Hepatocytes tuatahi: He taputapu nui mo te haerere kore - haumanu i roto i te rangahau tarukino Vitro

Hepatocytes tuatahi: He taputapu nui mo te haerere kore - haumanu i roto i te rangahau tarukino Vitro

Ko te ate, ko te mea tuatahi mo te rongoa tarukino, he mea nui ki te rongoa o te tarukino me te tukanga paitini. Ko nga hetacycytes tuatahi ko te whānuitanga katoa o nga ahuatanga pūkoro me nga taumata ahumoana o nga whaanui me nga corfidas me nga uniokohi i roto i te maeneene entochrome. Mo tenei take, ko te hepatacytes tuatahi e kiia ana ko te paerewa koura mo te hanga i nga kairangahau i te vitro late tauira, e manakohia ana e nga kairangahau i te taunekeneke tarukino, me te ako i te tarukino. E whakaatu ana tenei tuhinga i te tirohanga mo te 2D me te whakatauira ahurea 3D i runga i te hepatocytes tuatahi me a raatau tono i te whanaketanga tarukino.

Kupu matua: Hepatocycytes tuatahi, 2d te tipu 2d, te maara 3D, nga Orbersids, CO -

1. 1. Tuhinga o mua

Ko te haangai o te hepatocytes tuatahi he taahiraa whakahirahira ki te whakatu i nga tauira vitro late tauira, me te tikanga o te rahinga o te rahinga e rua. I roto i nga kararehe iti, ka taea te mahi a te ate i te hinu profe, i te nuinga o nga kararehe nui, i te nuinga o nga waahanga o te ate. He maha nga mea nui e awe ana i te wehenga angitu o Hepatocytes: Tuatahi, ko te kohinga me kore e - cytotoxic. Tuarua, ko te waa o te keri he mea nui -e rua i raro - ko te keri me te neke atu Tuatoru, me tino pai te ahua o te ate, na te mea he tino aro te hepatocytes ki te kino o Ihirama. Ko te ate mo te whakarite hepatocyen kia tere haere ki te whakaiti i nga reiti konupora me te aukati i te hypoxia o te konupora me te ischemia o muri.

Ko nga paerewa mo te Hepatocycytes tuatahi e whakamahia ana i roto i te rangahau tarukino e whai ake nei:

1. 2.. Te Apato Tamere tuatahi

Te tauira hepatocyte

Kei roto i te raau otinga katoa - te whakauru i nga whaanui me nga cofactors, e tika ana mo te ako i nga huarahi whakatikatika metabolic. Heoi, ko te whaikorero o te hematocytes me te ngohe o te tarukino - Ka heke haere te whakamahi i te whakamahi i te wa e whakamahia ana e te Vitro i te wa e piki haere ana, e 4 haora. Ko tenei tauira e whakamahia ana ki te whakatau i te whakatikatika o nga raau taero me te ngawari ki nga reiti whakaraerae nui. I te wa e iti iho te utu o te reanga whakaraerae i te 20%, kaore e taea te whakatau i nga uara tika. Ko te whakariterite i te aukati tuku iho - I runga i nga tauira a Vitro Metabolism e kore e taea te whakaputa i nga reanga metabolic kitea mo te puhoi. Ko te tikanga whakatārewatanga a HepatoCyCyte (Whakaahua 1) ki te whakawhānui i te waa whakauru ki te 20 haora neke atu ranei.

Tono:Ngohe Whakawhanake me te Akoranga Takawaenga mo nga raau taero iti.

Whakaahua 1

Source: Ko te rongoa metab rongoa, 2012,40 (9): 1860-1865

Ko te tauira Hepatocysys

Ko te hepatocycytes tuatahi ka poipoihia i roto i te punaha 2D i runga i te kohinga - pereti ahurea pani. Ko te hepatocytes e whakaatu ana i tetahi morphology epitaltial, me te nuclei, he maha tonu te whakaaturanga i roto i te puka broucleated. Ko nga ahuatanga o te ahurea Kotahitanga o Hepatocyer e uru ana ki te: 1.. Te whakarereketanga o te kiko o te pūtau me te mahi.2. Te kore o etahi atu momo pūtau e whai kiko ana (I.E., Non - Parenchymal cels) e hiahiatia ana mo te mahi noa.3. Te ngoikore ki te whakarato i nga matūkai nui me nga ahuatanga parataiao hei tautoko i te hepatocysen ki te mahi i a raatau mahi (penei i te waikawa bile me te rauropi rau pūmua).

