IevadsAknu mikrosomasun S9 frakcijas
Narkotiku metabolisma un farmakokinētikas jomā ir izšķiroša nozīme aknu mikrosomu un S9 frakciju sarežģītībai. Šīs in vitro sistēmas ir noderīgas narkotiku atklāšanas sākumposmā, sniedzot ieskatu par to, kā aknas metabolizē jaunas ķīmiskas vielas (NCES). Spēja paredzēt metabolisma stabilitāti un iespējamu zāļu mijiedarbību ir nenovērtējama, ietaupot laiku un resursus jaunu farmācijas izstrādājumu izstrādē. Šajā rakstā ir atšķirības starp aknu mikrosomām un S9 frakcijām, izpētot to sastāvu, funkcionalitāti, priekšrocības un ierobežojumus.Aknu mikrosomu sastāvs un struktūra
● Mikrosomas kā daļa no endoplazmatiskā retikuluma
Aknu mikrosomas ir vezikulas - piemēram, artefakti, kas iegūti no endoplazmas retikuluma eikariotu šūnās. Tie veidojas, kad šūnas tiek sadalītas homogenizācijas procesa laikā, kā rezultātā rodas endoplazmatiskā retikuluma sedimentācija. Šī subcelulārā frakcija ir bagātināta ar membrānu - saistīto enzīmu un ir ārkārtīgi svarīga zāļu metabolisma izpētē, īpaši I fāzes reakcijās.● Iesaistītie galvenie fermenti: citohroms P450 un UGTS
Augsta citohroma P450 enzīmu (CYP) koncentrācija aknu mikrosomās ir to raksturīgā īpašība. Šiem fermentiem ir izšķiroša loma plaša ksenobiotiku, ieskaitot narkotiku un vides toksīnu, oksidatīvajā metabolismā. Klāt ir arī uridīna difosfāts - Glikuronoziltransferāzes (UGT), kas veicina metabolītu konjugāciju un sekojošu izskaušanu, iezīmējot sākotnējo soli, lai izprastu I fāzes un dažas II fāzes reakcijas.S9 frakciju sastāvs un struktūra
● S9 kā mikrosomu un citosola frakciju kombinācija
S9 frakcija, ko bieži dēvē par 9000G supernatantu, ir subcelulārā sastāvdaļa, kas iegūta no aknu homogenātiem, izmantojot diferenciālu centrifugēšanu. Atšķirībā no mikrosomām, kas pārsvarā satur endoplazmatisku retikulumu, - saistītie enzīmi, S9 frakcija ietver gan mikrosomālos, gan citosoliskos enzīmus, parādot visaptverošāku fermentatīvu profilu.● Fermenti, kas atrodas S9, ieskaitot I un II fāzi
S9 frakcijas nodrošina bagātīgāku fermentatīvu vidi, iekapsulējot abus I fāzes enzīmus, piemēram, CYP, un II fāzes enzīmu komplektu, piemēram, sulfotransferāzes, glikuronoziltransferāzes un glutatione - S - transferāzes. Šis masīvs ļauj plašākas metabolisma pārvērtības, simulējot aknu vidi in vivo precīzāk nekā tikai mikrosomas.Funkcionalitāte: I un II fāzes metabolisms
● Fermenta aktivitātes atšķirības starp mikrosomām un S9
Galvenā atšķirība slēpjas fermentatīvajā jomā. Aknu mikrosomas galvenokārt atbalsta I fāzes vielmaiņas reakcijas, iesaistot oksidāciju, reducēšanu un hidrolīzi. Šīs reakcijas ievieš vai pakļauj funkcionālās grupas uz zāļu molekulām, paverot ceļu II fāzes reakcijām. Turpretī S9 frakcijas ietver abas I un II fāzes, tādējādi atvieglojot konjugācijas reakcijas, kuras mikrosomas nevar patstāvīgi veikt.● I un II fāzes nozīme zāļu metabolismā
I un II fāzes reakciju secīgais raksturs uzsver to nozīmi zāļu metabolismā. I fāzes modifikācijas parasti sagatavo savienojumus II fāzei, kas parasti ietver konjugāciju, lai palielinātu šķīdību, palīdzot izdalīšanās procesā. Izpratne par šīm fāzēm ir būtiska, lai prognozētu zāļu bioloģisko pieejamību, efektivitāti un iespējamo toksicitāti.Pieteikšanās zāļu metabolisma pētījumos
● Izmantošana ADME pētījumos: absorbcija, izplatīšana, metabolisms, eliminācija
Aknu mikrosomas un S9 frakcijas ir galvenās ADME pētījumos, kas novērtē zāļu kandidātu absorbciju, izplatīšanu, metabolismu un izskaušanu. Šie pētījumi ir kritiski svarīgi, nosakot zāļu farmakokinētisko profilu, nodrošinot būtiskus datus, kas informē dozēšanu, iespējamo mijiedarbību un blakusparādības.● Salīdzinošie pētījumi: mikrosomas pret S9 narkotiku atklāšanā
Salīdzinošā analīze starp mikrosomām un S9 frakcijām atklāj, ka, lai arī abiem to izmanto, S9 frakcijas piedāvā holistiskāku metabolisma stabilitātes skatījumu, pateicoties II fāzes enzīmu iekļaušanai. Šī visaptverošā analīze palīdz identificēt metabolisma ceļus, kas varētu nebūt acīmredzami, lietojot tikai aknu mikrosomas.Aknu mikrosomu priekšrocības
● Izmaksas - Efektivitāte un pieejamība
Aknu mikrosomas ir labvēlīgas to izmaksām - Efektivitāte un plaša pieejamība. Procesi to sagatavošanai un lietošanai ir labi izveidoti, padarot tos par praktisku izvēli daudzām laboratorijām.● Augsta caurlaidspēja un automatizācijas saderība
