ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳು: ನಾನ್ - ಕ್ಲಿನಿಕಲ್ ಇನ್ ವಿಟ್ರೊ drug ಷಧ ಸಂಶೋಧನೆಯನ್ನು ಮುನ್ನಡೆಸಲು ಒಂದು ನಿರ್ಣಾಯಕ ಸಾಧನ

ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳು: ನಾನ್ - ಕ್ಲಿನಿಕಲ್ ಇನ್ ವಿಟ್ರೊ drug ಷಧ ಸಂಶೋಧನೆಯನ್ನು ಮುನ್ನಡೆಸಲು ಒಂದು ನಿರ್ಣಾಯಕ ಸಾಧನ

ಯಕೃತ್ತು, drug ಷಧ ಮಾನ್ಯತೆಗಾಗಿ ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಅಂಗವಾಗಿ, drug ಷಧ ಚಯಾಪಚಯ ಮತ್ತು ವಿಷತ್ವ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಗಳಲ್ಲಿ ನಿರ್ಣಾಯಕ ಪಾತ್ರ ವಹಿಸುತ್ತದೆ. ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳು ಸೆಲ್ಯುಲಾರ್ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳು ಮತ್ತು ಕಿಣ್ವಗಳು ಮತ್ತು ಕಾಫ್ಯಾಕ್ಟರ್‌ಗಳ ಶಾರೀರಿಕ ಮಟ್ಟವನ್ನು ಹೊಂದಿವೆ, ಇದರಲ್ಲಿ ಮೆಂಬರೇನ್ - ಸೈಟೋಕ್ರೋಮ್ ಪಿ 450 (ನಯವಾದ ಎಂಡೋಪ್ಲಾಸ್ಮಿಕ್ ರೆಟಿಕ್ಯುಲಮ್‌ನಲ್ಲಿ ಮಿಶ್ರ - ಫಂಕ್ಷನ್ ಆಕ್ಸಿಡೇಸ್) ಮತ್ತು ಸೈಟೋಸೋಲಿಕ್ ಎಸ್ಟೆರೇಸ್‌ಗಳು, ಎಲ್ಲಾ ಚಯಾಪಚಯ ಮಾರ್ಗಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಳ್ಳುತ್ತವೆ. ಈ ಕಾರಣಕ್ಕಾಗಿ, ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳನ್ನು ವಿಟ್ರೊ ಪಿತ್ತಜನಕಾಂಗದ ಮಾದರಿಗಳಲ್ಲಿ ನಿರ್ಮಿಸುವ ಚಿನ್ನದ ಮಾನದಂಡವೆಂದು ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ಪರಿಗಣಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು drug ಷಧ ಸಂವಹನ, drug ಷಧ ಚಯಾಪಚಯ ಮತ್ತು ವಿಷತ್ವ ಅಧ್ಯಯನಗಳಲ್ಲಿ ಸಂಶೋಧಕರು ಒಲವು ತೋರುತ್ತಾರೆ. ಈ ಲೇಖನವು ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳು ಮತ್ತು drug ಷಧ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಯಲ್ಲಿ ಅವುಗಳ ಅನ್ವಯಗಳ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ 2 ಡಿ ಮತ್ತು 3 ಡಿ ಸಂಸ್ಕೃತಿ ಮಾದರಿಗಳ ಅವಲೋಕನವನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ.

ಕೀವರ್ಡ್ಗಳು: ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳು, 2 ಡಿ ಕೃಷಿ, 3 ಡಿ ಕೃಷಿ, ಆರ್ಗನಾಯ್ಡ್ಸ್, ಸಿಒ - ಸಂಸ್ಕೃತಿ.

1. 1. ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆ

ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯು ವಿಟ್ರೊ ಪಿತ್ತಜನಕಾಂಗದ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಸ್ಥಾಪಿಸುವಲ್ಲಿ ಒಂದು ನಿರ್ಣಾಯಕ ಹೆಜ್ಜೆಯಾಗಿದೆ, ಎರಡು - ಸ್ಟೆಪ್ ಕಾಲಜನೇಸ್ ಪರ್ಫ್ಯೂಷನ್ ವಿಧಾನವನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಸಣ್ಣ ಪ್ರಾಣಿಗಳಲ್ಲಿ, ಪಿತ್ತಜನಕಾಂಗದ ಪರ್ಫ್ಯೂಷನ್ ಅನ್ನು ಪೋರ್ಟಲ್ ಸಿರೆ ಅಥವಾ ಕೆಳಮಟ್ಟದ ವೆನಾ ಕ್ಯಾವಾ ಮೂಲಕ ಮಾಡಬಹುದು, ಆದರೆ ದೊಡ್ಡ ಪ್ರಾಣಿಗಳಿಗೆ ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಪಿತ್ತಜನಕಾಂಗದ ಹಾಲೆಗಳು ಅಥವಾ ಭಾಗಗಳ ಮೂಲಕ ಸುಗಂಧ ದ್ರವ್ಯದ ಅಗತ್ಯವಿರುತ್ತದೆ. ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳ ಯಶಸ್ವಿ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯ ಮೇಲೆ ಹಲವಾರು ಪ್ರಮುಖ ಅಂಶಗಳು ಪ್ರಭಾವ ಬೀರುತ್ತವೆ: ಮೊದಲನೆಯದಾಗಿ, ಕಾಲಜನೇಸ್ - ಸೈಟೊಟಾಕ್ಸಿಕ್ ಅಲ್ಲ. ಎರಡನೆಯದಾಗಿ, ಜೀರ್ಣಕ್ರಿಯೆಯ ಸಮಯವು ನಿರ್ಣಾಯಕವಾಗಿದೆ- ಜೀರ್ಣಕ್ರಿಯೆ ಮತ್ತು ಅದಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚಿನ - ಜೀರ್ಣಕ್ರಿಯೆ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ ಇಳುವರಿ ಮತ್ತು ಕಾರ್ಯಸಾಧ್ಯತೆಯನ್ನು ರಾಜಿ ಮಾಡಿಕೊಳ್ಳಬಹುದು. ಮೂರನೆಯದಾಗಿ, ಯಕೃತ್ತಿನ ಸ್ಥಿತಿ ಸೂಕ್ತವಾಗಿರಬೇಕು, ಏಕೆಂದರೆ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳು ರಕ್ತಕೊರತೆಯ ಹಾನಿಗೆ ಹೆಚ್ಚು ಸೂಕ್ಷ್ಮವಾಗಿರಬೇಕು. ಚಯಾಪಚಯ ದರವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಲು ಮತ್ತು ಚಯಾಪಚಯ ಹೈಪೋಕ್ಸಿಯಾ ಮತ್ತು ನಂತರದ ಇಷ್ಕೆಮಿಯಾವನ್ನು ತಡೆಯಲು ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ ತಯಾರಿಕೆಗಾಗಿ ಬಳಸುವ ಯಕೃತ್ತು ವೇಗವಾಗಿ ತಂಪಾಗಿಸಬೇಕು.

