CGT novatoriška terapija - Lentivirusas - pakavimo automobilis - T imuninės ląstelės

CGT novatoriška terapija - Lentivirusas - pakavimo automobilis - T imuninės ląstelės

Imuninės ląstelių terapija yra novatoriškas vėžio gydymas, sustiprinantis organizmo imuninę sistemą nukreipti ir pašalinti vėžio ląsteles. Pagrindinės formos yra citokinas - sukelta žudikų ląstelių terapija, t - ląstelių terapija ir CAR - T ląstelių terapija. Automobilio - T terapija apima T ląstelių perprogramavimą, kad būtų išreikštos chimerinių antigeno receptorių (CAR), kurie konkrečiai nukreipta į naviko ląsteles, rodo didelę hematologinių vėžio, tokių kaip leukemija ir limfoma, sėkmės.

Raktiniai žodžiai: automobilis - T, lentivirusinis, lentivirusinis vektorius, „Tracer Lentivirus“

Automobilio paruošimas - T ląstelių terapija

Apskritai, pagrindiniai automobilio - T ląstelių paruošimo žingsniai yra šie:

Pav. Šaltinis: Dana - Farber vėžio institutas - CAR T - Ląstelių klinikiniai tyrimai padeda kelių mieloma pacientams grįžti į sveikatą

1. 1.Sortas (t - ląstelių izoliacija)

Pirmasis žingsnis ruošiant CAR - T ląsteles yra atskirti T - ląsteles nuo baltųjų kraujo kūnelių paciento periferiniame kraujyje. Tokie metodai, kaip imunomagnetinių karoliukų atskyrimas ar srauto citometrija, paprastai naudojami CD3+- turtingoms T - ląstelėms iš kraujo išgauti. Norint užtikrinti ląstelių grynumą, rūšiavimo procesas turi būti labai tikslus, užtikrinant, kad būtų gautas pakankamas skaičius aukštos kokybės T - ląstelės.

2. 2.Stimuliacija (t - ląstelių aktyvacija)

Ištrauktos T - ląstelės yra suaktyvinamos in vitro, paprastai naudojant aCD3 /CD28 T - Ląstelių aktyvacijos /išplėtimo rinkinys. Aktyviosios T ląstelės patenka į aktyvią būseną, paruošdamos jas genų transfekcijai. Vykdant šį procesą, sustiprinama T ląstelių funkcija, prisidedanti prie vėlesnio genetinio modifikavimo ir amplifikacijos.

3. 3.transfekcija (genų redagavimas)

Aktyvuotos T ląstelės atliekama genų transfekcija, kad išreikštų chimerinio antigeno receptorių (CAR). Šis procesas paprastai naudojamaslentivirusinis vektoriusNorėdami įvesti automobilių genus į T ląsteles. Lentivirusas yra veiksminga genų transdukcijos priemonė, naudinga stabiliai integruoti tikslinį geną (pvz., CAR geną) į ląstelių genomą. Užkrečiant T ląsteles ir transfekuodamas automobilio geną į T ląstelių DNR, lentivirusas leidžia T ląstelėms ilgą laiką išreikšti automobilius. Automobilio genas apima vieną - grandinės kintamąjį fragmentą (SCFV) antikūną, kuris leidžia T ląstelėms atpažinti specifinius antigenus naviko ląstelių paviršiuje ir inicijuoti imuninį atsaką, aktyvuodami T ląstelių signalizacijos sritis. Kaip parodyta 2 paveiksle. Lentivirusinis transfekcija pasižymi didelio efektyvumo ir stabilumo savybėmis, todėl automobilio geną ilgą laiką galima ekspresuoti T ląstelėse.

Figūros šaltinis: Singapūro automobilis - T ląstelių terapija

4. 4.Pasplifikacija (ląstelių proliferacija)

Po transfekcijos automobilio - T ląstelės patenka į amplifikacijos etapą, kur augimo faktoriai, tokie kaipIl - 2pridedami siekiant skatinti ląstelių proliferaciją. Šio proceso tikslas yra užtikrinti, kad pacientui būtų galima gauti pakankamai automobilių - T ląstelių. Amplifikacijos procesas turi būti atliekamas steriliomis sąlygomis, kad būtų užtikrinta ląstelių kokybė ir kiekis.

5. 5. Quality Control (QC)
6. Prieš pakartotinai į pacientą, kokybės kontrolė yra labai svarbi ruošimo proceso metu. Paruoštas automobilis - T ląstelės yra griežtai bandomosUžtikrinkite jų grynumą, aktyvumą, transfekcijos efektyvumą ir gydymo standartų laikymąsi. Be to, norint užtikrinti ląstelių užteršimo ar nepageidaujamų reakcijų tyrimus, norint užtikrinti ląstelių saugumą ir terapinį veiksmingumą po pakartotinio paciento.