Tono:

1). Te Aromātai o te tarukino - Te taunekeneke o te tarukino:Kei roto i tenei ko te whakaurutanga o te whakaurunga, te aukati, me nga rangahau whakawhiti. Tuatahi, i te wa e mahi ana te raau taero, ka taea e te kii ki te whakanui ake i te raau taero - te whakauru i nga whaanui me nga kaihomai. Ka taea e nga kaitakaro kaha te whakanui i nga ira maha i te wa ano, penei i te whakaurutanga a Phenobarbital o Cyp2B6, Cyp3A4, Cyp3A4, Cyp2C9, Ugt, me etahi pūmua kawemai penei i Mrp2. Tuarua, kei reira nga momo - nga rereketanga motuhake o te whakautu a Hepatocytes ki nga piringa. Hei tauira, ko te rifampicin he mea whai hua mo te tangata me te kopapa he hetacyste, engari kaore he mana whakaurua ki nga kiore hetatocytes. Hei whakamutunga, ka taea e te suboptimal te kaha o te hepatocytes whai kiko ki te whakaheke i nga puranga o te P450 me te piki haere o nga urupare whakaurutanga. Ka rite ki te whakaatu i te Whakaahua 3, hepatocytes i te whakaheke i nga rama o raro e whakaatu ana i nga mahi basal o raro o Cyp1a2, Cyp2B6, me Cyp3a4, engari he kaha ake te urupare. Na reira, ko Hetatocycyset hauora i te wa e tika ana te whakarite tika kia whiwhi ai i nga raraunga whai kiko.

Whakaahua 2

Source: Te Hangarau Tiaki Tauhokohoko o naianei, 2010, 7: 188 - 198

2). Te Aromatawai Hepatooxicity: Ko te tirotiro i nga huringa morphological i raro i te whaikorero marama, penei i te morphology Cell, Vadole me te whakahiatotanga me te taapiri waea / me te taapiri. Te kitenga o nga hepatocyse necrosis (pera me te asparterate aminotransferase, zehtate dehydrogenase, me te alanine aminotransfese) me te apoptosis (wehenga dna). Mo te cytokine - Ko te Cytotoxicity i whakaponohia, ko nga ahurea monolayer o te hepatolysen e kore e taea te whakaatu i nga urupare paitini na te mea i tukuna mai i nga waahanga kore.

3). "Tikanga Relay" mo te ako i te puranga puhoi me ona metabolites: Te ngohe o te raau taero - Ko te whakaurutanga o nga whaanui i roto i te hepatoleable ka tiimata te heke i muri i te 24 haora o te whakamahana. I muri i te hepara nui o te hepatocytes me te serum - Whakanohia te whakauru moni mo te 24 haora, ka kohia, ka whakaranu te reo, ka whakawhiti ki nga hetatoka hou mo te ako ano (Whakaahua 3).

Whakaahua 3

Source: Nga reta menobolism tarukino, 2016, 10: 3 - 15

3). Te arotake i te UptAcular Cellular, EndoCytosis, ka rere tendosomal, me te aukati i nga paanga o te ira whaainga o Hepatocyte - Nga raau taero waikawa karihi.

Tauira ahuwhenua hanawiti

I roto i te vitro, hepatocytes ka taea te whakamahi i waenga i nga paparanga e rua o te kohinga, te matrigel ranei ki te hanga i nga hanganga vivo, e mohiotia ana ko te maara hanawiti. I whakatipuhia e Hepatocytes i waenga i nga paparanga e rua o te Gel - Collagen (hanganga hanawiti) ka taea e te morphology me te kaha o nga pūtau, me te pupuri i a raatau mahi mo te waa roa. I tua atu, ko Hepatocytes i te Hanuere ka taea te whakahoki mai i te maitai, te tuku i te whakatikatika tika o te basedelral me nga waka kawe, me te hanganga o nga whatunga-putea putea (Whakaahua 4).

Whakaahua 4

Source: Te Hangarau Tauhokohoko tarukino o naianei, 2010, 7, 188 - 198

Tono:

1. 1). Te whakatau i te tangohanga a-piriona o nga pūhui.
2. 2). Te arotake i te tohatoha heptic me te rahinga o nga pūhui endogenous me te whakahiato me nga metabolites.
3. 3). Ko te whakatau i te whakahekenga i tukuna e te pākia me te kawe, me te hanga ahupūngao - tauira tauira rongoā.
4. 4). Te ako i te hepatoxicity me te whakarato tikanga mo te tarukino haumanu - Te whara ate o te ate. Kua whakauruhia nga raraunga ki roto i nga tauira rongoā rongoā hei tohu i te raau taero - te whara a te ate i roto i te tangata.
5.  
   1. 3.. Te Apato Toa Tuatahi

6. I roto i nga punaha ahurea 3D, ka whakatipuhia e Hepatocytes i roto i te toru - paerua Ko enei punaha whakatairanga i te pūtau - Pūtau me te pūtau - Ko te taunekeneke a Matrix, ka taea te whakahoki mai i nga mahi a te ate, tae atu ki te metabolism tarukino, te paruru paru, me te rahinga. Ko nga ahurea a HepatocyCyte 3D ka taea te whakamahi ki te ako i te liter - He rite ki te taiao, te tuku i nga painga mo te whakamatautau tarukino, te aromatawai paitini, me te whakatauira mate.

