Splenocytes ໃນການຄົ້ນຄວ້າພູມຕ້ານທານ: ໃນທົ່ວຊະນິດແລະຄວາມໂດດດ່ຽວ, ການແຊ່ແຂງ, ບາດກ້າວ

ຄໍາສໍາຄັນ:splenocytes (spls); Cynomolgus Monkey splenocytes; rhesus monkey spleocytes; ຫມາ splenocytes; canine splideres; ຫນູ splenocytes; ຫນູ splideretes; ຫນູ splenocytes; Rabbit Splenocytes; ຄວາມໂດດດ່ຽວທີ່ບໍ່ສຸຂະພາບ; splenocytes freezing; ລະລາຍກະເພາະ

ຜະລິດຕະພັນ Iphase

splenocytes (SPLS)ແມ່ນປະຊາກອນທີ່ມີພູມສັນຖານຂອງຈຸລັງພູມຕ້ານທານທີ່ໂດດດ່ຽວຈາກກະດູກສັນຫຼັງ, ເປັນອະໄວຍະວະທີ່ສໍາຄັນທີ່ກ່ຽວຂ້ອງກັບການແບ່ງແຍກເລືອດ, ແລະຮັກສາ homeostasis. ຈຸລັງເຫຼົ່ານີ້ລວມມີ lymphocytes (ຈຸລັງ, ຈຸລັງ B), ຈຸລັງ macrophages, ຈຸລັງທີ່ຕ້ອງການ, ແລະເຄື່ອງຫຼີ້ນທີ່ສໍາຄັນໃນພູມຕ້ານທານທີ່ສາມາດປັບຕົວໄດ້ SCLEANCYTERTES ແມ່ນຖືກນໍາໃຊ້ຢ່າງກວ້າງຂວາງໃນການຄົ້ນຄວ້າແບບງ່າຍໆແລະແປການຄົ້ນຄວ້າເພື່ອສຶກສາຫນ້າທີ່ຂອງພູມຕ້ານທານ, ການພັດທະນາປ້ອງກັນ, ແລະໂຣກມະເຮັງ.

ບົດບາດແລະສ່ວນປະກອບຂອງ splenocytes (SPLS)

ພາຍໃນ splenocentes ທີ່ຢູ່ໃນເຂດທີ່ແຕກຕ່າງ: ເສັ້ນເລືອດແດງ, ເຊິ່ງການກັ່ນຕອງເມັດເລືອດແດງເກົ່າ, ແລະບ່ອນທີ່ມີການຕອບແທນພູມຕ້ານທານ. ເນື້ອເຍື່ອສີຂາວໄດ້ຖືກຈັດເຂົ້າໃນເຂດຈຸລັງແລະຫ້ອງ B ດ້ານຫ້ອງ B, ກໍາລັງສະກັດກັ້ນການຕິດຕໍ່ພົວພັນລະຫວ່າງ Antigen - ການນໍາສະເຫນີຈຸລັງແລະ lymphocytes. ນີ້ທີ່ເປັນເອກະລັກສະເພາະຂອງ SPLECONTES (SPLS) ເຄື່ອງມືທີ່ມີປະສິດທິພາບໃນການລ່ວງລະເມີດພູມຕ້ານທານເຊັ່ນ Elispet, cytometry, ແລະປະຕິກິລິຍາ lymphocyte ປະສົມ.

ຊະນິດ - splenocytes ສະເພາະ (SPLS)

-monkey monkey monkey:Cynomolgus Monkey Splenocytes ຖືກນໍາໃຊ້ໃນການຄົ້ນຄວ້າແບບທໍາມະດາເພາະວ່າພວກມັນມີການຕອບສະຫນອງພູມຕ້ານທານຂອງມະນຸດຢ່າງໃກ້ຊິດ.

-rhesus monkey splecytes:Monkey monkey splenocytes ແມ່ນມີຄຸນຄ່າຄ້າຍຄືກັນສໍາລັບຄວາມຄ້າຍຄືກັນກັບພູມຕ້ານທານຢ່າງໃກ້ຊິດຂອງພວກເຂົາກັບມະນຸດ. ການສຶກສາໂດຍໃຊ້ Rhesus splantictes monkey Splecentestes ຊ່ວຍໃຫ້ຂົວຂ້າມຊ່ອງຫວ່າງລະຫວ່າງສັດແລະການນໍາໃຊ້ທາງດ້ານການຊ່ວຍ.

-ຫມາ splenocytes / canine splenocytes:ໃນການຄົ້ນຄວ້າສັດຕະວະແພດ, ການຄົ້ນຄວ້າຫມາ (ຫຼືກະໂປງຂອງ canine) ແມ່ນໃຊ້ເພື່ອສຶກສາຄວາມຜິດປົກກະຕິຂອງພູມຕ້ານທານໃນ canines ແລະແຕ້ມການປຽບທຽບຂອງມະນຸດ.