ILentiviruso transfekcijos imuninėse ląstelėse Mortance

Lentivirusinė transfekcijos technologija yra labai svarbi imuninių ląstelių terapijoje, ypač genų redagavimui ir ląstelių inžinerijai. Lentivirusiniai vektoriai, gauti iš modifikuoto ŽIV - 1, yra plačiai naudojami dėl jų sugebėjimo integruoti genus į šeimininko genomą, užtikrinant stabilią, ilgą - termino išraišką. Jie gali užkrėsti ir skiriamąsias, ir ne - dalijimosi ląsteles, o jų saugumas buvo patobulintas modifikuojant pagrindinius genus, kad būtų išvengta replikacijos. Šie vektoriai dabar dažniausiai naudojami genų terapijoje, genų redagavimo ir ląstelių biologijos tyrimuose, kad būtų galima atlikti jų efektyvumą ir ilgaamžiškumą teikiant genus.

Figūros šaltinis: Obiosh.com/product/ Lentiviruso pakuotės ir lentiviruso transfekcijos proceso schema 293T ląstelėse

1. Efektyvus genų transdukcija

Lentivirusinis vektorius gali efektyviai pristatyti tikslinius genus, tokius kaip CAR genas, į imunines ląsteles ir stabiliai integruoti šiuos genus į ląstelių genomą, užtikrindamas, kad automobilio genas būtų nuolat ekspresuojamas ląstelių dalijimosi metu ir proliferacijos metu. Šis aukštas - efektyvumo perdavimo galimybė yra esminė imunoterapijos sėkmei.

2. mažesnis imunogeniškumas 

Palyginti su kitais viruso vektoriais, lentivirusai turi mažesnį imunogeniškumą. Dėl to, kai lentivirusai naudojami imuninėms ląstelėms perduoti, paciento imuninė sistema sukuria palyginti silpnesnį imuninį atsaką į virusą. Tai padeda sumažinti nepageidaujamas reakcijas, ypač per ilgą ląstelių išgyvenimą po infuzijos ir taip užkirsti kelią per dideliam imuniniam atmetimui.

3. Aukštai prisitaikymas prie imuninių ląstelių

Lentivirusinis vektorius gali efektyviai perduoti įvairių tipų imunines ląsteles,ypač T ląstelės ir NK ląstelės. Per lentivirusinę transdukciją imuninės ląstelės gali įgyti naviko - specifinius atpažinimo gebėjimus, taip padidindamos jų gebėjimą nukreipti ir nužudyti naviko ląsteles.

4. Perduotų efektorinių ląstelių nustatymas tikslinių ląstelių atpažinime 

Imunoterapijoje,Transdukuotos efektorinės ląstelėsRemkite imunines ląsteles, kurios po transdukcijos išreiškia automobilį ir veikia anti - naviko aktyvumą. Lentivirusiniai vektoriai gali tiksliai pristatyti automobilio geną į šias efektorines ląsteles, leidžiančias jiems atpažinti ir nukreipti naviko ląsteles.Tikslinės ląstelėsyra naviko ląstelės, kurias nustato ir sunaikina šios imuninės ląstelės. Per lentivirusinę transdukciją imuninės ląstelės gali sustiprinti jų specifiškumą atpažindami ir žudant naviko ląsteles, taip pagerindamos terapinį efektyvumą.

Šiame kontekste „iPhase“, in vitro tyrimų reagentų lyderė, sukūrė lentiviruso pakuočių rinkinį ir lentiviruso koncentracijos reagentą, kad supaprastintų imunoterapijos klientų transdukcijos sudėtingumą ir pagerintų stabilių genų transfekcijos sėkmės procentą. Šie produktai siūlo vieną „Stop“ sprendimą klientams.

„IPhase Lentivirus“PRoducts

„IPhase“ lentiviruso pakuotės rinkinysyra visi esminiai reagentai, reikalingiLentiviruso pakuotė, žymiai supaprastinant eksperimentinį procesą ir taupant laiką bei pastangas. Šis rinkinys apima:

• Lentiviruso pakuotės plazmidės mišinys
• Transfektas reagentas
• EGFP plazmidė
• „IPhase“ lentiviruso koncentracijos reagentas

Šis rinkinys tikrai supaprastina eksperimentą! Nereikalaujant sudėtingo reagentų paruošimo, lentivirusų pakuotes galima efektyviai užpildyti paprasčiausiai laikantis įtrauktų instrukcijų.Unikalios rinkinio pranašumai yra trumpas pakavimo laikas, aukštas virusinis titras ir lengvas veikimas, todėl jis idealiai tinka pradedantiesiems lentiviruso pakuotėje. Kiekviename reagentų rinkinyje yra griežta kokybės kontrolė, siekiant užtikrinti tikslius, patikimus ir atkuriamus rezultatus, žymiai pagerindamas transfekcijos efektyvumą ir virusinių vektorių stabilumą, taip užtikrinant stiprią techninę paramą imuninių ląstelių paruošimui.

