Plazmos baltymų surišimo dinamika: pusiausvyros dializė ir ultrafiltracijos metodai ir taikymas DDI

Raktiniai žodžiai: Pusiausvyros dializė, ultrafiltracija, baltymų surišimas plazmoje (PPB), plazmos baltymo (BRPP) surišimo greitis, pusiausvyros dializės prietaisas, pusiausvyros dializės membrana, greita pusiausvyros dializė (RED), vaistų sąveika (DDI), AdmE administravimas

Įvadas

Farmakokinetiniuose tyrimuose, Plazmos baltymų surišimas (PPB) ir Plazmos baltymo surišimo greitis (BRPP) tarnauja kaip pagrindiniai junginio farmakologinio elgesio veiksniai, tiesiogiai paveikdami jo absorbciją, pasiskirstymą, metabolizmą ir išsiskyrimą (Adme) savybės. Junginiai, pasižymintys aukštaiPlazmos baltymų surišimas (PPB)Parodykite ribotą laisvos frakcijos prieinamumą, taip moduliuodami terapinį veiksmingumą ir saugumą. Tuo pačiu metu BRPP suteikia kinetinę vaisto - baltymų sąveikos skiriamąją gebą, išaiškindama laiko surišimo dinamiką. Norėdami tiksliai įvertinti šiuos parametrus, tokios metodikos kaip Pusiausvyros dializė ir Ultrafiltracija yra reguliariai naudojami, ypač vertinant Narkotikų sąveika (DDI) ir narkotikų kūrimo vamzdynų tobulinimas.

Pusiausvyros dializė (ED)

Pusiausvyros dializė yra klasikinė biocheminė technika PPB ir BRPP matavimui.Pusiausvyros dializės įtaisasdirba dvi kameros, atskirtos pusiau neigiama Pusiausvyros dializės membrana: Vienoje pusėje yra makromolekulių - ligando mišinys, o kitoje yra tik buferis. Laikui bėgant, laisvai difuziniai ligandai juda per pusiausvyros dializės membraną, kol jų koncentracija bus lygi abiejose pusėse (pusiausvyroje), o baltymų ribojami ligandai lieka makromolekulės pusėje, nes jie negali praeiti pro membranos poras. Išmatuodami ligando koncentraciją buferinėje pusėje pasiekus pusiausvyrą, tyrėjai gali nustatyti laisvą ligando dalį ir, palyginti su visu pridedamu ligandu, apskaičiuoti surišimo afinitetas, gebėjimai ar laisvas vaisto lygis biologiniuose mėginiuose. Pusiausvyros dializės pranašumas yra tas, kad ji yra labai tiksli, tačiau atėjo laikas - sunaudojama. Įprastas pusiausvyros dializės įtaisas pusiausvyrai trunka 3 - 48 valandas.

Greita pusiausvyros dializė (raudona)

Greita pusiausvyros dializė(Raudona)yra klasikinės pusiausvyros dializės, skirtos pagreitinti ir supaprastinti nesurištos (laisvos) mažų molekulių - tipiškai vaistų, matavimo sudėtingose ​​biologinėse matricose - aukšto lygio. Greitos pusiausvyros dializės metu mėginiai (pvz., Plazma, kurioje yra vaistų baltymų kompleksų) ir buferis dedami į gretimus daugialypės plokštelės, atskirtos pusiau neigiama pusiausvyros dializės membrana, kameras; Optimizuotas membranos paviršiaus plotas, plokštelių projektavimas ir kontroliuojamas sujaudinimas leidžia pusiausvyrą pasiekti vos per kelias valandas, o ne per naktį. Kadangi membraną gali kirsti tik laisvas vaistas, kiekybiškai įvertinant jo koncentraciją buferinėje kameroje po pusiausvyros tiesiogiai gaunama nesurišta frakcija. Raudonasis įtaisas yra greitesnis nei tradiciniai pusiausvyros dializės įtaisai, neprarandant tikslumo, todėl raudona spalva yra ideali lygiagrečiai ADME atrankai.

Ultrafiltracija

Ultrafiltracija yra greitas, membranomis pagrįstas atskyrimo būdas, naudojamas atskirti laisvus (nesurištus) mažų molekules, tokias kaip vaistai, metabolitai ar ligandai, nuo didesnių makromolekulių, tokių kaip baltymai tirpale. Mėginys dedamas virš pusiau. Kadangi filtratas kaupiasi iš kitos pusės, jame yra tik neskausminga analitės dalis; Išmatuodami jos koncentraciją, tyrėjai gali tiesiogiai nustatyti laisvą vaisto ar ligando lygį. Šis aukšto lygio metodas yra plačiai naudojamas farmakokinetiniuose ir ADME tyrimuose, siekiant įvertinti baltymų surišimą be ilgo inkubacijos laiko.

Narkotikų sąveikos padariniai (DDIS)

Vykdydami narkotikų ir narkotikų sąveiką, du agentai, turintys tas pačias surišimo vietas, gali konkurencingai išstumti viena kitą, laikinai pakeldami nesurištą perkelto vaisto dalį; Šis poslinkis gali sustiprinti jo veiksmingumą ar toksiškumą ir pakeisti jo pasiskirstymo ir klirenso tūrį, kol bus atkurta nauja pusiausvyra. Kliniškai vaistai su dideliu baltymų surišimu plazmoje (PPB) ir didelis plazmos baltymų (BRPP) surišimo greitis yra labiausiai linkę į tokią poslinkio sąveiką, todėl kartu administravimas reikalauja kruopštaus stebėjimo ir prireikus, kad būtų išvengta netikėtų vaistų poveikio pokyčių.

Išvada

Supratimas apie baltymų surišimą plazmoje (PPB) ir plazmos baltymo (BRPP) surišimo greitis yra pagrindinis farmakokinetikoje, nes šie parametrai kritiškai daro įtaką vaisto absorbcijai, pasiskirstymui ir terapiniam efektyvumui. Tokie metodai kaip pusiausvyros dializė (ED), greita pusiausvyros dializė (raudona) ir ultrafiltracija yra būtini įrankiai, skirti kiekybiškai įvertinti laisvų vaistų frakcijas ir surišančią kinetiką. Nors ED išlieka auksinis tikslumo standartas, „Red“ siūlo aukštą - pralaidumo alternatyvą, kuri subalansuoja greitį ir tikslumą, o ultrafiltracija leidžia greitai patikrinti greitą patikrinimą, nepaisant galimybių tikslumo apribojimų. Šie metodai yra būtini vertinant vaistų sąveiką (DDIS), kai konkurencingas labai baltymų poslinkis surištiems vaistams gali pakeisti laisvą vaistų lygį, keliant toksiškumo riziką ar pakitusią veiksmingumą. Vykstant vaistų kūrimui, pasirinkus tinkamas metodikas PPB ir BRPP įvertinti, užtikrinami saugesni terapiniai rezultatai, vadovaujant dozės koregavimui ir sušvelninant riziką klinikinėje praktikoje. Galų gale, integruoti šiuos metodus į farmakokinetinius tyrimus padidėja mūsų sugebėjimas numatyti ir valdyti vaistų elgesį, pabrėžiant jų gyvybiškai svarbų vaidmenį optimizuojant vaistų kūrimą ir pacientų priežiūrą.