Drug ಷಧ ಸಂಶೋಧನೆಯಲ್ಲಿ ಬಳಸುವ ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳ ಮಾನದಂಡಗಳು ಹೀಗಿವೆ:

1. 2. ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ 2 ಡಿ ಸಂಸ್ಕೃತಿ

ಅಮಾನತು ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ ಮಾದರಿ

ಇದು ಸಂಪೂರ್ಣ drug ಷಧ - ಚಯಾಪಚಯಗೊಳಿಸುವ ಕಿಣ್ವಗಳು ಮತ್ತು ಕೋಫಾಕ್ಟರ್‌ಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿದೆ, ಇದು ವಿವಿಧ ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ಲಿಯರೆನ್ಸ್ ಮಾರ್ಗಗಳನ್ನು ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡಲು ಸೂಕ್ತವಾಗಿದೆ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಅಮಾನತುಗೊಳಿಸುವ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳ ಕಾರ್ಯಸಾಧ್ಯತೆ ಮತ್ತು drug ಷಧದ ಚಟುವಟಿಕೆ - ವಿಟ್ರೊ ಕಾವು ಸಮಯ ಹೆಚ್ಚಾದಂತೆ ಕಿಣ್ವಗಳನ್ನು ಚಯಾಪಚಯಗೊಳಿಸುವುದು ಕ್ರಮೇಣ ಕಡಿಮೆಯಾಗುತ್ತದೆ, ಕಾವುಕೊಡುವ ಸಮಯವನ್ನು ಗರಿಷ್ಠ 4 ಗಂಟೆಗಳವರೆಗೆ ಸೀಮಿತಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ. ಮಧ್ಯಮದಿಂದ ಹೆಚ್ಚಿನ ಕ್ಲಿಯರೆನ್ಸ್ ದರಗಳೊಂದಿಗೆ drugs ಷಧಿಗಳ ತೆರವುಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯನ್ನು ಅಂದಾಜು ಮಾಡಲು ಈ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಕ್ಲಿಯರೆನ್ಸ್ ದರವು 20%ಕ್ಕಿಂತ ಕಡಿಮೆಯಿದ್ದಾಗ, ನಿಖರವಾದ ಕ್ಲಿಯರೆನ್ಸ್ ಮೌಲ್ಯಗಳನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ. ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ಅಮಾನತು ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ - ವಿಟ್ರೊ ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ರಿಯೆಯ ಮಾದರಿಗಳು ನಿಧಾನ - ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ರಿಯೆಗೆ ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಬಹುದಾದ ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ರಿಯೆಗಳನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸಲು ಸಾಕಾಗುವುದಿಲ್ಲ, ಹೀಗಾಗಿ ಈ ಸಂಯುಕ್ತಗಳ ಕ್ಲಿಯರೆನ್ಸ್ ದರಗಳು ಮತ್ತು ಚಯಾಪಚಯ ಉತ್ಪನ್ನಗಳನ್ನು to ಹಿಸುವ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಸೀಮಿತಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ. ಕಾವು ಸಮಯವನ್ನು 20 ಗಂಟೆಗಳ ಅಥವಾ ಅದಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚಿನದಕ್ಕೆ ವಿಸ್ತರಿಸಲು ಅಮಾನತು ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ ರಿಲೇ ವಿಧಾನವನ್ನು (ಚಿತ್ರ 1) ಬಳಸಬಹುದು.

ಅರ್ಜಿ:ಸಣ್ಣ ಅಣು .ಷಧಿಗಳಿಗೆ ಕಿಣ್ವ ಚಟುವಟಿಕೆ ಮತ್ತು ಚಯಾಪಚಯ ಸ್ಥಿರತೆ ಅಧ್ಯಯನಗಳು.

ಚಿತ್ರ 1. ಅಮಾನತು ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ ರಿಲೇ ವಿಧಾನ ವರ್ಗಾವಣೆ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆ

ಮೂಲ: ಡ್ರಗ್ ಮೆಟಾಬ್ ಡಿಸ್ಪೋಸ್, 2012,40 (9): 1860-1865

ಪ್ಲ್ಯಾಟ್ ಮಾಡಬಹುದಾದ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳ ಮಾದರಿ

ಕಾಲಜನ್ - ಲೇಪಿತ ಸಂಸ್ಕೃತಿ ಫಲಕಗಳಲ್ಲಿ 2 ಡಿ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯಲ್ಲಿ ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳನ್ನು ಬೆಳೆಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳು ಎಪಿಥೇಲಿಯಲ್ ರೂಪವಿಜ್ಞಾನವನ್ನು ಪ್ರದರ್ಶಿಸುತ್ತವೆ, ಚಾಚಿಕೊಂಡಿರುವ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ಗಳೊಂದಿಗೆ, ಇದನ್ನು ಹೆಚ್ಚಾಗಿ ಬೈನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೇಟೆಡ್ ರೂಪದಲ್ಲಿ ಪ್ರಸ್ತುತಪಡಿಸುತ್ತದೆ. ಏಕ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ ಮೊನೊಲೇಯರ್ ಸಂಸ್ಕೃತಿಯ ನ್ಯೂನತೆಗಳು ಸೇರಿವೆ: 1. ಜೀವಕೋಶದ ಧ್ರುವೀಯತೆ ಮತ್ತು ಕಾರ್ಯದ ಬದಲಾವಣೆ .2. ಸಾಮಾನ್ಯ ಕಾರ್ಯಕ್ಕೆ ಅಗತ್ಯವಿರುವ ಇತರ ಸಂಬಂಧಿತ ಕೋಶ ಪ್ರಕಾರಗಳ (ಅಂದರೆ, - ಪ್ಯಾರೆಂಚೈಮಲ್ ಕೋಶಗಳು) ಕೊರತೆ .3. ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳನ್ನು ಅವುಗಳ ಕಾರ್ಯಗಳನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸುವಲ್ಲಿ (ಪಿತ್ತರಸ ಆಮ್ಲ ಮತ್ತು ಸೀರಮ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಜೈವಿಕ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯಂತಹ) ಬೆಂಬಲಿಸಲು ಸಾಕಷ್ಟು ಪೋಷಕಾಂಶಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ಯಾರಾಕ್ರಿನ್ ಅಂಶಗಳನ್ನು ಒದಗಿಸಲು ಅಸಮರ್ಥತೆ.

ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್‌ಗಳು:

1). Drug ಷಧದ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ - drug ಷಧ ಸಂವಹನ:ಇದು ಕಿಣ್ವದ ಪ್ರಚೋದನೆ, ಕಿಣ್ವ ಪ್ರತಿಬಂಧ ಮತ್ತು ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಪೋರ್ಟರ್ ಅಧ್ಯಯನಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿದೆ. ಮೊದಲನೆಯದಾಗಿ, drug ಷಧವು ಪ್ರಚೋದಕವಾಗಿ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸಿದಾಗ, ಅದು drug ಷಧದ ಹೆಚ್ಚಿದ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಗೆ ಕಾರಣವಾಗಬಹುದು - ಕಿಣ್ವಗಳು ಮತ್ತು ಸಾಗಣೆದಾರರನ್ನು ಚಯಾಪಚಯಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ. ಸಿವೈಪಿ 2 ಬಿ 6, ಸಿವೈಪಿ 3 ಎ 4, ಸಿವೈಪಿ 2 ಸಿ 9, ಯುಜಿಟಿ, ಮತ್ತು ಎಂಆರ್‌ಪಿ 2 ನಂತಹ ಹಲವಾರು ಸಾರಿಗೆ ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳ ಫಿನೊಬಾರ್ಬಿಟಲ್ ಇಂಡಕ್ಷನ್ ನಂತಹ ಬಲವಾದ ಪ್ರಚೋದಕಗಳು ಏಕಕಾಲದಲ್ಲಿ ಅನೇಕ ಜೀನ್‌ಗಳನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸಬಹುದು. ಎರಡನೆಯದಾಗಿ, ಜಾತಿಗಳಿವೆ - ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳು ಪ್ರಚೋದಕಗಳಿಗೆ ಹೇಗೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯಿಸುತ್ತವೆ ಎಂಬುದರಲ್ಲಿ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳು. ಉದಾಹರಣೆಗೆ, ರಿಫಾಂಪಿಸಿನ್ ಮಾನವ ಮತ್ತು ಮೊಲದ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳಿಗೆ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿ ಪ್ರಚೋದಕವಾಗಿದೆ, ಆದರೆ ಇಲಿ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳ ಮೇಲೆ ಯಾವುದೇ ಪ್ರಚೋದನೆಯ ಪರಿಣಾಮವನ್ನು ಹೊಂದಿಲ್ಲ. ಅಂತಿಮವಾಗಿ, ಪ್ಲ್ಯಾಟ್ ಮಾಡಬಹುದಾದ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳ ಸಬ್‌ಪ್ಟಿಮಲ್ ಲೇಪನ ಸಾಂದ್ರತೆಯು P450 ಗಳ ತಳದ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಮತ್ತು ಕೃತಕವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿದ ಇಂಡಕ್ಷನ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳಿಗೆ ಕಾರಣವಾಗಬಹುದು. ಚಿತ್ರ 3 ರಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಿರುವಂತೆ, ಕಡಿಮೆ ಲೇಪನ ಸಾಂದ್ರತೆಗಳಲ್ಲಿನ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳು CYP1A2, CYP2B6, ಮತ್ತು CYP3A4 ನ ಕಡಿಮೆ ತಳದ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತವೆ, ಆದರೆ ಬಲವಾದ ಇಂಡಕ್ಷನ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳು. ಆದ್ದರಿಂದ, ಶಾರೀರಿಕವಾಗಿ ಸಂಬಂಧಿಸಿದ ಡೇಟಾವನ್ನು ಪಡೆಯಲು ಸೂಕ್ತವಾದ ಲೇಪನ ಸಾಂದ್ರತೆಯಲ್ಲಿ ಆರೋಗ್ಯಕರ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳು ಅವಶ್ಯಕ.

ಚಿತ್ರ 2. ಕ್ರಯೋಪ್ರೆಸರ್ವ್ಡ್ ಮಾನವ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳ ಲೇಪನ ಸಾಂದ್ರತೆ ಮತ್ತು ಕಿಣ್ವದ ಪ್ರಚೋದನೆಯ ನಡುವಿನ ಸಂಬಂಧ

ಮೂಲ: ಪ್ರಸ್ತುತ ಡ್ರಗ್ ಡಿಸ್ಕವರಿ ಟೆಕ್ನಾಲಜೀಸ್, 2010, 7: 188 - 198

2). ಹೆಪಟೊಟಾಕ್ಸಿಸಿಟಿ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ: ಜೀವಕೋಶದ ರೂಪವಿಜ್ಞಾನ, ವ್ಯಾಕ್ಯೂಲ್ ಮತ್ತು ಲಿಪಿಡ್ ಹನಿ ಒಟ್ಟುಗೂಡಿಸುವಿಕೆ ಮತ್ತು ಕೋಶ ಲಗತ್ತು/ಬೇರ್ಪಡುವಿಕೆ ಮುಂತಾದ ಬೆಳಕಿನ ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕದ ಅಡಿಯಲ್ಲಿ ರೂಪವಿಜ್ಞಾನದ ಬದಲಾವಣೆಗಳನ್ನು ಗಮನಿಸುವುದು. ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ ನೆಕ್ರೋಸಿಸ್ನ ಪತ್ತೆ (ಆಸ್ಪರ್ಟೇಟ್ ಅಮಿನೊಟ್ರಾನ್ಸ್ಫೆರೇಸ್, ಲ್ಯಾಕ್ಟೇಟ್ ಡಿಹೈಡ್ರೋಜಿನೇಸ್, ಮತ್ತು ಅಲನೈನ್ ಅಮಿನೊಟ್ರಾನ್ಸ್ಫೆರೇಸ್) ಮತ್ತು ಅಪೊಪ್ಟೋಸಿಸ್ (ಡಿಎನ್ಎ ವಿಘಟನೆ) ನಿಂದ ಸೂಚಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿದೆ. ಸೈಟೊಕಿನ್ - ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆಯ ಸೈಟೊಟಾಕ್ಸಿಸಿಟಿಗಾಗಿ, ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳ ಏಕ ಮೊನೊಲೇಯರ್ ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳು ನೆರೆಯ ಪ್ಯಾರೆಂಚೈಮಲ್ ಕೋಶಗಳಿಂದ ಬಿಡುಗಡೆಯಾದ ವಸ್ತುಗಳ ನಿಯಂತ್ರಣದ ಕಾರಣದಿಂದಾಗಿ ವಿಷಕಾರಿ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳನ್ನು cannot ಹಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಿಲ್ಲ, ಉದಾಹರಣೆಗೆ ಕುಫ್ಫರ್ ಕೋಶಗಳು, ಸ್ಟೆಲೇಟ್ ಕೋಶಗಳು ಮತ್ತು ಸೈನುಸಾಯ್ಡಲ್ ಎಂಡೋಥೆಲಿಯಲ್ ಕೋಶಗಳು.

3). ನಿಧಾನ ಚಯಾಪಚಯಗೊಳಿಸುವ ಸಂಯುಕ್ತ ಕ್ಲಿಯರೆನ್ಸ್ ಮತ್ತು ಅದರ ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ರಿಯೆಗಳ ಅಧ್ಯಯನಕ್ಕಾಗಿ "ರಿಲೇ ವಿಧಾನ": Drug ಷಧದ ಚಟುವಟಿಕೆ - ಪ್ಲ್ಯಾಟ್ ಮಾಡಬಹುದಾದ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳಲ್ಲಿ ಕಿಣ್ವಗಳನ್ನು ಚಯಾಪಚಯಗೊಳಿಸುವುದು 24 ಗಂಟೆಗಳ ಲೇಪನದ ನಂತರ ಕಡಿಮೆಯಾಗಲು ಪ್ರಾರಂಭಿಸುತ್ತದೆ. ಸೀರಮ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಪ್ಲ್ಯಾಟ್ ಮಾಡಬಹುದಾದ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳನ್ನು ಕಾವುಕೊಟ್ಟ ನಂತರ - 24 ಗಂಟೆಗಳ ಕಾಲ ಆಸಕ್ತಿಯ ಸಂಯುಕ್ತವನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಉಚಿತ ಮಾಧ್ಯಮ, ಮಾಧ್ಯಮವನ್ನು ಸಂಗ್ರಹಿಸಿ ಬೆರೆಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ನಂತರ ಹೆಚ್ಚಿನ ಅಧ್ಯಯನಕ್ಕಾಗಿ ಹೊಸ ಪ್ಲ್ಯಾಟ್ ಮಾಡಬಹುದಾದ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳಿಗೆ ವರ್ಗಾಯಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ (ಚಿತ್ರ 3).