   Tauira Spheroid

Na roto i nga tikanga penei i te Ultra - Te ahurea taapiri iti, te whakairi ahurea, me te Agatocy Cell (Whakaahua 5), ​​ka taea e Hepatocycytes te whakakotahi ki te 150 - 175 μm me te kore e whakawhirinaki ki nga tikanga o waho. Ko tetahi painga o te ahurea SHAHIC e hiahiatia ana e ia spheroid anake te 1,330 1,3,000 noa iho, e whakaiti ana i te maha o nga pūtau i whakaritea ki etahi atu tikanga ahurea 3D. Ko nga rangahau tata nei kua whakaatuhia ko te HepatocyCy Tapahi ka taea te pupuri i nga mahi a te Cyp, te tohatoha i te tarukino, te whakanaotanga, te whakakotahitanga o te tarukino. Heoi, ko te ate he matatini nui atu i te whakahiatotanga pūtau. Ko te taha o te kopae o Hepatocyte e taunekeneke ana ki te toto, i te wa e rere mai ana te BIAF mai i te taha o te apical, ko te mea nui o te waahanga a te ate cobule matatini, kaore ano kia taea te whakatauira i te tauira SPHEID.

Tono:

1. 1). Ko te ako i te puhoi whakaraerae i te whakatikatika me ona metabolites.
2. 2). Te rangahau hepatoxicity.
3. 3). Te Aromātai o te Urunga Pūkoro, EndoCytosis, ka rere tendosomal, me te aukati i nga paanga ki nga ira whaainga o te hepatocyte - Nga raau taero waikawa karihi.

Whakaahua 5. Te tikanga ahurea SPheroid

Tauira a te ate

Ko te whakamāramatanga o nga Operanoids ko: 3D nga hanganga i ahu mai i nga pūtau kakau, te whakaputa i nga waahanga takirua, he pai te whakamahi i nga mahi a te vivo kiki me te pūtau. Kua tāutuhia te Ope Taiao a Liter hei tauira tino pai mo te rangahau a te tangata a te tangata a te tangata.

Ko nga puna o te pūtau mo te hanga o te Ope Operoid.

 nga pūtau kakau pluripottent (PSCS):

Ko nga pūtau kakau stem (ESSS) me nga pūtau kakau pluripotter e whai kiko ana (IPSCs) kei roto i te konupora nui, te kirihou, me te kaha huakore. I raro i te mana o nga ahuatanga tohu tohu, ka rereke ratou ki te hepatocyte - He rite ki nga pūtau me te ngohe me te mahi. Heoi, ko nga Organoid a Lifer i ahu mai i te PSS ka pa ki te whakarereke i te whakamahi me te ira tangata, te whakaatu i nga huringa a Gromosomal Aneuploidy i te wa i te whakanui.

Tono:

1. 1). Tauira tauira ate genetic
2. 2). Tauira mate mate a te kaihoko
3. 3). Whakamātautau cytotoxcity tarukino

 te kiko o te ate - Ko nga pūtau i ahu mai: kei roto ko nga cholangiocytes me Hepatocycytes. Ka mau tonu a Hepatocytes ki te pupuri i te punaha pūtau a Stem me te kaha o te tipu i roto i nga taiao motuhake. Ka whakatauritea ki te PSC - Orbersids i ahu mai i te kiko tuatahi he pakeke ake, me te pupuri i nga ira tangata i te waa roa - Heoi, ko te roa o te wa roa o te rauropi hetatocye tangata he mea whakarite ki te hepataple tangata, he hetatocys tuatahi ranei. Ko te hanga i nga Ope Taputapu Pakeke Pakeke e mau tonu ana nga wero.

Tikanga Ahurea (Whakaahua 6): Ka keri te kiko o te ate ki nga pūtau kotahi, ka whakatokia te ranunga o te matrigel me nga pūtau i te 24 - pereti pai hei hanga i te DOMA - Nga hanganga hanga. Incubate i roto i te Interbator Cell Cell (37 ° C) mo te 15 meneti. I muri i te whakakakahu, whakauruhia te reo ahurea motuhake. Whiti i muri tata atu ki te 14 ra. Whakakapihia te reo taketake me te reo rereke i muri i te 7 - 10 ra.

