Plazmas olbaltumvielu saistīšanās dinamika: līdzsvara dialīze un ultrafiltrācijas metodes un pielietojums DDI

Atslēgas vārdi: Līdzsvara dialīze, ultrafiltrācija, plazmas olbaltumvielu saistīšanās (PPB), plazmas olbaltumvielu (BRPP) saistīšanās ātrums, līdzsvara dialīzes ierīce, līdzsvara dialīzes membrāna, ātra līdzsvara dialīze (sarkana), narkotiku mijiedarbība (DDI), pieņemšana, pieņemt

Ievads

Farmakokinētiskos pētījumos, Saistīšanās ar plazmu olbaltumvielu (PPB) un Plazmas olbaltumvielu saistīšanās ātrums (BRPP) Kalpo kā galvenā savienojuma farmakoloģiskās uzvedības noteicošie faktori, tieši ietekmējot tā absorbciju, sadalījumu, metabolismu un izdalīšanos (Advokāts) īpašības. Savienojumi, kas attēlo augstuSaistīšanās ar plazmu olbaltumvielu (PPB)Demonstrējiet ierobežotu bezmaksas frakcijas pieejamību, tādējādi modulējot terapeitisko efektivitāti un drošību. Vienlaicīgi BRPP nodrošina zāļu kinētisko izšķirtspēju - Olbaltumvielu mijiedarbība, noskaidrojot laika saistīšanas dinamiku. Lai kvantitatīvi noteiktu šos parametrus ar precizitāti, metodoloģijas, piemēram, Līdzsvara dialīze un Ultrafiltrācija parasti tiek izmantoti, īpaši novērtējot Narkotiku mijiedarbība (DDI) un narkotiku attīstības cauruļvadu uzlabošana.

Līdzsvara dialīze (ed)

Līdzsvara dialīze ir klasiska bioķīmiska tehnika PPB un BRPP mērīšanai. Līdzlīdzsvara dialīzes ierīcenodarbina divas kameras, kuras atdala puscilvēks līdzsvara dialīzes membrāna: Vienā pusē ir makromolekulas - ligandu maisījums, bet otra satur tikai buferi. Laika gaitā brīvi izkliedējošie ligandi pārvietojas pa līdzsvara dialīzes membrānu, līdz to koncentrācija ir vienāda no abām pusēm (līdzsvars), savukārt ar olbaltumvielām saistītie ligandi paliek makromolekulā, jo tie nevar iziet cauri membrānas porām. Izmērot ligandu koncentrāciju bufera pusē pēc līdzsvara sasniegšanas, pētnieki var noteikt brīvo ligandu daļu un, salīdzinot ar kopējo ligandu, aprēķināt saistīšanas afinitāti, spēju vai brīvu zāļu līmeni bioloģiskos paraugos. Līdzsvara dialīzes priekšrocība ir tā, ka tā ir ļoti precīza, bet ir laiks - patērēt. Parastā līdzsvara dialīzes ierīce līdzsvarā prasa 3 - 48 stundas.

Ātra līdzsvara dialīze (sarkana)

Ātra līdzsvara dialīze(Sarkana)ir klasiskā līdzsvara dialīzes, kas paredzēta mazu molekulu - tipiski narkotiku, mērījumiem arvien lielai caurlaidspējai, lai paātrinātu un pilnveidotu nesaistītās (brīvās)) daļas mērījumus. Ātrās līdzsvara dialīzes gadījumā paraugi (piemēram, plazmā saturošu zāļu olbaltumvielu kompleksi) un buferšķīdumu novieto blakus esošajās daudzfilmas plāksnes kamerās, kas atdalītas ar puscilviju līdzsvara dialīzes membrānu; Optimizēts membrānas virsmas laukums, plāksnes dizains un kontrolēta uzbudinājums ļauj līdzsvaru sasniegt tikai dažās stundās, nevis uz nakti. Tā kā membrānu var šķērsot tikai brīvas zāles, kvantitatīvi nosakot tā koncentrāciju buferbalmā pēc līdzsvara tieši nesaistītā frakcija. Sarkanā ierīce ir ātrāka nekā tradicionālās līdzsvara dialīzes ierīces, nezaudējot precizitāti, padarot sarkano ideālu paralēlu ADME skrīningam.