ಚಿತ್ರ 3. ಪ್ಲ್ಯಾಟ್ ಮಾಡಬಹುದಾದ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ ರಿಲೇ ವಿಧಾನ ವರ್ಗಾವಣೆ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆ

ಮೂಲ: drug ಷಧ ಚಯಾಪಚಯ ಪತ್ರಗಳು, 2016, 10: 3 - 15

3). ಸೆಲ್ಯುಲಾರ್ ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುವಿಕೆ, ಎಂಡೊಸೈಟೋಸಿಸ್, ಎಂಡೋಸೋಮಲ್ ಎಸ್ಕೇಪ್ ಮತ್ತು ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ - ಉದ್ದೇಶಿತ ಸಣ್ಣ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲ .ಷಧಿಗಳ ಗುರಿ ಜೀನ್‌ನ ಮೇಲೆ ಮೌನಗೊಳಿಸುವ ಪರಿಣಾಮಗಳನ್ನು ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡಿ.

ಸ್ಯಾಂಡ್‌ವಿಚ್ ಕೃಷಿ ಮಾದರಿ

ವಿಟ್ರೊದಲ್ಲಿ, ಸ್ಯಾಂಡ್‌ವಿಚ್ ಕೃಷಿ ಎಂದು ಕರೆಯಲ್ಪಡುವ ವಿವೋ ರಚನೆಗಳಲ್ಲಿ ಪುನರ್ನಿರ್ಮಿಸಲು ಕಾಲಜನ್ ಅಥವಾ ಮ್ಯಾಟ್ರಿಜೆಲ್‌ನ ಎರಡು ಪದರಗಳ ನಡುವೆ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳನ್ನು ಬೆಳೆಸಬಹುದು. ಜೆಲ್ - ಕಾಲಜನ್ (ಸ್ಯಾಂಡ್‌ವಿಚ್ ರಚನೆ) ಯ ಎರಡು ಪದರಗಳ ನಡುವೆ ಸಂಸ್ಕರಿಸಿದ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳು ಜೀವಕೋಶಗಳ ರೂಪವಿಜ್ಞಾನ ಮತ್ತು ಕಾರ್ಯಸಾಧ್ಯತೆಯನ್ನು ಸುಧಾರಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಅವುಗಳ ಕ್ರಿಯಾತ್ಮಕತೆಯನ್ನು ದೀರ್ಘಕಾಲದವರೆಗೆ ಕಾಪಾಡಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ. ಇದಲ್ಲದೆ, ಸ್ಯಾಂಡ್‌ವಿಚ್ ಸಂಸ್ಕೃತಿಯಲ್ಲಿನ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳು ಧ್ರುವೀಯತೆಯನ್ನು ಪುನಃಸ್ಥಾಪಿಸಬಹುದು, ಇದು ಬಾಸೊಲೇಟರಲ್ ಮತ್ತು ಕಾಲುವೆ ಸಾಗಣೆದಾರರ ಸರಿಯಾದ ಸ್ಥಳೀಕರಣಕ್ಕೆ ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡುತ್ತದೆ, ಜೊತೆಗೆ ಕ್ರಿಯಾತ್ಮಕ ಪಿತ್ತರಸ ಜಾಲಗಳ ರಚನೆಗೆ ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡುತ್ತದೆ (ಚಿತ್ರ 4).

ಚಿತ್ರ 4. ಮಾನವ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ ಸ್ಯಾಂಡ್‌ವಿಚ್ ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿ ಸಾಗಣೆದಾರರ ಧ್ರುವೀಕರಿಸಿದ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ

ಮೂಲ: ಪ್ರಸ್ತುತ ಡ್ರಗ್ ಡಿಸ್ಕವರಿ ಟೆಕ್ನಾಲಜೀಸ್, 2010, 7, 188 - 198

ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್‌ಗಳು:

1. 1). ಸಂಯುಕ್ತಗಳ ಪಿತ್ತರಸದ ವಿಸರ್ಜನೆಯನ್ನು ಅಂದಾಜು ಮಾಡುವುದು.
2. 2). ಅಂತರ್ವರ್ಧಕ ಮತ್ತು ಹೊರಗಿನ ಸಂಯುಕ್ತಗಳು ಮತ್ತು ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ರಿಯೆಗಳ ಯಕೃತ್ತಿನ ಮತ್ತು ಪಿತ್ತರಸ ವಿತರಣೆಯನ್ನು ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡುವುದು.
3. 3). ಚಯಾಪಚಯ ಮತ್ತು ಸಾಗಣೆದಾರರಿಂದ ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆ ವಹಿಸಿದ ಕ್ಲಿಯರೆನ್ಸ್ ಅನ್ನು ಅಂದಾಜು ಮಾಡುವುದು ಮತ್ತು ಶರೀರಶಾಸ್ತ್ರ - ಆಧಾರಿತ ಫಾರ್ಮಾಕೊಕಿನೆಟಿಕ್ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ನಿರ್ಮಿಸುವುದು.
4. 4). ಹೆಪಟೊಟಾಕ್ಸಿಸಿಟಿಯನ್ನು ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡುವುದು ಮತ್ತು ಕ್ಲಿನಿಕಲ್ drug ಷಧಕ್ಕಾಗಿ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳನ್ನು ಒದಗಿಸುವುದು - ಯಕೃತ್ತಿನ ಗಾಯದಿಂದ ಪ್ರೇರಿತವಾಗಿದೆ. ಸಂಭಾವ್ಯ drug ಷಧವನ್ನು to ಹಿಸಲು ಡೇಟಾವನ್ನು ಸಿಸ್ಟಮ್ಸ್ ಫಾರ್ಮಾಕಾಲಜಿ ಮಾದರಿಗಳಲ್ಲಿ ಸಂಯೋಜಿಸಲಾಗಿದೆ - ಮಾನವರಲ್ಲಿ ಯಕೃತ್ತಿನ ಗಾಯ.
5.  
   1. 3. ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ 3D ಸಂಸ್ಕೃತಿ