-Rabbit Splentocytes: Rabbit Splenocentes ແມ່ນມີຄວາມສໍາຄັນໃນການສຶກສາກ່ຽວກັບການຜະລິດຕ້ານພູມຕ້ານທານແລະການສັກຢາປ້ອງກັນໂຣກ. Rabbit Splentocytes ຊ່ວຍເປີດເຜີຍລາຍລະອຽດທີ່ອາດຈະແຕກຕ່າງຈາກຫນູ splenocytes ຫຼືຫນູ splenocytes.

-ຫນູ splenocytes / mice splenocytes:ຫນູ splentocytes ແມ່ນຫນຶ່ງໃນບັນດາຊຸດປ້ອງກັນທີ່ມັກທີ່ສຸດ (SPLS) ໃນພູມຕ້ານທານ. ພິທີການສໍາລັບການໂດດດ່ຽວ splenocytes ຈາກຫນູແມ່ນຖືກສ້າງຕັ້ງຂື້ນ, ແລະທັງຫນູ splenocytes ແລະ Mice splenocentes ແມ່ນໃຊ້ສໍາລັບການໄຫຼວຽນຂອງ cytometry, Elispot, ແລະການແຈກຢາຍທີ່ເປັນປະໂຫຍດອື່ນໆ.

-ຫນູ splenocytes:ຫນູ splenocytes ສະຫນອງຮູບແບບເສີມສ້າງສໍາລັບພູມຕ້ານທານແລະການສຶກສາຂອງຢາວັກຊີນ. ຫນູ splenocytes ມັກຈະຖືກປຽບທຽບກັບຫນູ splenocytes ເພື່ອໃຫ້ເຂົ້າໃຈຄວາມແຕກຕ່າງຂອງ Interterspecies.

ຄວາມໂດດດ່ຽວທີ່ບໍ່ສຸພາບ

ຄວາມໂດດດ່ຽວທີ່ບໍ່ສຸພາບແມ່ນຂັ້ນຕອນການສະກັດເອົາຈຸລັງພູມຕ້ານທານຈາກກະດູກສັນຫຼັງເພື່ອນໍາໃຊ້ໃນໂປແກຼມຄົ້ນຄວ້າຕ່າງໆ, ເຊັ່ນ: cytometry ການໄຫຼວຽນ, ການຜະລິດ cytokine, ຫຼືປະຕິກິລິຍາ lymphocyte ປະສົມ.

spleen ໄດ້ຖືກໂຍກຍ້າຍອອກພາຍໃຕ້ເງື່ອນໄຂທີ່ເຫມາະສົມ, ພື້ນທີ່ໃນການແກ້ໄຂບັນຫາທີ່ໂດດດ່ຽວແລະຖືກໂອນເຂົ້າໄປໃນທໍ່ທີ່ເປັນຫມັນເຊິ່ງບັນຈຸ rpmi 1640. ຊັ້ນ leukocyte ໄດ້ຖືກເກັບກໍາຢ່າງລະມັດລະວັງຫຼັງຈາກ centrifugation. ຈຸລັງໄດ້ຖືກລ້າງດ້ວຍ RPMI 1640 ຂະຫນາດກາງ, ເຊິ່ງສູນກາງແລະທາດທຽມໄດ້ຍົກເລີກ. ຂັ້ນຕອນການລ້າງນີ້ໄດ້ຖືກຊ້ໍາອີກ 1 - 2 ເທື່ອກ່ອນທີ່ຈຸລັງທີ່ໂດດດ່ຽວໄດ້ຖືກນໍາໃຊ້ໃນການທົດລອງຕື່ມອີກ.

splentocytes freezing

splentocytes freezingແມ່ນບາດກ້າວທີ່ສໍາຄັນສໍາລັບການຮັກສາຈຸລັງສໍາລັບການນໍາໃຊ້ໃນອະນາຄົດ. ນັກຄົ້ນຄວ້າອະນຸຍາດໃຫ້ນັກຄົ້ນຄວ້າເກັບຮັກສາ splenocytes ສໍາລັບໄລຍະເວລາທີ່ຂະຫຍາຍໂດຍບໍ່ມີການປະນີປະນອມຄວາມເປັນໄປໄດ້ຫຼືການເຮັດວຽກຂອງມັນ.

supernatant ຂອງຈຸລັງຈຸລັງຂອງ centrifuged ຈາກຂັ້ນຕອນການໂດດດ່ຽວແມ່ນຖືກຍົກເລີກແລະຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງຈຸລັງຖືກ diluted ໃນສື່ກາງ. ຕື່ມການ aliquot ກັບແຕ່ລະທໍ່ທີ່ແຊ່ແຂງແລະໂອນໄປຫາຖັງທີ່ຫນາວເຢັນ, ຮັບປະກັນວ່າຈຸລັງທີ່ຍັງຄົງຄ້າງຢູ່. ແຊ່ເຄື່ອງບັນຈຸທີ່ຫນາວເຢັນໂດຍໄວໃນຕູ້ເຢັນ - 80 ° C. Freezer. ໂອນໄປທີ່ຕູ້ຄອນເທນເນີຕູ້ເອກະສານຕູ້ແຊ່ແຂງ 150 ° C (ຫຼືຖັງໄນໂຕຣເຈນໄວ້) ເປັນເວລາດົນນານ - ການເກັບຮັກສາໃນໄລຍະ.