Ultrafiltrācija

Ultrafiltrācija ir ātra, uz membrānu balstīta atdalīšanas paņēmiens, ko izmanto, lai atšķirtu brīvas (nesaistītas) mazas molekulas - piemēram, zāles, metabolītus vai ligandus - no lielākām makromolekulām, piemēram, olbaltumvielām šķīdumā. Paraugu novieto virs puscaurlaidīgas membrānas, kuras poru izmērs saglabā olbaltumvielas un olbaltumvielu un ligandu kompleksus, vienlaikus ļaujot brīvām molekulām un šķīdinātājam iziet cauri lietišķajam spiedienam vai centrbēdzes spēkam. Kad filtrāts savāc otrā pusē, tas satur tikai nesaistīto analītes daļu; Izmērot tās koncentrāciju, pētnieki var tieši noteikt bezmaksas zāļu vai ligandu līmeni. Šī augstas caurlaides spējas pieeja tiek plaši izmantota farmakokinētiskos un ADME pētījumos, lai novērtētu olbaltumvielu saistīšanos bez plašiem inkubācijas laikiem.

Ietekme narkotiku mijiedarbībā (DDIS)

Mijiedarbībā ar narkotikām, diviem aģentiem, kuriem ir vienādas saistīšanās vietas, var konkurēt viens otram izspiest viens otru, īslaicīgi paaugstinot pārvietoto zāļu nesaistīto frakciju; Šī maiņa var pastiprināt tās efektivitāti vai toksicitāti un mainīt tā sadalījuma un klīrensa daudzumu, līdz tiek atjaunots jauns līdzsvars. Klīniski medikamenti ar augstu plazmas olbaltumvielu saistīšanos (PPB) un augstu plazmas olbaltumvielu saistīšanās ātrumu (BRPP) ir visvairāk pakļauti šādai pārvietošanas mijiedarbībai, tāpēc vienlaicīga lietošana prasa rūpīgu uzraudzību un, ja nepieciešams, devas pielāgošana, lai izvairītos no negaidītām narkotiku iedarbības izmaiņām.

Secinājums

Izpratne par plazmas olbaltumvielu saistīšanos (PPB) un plazmas olbaltumvielu saistīšanās ātrums (BRPP) ir galvenā farmakokinētikā, jo šie parametri kritiski ietekmē zāļu absorbciju, izplatību un terapeitisko efektivitāti. Tādas metodes kā līdzsvara dialīze (ed), ātrās līdzsvara dialīze (sarkana) un ultrafiltrācija nodrošina būtiskus instrumentus bezmaksas zāļu frakciju kvantitatīvai noteikšanai un saistošai kinētikai. Kamēr ED joprojām ir zelta standarts precizitātei, Red piedāvā augstu - caurlaidspējas alternatīvu, kas līdzsvaro ātrumu un precizitāti, un ultrafiltrācija ļauj ātri pārbaudīt, neskatoties uz iespējamiem precizitātes ierobežojumiem. Šīs metodes ir neaizstājamas, novērtējot zāļu mijiedarbību (DDI), kur ļoti olbaltumvielu konkurences pārvietošana - saistītās zāles var mainīt brīvo zāļu līmeni, radot toksicitātes vai mainītas efektivitātes risku. Papildu zāļu izstrādei, piemērotu metodoloģiju izvēle PPB un BRPP novērtēšanai nodrošina drošākus terapeitiskos rezultātus, vadot devas pielāgošanu un mīkstinošu risku klīniskajā praksē. Galu galā šo metožu integrēšana farmakokinētiskos pētījumos uzlabo mūsu spēju paredzēt un pārvaldīt zāļu izturēšanos, uzsverot viņu būtisko lomu zāļu izstrādē un pacientu aprūpē.