6. 3D ಸಂಸ್ಕೃತಿ ವ್ಯವಸ್ಥೆಗಳಲ್ಲಿ, ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳನ್ನು ಮೂರು - ಆಯಾಮದ ಮ್ಯಾಟ್ರಿಕ್ಸ್‌ನಲ್ಲಿ ಬೆಳೆಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದು 2 ಡಿ ಮೊನೊಲೇಯರ್ ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ ವಿವೋ ಲಿವರ್ ವಾಸ್ತುಶಿಲ್ಪವನ್ನು ಉತ್ತಮವಾಗಿ ಅನುಕರಿಸುತ್ತದೆ. ಈ ವ್ಯವಸ್ಥೆಗಳು ಕೋಶ - ಕೋಶ ಮತ್ತು ಕೋಶ - ಮ್ಯಾಟ್ರಿಕ್ಸ್ ಸಂವಹನಗಳನ್ನು ಉತ್ತೇಜಿಸುತ್ತವೆ, ಇದು ಯಕೃತ್ತಿನ ಚಯಾಪಚಯ, ಪ್ರೋಟೀನ್ ಸ್ರವಿಸುವಿಕೆ ಮತ್ತು ಪಿತ್ತರಸ ರಚನೆ ಸೇರಿದಂತೆ ಯಕೃತ್ತಿನ ಶಾರೀರಿಕ ಕಾರ್ಯಗಳನ್ನು ಪುನಃಸ್ಥಾಪಿಸುತ್ತದೆ. ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ 3D ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳನ್ನು ಯಕೃತ್ತನ್ನು ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡಲು ಬಳಸಬಹುದು - ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಕಾರ್ಯಗಳು ವಿವೋ - ನಂತಹ ಪರಿಸರದಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚು, drug ಷಧ ಪರೀಕ್ಷೆ, ವಿಷತ್ವ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮತ್ತು ರೋಗ ಮಾಡೆಲಿಂಗ್‌ಗೆ ಅನುಕೂಲಗಳನ್ನು ನೀಡುತ್ತದೆ.

   ಗೋಳಾಕಾರದ ಮಾದರಿ

ಅಲ್ಟ್ರಾ - ಕಡಿಮೆ ಲಗತ್ತು ಸಂಸ್ಕೃತಿ, ಹ್ಯಾಂಗಿಂಗ್ ಡ್ರಾಪ್ ಸಂಸ್ಕೃತಿ ಮತ್ತು ಕಾಂತೀಯ ಕೋಶ ಸಂಸ್ಕೃತಿ (ಚಿತ್ರ 5) ನಂತಹ ತಂತ್ರಗಳ ಮೂಲಕ, ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳು ಬಾಹ್ಯ ಮ್ಯಾಟ್ರಿಕ್‌ಗಳನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸದೆ 150 - 175 µm ವ್ಯಾಸವನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಗೋಳಾಕಾರದ ಸಮುಚ್ಚಯಗಳಾಗಿ ಒಟ್ಟುಗೂಡಿಸಬಹುದು. ಗೋಳಾಕಾರದ ಸಂಸ್ಕೃತಿಯ ಒಂದು ಪ್ರಯೋಜನವೆಂದರೆ, ಪ್ರತಿ ಗೋಳಾಕಾರಕ್ಕೆ ಕೇವಲ 1,330 - 2,000 ಕೋಶಗಳು ಬೇಕಾಗುತ್ತವೆ, ಇತರ 3D ಸಂಸ್ಕೃತಿ ತಂತ್ರಗಳಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ ಕೋಶಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಇತ್ತೀಚಿನ ಅಧ್ಯಯನಗಳು ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ ಗೋಳಾಕಾರದ ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳು 5 ವಾರಗಳವರೆಗೆ ಉಳಿಸಿಕೊಳ್ಳಬಲ್ಲವು, ಸಿವೈಪಿ ಕಿಣ್ವ ಚಟುವಟಿಕೆಯು 8 ನೇ ದಿನ ಮತ್ತು 35 ರ ನಡುವೆ ಬಹುತೇಕ ಬದಲಾಗದೆ ಉಳಿದಿದೆ. ಪ್ರೋಟಿಯೋಮಿಕ್ಸ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯು ಸ್ಯಾಂಡ್‌ವಿಚ್ ಸಂಸ್ಕೃತಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ, drug ಷಧ ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆ, ವಿತರಣೆ, ಚಯಾಪಚಯ ಮತ್ತು ಉತ್ಕೃಷ್ಟತೆಗೆ ಕಾರಣವಾದ ಕಿಣ್ವಗಳು ಸ್ಪೆರಾಯ್ಡ್ ಸಂಸ್ಕೃತಿಯಲ್ಲಿ 14 ದಿನಗಳವರೆಗೆ ಉತ್ತಮವಾಗಿ ಸಂರಕ್ಷಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿವೆ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಜೀವಕೋಶದ ಸಮುಚ್ಚಯಕ್ಕಿಂತ ಯಕೃತ್ತು ಹೆಚ್ಚು ಸಂಕೀರ್ಣವಾಗಿದೆ. ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳ ಬಾಸೊಲೇಟರಲ್ ಭಾಗವು ರಕ್ತದೊಂದಿಗೆ ಸಂವಹನ ನಡೆಸುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ಪಿತ್ತರಸವು ಅಪಿಕಲ್ ಕಡೆಯಿಂದ ಹರಿಯುತ್ತದೆ, ಇದು ಸಂಕೀರ್ಣ ಪಿತ್ತಜನಕಾಂಗದ ಲೋಬುಲ್ ರಚನೆಯ ಪ್ರಮುಖ ಲಕ್ಷಣವಾಗಿದೆ, ಮತ್ತು ಇದನ್ನು ಇನ್ನೂ ಗೋಳಾಕಾರದ ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿ ಪುನರಾವರ್ತಿಸಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ.

ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್‌ಗಳು:

1. 1). ನಿಧಾನ ಚಯಾಪಚಯಗೊಳಿಸುವ ಸಂಯುಕ್ತ ಕ್ಲಿಯರೆನ್ಸ್ ಮತ್ತು ಅದರ ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ರಿಯೆಗಳ ಅಧ್ಯಯನ.
2. 2). ಹೆಪಟೊಟಾಕ್ಸಿಸಿಟಿ ಸಂಶೋಧನೆ.
3. 3). ಸೆಲ್ಯುಲಾರ್ ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುವಿಕೆ, ಎಂಡೊಸೈಟೋಸಿಸ್, ಎಂಡೋಸೋಮಲ್ ಎಸ್ಕೇಪ್ ಮತ್ತು ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ನ ಗುರಿ ಜೀನ್‌ಗಳ ಮೇಲೆ ಮೌನಗೊಳಿಸುವ ಪರಿಣಾಮಗಳ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ - ಉದ್ದೇಶಿತ ಸಣ್ಣ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲ .ಷಧಿಗಳು.

ಚಿತ್ರ 5. ಗೋಳಾಕಾರದ ಸಂಸ್ಕೃತಿ ವಿಧಾನ

ಯಕೃತ್ತಿನ ಆರ್ಗನಾಯ್ಡ್ಸ್ ಮಾದರಿ

ಆರ್ಗನಾಯ್ಡ್‌ಗಳ ಒಮ್ಮತದ ವ್ಯಾಖ್ಯಾನ ಹೀಗಿದೆ: ಕಾಂಡಕೋಶಗಳು, ಮೂಲಜನಕ ಕೋಶಗಳು ಅಥವಾ ವಿಭಿನ್ನ ಕೋಶಗಳಿಂದ ಪಡೆದ 3D ರಚನೆಗಳು, ವಿಟ್ರೊದಲ್ಲಿನ ಸ್ಥಳೀಯ ಅಂಗಾಂಶದ ಕೆಲವು ಕಾರ್ಯಗಳು ಮತ್ತು ರಚನೆಗಳನ್ನು ಪುನರುತ್ಪಾದಿಸುವ ಸಾಮರ್ಥ್ಯ ಹೊಂದಿವೆ, ವಿವೋ ಸೂಕ್ಷ್ಮ ಪರಿಸರ ಮತ್ತು ಕೋಶವನ್ನು - ಮಾನವನ ಯಕೃತ್ತಿನ ಜೀವಶಾಸ್ತ್ರ ಸಂಶೋಧನೆಗೆ ಯಕೃತ್ತಿನ ಆರ್ಗನಾಯ್ಡ್‌ಗಳನ್ನು ಅತ್ಯಾಧುನಿಕ ಮಾದರಿ ಎಂದು ಗುರುತಿಸಲಾಗಿದೆ.