Mikrosomu testu vienkāršība padara tos par lielu caurlaidspēju un automatizāciju, kas ir būtiska funkcija lielo savienojumu bibliotēku pārbaudei. Šī priekšrocība ir būtiska, lai pilnveidotu narkotiku atklāšanas cauruļvadu, ļaujot agrīni identificēt daudzsološus kandidātus.Aknu S9 frakciju priekšrocības
● Visaptveroša vielmaiņas attēlojums
Izmantojot gan I, gan II fāzes enzīmus, S9 frakcijas piedāvā pilnīgāku savienojuma metabolisma likteņa novērtējumu. Šis visaptverošais attēlojums ir īpaši noderīgs, lai noteiktu potenciālos metabolītus agrīnā zāļu izstrādes procesā.● II fāzes metabolisma un izmaksu apsvērumu iekļaušana
IIP fāzes fermenti nozīmē, ka S9 frakcijas var sniegt ieskatu konjugācijas reakcijās, prognozējot, kā zāles tiks apstrādātas organismā. Lai arī viņiem var būt nepieciešami papildu kofaktori noteiktām reakcijām, tie joprojām piedāvā labvēlīgu izmaksu un lietderības līdzsvaru augstā caurlaides iestatījumos.Aknu mikrosomu ierobežojumi
● Citosola enzīmu neesamība, kas ietekmē pilnu metabolisma datus
Ievērojams aknu mikrosomu ierobežojums ir to citosola enzīmu trūkums, kas ir nepieciešami pilnīgai metabolisma attēlam. Šī prombūtne nozīmē, ka dažus metabolītus varētu aizmirst, trūkst kritisku ceļu, kas ir svarīgi, lai izprastu zāļu drošību un efektivitāti.● Prasība par papildu sistēmām II fāzes pētījumam
Lai visaptveroši izpētītu II fāzes reakcijas, mikrosomu lietošanas laikā ir nepieciešama papildu sistēmas vai papildināšana ar ārējiem enzīmiem/kofaktoriem. Šī prasība var sarežģīt testa projektēšanu un interpretāciju.Aknu S9 frakciju ierobežojumi
● Nepieciešamība pēc CO - faktoriem un iespējamā enzīmu atšķaidīšana
Neskatoties uz visaptverošo raksturu, S9 frakcijām bieži ir nepieciešams pievienot kofaktorus, lai atbalstītu noteiktas fermentatīvas darbības. Šī vajadzība testos var ieviest mainīgumu un sarežģītību. Turklāt fermentu atšķaidīšana S9 frakcijās, salīdzinot ar izolētiem preparātiem, dažām metabolisma reakcijām var ietekmēt noteikšanas jutīgumu.● Uzglabāšanas un sagatavošanas izaicinājumi, salīdzinot ar mikrosomām
S9 frakciju sagatavošana un uzglabāšana var būt grūtāka nekā mikrosomām. Fermentatīvas aktivitātes pareiza uzturēšana, rūpīgi apstrādājot un uzglabājot, ir būtiska, lai iegūtu ticamus rezultātus, nedaudz sarežģot to izmantošanu lielos - mēroga pētījumos.Secinājums un ieteikumi
● Vislabāko kopsavilkums - Izmantojiet katras metodes scenārijus
Aknu mikrosomām un S9 frakcijām katrai ir atšķirīgas stiprās un vājās puses. Aknu mikrosomas vislabāk izmanto, ja ir nepieciešama izmaksu efektīva, ātras I fāzes metabolisma skrīnings. Turpretī S9 frakcijas ir labāk piemērotas visaptverošos pētījumos, kuriem ir nepieciešams ieskats gan I, gan II fāzes metabolismā. Atbilstošās sistēmas izvēle ir atkarīga no pētījuma īpašajām prasībām un pieejamo resursiem.● Ieteikumi optimālai lietošanai zāļu izstrādes procesos
Tiem, kas atrodas agrīnā zāļu attīstības stadijā, izmantojot augstas - Kvalitatīvas aknu mikrosomas no cienījamām aknu mikrosomām piegādātāju vai aknu mikrosomām, ražotājs var pilnveidot sākotnējās pārbaudes. Pētījumam progresējot, iekļaujotaknas S9Frakcijas, kas, iespējams, iegūtas no uzticamas aknu mikrosomu rūpnīcas, sniegs pilnīgāku priekšstatu par metabolisma stabilitāti, nodrošinot stabilu narkotiku kandidātu novērtēšanu.● IevadsIPhase
Iphase Biosciences, kuras galvenā mītne atrodas Ziemeļvelsā, Pensilvānijā, ir "specializēta, jauna un novatoriska" augstā - Tech Enterprise integrējoši inovatīvu bioloģisko reaģentu pētniecības, izstrādes, ražošanas, pārdošanas un tehniskie pakalpojumi. Izmantojot plašas zināšanas un aizraušanos ar zinātniskiem pētījumiem, mūsu zinātniskā komanda ir apņēmusies piegādāt kvalitatīvus novatoriskus bioloģiskos reaģentus zinātniekiem visā pasaulē un palīdzēt pētniekiem visā viņu zinātniskajā centienā palīdzēt sasniegt savus pētniecības mērķus. Izmantojot R&D ideālu "novatoriski reaģenti, izpētīt nākotni", iPhase izveidoja vairākas pētniecības un attīstības iespējas, tirdzniecības centrus, noliktavas un izplatīšanas partnerus visā pasaulē.
Pasta laiks: 2024 - 11 - 26 16:50:02