Be to, norėdamas padėti klientams sutaupyti išlaidų, „iPhase“ taip pat sukūrė ir gamino Lentiviruso koncentracijos reagentą, siūlantį greitą ir paprastą koncentracijos sprendimą.Tiesiog sumaišius lentiviruso supernatantą su koncentracijos reagentu, po to trumpai inkubuojant ir centrifuguojant standartine centrifuga, lentivirusinės dalelės gali būti greitai sukoncentruotos. Šis procesas nereikalauja ultracentrifugos, todėl daugumai laboratorijų vartotojų jis yra patogus ir kainuojantis.

Trumpai tariant, „iPhase“ lentiviruso koncentracijos reagentas ne tik žymiai pagerina transfekcijos efektyvumą, bet ir suteikia aukštą - kokybišką viruso vektorių palaikymą imuninių ląstelių paruošimui. Tai yra svarbus įprastų eksperimentų, ikiklinikinių tyrimų ir kitų taikymo sričių produktas.

Apibendrinant galima pasakyti, kad imunoterapija, ypač CAR - T ląstelė ir CAR - NK ląstelių terapija, yra nauja šiuolaikinio vėžio gydymo kryptis. Taikydami tikslius procesus, tokius kaip ląstelių rūšiavimas, aktyvinimas, transdukcija, plėtra ir kokybės kontrolė, mokslininkai gali paruošti efektyvius ir saugius imuninių ląstelių produktus pacientams, kad būtų galima gydyti tikslinį vėžį.Lentivirusinis transdukcija, kaip pagrindinė technologija, vaidina svarbų vaidmenį ruošiant CAR - T ir CAR - NK ląsteles dėl didelio efektyvumo ir stabilumo.Nuo nuolatinės technologinės pažangos, imunoterapija turi galimybę pasiūlyti novatoriškas gydymo galimybes daugiau pacientų, užtikrinant didesnę klinikinę vertę. Tikimasi, kad ateityje imunoterapija atneš revoliucinę terapinę viltį daugiau vėžiu sergančių pacientų.

Siekdama patenkinti genų transdukcijos, raiškos ir ligos tyrimų poreikius, „iPhase“ siūlo lentivirusų pakuočių rinkinius, lentiviruso koncentracijos reagentus ir žandikaulio lentivirusus. Šie žymeklių lentivirusai yra supakuoti su žaliais fluorescenciniais baltymais (GFP), raudonais fluorescenciniais baltymų mCherry ir luciferaze, leidžiančiomis lengvai sekti tikslines ląsteles tiek in vitro, tiek in vivo.

Be to, „iPhase“ taip pat gali pasiūlyti du iš anksto supakuotus atsekamuosius lentivirusus: GFP ir luciferazę bei „McHerry & Luciferase“. Šiuos atsekamuosius elementus galima pasirinkti arba sujungti atsižvelgiant į eksperimentinius poreikius, supaprastinti darbo eigas ir padidinti realaus laiko stebėjimo ir tikslinių ląstelių stebėjimo efektyvumą.

„IPhase“ImmunoterapijaRpakilęsPRoducts

Be lentiviruso - Susiję produktai, naudojami automobilyje - T arba CAR - NK gydymo terapijoje, „iPhase“, kaip tyrimų reagentų in vitro lyderė, taip pat labai prisidėjo prie CGT (ląstelių ir genų terapijos) ir kitų sričių palaikymo. „IPhase“ sukūrė ir gamino leukocitus ir PBMC (periferinio kraujo mononuklearines ląsteles), išskirtus per leukapherezę, kartu su įvairiais imuninių ląstelių izoliacijos rinkiniais, norint palaikyti greitą imunoterapijos vystymąsi.

„IPhase“ produktai siūlo šiuos pranašumus irAnalizės pažymėjimas (COA)Patikrinta „iPhase“ kiekvienai partijai.

Saugumas 

„IPhase“ produktai gaunami iš sveikų donorų/gyvūnų, kuriems buvo atlikta kruopštumas iš anksto atliktas, o viruso tyrimų rezultatai buvo neigiami (ŽIV - 1/2, HBV, HCV, sifilis).

Atitiktis  

„IPhase“ teikia informuotas donorų pasirašytas sutikimo formas su aiškiu ir atsekamu šaltinio patikrinimu.

Profesionalumas

„IPhase“ pateiktus produktus, gautus per leukapherezę, tvarko apmokyti profesionalai. Kiekvieną partiją lydi atitinkama COA, o produktai gabenami po griežta šalta grandine, kad būtų užtikrintas saugumas, greitas pristatymas ir kokybės užtikrinimas.

Klientų aptarnavimas

„IPhase“ siūlo aukštą - kokybę po - pardavimo paslaugos, užtikrinant sklandų ir nepertraukiamą patirtį viso bandymo proceso metu.