ಪಿತ್ತಜನಕಾಂಗದ ಆರ್ಗನಾಯ್ಡ್ ನಿರ್ಮಾಣಕ್ಕಾಗಿ ಕೋಶ ಮೂಲಗಳು:

① ಪ್ಲುರಿಪೊಟೆಂಟ್ ಸ್ಟೆಮ್ ಸೆಲ್‌ಗಳು (ಪಿಎಸ್‌ಸಿಗಳು):

ಭ್ರೂಣದ ಕಾಂಡಕೋಶಗಳು (ಇಎಸ್‌ಸಿಗಳು) ಮತ್ತು ಪ್ರೇರಿತ ಪ್ಲುರಿಪೊಟೆಂಟ್ ಸ್ಟೆಮ್ ಸೆಲ್‌ಗಳು (ಐಪಿಎಸ್‌ಸಿಗಳು) ಹೆಚ್ಚಿನ ಪ್ಲುರಿಪೊಟೆನ್ಸಿ, ಪ್ಲಾಸ್ಟಿಟಿ ಮತ್ತು ಅನಿಯಮಿತ ಪ್ರಸರಣ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತವೆ. ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಸಿಗ್ನಲಿಂಗ್ ಅಂಶಗಳ ಪ್ರಭಾವದಡಿಯಲ್ಲಿ, ಅವು ಚಟುವಟಿಕೆ ಮತ್ತು ಕಾರ್ಯವನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಕೋಶಗಳಂತೆ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ - ಗೆ ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸುತ್ತವೆ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಪಿಎಸ್‌ಸಿಗಳಿಂದ ಪಡೆದ ಪಿತ್ತಜನಕಾಂಗದ ಆರ್ಗನಾಯ್ಡ್‌ಗಳು ಎಪಿಜೆನೆಟಿಕ್ ಮತ್ತು ಆನುವಂಶಿಕ ಬದಲಾವಣೆಗಳಿಗೆ ಒಳಗಾಗಬಹುದು, ವರ್ಧನೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ವರ್ಣತಂತು ಅನ್ಯೂಪ್ಲಾಯ್ಡಿ ಬದಲಾವಣೆಗಳನ್ನು ಪ್ರದರ್ಶಿಸುತ್ತವೆ.

ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್‌ಗಳು:

1. 1). ಆನುವಂಶಿಕ ಯಕೃತ್ತಿನ ರೋಗ ಮಾದರಿಗಳು
2. 2). ಸಾಂಕ್ರಾಮಿಕ ಯಕೃತ್ತಿನ ರೋಗ ಮಾದರಿಗಳು
3. 3). ಡ್ರಗ್ ಸೈಟೊಟಾಕ್ಸಿಸಿಟಿ ಪರೀಕ್ಷೆ

② ಪಿತ್ತಜನಕಾಂಗದ ಅಂಗಾಂಶ - ಪಡೆದ ಜೀವಕೋಶಗಳು: ಇವುಗಳಲ್ಲಿ ಚೋಲಾಂಜಿಯೊಸೈಟ್ಗಳು ಮತ್ತು ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳು ಸೇರಿವೆ. ಪ್ರಬುದ್ಧ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪರಿಸರದಲ್ಲಿ ಕಾಂಡಕೋಶದ ಸಾಮರ್ಥ್ಯ ಮತ್ತು ಪ್ರಸರಣ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಉಳಿಸಿಕೊಳ್ಳುತ್ತವೆ. ಪಿಎಸ್‌ಸಿ - ಪಡೆದ ಆರ್ಗನಾಯ್ಡ್‌ಗಳಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ, ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಅಂಗಾಂಶದಿಂದ ಪಡೆದ ಆರ್ಗನಾಯ್ಡ್‌ಗಳು ಹೆಚ್ಚು ಪ್ರಬುದ್ಧವಾಗಿದ್ದು, ಹೆಚ್ಚು ಸ್ಥಿರವಾದ ಜೀನೋಮ್‌ಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ವಿಟ್ರೊ ಸಂಸ್ಕೃತಿಯಲ್ಲಿ ದೀರ್ಘಾವಧಿಯ ಅವಧಿಯಲ್ಲಿ ಫಿನೋಟೈಪಿಕ್ ಮತ್ತು ಆನುವಂಶಿಕ ಸ್ಥಿರತೆಯನ್ನು ಕಾಪಾಡಿಕೊಳ್ಳುತ್ತವೆ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಭ್ರೂಣದ ಮಾನವ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳು ಅಥವಾ ವಯಸ್ಕ ಮೌಸ್ ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ ಪ್ರಬುದ್ಧ ಮಾನವ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ ಆರ್ಗನಾಯ್ಡ್ಗಳ ದೀರ್ಘ - ಪದ ಪ್ರಸರಣ ಸಾಮರ್ಥ್ಯ ಸೀಮಿತವಾಗಿದೆ. ವಯಸ್ಕ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ ಆರ್ಗನಾಯ್ಡ್‌ಗಳನ್ನು ಬೆಳೆಸುವುದು ಸವಾಲಾಗಿ ಉಳಿದಿದೆ.

ಸಂಸ್ಕೃತಿ ವಿಧಾನ (ಚಿತ್ರ 6): ಯಕೃತ್ತಿನ ಅಂಗಾಂಶವನ್ನು ಏಕ ಕೋಶಗಳಾಗಿ ಜೀರ್ಣಿಸಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ, ಮತ್ತು ಡೋಮ್ - ಆಕಾರದ ರಚನೆಗಳನ್ನು ರೂಪಿಸಲು ಮ್ಯಾಟ್ರಿಜೆಲ್ ಮತ್ತು ಕೋಶಗಳ ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು 24 - ಬಾವಿ ಪ್ಲೇಟ್‌ನಲ್ಲಿ ಬೀಜ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ. ಕೋಶ ಸಂಸ್ಕೃತಿಯ ಇನ್ಕ್ಯುಬೇಟರ್ (37 ° C) ನಲ್ಲಿ 15 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಕಾವುಕೊಡಿ. ಘನೀಕರಣದ ನಂತರ, ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಸಂಸ್ಕೃತಿ ಮಾಧ್ಯಮವನ್ನು ಸೇರಿಸಿ. ಸುಮಾರು 14 ದಿನಗಳ ನಂತರ ಅಂಗೀಕಾರ. 7 - 10 ದಿನಗಳ ನಂತರ ಮೂಲ ಮಾಧ್ಯಮವನ್ನು ಡಿಫರೆಂಟಿಯೇಶನ್ ಮಾಧ್ಯಮದೊಂದಿಗೆ ಬದಲಾಯಿಸಿ.

ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್‌ಗಳು:

1. 1). ಹೆಪಟೊಟಾಕ್ಸಿಸಿಟಿ ಮಾದರಿಗಳು
2. 2). ವಿಟ್ರೊ ಮೆಟಾಬಾಲಿಸಮ್ ಡಿಸಾರ್ಡರ್ ಅಧ್ಯಯನದಲ್ಲಿ
3. 3). ಅಲ್ಲದ - ಆಲ್ಕೊಹಾಲ್ಯುಕ್ತ ಕೊಬ್ಬಿನ ಪಿತ್ತಜನಕಾಂಗದ ಕಾಯಿಲೆ
4. 4). ಹಾನಿಕರವಲ್ಲದ ಮತ್ತು ಮಾರಣಾಂತಿಕ ಯಕೃತ್ತಿನ ಕಾಯಿಲೆಗಳಿಗೆ ಮಾದಕವಸ್ತು ಅಭಿವೃದ್ಧಿ

ಚಿತ್ರ 6. ಅಂಗಾಂಶದ ಸಂಸ್ಕೃತಿ ಮತ್ತು ಅಂಗೀಕಾರ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆ - ಪಡೆದ ಯಕೃತ್ತಿನ ಆರ್ಗನಾಯ್ಡ್‌ಗಳು

ಮೂಲ: ಸೆಲ್ & ಬಯೋಸೈನ್ಸ್ (2023) 13: 197

ಗೋಳಾಕಾರದ ಸಂಸ್ಕೃತಿ ಮತ್ತು ಆರ್ಗನಾಯ್ಡ್ ಸಂಸ್ಕೃತಿಯ ಹೋಲಿಕೆ

4. ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ ಕೋ - ಸಂಸ್ಕೃತಿ ಮಾದರಿ

1. 1. 2 ಡಿ ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ ಕೋ - ಸಂಸ್ಕೃತಿ ಮಾದರಿ
      

      2 ಡಿ ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ ಕೋ - ಸಂಸ್ಕೃತಿ ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿ, ಎರಡು ಅಥವಾ ಹೆಚ್ಚಿನ ವಿಭಿನ್ನ ಕೋಶ ಪ್ರಕಾರಗಳನ್ನು ಎರಡು - ಆಯಾಮದ ಪರಿಸರದಲ್ಲಿ ಬೆರೆಸಿ ಸಂಸ್ಕರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಈ ಮಾದರಿಯ ಪ್ರಮುಖ ಲಕ್ಷಣವೆಂದರೆ ವಿಭಿನ್ನ ಕೋಶ ಪ್ರಕಾರಗಳ ನಡುವಿನ ನೇರ ಸಂವಹನ, ಜೀವಕೋಶಗಳು ಮತ್ತು ಬಾಹ್ಯಕೋಶೀಯ ಮ್ಯಾಟ್ರಿಕ್ಸ್ ನಡುವಿನ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆ ಅಥವಾ ಸೈಟೊಕಿನ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ರಾಸಾಯನಿಕ ಸಂವಹನಗಳ ಮೂಲಕ ಪರೋಕ್ಷ ಸಿಗ್ನಲ್ ಪ್ರಸರಣ. ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ ಕಾರ್ಯಗಳಾದ ಅಲ್ಬುಮಿನ್ ಉತ್ಪಾದನೆ ಮತ್ತು drug ಷಧ ಚಯಾಪಚಯ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಮೂರು ವಾರಗಳವರೆಗೆ ನಿರ್ವಹಿಸಬಹುದು.

      ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್‌ಗಳು:

      1. 1). ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳಾದ ಸಿಒ - ಫೈಬ್ರೊಬ್ಲಾಸ್ಟ್‌ಗಳೊಂದಿಗೆ ಸಂಸ್ಕರಿಸಲಾಗಿದೆ: ನಿಧಾನ - ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ರಿಯೆ ಮತ್ತು ಅವುಗಳ ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ರಿಯೆಗಳ ತೆರವು ದರವನ್ನು ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡಲು ಈ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
      2. 2). ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳಾದ ಸಿಒ - ಪ್ಯಾರೆಂಚೈಮಲ್ ಪಿತ್ತಜನಕಾಂಗದ ಕೋಶಗಳೊಂದಿಗೆ (ಉದಾ., ಸ್ಟೆಲೇಟ್ ಕೋಶಗಳು, ಸೈನುಸಾಯ್ಡಲ್ ಎಂಡೋಥೆಲಿಯಲ್ ಕೋಶಗಳು) ಸಂಸ್ಕರಿಸಲಾಗಿದೆ: ಈ ಮಾದರಿಯು drug ಷಧವನ್ನು ಸಂಶೋಧಿಸಲು ಉಪಯುಕ್ತವಾಗಿದೆ - ಪ್ರೇರಿತ ಪಿತ್ತಜನಕಾಂಗದ ಗಾಯ (ಡಿಐಎಲ್ಐ), ಏಕೆಂದರೆ ಇದು ಸೈಟೊಕಿನ್ಗಳು, ಕೀಮೋಕೈನ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಬೆಳವಣಿಗೆಯ ಅಂಶಗಳ ಪಾತ್ರವನ್ನು ತನಿಖೆ ಮಾಡಲು ಸಹಾಯ ಮಾಡುತ್ತದೆ.
      3. 3). ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳಾದ ಸಿಒ - ಟಿ ಕೋಶಗಳೊಂದಿಗೆ ಸಂಸ್ಕರಿಸಲಾಗಿದೆ: ಪಿತ್ತಜನಕಾಂಗದ drug ಷಧ ಚಯಾಪಚಯವನ್ನು ಕಂಡುಹಿಡಿಯಲು ಈ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ - ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಟಿ ಕೋಶ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳು.
      4. 4). ಐಫೇಸ್ ಹೆಪಟೊಮ್ಯಾಕ್ಸ್ಸಿಒ - ಸಂಸ್ಕೃತಿ ವ್ಯವಸ್ಥೆ: ಐಫೇಸ್ ವಿವಿಧ ಜಾತಿಗಳಿಂದ ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳೊಂದಿಗೆ ಸಿಒ - ಸಂಸ್ಕೃತಿ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಿದೆ, ಇದನ್ನು ಹೆಪಟೊಮ್ಯಾಕ್ಸ್ ಎಂದು ಕರೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ™. ಸಿಒ - ಮಾನವ ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳನ್ನು ಸ್ಟ್ರೋಮಲ್ ಕೋಶಗಳೊಂದಿಗೆ ಬೆಳೆಸುವುದು, ಉತ್ತಮ drug ಷಧಿಯನ್ನು ಕಾಪಾಡಿಕೊಳ್ಳಲು ಸಾಧ್ಯವಿದೆ - ಮಾನವನ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳಲ್ಲಿ 3 ವಾರಗಳವರೆಗೆ ಕಿಣ್ವ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಚಯಾಪಚಯಗೊಳಿಸುವುದು. ನಿಧಾನವಾಗಿ ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡಲು ಈ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯು ಸೂಕ್ತವಾಗಿದೆ - ಸಂಯುಕ್ತ ಕ್ಲಿಯರೆನ್ಸ್ ದರಗಳು ಮತ್ತು ಅವುಗಳ ಚಯಾಪಚಯ ಕ್ರಿಯೆಗಳನ್ನು ಚಯಾಪಚಯಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ.