ລະລາຍກະເພາະ

ລະລາຍກະເພາະຕ້ອງເຮັດໃຫ້ລະມັດລະວັງເພື່ອຮັບປະກັນຄວາມເປັນໄປໄດ້ແລະການເຮັດວຽກຂອງຈຸລັງສູງຫຼັງຈາກ CryOpReservation. ຂະບວນການລະລາຍແມ່ນໂດຍປົກກະຕິໄວເພື່ອຫຼຸດຜ່ອນຜົນກະທົບທີ່ທໍາລາຍຂອງການສ້າງປະເທດ DMSO ແລະກ້ອນ.

Cryotubes ໄດ້ຖືກຍົກຍ້າຍໄປອາບນ້ໍາ 37 ° C ແລະລະລາຍຈົນກ່ວາພຽງແຕ່ພຽງແຕ່ມີພຽງແຕ່ຜລຶກນ້ໍາທີ່ຍັງຄ້າງຢູ່ຢູ່ໃນທໍ່. ຕື່ມ 0.5 - 1ml ຂອງວັດທະນະທໍາຈຸລັງຂະຫນາດກາງກັບທໍ່ທີ່ແຊ່ແຂງ, ສົ່ງຕໍ່ແລະໂອນລະງັບໃນທໍ່ຂະຫນາດ 15ml ທີ່ເຕັມໄປດ້ວຍຂະຫນາດກາງ. centrifuge, ເອົາ supernatant ເອົາທໍ່ແລະແຕະທໍ່ເພື່ອພວນການຈັດແຈງເຊນ. ຕື່ມຂະຫນາດກາງ 1ml ຂອງວັດທະນະທໍາຈຸລັງ, ຟັນແລະສົ່ງຄືນດ້ວຍທໍ່ທີ່ມີຂະຫນາດກາງເຖິງປະລິມານ 15 ມລ. Centrifuge, De - ແປກປະຫຼາດ, ເພີ່ມ 1ml ຂອງຂະຫນາດກາງຫ້ອງ, ເພີ່ມສື່ກາງຕາມຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງຫ້ອງທີ່ຄາດໄວ້. ວາງຈຸລັງໃນ CO2 CO2 ແລະ incubate ສໍາລັບ 1h ດ້ວຍຊ່ອງຫວ່າງເລັກນ້ອຍໃນຝາປິດ. ໃນຕອນທ້າຍຂອງບ່ອນ, resuspend ແລະປ່ອຍໃຫ້ 1min ເພື່ອໃຫ້ callered cell cell calls ໃນການ precrisition. ການໂຈະຫ້ອງໂດຍບໍ່ມີຝົນຕົກໄດ້ຖືກໂອນເຂົ້າໄປໃນທໍ່ 15ml ໃຫມ່ຢ່າງລະມັດລະວັງ. ຈຸລັງຖືກນັບເຂົ້າໃນການກໍານົດກິດຈະກໍາຂອງເຊນ.

ສະຫຼຸບ

Splenocytes, ມີສ່ວນປະກອບແລະມີບົດບາດທີ່ຫລາກຫລາຍຂອງພວກເຂົາໃນການຕອບແທນພູມຕ້ານທານ, ແມ່ນເຄື່ອງມືທີ່ລ້ໍາຄ່າ, ໃນການຄົ້ນຄວ້າພູມຕ້ານທານ. ບໍ່ວ່າຈະມາຈາກຫນູ, ຕົ້ນຕໍ, ຫຼືຊະນິດອື່ນໆເຊັ່ນ: ກະຕ່າຍແລະຫມາ, ປ້ອງກັນທີ່ສໍາຄັນໃນການເຮັດວຽກຂອງພູມຕ້ານທານ, ການປ້ອງກັນພະຍາດ, ແລະປ້ອງກັນໂຣກມະເຮັງ. ຂະບວນການຂອງການໂດດດ່ຽວ, ການແຊ່ແຂງ, ແລະການລະລາຍແມ່ນມີຄວາມຈໍາເປັນໃນການຮັກສາຄວາມສໍາຄັນແລະຄວາມເປັນໄປໄດ້ຂອງພວກເຂົາ, ເຮັດໃຫ້ນັກຄົ້ນຄວ້າສາມາດສໍາຫຼວດການເຄື່ອນໄຫວແບບເຄື່ອນໄຫວຕ່າງໆ. ໃນຖານະເປັນຄວາມເຂົ້າໃຈຂອງພວກເຮົາກ່ຽວກັບພູມຕ້ານທານ