაწილეობა მიიღონ როგორც ჰუმორულ, ისე უჯრედულ იმუნურ პასუხებში. მაგალითად, ისინი ანტიგენებს უფრო ეფექტურად აკავშირებენ, ვიდრე ჩვეულებრივი B უჯრედები და წარმოქმნიან ინტერფერონს - გამა (IFN - γ) T უჯრედების მსგავს დონეზე.

მონოციტები და მათი იმუნური ფუნქციები

მონოციტები კიდევ ერთი მთავარი ჯგუფია ადამიანის PBMC- ებში. ეს უჯრედები პატრულირებენ თქვენს სისხლს, ეძებენ ინფექციის ან ქსოვილების დაზიანების ნიშნებს. პრობლემის აღმოჩენისთანავე ისინი მიგრირებენ დაზარალებულ მხარეში და გარდაიქმნებიან მაკროფაგებად ან დენდრიტულ უჯრედებად. მაკროფაგები ჩართულია და იწვება პათოგენები, ხოლო დენდრიტული უჯრედები ანტიგენებს წარმოადგენენ სხვა იმუნურ უჯრედებზე.

მონოციტები ასევე ათავისუფლებენ ციტოკინებს, რომლებიც სიგნალიზაციას ახდენენ მოლეკულებს, რომლებიც ხელს უწყობენ იმუნური პასუხის კოორდინაციას. ამით ისინი უზრუნველყოფენ, რომ თქვენი სხეული ეფექტურად რეაგირებს ინფექციებზე ან დაზიანებებზე.

დენდრიტული უჯრედები და მათი როლი ანტიგენის პრეზენტაციაში

დენდრიტული უჯრედები პროფესიონალური ანტიგენია - უჯრედების (APCs) წარდგენა ადამიანის PBMC- ებში. ისინი მნიშვნელოვან როლს ასრულებენ T უჯრედების გააქტიურებაში, ანტიგენების ზედაპირზე წარდგენით. კვლევებმა აჩვენა, რომ დენდრიტული უჯრედები ერთადერთი APC– ები არიან, რომელთაც შეუძლიათ გააქტიურონ როგორც CD4+ და CD8+ გულუბრყვილო T უჯრედები. მათი ეფექტურობა გამომდინარეობს ანტიგენის მონელების შეანელების უნარისგან, რაც ზრდის პეპტიდების ხელმისაწვდომობას MHC დატვირთვისთვის.

ეს უჯრედები უზრუნველყოფენ, რომ თქვენი იმუნური სისტემა ცნობს და რეაგირებს საფრთხეებზე ეფექტურად, რაც მათ იმუნიტეტში შეუცვლელი გახდის.

ადამიანის PBMC- ების იზოლაცია

PBMC- ების წყაროები: პერიფერიული სისხლი და ძვლის ტვინი

ადამიანის PBMC შეიძლება იზოლირებული იყოს ორი ძირითადი წყაროდან: პერიფერიული სისხლი და ძვლის ტვინი. პერიფერიული სისხლი ყველაზე გავრცელებული წყაროა მისი ხელმისაწვდომობისა და მინიმალური ინვაზიურობის გამო. ძვლის ტვინი, მეორეს მხრივ, უზრუნველყოფს უფრო მდიდარ გარემოს იმუნური უჯრედებისთვის, მაგრამ მოითხოვს უფრო ინვაზიურ პროცედურას.

PBMC– ების მოსავლიანობა და სიწმინდე შეიძლება განსხვავდებოდეს წყაროსა და იზოლაციის მეთოდიდან გამომდინარე. მაგალითად, კვლევებმა აჩვენა, რომ სტანდარტული FICOLL მეთოდი აღწევს უფრო მაღალ მოსავალს და სიწმინდეს CPT (უჯრედების მომზადების მილის) მეთოდებთან შედარებით. ქვემოთ მოცემულ ცხრილში ასახულია ეს განსხვავებები:

Ficoll გადაფარვის ტექნიკა PBMC იზოლაციისთვის

FICOLL გადაფარვის ტექნიკა არის ფართოდ გამოყენებული მეთოდი PBMC– ების იზოლირებისთვის. ეს პროცესი გულისხმობს Ficoll- ის სისხლში ჩასვლას - პაკის ხსნარი და მისი ცენტრიფუგირება უჯრედების განცალკევებას სიმკვრივის საფუძველზე. PBMC– ები ქმნიან მკაფიო ფენას პლაზმასა და ფიკოლს შორის, რაც მათ მარტივად შეგროვებას ხდის.