      ಈ CO - ಸಂಸ್ಕೃತಿ ಮಾದರಿಯು drug ಷಧ ಚಯಾಪಚಯ, ವಿಷತ್ವ ಮತ್ತು ಯಕೃತ್ತು - ಸಂಬಂಧಿತ ರೋಗ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಗಳನ್ನು ನಿರ್ಣಯಿಸಲು ಹೆಚ್ಚು ಶಾರೀರಿಕವಾಗಿ ಸಂಬಂಧಿಸಿದ ವೇದಿಕೆಯನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ, ಯಕೃತ್ತಿನ ಕಾರ್ಯ ಮತ್ತು ರೋಗಕ್ಕೆ ವಿಭಿನ್ನ ಕೋಶ ಪ್ರಕಾರಗಳು ಹೇಗೆ ಕೊಡುಗೆ ನೀಡುತ್ತವೆ ಎಂಬುದರ ಕುರಿತು ಒಳನೋಟಗಳನ್ನು ನೀಡುತ್ತದೆ.
      
      

      3 ಡಿ ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ ಕೋ - ಸಂಸ್ಕೃತಿ ಮಾದರಿ

      ನೇರ 3 ಡಿ ಕೋ - ಸಂಸ್ಕೃತಿ. ಡೈರೆಕ್ಟ್ 3 ಡಿ ಕೋ - ಸಂಸ್ಕೃತಿಯು ಕೋಶ - ರಿಂದ - ಜೀವಕೋಶದ ಅಂಟಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆ, ಕರಗಬಲ್ಲ ಸೈಟೊಕಿನ್‌ಗಳ ಮೂಲಕ ಪ್ಯಾರಾಕ್ರಿನ್ ಸಿಗ್ನಲಿಂಗ್ ಮತ್ತು ಬಾಹ್ಯಕೋಶೀಯ ಮ್ಯಾಟ್ರಿಕ್ಸ್ ಅಂಟಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆಯಂತಹ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳ ಮೂಲಕ ವಿಭಿನ್ನ ಯಕೃತ್ತಿನ ಕೋಶಗಳ ನಡುವೆ ನಿಕಟ ಸಂವಾದವನ್ನು ಅನುಮತಿಸುತ್ತದೆ, ಇದು ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳ ನಡುವೆ ಸಂವಹನವನ್ನು ಶಕ್ತಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ.

      ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್‌ಗಳು:

      1. 1). ಲಿವರ್ ಫೈಬ್ರೋಸಿಸ್ ಮಾದರಿ: ಪಿತ್ತಜನಕಾಂಗದ ಫೈಬ್ರೋಸಿಸ್ನ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ರಗತಿಯನ್ನು ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
      2. 2). Drug ಷಧ - ಪ್ರೇರಿತ ಪಿತ್ತಜನಕಾಂಗದ ಗಾಯ (ಡಿಐಎಲ್ಐ) ಮಾದರಿ: .ಷಧಿಗಳಿಂದ ಉಂಟಾಗುವ ಪಿತ್ತಜನಕಾಂಗದ ಹಾನಿಯನ್ನು ಅನುಕರಿಸಲು ಮತ್ತು ನಿರ್ಣಯಿಸಲು ಸಹಾಯ ಮಾಡುತ್ತದೆ.
      3. 3). Drug ಷಧ ಸಂವಹನಗಳು, drug ಷಧ ಚಯಾಪಚಯ ಮತ್ತು ಕಿಣ್ವದ ಪ್ರಚೋದನೆ: ವಿಭಿನ್ನ drugs ಷಧಿಗಳು ಹೇಗೆ ಸಂವಹನ ನಡೆಸುತ್ತವೆ, ಅವು ಹೇಗೆ ಚಯಾಪಚಯಗೊಳ್ಳುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಅವು ಯಕೃತ್ತಿನ ಕಿಣ್ವಗಳನ್ನು ಹೇಗೆ ಪ್ರೇರೇಪಿಸುತ್ತವೆ ಎಂಬುದನ್ನು ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡುತ್ತದೆ.

      ಪರೋಕ್ಷ 3 ಡಿ ಕೋ - ಸಂಸ್ಕೃತಿ. ಜೀವಕೋಶಗಳ ನಡುವಿನ ಸಂವಹನವು ಕರಗಬಲ್ಲ ಸೈಟೊಕಿನ್‌ಗಳ ಮೂಲಕ ಸಂಭವಿಸುತ್ತದೆ.

      ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್‌ಗಳು:
      ದೇಹದಲ್ಲಿನ ಪಿತ್ತಜನಕಾಂಗದ ಕೋಶಗಳ ನಡುವೆ ಸಂಪರ್ಕವನ್ನು ಸಂಪರ್ಕಿಸಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ.

      
      ಸಂಕ್ಷಿಪ್ತವಾಗಿ ಹೇಳುವುದಾದರೆ, ಐಫೇಸ್, ಇನ್ ವಿಟ್ರೊ ಜೈವಿಕ ಸಂಶೋಧನೆಯಲ್ಲಿ ನಾಯಕನಾಗಿ, - ಕ್ಲಿನಿಕಲ್ drug ಷಧ ಪರೀಕ್ಷೆಗೆ ಸಮಗ್ರ ಪರಿಹಾರಗಳನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ. ವಿವಿಧ ಪ್ರಭೇದಗಳಿಂದ ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಹೆಪಟೊಸೈಟ್ಗಳ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆ ಮತ್ತು ಸಂಸ್ಕೃತಿಯಿಂದ ಹಿಡಿದು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಅನ್ವಯಿಕೆಗಳಿಗಾಗಿ ಸಂಸ್ಕೃತಿ ಮಾಧ್ಯಮದಂತಹ ಪೋಷಕ ಉತ್ಪನ್ನಗಳ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಯವರೆಗೆ ಅಥವಾ ಬಹು - ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಕಾಲಜನ್ - ಲೇಪಿತ ಫಲಕಗಳು, drug ಷಧ ಅನ್ವೇಷಣೆ ಮತ್ತು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಗೆ ಅತ್ಯುತ್ತಮವಾದ ವಿಟ್ರೊ ಸಂಶೋಧನಾ ಸಾಧನಗಳನ್ನು ನೀಡಲು ಐಫೇಸ್ ಸಮರ್ಪಿಸಲಾಗಿದೆ. ನಾವು ce ಷಧೀಯ ಉದ್ಯಮದ ಗ್ರಾಹಕರಿಗೆ ವಿಶ್ವಾಸಾರ್ಹ ಪಾಲುದಾರರಾಗಿದ್ದೇವೆ, - ಕ್ಲಿನಿಕಲ್ ಸಂಶೋಧನೆಗಾಗಿ ಕತ್ತರಿಸುವುದು - ಎಡ್ಜ್ ಪರಿಹಾರಗಳನ್ನು ಒದಗಿಸಲು ಬದ್ಧವಾಗಿದೆ.