Tono:

1. 1). Tauira Hepatotoxicity
2. 2). I roto i nga rangahau mate pukupuku Vitro
3. 3). Kaore e mate
4. 4). Te whanaketanga o te tarukino mo nga mate ate me nga mate ate kino

Whakaata 6

Source: Cell & Bioscience (2023) 13: 197

Te whakataurite o te ahurea SPheroid me te ahurea tuuturu

4. Te tuatahi hepatocyte CO - Tauira Ahurea

1. 1. 2d Hepatocyte CO - Tauira Ahurea
      

      I roto i te 2D tuatahi Hepatocyte CO - Tauira Ahurea, e rua, neke atu ranei nga momo momo pūtau e whakaranu ana i roto i te rua - Te taiao inenga. Ko te tino kaupapa o tenei tauira ko te taunekeneke tika i waenga i nga momo pūtau rereke, ko te taunekeneke i waenga i nga pūtau me te whakawhiti i waenga i nga pūtau me te whakawhiti tohu ma te cytokines me te whakawhitiwhiti korero. Ko nga mahi a te hepatocyte tuatahi, penei i te hanga albumin me te kaha metobolism tarukino, ka taea te pupuri kia toru nga wiki.

      Tono:

      1. 1). Hepatocytes Tuatahi CO - I whakatipuhia me te Fibroblasts: Ka whakamahia tenei tauira hei ako i te reanga whakahekeheke o te puhoi - whakahiato me o raatau metabolites.
      2. 2). Hepatocytes Tuatahi CO - I whakatipuhia me te kore o nga pūtau a te ate (E.G.
      3. 3). Hepatocytes Tuatahi CO - I whakatipuhia me T CNDS: Ka whakamahia tenei tauira ki te kite i te konutai tarukino ate - whakautu urupare.
      4. 4). Ko te hepatomax ™CO - Pūnaha Culture: Kua whakawhanakehia e Iphase te CO - Culture me te hetaceacytes tuatahi mai i nga momo rereke, e kiia ana ko Hepatomax.. By co - Te whakatipu i te hepato tuatahi o te tangata me nga pūtau Stromal, ka taea te pupuri i te tarukino pai He pai tenei punaha mo te ako i te puhoi - Ko te whakakii i nga reiti whakaraerae me o raatau metabolites.

      Ko tenei tauira CO - Ko te tauira ahurea te whakarato i te papanga whaihua nui ake mo te aromatawai i te rongoa tarukino, te matekai, me te ate.
      
      

      3D Hepatocyyte CO - Tauira Ahurea

      Tika 3D Co - Culture: Ko tenei tauira e hono ana i te rua, neke atu ranei nga momo waahanga ate (E.G., he kowhatu Seresoidal, he kowhatu sinusoidal) ki te hanga i te ao. Tika 3D CO - Ka taea e te ahurea te taunekeneke tata i waenga i nga momo ate rereke na roto i nga miihini penei i te Cell - Ki -

      Tono:

      1. 1). Tauira Fibrorissis ate: i whakamahia hei ako i nga miihini me te ahunga whakamua o te ate Fibrosis.
      2. 2). Te raau taero - Te whara a te ate i akiakihia (Dili) Tauira: Ka awhina i te whakatauira me te aromatawai i te kino o te ate i puta mai i nga raau taero.
      3. 3). Te taunekeneke o te raau taero, te konutai tarukino, me te whakaurunga o te tarukino: Me pehea te rereke o nga raau taero, me pehea te whakaohooho i a raatau ki nga whaanui ate.

      INFIRECT 3D CO - Culture: Ko tenei tikanga e whakamahi ana i tetahi punaha wehenga tinana (e.g., Transwell ranei etahi atu taonga) ki te ahurea e rua, neke atu ranei nga momo pūtau. Ko te whakawhitiwhiti korero i waenga i nga pūtau ka puta ma te cytokines rewa.

      Tono:
      Whakamahia ai mo te ako kore - Whakawhitiwhiti whakapā i waenga i nga pūtau ate i te tinana.

      
      Hei whakarāpopototanga, Iphase, hei rangatira i roto i te rangahau koiora Vitro Biological, e whakarato ana i nga otinga whanui mo te kore - Te whakamātautau rongoa haumanu. Mai i te wehenga me te ahurea o te Hepatolcytes tuatahi mai i nga momo tautoko i nga mahi a te ahurea, i te maha o nga papaa, i te papatipu. He hoa pono matou mo nga kiritaki i roto i te umanga rongoā, i mahia e ia ki te tapahi - Nga Rangahau Tatau mo te Non - Rangahau haumanu.