კვლევები ხაზს უსვამს ამ პროცესის დროს სათანადო მართვის მნიშვნელობას, თანმიმდევრული შედეგების უზრუნველსაყოფად. მაგალითად, ერთმა კვლევამ დაადგინა, რომ FICOLL- ის სწორად გამოყენებამ შეიძლება მიაღწიოს სიწმინდეს 97% -მდე მინიმალური ცვალებადობით. ქვემოთ მოყვანილი ცხრილი ადარებს PBMC იზოლაციის სხვადასხვა ინკუბაციურ მეთოდებს:

იმუნომაგნიტური განცალკევების მეთოდები

იმუნომაგნიტური განცალკევება კიდევ ერთი მოწინავე ტექნიკაა PBMC– ების იზოლირებისთვის. ეს მეთოდი იყენებს მაგნიტურ მძივებს, რომლებიც დაფარულია ანტისხეულებით, უჯრედების სპეციფიკური ტიპების დასახმარებლად. პოზიტიური დახარისხება იზოლირებს უჯრედებს მძივებთან დაკავშირებით, ხოლო უარყოფითი დახარისხება შლის არასასურველ უჯრედებს, რის გამოც სასურველ მოსახლეობას ხელუხლებელი ტოვებს.

კვლევებმა აჩვენა, რომ უარყოფითი დახარისხება ინარჩუნებს უჯრედების სიცოცხლისუნარიანობას და არ ახდენს გავლენას აქტივაციის მარკერებზე, როგორიცაა IL - 2R (CD25). ამის საპირისპიროდ, პოზიტიურმა დახარისხებამ შეიძლება შეამციროს სიცოცხლისუნარიანობა და გააქტიურების მოცულობა, განსაკუთრებით სტიმულაციის შემდეგ. ქვემოთ მოყვანილი ცხრილი აჯამებს ამ დასკვნებს:

ეს მეთოდი განსაკუთრებით სასარგებლოა, როდესაც გჭირდებათ სპეციფიკური უჯრედების პოპულაცია კვლევისთვის ან თერაპიული პროგრამებისთვის.

ადამიანის PBMC– ების პროგრამები კვლევასა და მედიცინაში

როლი CAR - T უჯრედების თერაპიის განვითარებაში

ადამიანის PBMC– ები მნიშვნელოვან როლს ასრულებენ CAR - T უჯრედული თერაპიის წინსვლაში, გარკვეული კიბოსთვის დამახასიათებელი მკურნალობა. ეს უჯრედები ემსახურებიან როგორც საწყის მასალას CAR - T უჯრედების წარმოქმნისთვის, რომლებიც ინჟინერირებულია კიბოს უჯრედების მიზნებისთვის და განადგურებისთვის. თქვენ გაგიკვირდებათ, რამდენად ეფექტურია PBMC– ები ამ პროცესში. კვლევებმა აჩვენა შთამბეჭდავი შედეგები:

• კულტურის 11 დღის შემდეგ, 1 × 10^7 გაყინულ PBMC– ს შეუძლია წარმოქმნას მინიმუმ 1.48 × 10^9 Mesocar - T უჯრედები, 30% -ზე მეტი CAR+ უჯრედებით.

• ციტოტოქსიურობის ტესტებში ნაჩვენებია mesocar - t უჯრედები, რომლებიც წარმოიქმნება სუფთა და კრიოპრესირებული PBMC- ებიდან, ანალოგიურად ასრულებენ. 4: 1 -ის მიზნობრივი თანაფარდობით, მათი ციტოტოქსიურობა მერყეობს 91.02%-მდე - 100.00%და 95,46%- 98.07%, შესაბამისად.

• 2: 1 -ის უფრო დაბალი თანაფარდობითაც კი, ციტოტოქსიურობის მნიშვნელოვანი განსხვავება არ აღინიშნება.

ეს დასკვნები ხაზს უსვამს PBMC– ების საიმედოობას ეფექტური მანქანის უჯრედების წარმოებაში, თუნდაც გრძელვადიანი - ვადაგადაცილებული შენახვის შემდეგ.

გამოიყენეთ ნარკომანიისა და ტოქსიკურობის შესწავლა

PBMC– ები ფასდაუდებელია ნარკომანიისა და ტოქსიკურობის კვლევებში. ისინი უზრუნველყოფენ ადამიანს - შესაბამის მოდელს, რათა შეაფასონ, თუ როგორ ურთიერთქმედებენ წამლები იმუნურ უჯრედებთან. მაგალითად, მკვლევარებმა შეამოწმეს წამლის კვინაკრინი PBMC– ებზე, რათა შეაფასონ მისი ტოქსიკურობა. ქვემოთ მოყვანილი ცხრილი აჯამებს დასკვნებს:

ეს შედეგები ცხადყოფს, რომ PBMC– ები აქტიურად რეაგირებენ კვინაკრინზე, თუნდაც ტოქსიკურობის დაბალ დონეზე. ეს მათ საიმედო ინსტრუმენტად აქცევს ახალ წამლებზე იმუნური პასუხების პროგნოზირებას.

ბიომარკერის აღმოჩენა და იმუნური მონიტორინგი

PBMC– ები აუცილებელია ბიომარკერების იდენტიფიცირებისა და იმუნური ჯანმრთელობის მონიტორინგისთვის. ბიომარკერები ბიოლოგიური პროცესების ან დაავადებების გაზომვადი ინდიკატორებია. PBMC– ების ანალიზით, შეგიძლიათ აღმოაჩინოთ ბიომარკერები, რომლებიც გამოავლენენ იმუნურ მოქმედებას, დაავადების პროგრესირებას ან მკურნალობის ეფექტურობას. მაგალითად, მკვლევარები ხშირად ზომავს ციტოკინის დონეს PBMC- ში, ინფექციების ან თერაპიების დროს იმუნური პასუხების მონიტორინგისთვის. ეს მიდგომა ხელს უწყობს ინდივიდუალურ პაციენტებს მკურნალობას, შედეგების გაუმჯობესებას.

PBMCS ასევე საშუალებას იძლევა გრძელვადიანი - იმუნური მონიტორინგი. მათი სტაბილურობა და ადაპტირება მათ იდეალურს ხდის იმუნური ფუნქციის ცვლილებების თვალყურის დევნისთვის დროთა განმავლობაში. ეს განსაკუთრებით სასარგებლოა ქრონიკულ დაავადებებში ან გახანგრძლივებული მკურნალობის დროს.

ადამიანის PBMC– ები შეუცვლელია იმუნოლოგიის გაგებაში და წინსვლაში. მათი მრავალფეროვანი შემადგენლობა - ლიმფოციტები, მონოციტები და დენდრიტული უჯრედები - საშუალებას აძლევს მათ შეასრულონ კრიტიკული იმუნური ფუნქციები. იზოლაციის ტექნიკა, როგორიცაა FICOLL გადახურვა და იმუნომაგნიტური განცალკევება, უზრუნველყოფს მაღალი - სიწმინდის PBMC– ებს კვლევისთვის ან თერაპიული გამოყენებისთვის.

მათი პროგრამები მოიცავს ფართო სპექტრს:

• ათასობით კვლევამ გამოიყენა PBMC– ები კლინიკურ კვლევაში ბოლო 50 წლის განმავლობაში.

• ისინი სასიცოცხლოდ მნიშვნელოვანია CAR - T უჯრედული თერაპიისთვის, წამლების განვითარებისა და იმუნური რეაგირების ანალიზისთვის.

• PBMC– ები ხელს უწყობენ ბიომარკერის აღმოჩენას, პაციენტთა სტრატიფიკაციას და იშვიათ დაავადების კვლევას.

PBMC– ების გამოყენებით, შეგიძლიათ გახსნათ ახალი შესაძლებლობები იმუნოლოგიაში და შეიმუშაოთ ინოვაციური მკურნალობა, რომლებიც გარდაქმნიან ჯანდაცვას.

კითხვები

რისთვის გამოიყენება PBMC– ები სამედიცინო გამოკვლევაში?

PBMCS ეხმარება მკვლევარებს შეისწავლონ იმუნური პასუხები, შეამოწმონ ახალი წამლები და შეიმუშაონ თერაპიები, როგორიცაა CAR - T უჯრედების მკურნალობა. მათი ადაპტირება და სტაბილურობა მათ იდეალურს ხდის ექსპერიმენტებისთვის, რომლებიც საჭიროებენ ადამიანის იმუნურ უჯრედებს.

როგორ ინახავთ PBMC– ს მომავალი გამოყენებისთვის?

შეგიძლიათ შეინახოთ PBMC– ები კრიოპრეზირებით მათ თხევადი აზოტით. ეს მეთოდი წლების განმავლობაში ინარჩუნებს მათ სიცოცხლისუნარიანობას და ფუნქციონირებას, რაც საშუალებას გაძლევთ გამოიყენოთ ისინი გრძელვადიან კვლევებში ან თერაპიულ პროგრამებში.

PBMC– ები იგივეა, რაც სისხლის თეთრი უჯრედები?

არა ზუსტად. PBMC– ები არის სისხლის თეთრი უჯრედების ქვესათაური, რომელიც მოიცავს ლიმფოციტებს, მონოციტებს და დენდრიტულ უჯრედებს. ისინი გამორიცხავენ გრანულოციტებს, როგორიცაა ნეიტროფილები, რომლებიც ასევე სისხლის თეთრი უჯრედების ნაწილია.

შეიძლება გამოყენებულ იქნას PBMC– ები აუტოიმუნური დაავადებების შესასწავლად?

დიახ! PBMC– ები ღირებულია აუტოიმუნური დაავადებების შესასწავლად. ისინი დაგეხმარებათ გაანალიზოთ იმუნური უჯრედების ქცევა, ციტოკინის წარმოება და გენეტიკური მარკერები, რაც უზრუნველყოფს დაავადების მექანიზმებსა და პოტენციურ მკურნალობას.

PBMC იზოლაცია რთული პროცესია?

არა ნამდვილად. ტექნიკა, როგორიცაა FICOLL გადახურვის მეთოდი ან იმუნომაგნიტური განცალკევება, PBMC იზოლაციას პირდაპირ ხდის. სათანადო ტრენინგით და აღჭურვილობით, თქვენ შეგიძლიათ მიაღწიოთ მაღალ - სიწმინდის ნიმუშებს თქვენი კვლევისთვის.